What is the purpose substrate TMB
L'enzyme peroxydase de raifort (HRP), présente dans les racines du raifort, est largement utilisée dans les applications biochimiques, principalement pour sa capacité à amplifier un signal faible et à augmenter la détectabilité d'une molécule cible. Il s'agit d'une métalloenzyme comportant de nombreuses isoformes, dont la plus Le type étudié est C. La peroxydase du radis est une glycoprotéine de 44 173,9 daltons avec 6 résidus lysine qui peut être conjuguée à une molécule marquée. La TMB (3,3',5,5'-tétraméthybézidine) est couramment utilisée dans l'ELISA basé sur la HRP (essai immuno-enzymatique). Ce réactif TMB est formulé sous forme de substrat HRP tout-en-un prêt à l'emploi. Le réactif contient tous les composants essentiels (TMB, tampon de sous-état et H 2 O 2) dans une solution pour la réaction enzymatique HRP. Lorsque la réaction enzymatique HRP se produit, le Le réactif substrat produit un produit de réaction de couleur bleue. Le MB (3,3',5,5' -tétraméthybézidine) est couramment utilisé dans l'ELISA basé sur HRP (dosage immuno-enzymatique). Ce réactif TMB est formulé sous forme de substrat HRP tout-en-un, prêt à l’emploi. Lorsque le substrat est un substrat TMB où le produit de réaction entre le TMB, le peroxyde et le HRP est mesuré à environ 450 nm (jaune), il est préférable que le substrat (colorant) ait une couleur visible dans la plage de 500 à 600 nm, c'est-à-dire dans la gamme des couleurs bleues et jaunes du TMB. Pour la détection de l'activité enzymatique, un substrat enzymatique spécifique est nécessaire pour l'enzyme elle-même. Divers substrats enzymatiques tels que l'ortho-phénylènediamine (OPD), l'acide 2,2â€²-azino-bis-(3-éthylbenz-thiazoline-6-sulfonique) (ABTS) et le 3,3â€²,5,5â€²- la tétraméthylbenzidine (TMB) sont couramment utilisées. En présence de conjugués enzymatiques de peroxydase de raifort (HRP), le TMB et le peroxyde réagissent pour produire un sous-produit bleu ayant une absorbance maximale à 605 nm. L'intensité de la couleur est proportionnelle à la quantité d'activité HRP, qui à son tour est liée aux niveaux d'analyte cible dans une procédure ELISA optimisée à température ambiante ou entre 2 et 8 °C. • Application : ELISA : Après l'incubation du TMB, ajoutez une quantité de solution d'arrêt égale à la quantité de substrat TMB ajoutée dans chaque puits de la plaque ELISA (généralement 50 à 100 ml par puits). Utiliser à pleine puissance.  La peroxydase de raifort est une glycoprotéine de 44 173,9 daltons avec 6 résidus lysine qui peuvent être conjugués à une molécule marquée. Elle produit un dérivé coloré, fluorimétrique ou luminescent de la molécule marquée lorsqu'elle est incubée avec un substrat approprié, permettant de la détecter et de la quantifier. La peroxydase du radis est une glycoprotéine de 44 173,9 daltons avec 6 résidus lysine qui peuvent être conjugués à une molécule marquée. La peroxydase de raifort catalyse l'oxydation du luminol en 3-aminophtalate via plusieurs intermédiaires. La réaction s'accompagne d'une émission de lumière de faible intensité à 428 nm. La peroxydase de raifort est une glycoprotéine de 44 173,9 daltons avec 6 résidus lysine qui peuvent être conjugués à une molécule marquée.  La solution d'arrêt est de l'acide sulfurique 0,16 M à utiliser avec le substrat ELISA 3,3', 5,5' - tétraméthylbenzidine (TMB). tore à température ambiante ou 2-8°C. • Application : ELISA : Après l'incubation du TMB, ajoutez une quantité de solution d'arrêt égale à la quantité de substrat TMB ajoutée dans chaque puits de la plaque ELISA (généralement 50 à 100 ml par puits). Utiliser à pleine puissance. Nous proposons un substrat colorimétrique (également appelé chromogène) pour le développement ELISA avec la phosphatase alcaline (AP) et trois substrats pour l'enzyme peroxydase de raifort (HRP) : 1 PNPP (P-Nitrophényl Phosphate, Sel Disodique) est un substrat largement utilisé pour détecter la phosphatase alcaline. dans les applications ELISA. Les substrats LISA nécessitent une variété de procédures pour préparer la solution de travail du substrat et détecter le signal. Certains supports sont prêts à l'emploi, tandis que d'autres nécessitent la fourniture de matériaux supplémentaires. De plus, chaque substrat a des exigences uniques en matière d’optimisation. Identificateur de produit Nom du produit : BioFX®TMB One Component HRP Microwell Substrate Forme du produit : Mélange Code produit : TMBW 1.2. Utilisations identifiées pertinentes de la substance ou du mélange et utilisations déconseillées Utilisation de la substance/du mélange : Pour usage en laboratoire 1.3.identifiant du produit Nom du produit : BioFX®TMB One Component HRP Microwell Substrate Forme du produit : Mélange Code produit : TMBW 1.2. Utilisations identifiées pertinentes de la substance ou du mélange et utilisations déconseillées Utilisation de la substance/du mélange : Pour usage en laboratoire 1.3. A. Comparaison des courbes cinétiques de plusieurs substrats TMB à 500 pg/mL msIgG dans le système de test modèle surveillé au fil du temps à 650 nm. B. Comparaison des courbes standard pour le TMBW et le TMBX arrêtées et lues à 450 nm à l'aide du système de test modèle. Les résultats montrent une plage dynamique étendue lorsque le TMBX est utilisé. Méthodes Afin d'illustrer les différences entre les différents substrats du TMB, un système de test modèle a été développé ( Figure 2). Les IgG anti-souris de lapin ont été enduites à raison de 0,1 µg/puits sur une plaque ELISA à 96 puits et stabilisées avec le stabilisateur d'immunoessai StabilCoat® (SC01).
 La TMB (3,3',5,5'-tétraméthybézidine) est couramment utilisée dans l'ELISA basé sur la HRP (essai immuno-enzymatique). Ce réactif TMB est formulé sous forme de substrat HRP tout-en-un prêt à l'emploi. Le réactif contient tous les composants essentiels (TMB, tampon de sous-état et H 2 O 2) dans une solution pour la réaction enzymatique HRP. Lorsque la réaction enzymatique HRP se produit, le Le réactif substrat produit un produit de réaction de couleur bleue.