Background and Objective: Valproic acid (VPA); used as anti-epileptic and cancer drug, has been proven to have reproductive toxicity effects especially on testicular structures and functions. VPA also can cause atrophy of seminal vesicle; a major micronutrient source of mature sperm after ejaculation. However, the effect of VPA on the associations between the qualities of seminal fluid and expressions of essential proteins in seminal vesicle tissue has never been documented. This study aimed to investigate the effects of VPA on the levels of seminal fluid components and expressions of seminal essential proteins including tyrosine phosphorylated proteins; androgen (AR) receptor; and heat shock protein 70 (Hsp70)
Methods: Sixteen Sprague-Dawley male rats (180-200 g) were divided into control and VPA treated groups (each group, n = 8). Control rats were injected with saline while the experimental animals were injected with VPA (500 mg/kgBW) into intraperitoneal cavity for 10 consecutive days. At the end of experiment, seminal vesicles were weighted and examined for histology. Then seminal fluids were squeezed out to be analyzed for   biochemical components. In seminal protein expressions; the proteins of seminal fluids and tissues were separated by SDS-PAGE and specifically detected for tyrosine phosphorylated proteins, androgen recto; and Hsp70 by immuno- western blotting.
Results : The results showed that atrophy with decreased epithelial height of the seminal vesicles was observed in VPA treated rats. In addition; seminal fluid volume and major biochemical components in the VPA-treated group were significantly decreased (P ≤ 0.05) compared to control. Moreover; VPA changed the intensity patterns of tyrosine phosphorylated proteins and significantly decreased the expressions of AR and Hsp 70in both seminal fluid and tissue of VPA treated animals.
Conclusions: Atrophic seminal vesicle treated with VPA was associated with reductions of seminal fluid components and protein expressions such as phosphorylated proteins, AR; and Hsp 70. It was suggested that VPA affected seminal vesicle structure and function; resulted in low quality of seminal plasma. This finding also can be used to explain the cause of male sub/ infertility in VPA treating patients.  
หลักการและวัตถุประสงค์: กรดแวลโพอิก (valproic acid, VPA) ถูกนำมาใช้เป็นยารักษาอาการลมชักและโรคมะเร็ง ซึ่งพบว่าเป็นพิษต่อระบบสืบพันธุ์โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อโครงสร้างและหน้าที่ของอัณฑะ นอกจากนั้น VPA ยังทำให้เกิดการฝ่อของถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิ ซึ่งเป็นแหล่งอาหารที่สำคัญของอสุจิตัวเต็มวัยหลังจากการหลั่งน้ำอสุจิ อย่างไรก็ตามผลของ VPA ต่อความสัมพันธ์ระหว่างคุณภาพของน้ำเลี้ยงอสุจิและการแสดงออกของโปรตีนที่สำคัญในเนื้อเยื่อถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิยังไม่เคยมีการรายงานมาก่อน ดังนั้น การศึกษานี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของ VPA ต่อระดับสารประกอบและการแสดงออกของโปรตีนที่สำคัญในน้ำเลี้ยงอสุจิ รวมถึงโปรตีนฟอสโฟไทโรซีน,ตัวรับแอนโดรเจน (AR) และโปรตีนฮีทช็อค 70 (Hsp70)
วิธีการศึกษา: หนูแรทเพศผู้ สายพันธุ์ Sprague-Dawley จำนวน 16 ตัว (180-200 กรัม) ถูกแบ่งออกเป็นกลุ่มควบคุม และกลุ่มที่ได้รับสาร VPA (8 ตัว/กลุ่ม) โดยหนูกลุ่มควบคุมถูกฉีดด้วยน้ำเกลือ ในขณะที่หนูกลุ่มทดลองถูกฉีดด้วย VPA (500 มิลลิกรัม/กิโลกรัมของน้ำหนักตัว) เข้าช่องท้อง เป็นเวลาต่อเนื่อง 10 วัน เมื่อสิ้นสุดการทดลองถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิ ถูกชั่งน้ำหนักและตรวจสอบลักษณะทางจุลกายวิภาคศาสตร์ แล้วทำการเก็บน้ำเลี้ยงอสุจิสำหรับวิเคราะสารประกอบทางชีวเคมี จากนั้นศึกษาการแสดงออกของโปรตีนในถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิ   โดยทำการแยกโปรตีนในน้ำเลี้ยงอสุจิและเนื้อเยื่อของถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิด้วยวิธี SDS-PAGE และตรวจสอบอย่างจำเพาะของโปรตีนฟอสโฟไทโรซีน ตัวรับแอนโดรเจน รวมทั้งโปรตีนฮีทช็อค 70 ด้วยเทคนิค immuno- Western blotting
ผลการศึกษา: ผลการทดลองพบว่ามีการฝ่อของถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิเนื่องมาจากความสูงของเยื่อบุผิว seminal vesicles ที่ลดลง ในหนูที่ได้รับสาร VPA นอกจากนั้นยังพบว่ามี ปริมาณ seminal fluid และสารประกอบทางชีวเคมีในกลุ่มที่ได้รับสาร VPA ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p≤ 0.05) เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ยิ่งไปกว่านั้น VPA ยังไปเปลี่ยนแปลงรูปแบบความเข้มของโปรตีนฟอสโฟไทโรซีน,และพบการแสดงออกของ ตัวรับแอนโดรเจน และโปรตีนฮีทช็อค 70 ลดลงอย่างมีนัยสำคัญทั้งในน้ำเลี้ยงอสุจิและเนื้อเยื่อถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิในกลุ่มที่ได้รับ VPA
สรุป: การฝ่อของถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิที่ได้รับ VPA มีความสัมพันธ์กับการลดลงของสารประกอบของน้ำเลี้ยงอสุจิและการแสดงออกของโปรตีน เช่น โปรตีนฟอสโฟไทโรซีน , ตัวรับแอนโดรเจน (AR) และโปรตีนฮีทช็อค 70 ซึ่งชี้ให้เห็นว่า VPA ส่งผลต่อโครงสร้างและหน้าที่ของถุงผลิตน้ำเลี้ยงอสุจิก่อให้เกิดการลดลงของคุณภาพน้ำเลี้ยงอสุจิ การศึกษาครั้งนี้สามารถใช้อธิบายถึงสาเหตุของภาวะมีบุตรยาก / ภาวะเป็นหมันในผู้ป่วยเพศชายที่รักษาด้วย VPA