What is the purpose substrate TMB
La enzima peroxidasa de rábano picante (HRP), que se encuentra en las raíces del rábano picante, se utiliza ampliamente en aplicaciones bioquímicas principalmente por su capacidad para amplificar una señal débil y aumentar la detectabilidad de una molécula objetivo. Es una metaloenzima con muchas isoformas, de las cuales la más el tipo estudiado es la C. la peroxidasa de rábano es una glicoproteína de 44.173,9 daltons con 6 residuos de lisina que puede conjugarse con una molécula marcada. TMB (3,3',5,5'-tetrametibezidina) se usa comúnmente en ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) basado en HRP. Este reactivo TMB está formulado como sustrato HRP todo en uno, listo para usar. El reactivo contiene todos los componentes esenciales (TMB, tampón de subestado y H 2 O 2) en una solución para la reacción enzimática HRP. Cuando se produce la reacción enzimática HRP, el El reactivo sustrato produce un producto de reacción de color azul. La MB (3,3',5,5' -tetrametibezidina) se usa comúnmente en ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) basado en HRP. Este reactivo TMB está formulado como sustrato HRP todo en uno, listo para usar. Cuando el sustrato es un sustrato de TMB donde el producto de reacción entre TMB, peróxido y HRP se mide a aproximadamente 450 nm (amarillo), se prefiere que el sustrato (tinte) tenga un color visible en el intervalo de 500-600 nm, es decir en el rango claro de los colores azul y amarillo de TMB. Para la detección de la actividad enzimática se necesita un sustrato enzimático específico para la enzima real. Diversos sustratos enzimáticos como ortofenilendiamina (OPD), ácido 2,2â€²-azino-bis-(3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico) (ABTS) y 3,3â€²,5,5â€²- Se utilizan habitualmente tetrametilbencidina (TMB). En presencia de conjugados de enzima peroxidasa de rábano picante (HRP), el TMB y el peróxido reaccionan para producir un subproducto azul que tiene una absorbancia máxima a 605 nm. La intensidad del color es proporcional a la cantidad de actividad HRP, que a su vez está relacionada con los niveles del analito objetivo en un procedimiento ELISA optimizado. Se realizó a temperatura ambiente o entre 2 y 8 °C. â€¢ Aplicación: ELISA: Después de la incubación de TMB, agregue una cantidad de solución de parada igual a la cantidad de sustrato de TMB agregado a cada pocillo de la placa ELISA (normalmente 50 - 100 ml por pocillo). Úselo con toda su fuerza.  La peroxidasa de rábano picante es una glicoproteína de 44.173,9 daltons con 6 residuos de lisina que se pueden conjugar con una molécula marcada. Produce un derivado coloreado, fluorimétrico o luminiscente de la molécula marcada cuando se incuba con un sustrato adecuado, lo que permite detectarla y cuantificarla. La peroxidasa de rábano es una glicoproteína de 44.173,9 daltons con 6 residuos de lisina que puede conjugarse con una molécula marcada. La peroxidasa de rábano picante cataliza la oxidación del luminol a 3-aminoftalato a través de varios intermediarios. La reacción va acompañada de una emisión de luz de baja intensidad a 428 nm. La peroxidasa de rábano es una glicoproteína de 44.173,9 daltons con 6 residuos de lisina que se pueden conjugar con una molécula marcada.  La solución de parada es ácido sulfúrico 0,16 M para usar con el sustrato ELISA 3,3',5,5'-tetrametilbencidina (TMB). Se prepara a temperatura ambiente o entre 2 y 8 °C. â€¢ Aplicación: ELISA: Después de la incubación de TMB, agregue una cantidad de solución de parada igual a la cantidad de sustrato de TMB agregado a cada pocillo de la placa ELISA (normalmente 50 - 100 ml por pocillo). Úselo con toda su fuerza. Ofrecemos un sustrato colorimétrico (también llamado cromogénico) para el desarrollo de ELISA con fosfatasa alcalina (AP) y tres sustratos para la enzima peroxidasa de rábano picante (HRP): 1 PNPP (fosfato de p-nitrofenilo, sal disódica) es un sustrato ampliamente utilizado para detectar fosfatasa alcalina. en aplicaciones ELISA. Los sustratos LISA requieren una variedad de procedimientos para preparar la solución de trabajo del sustrato y detectar la señal. Algunos sustratos están listos para usar, mientras que otros requieren el suministro de materiales adicionales. Además, cada sustrato tiene requisitos únicos de optimización. Identificador del producto Nombre del producto: BioFX®TMB One Component HRP Microwell Substrate Forma del producto: Mezcla Código de producto: TMBW 1.2. Usos pertinentes identificados de la sustancia o de la mezcla y usos desaconsejados Uso de la sustancia/mezcla: Para uso en laboratorio 1.3.identificador del producto Nombre del producto: BioFX®TMB One Component HRP Microwell Substrate Forma del producto: Mezcla Código de producto: TMBW 1.2. Usos pertinentes identificados de la sustancia o de la mezcla y usos desaconsejados Uso de la sustancia/mezcla: Para uso en laboratorio 1.3. A. Comparación de las curvas cinéticas de varios sustratos de TMB a 500 pg/ml de msIgG en el sistema de ensayo modelo monitorizado a lo largo del tiempo a 650 nm. B. Comparación de curvas estándar para TMBW y TMBX detenidas y leídas a 450 nm usando el sistema de ensayo modelo. Los resultados muestran un rango dinámico extendido cuando se usa TMBX. Métodos Para ilustrar las diferencias entre varios sustratos de TMB, se desarrolló un sistema de ensayo modelo ( Figura 2). Se recubrió IgG anti-ratón de conejo a 0,1 µg/pocillo en una placa ELISA de 96 pocillos y se estabilizó con StabilCoat® Immunoassay Stabilizer (SC01).
 TMB (3,3',5,5'-tetrametibezidina) se usa comúnmente en ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas) basado en HRP. Este reactivo TMB está formulado como sustrato HRP todo en uno, listo para usar. El reactivo contiene todos los componentes esenciales (TMB, tampón de subestado y H 2 O 2) en una solución para la reacción enzimática HRP. Cuando se produce la reacción enzimática HRP, el El reactivo sustrato produce un producto de reacción de color azul.