ضع القفازات وقم بربط الشعر الطويل للخلف لمنع تلوث العينة التي تقوم باختبارها. عقّم المنطقة التي تقوم بالعمل بها على أن تكون في منطقة جيدة التهوية. تأكد من أن موقد بنزن والمجهر يعملان بشكل جيد قبل البدء. إن كانت الشريحة متسخة فقم بغسلها بالماء والصابون لإزالة الدهون والأتربة. طهّر الشريحة بالكحول الإيثيلي ومنظف الزجاج أو أي طريقة أخرى مُوصى بها. يمكنك استخدام صبغة غرام للتأكد من وجود البكتيريا في العينات الطبية أو مزرعة البكتيريا التي تنمو على طبق بتري. لكي تكون الصبغة مفيدة، أضف طبقة رقيقة من العينة على الصبغة. ينصح باستخدام عينة لم تتجاوز 24 ساعة حيث إن البكتيريا التي يمضي عليها وقت أطول قد يصيب جدارها الخلوي بعض التلف وتصبح أقل استجابة للصبغة.  إن كنت تقوم باستخدام عينة نسيج، أضف قطرة أو قطرتين على الشريحة الزجاجية. قم بفردها بالتساوي لتحصل على مسحة رقيقة وذلك باستخدام حافة شريحة زجاجية أخرى، اتركها تجف في الهواء قبل المتابعة. إن كنت تستخدم بكتيريا مأخوذة من طبق بتري، فقم بتعقيم حلقة التلقيح بتسخينها على موقد بنزن حتى تتوهج. باستخدام الحلقة قم بوضع قطرة من الماء على الشريحة ثم أعد تعقيم الحلقة وتركها تبرد قبل استخدامها مجددًا في نقل عينة صغيرة من البكتيريا ومزجها بالماء.   يتم خلط البكتيريا الموجودة في هذا الخليط السائل بحركة دائرية، ثم تضاف بحلقة التلقيح كما هو بالأعلى، دون إضافة الكمية الباقية من الماء.   إن كان لديك عينة من مسحة، افرد المسحة برفق على جانب الشريحة. سيعمل التسخين على تثبيت البكتيريا على الشريحة فلا تنزلق بسهولة أثناء استخدام الصبغة. مرر الشريحة بسرعة مرتين أو ثلاثًا فوق لهب موقد بنزن أو قم بتسخينه على سخان كهربائي. تجنب الإفراط في التسخين حيث قد يفسد هذا العينة. في حال استخدام موقد بنزن لابد أن يكون اللهب منخفضًا، مخروطي الشكل أزرق اللون وليس طويلًا وبرتقاليًا.  يمكن بدلًا من هذا تثبيت الشريحة بالكحول الميثيلي وذلك بإضافة قطرة أو اثنتين من الميثانول على الشريحة الجافة وترك الميثانول الفائض يجف في الهواء. هذه الطريقة تقلل التلف الذي يلحق بخلايا المضيف مما يعطي العينة خلفية صافية. طبق الصبغة هو طبق مسطح مصنوع من المعدن أو الزجاج أو البلاستيك مثبت عبر فتحته العلوية شبكة أو سلك. ضع الشريحة على هذا السلك بحيث يمكن للسوائل التي ستستخدمها أن تتسرب عبر الشبكة.  إن لم يتوفر لديك طبق الصبغة يمكنك أن تضع الشريحة مباشرة على طبق مكعبات الثلج البلاستيكي.
قم بالإعداد للعمل المعملي. قم بتعقيم شريحة فحص مجهري زجاجية. أضف العينة على الشريحة. سخن العينة. ضع الشريحة على طبق الصبغة.