At this stage, according to the prospectus an assay cocktail of MES buffer 11.25 mL, GSH co-factor mixture 0.45 mL, GSH enzyme mixture 2.1 mL, distilled water 2.3 mL, and GSH DTNB 0.45 mL was prepared and 150 µL freshly-prepared assay cocktail was added to all wells, the plate was covered and incubated on an orbital mixer in the dark for 25 min.
En esa fase, de acuerdo con las instrucciones, se preparó una combinación para el ensayo con tapón MES 11,25 mL, mezcla del cofactor GSH 0,45 mL, mezcla de enzimas GSH 2,1 mL, agua destilada 2,3 mL y GSH 5,5'-ditiobis-2-nitrobenzoico 0,45 mL, y 150 µL de esa combinación recién preparada fueron adicionados a todos los pozos; la placa se cubrió y se incubó en la oscuridad en un mezclador orbital durante 25 min.
Nessa fase, de acordo com as instruções, um coquetel para o ensaio com tampão MES 11,25 mL, mistura do cofator GSH 0,45 mL, mistura de enzimas GSH 2,1 mL, água destilada 2,3 mL e GSH DTNB 0,45 mL foi preparado e 150 µL desse coquetel recém-preparado foram adicionados a todos os poços. A placa foi coberta e incubada no escuro em misturador orbital por 25 minutos.