text:
Con gái ạ! Liệu sau này lớn lên con có trách mẹ đã không thể cho con một mái ấm gia đình bình yên và trọn vẹn như bao bạn bè không? Bây giờ con còn quá bé để hiểu mọi chuyện đang xảy ra nhưng chắc chắn sẽ có lúc con mẹ tủi thân lắm vì thiếu vắng người cha bên cạnh.
Ngày mẹ quen ba con là khi mẹ vẫn còn là cô sinh viên năm 3 đại học. Lúc đó mẹ thật xinh tươi và tràn đầy nhiệt huyết sống, mẹ luôn tin tưởng tình yêu của mẹ và ba con sẽ vẹn tròn, viên mãn như bao người vì ba con đã cho mẹ những tháng ngày tươi đẹp, hạnh phúc. Mẹ có thể khẳng định với con một điều rằng, cho đến giờ phút này mẹ không giận dữ cuộc đời và giận dỗi người cha của con, cho dù người đó đã rời xa mẹ con mình trong giờ phút khốn khó nhất. Mẹ cũng mong con gái sau này trưởng thành sẽ bản lĩnh, cứng rắn thông mình hơn mẹ và dù có như thế nào đừng bao giờ giận ba con nhé!
Ba của con vốn là một chàng trai rất hài hước và dễ thương. Ba có làn da rám nắng của người miền biển và giọng nói trầm ấm vô cùng đặc biệt. Ông bà nội của con đã mất từ lâu nên một mình ba tự lập từ bé, ba con rất có ý chí và luôn chăm chỉ làm nụng kiếm tiền, điều đó khiến mẹ nể phục ba con vô cùng. Tuy vậy, người đàn ông của mẹ còn nghèo nên tình yêu của ba mẹ cũng chỉ quanh quẩn với những bữa trà đá, những buổi tối đi dạo công viên rồi nắm chặt tay nhau.
Vào năm cuối đại học, mẹ đã rất buồn khi ba con quyết định bỏ dở trường đại học để đi xuất khẩu lao động sang Nga vì họ hàng của ba đã lo hết mọi thứ. Một tháng trước ngày ba con đi, mẹ đã không ngần ngại trao điều quý giá nhất của đời người con gái cho người đàn ông mình yêu. Ba hẹn mẹ chỉ đi 2 năm, kiếm được nhiều tiền rồi sẽ quay về lo cưới xin mẹ đàng hoàng.
Nhưng con có biết không, khi chiếc máy bay cất cánh được ít lâu thì mẹ đã ngất xỉu, người ta đưa mẹ vào phòng bệnh và thông báo mẹ đã có bầu. Lòng mẹ xót xa và hoảng hốt không biết sẽ phải một thân một mình đương đầu làm sao với sóng gió cuộc đời khi người đàn ông nói sẽ che chở cho mẹ đã rời xa khỏi đất nước này.
Mãi 10 ngày sau mẹ mới có thể liên lạc được với ba con và thông báo về sự xuất hiện của con, ba con động viên mẹ phải cố gắng hoàn thành các môn thi của năm cuối và giữ sức khỏe để chăm sóc cho con. Con ạ! Có lẽ điều an ủi mẹ lớn nhất trong những ngày mang thai con là những lời động viên từ nơi xa ấy của ba dành cho hai mẹ con ta. Mẹ và ba con vẫn chần chừ chưa dám công khai với hai bên gia đình. Dù gì thì mẹ vẫn là cô sinh viên chưa tốt nghiệp đại học, chưa có công ăn việc làm và hiện giờ ba con ở xa đâu có ở nhà. Mẹ thì rất sợ ngoại của con vì có lẽ bà sẽ rất buồn khi biết mẹ đã “ăn cơm trước kẻng”, làm trái với gia phong của gia đình.
Một mình nuôi con khôn lớn khi ba đã không còn trên cõi đời là quyết định khó khăn của mẹ (ảnh minh hoạ)
Ba con sau khi sang đó cũng gặp nhiều khó khăn, trở ngại do bất đồng ngôn ngữ và điều kiện thời tiết. Mẹ thì một mình ở thành phố đối mặt với những cơn nghén sớm trong khi bài vở cuối năm chất chồng. Mọi thứ đều mù mịt, tối tắm cho cả ba và mẹ, đã có lúc mẹ có suy nghĩ độc ác rằng: “ Hay thôi, từ bỏ con đi vậy”. Ba còn cũng có đôi lần ám chỉ về chuyện này vì nghĩ đến quãng thời gian và tương lai phía trước cho mẹ trong khi còn một thời gian dài nữa ba mới về. Nhưng mẹ không thể cam tâm mà làm được việc đó, con là giọt máu, là kết tinh tình yêu của ba mẹ cơ mà. Giữ lại con đồng nghĩa với việc mẹ sẽ phải đương đầu với rất nhiều sóng gió và chắc chắn cuộc đời mẹ sẽ rẽ sang một hướng khác.
Nhưng có lẽ sẽ có nhiều bao nhiêu đau đớn trong cuộc sống này không thể nào bằng những ngày mẹ biệt tăm thông tin của ba con, mẹ ra ngóng vào trông chờ đợi email, tin nhắn từ ba con nhưng tất cả đều im lìm, trống trơn. Mẹ sợ hãi không biết có chuyện xấu gì đã xảy ra với ba con, rồi có lúc mẹ nghĩ hay ba con cố tính lảng tránh mẹ vì có niềm vui mới. 3 tuần lễ sau mẹ nhận được tin ba con bị tai nạn lao động và đã mất tại bệnh viện bên đó. Trời ơi! Đất dưới chân mẹ sụp xuống hoàn toàn, tại sao ông trời lại cướp đi tương lai của hai mẹ con ta? Ba con không người thân thích thì liệu rằng ai sẽ làm thủ tục đưa xác của ba con về Việt Nam.
Khi mẹ về quê vì điều kiện cách trở nên không thể biết thêm thông tin gì khác của ba con. Mẹ chỉ chờ ngày con chào đời rồi sẽ tự mình tìm về quê nội của con để kiểm chứng mọi thông tin và trả lại quê quán, nguồn gốc cho con.Những ngày sau đó sức khỏe của mẹ yếu dần, hai cô bạn cùng phòng mẹ phải gọi điện về cho ngoại con để ngoại đưa mẹ về quê. Con ạ! mẹ đã gục đầu khóc trong lòng ngoại cho thỏa bao nỗi buồn bấy lâu nay. Ngoại không trách mẹ mà chỉ thương mẹ con mình nhiều hơn. Khi ấy con gái mẹ đã được hơn 7 tháng.
***
Con của mẹ chào đời sớm hơn hẳn các bạn khác 1 tháng 10 ngày cơ đấy nhưng trộm vía con không bệnh tật, ốm đau như nhiều trẻ sinh non khác. Do có nhiều nguyên nhân nên đến khi con được 6 tháng tuổi mẹ mới tìm về đến quê nội của con….Vậy là ba con đã nằm lại nơi đất khách quê hương, nơi mà quanh năm chỉ có tuyết trắng bao phủ. Chắc chắn ba con lạnh lẽo lắm nhưng ba con có thể yên lòng rằng, từ nay về sau mẹ đã có con ở bên cạnh để sưởi ấm trái tim lẻ loi của mẹ. Họ hàng của ba con đã nắm chặt lấy tay mẹ và chào mừng hai mẹ con ta. Điều ấy khiến mẹ xúc động vô cùng con gái ạ. Họ đều là những người nông dân chất phác thật thà nên khi nghe mẹ kể đầu đuôi câu chuyện tình yêu giữa mẹ và ba con, rồi con đang lớn dần lên từng này mọi người đều rất yêu thương.
***
Một mùa xuân nữa lại về, vậy là 3 năm qua mẹ đã trở thành bà mẹ đơn thân, từ một cô sinh viên non nớt mẹ đã vững chãi đối mặt với nhiều khó khăn, thách thức trong cuộc sống. Con gái mẹ vẫn luôn hỏi mẹ về ba, hỏi xem ba đi làm xa ở đâu mãi chưa về để nghe con gái hát bài “Cả nhà thương nhau”.
Mẹ vẫn chưa thể nói sự thật với con vì con vẫn còn quá nhỏ để hiểu chuyện người lớn. Và dù có như thế nào thì con hãy luôn tự hào về mình có một người cha thực sự tuyệt vời đó con gái bé bỏng ạ!
Tâm sự của độc giả ở địa chỉ mail thanhng.........@............

markdown:
Con gái ạ! Liệu sau này lớn lên con có trách mẹ đã không thể cho con một mái ấm gia đình bình yên và trọn vẹn như bao bạn bè không? Bây giờ con còn quá bé để hiểu mọi chuyện đang xảy ra nhưng chắc chắn sẽ có lúc con mẹ tủi thân lắm vì thiếu vắng người cha bên cạnh.
Ngày mẹ quen ba con là khi mẹ vẫn còn là cô sinh viên năm 3 đại học. Lúc đó mẹ thật xinh tươi và tràn đầy nhiệt huyết sống, mẹ luôn tin tưởng tình
[yêu](https://eva.vn/nghe-thuat-yeu-c54.html
) của mẹ và ba con sẽ vẹn tròn, viên mãn như bao người vì ba con đã cho mẹ những tháng ngày tươi đẹp, hạnh phúc. Mẹ có thể khẳng định với con một điều rằng, cho đến giờ phút này mẹ không giận dữ cuộc đời và giận dỗi người cha của con, cho dù người đó đã rời xa mẹ con mình trong giờ phút khốn khó nhất. Mẹ cũng mong con gái sau này trưởng thành sẽ bản lĩnh, cứng rắn thông mình hơn mẹ và dù có như thế nào đừng bao giờ giận ba con nhé!
Ba của con vốn là một chàng trai rất hài hước và dễ thương. Ba có làn da rám nắng của người miền biển và giọng nói trầm ấm vô cùng đặc biệt. Ông bà nội của con đã mất từ lâu nên một mình ba tự lập từ bé, ba con rất có ý chí và luôn chăm chỉ làm nụng kiếm tiền, điều đó khiến mẹ nể phục ba con vô cùng. Tuy vậy, người đàn ông của mẹ còn nghèo nên tình yêu của ba mẹ cũng chỉ quanh quẩn với những bữa trà đá, những buổi tối đi dạo công viên rồi nắm chặt tay nhau.
Vào năm cuối đại học, mẹ đã rất buồn khi ba con quyết định bỏ dở trường đại học để đi xuất khẩu lao động sang Nga vì họ hàng của ba đã lo hết mọi thứ. Một tháng trước ngày ba con đi, mẹ đã không ngần ngại trao điều quý giá nhất của đời người con gái cho người đàn ông mình yêu. Ba hẹn mẹ chỉ đi 2 năm, kiếm được nhiều tiền rồi sẽ quay về lo cưới xin mẹ đàng hoàng.
Nhưng con có biết không, khi chiếc máy bay cất cánh được ít lâu thì mẹ đã ngất xỉu, người ta đưa mẹ vào phòng bệnh và thông báo mẹ đã có bầu. Lòng mẹ xót xa và hoảng hốt không biết sẽ phải một thân một mình đương đầu làm sao với sóng gió cuộc đời khi người đàn ông nói sẽ che chở cho mẹ đã rời xa khỏi đất nước này.
Mãi 10 ngày sau mẹ mới có thể liên lạc được với ba con và thông báo về sự xuất hiện của con, ba con động viên mẹ phải cố gắng hoàn thành các môn thi của năm cuối và giữ sức khỏe để chăm sóc cho con. Con ạ! Có lẽ điều an ủi mẹ lớn nhất trong những ngày mang thai con là những lời động viên từ nơi xa ấy của ba dành cho hai mẹ con ta. Mẹ và ba con vẫn chần chừ chưa dám công khai với hai bên gia đình. Dù gì thì mẹ vẫn là cô sinh viên chưa tốt nghiệp đại học, chưa có công ăn việc làm và hiện giờ ba con ở xa đâu có ở nhà. Mẹ thì rất sợ ngoại của con vì có lẽ bà sẽ rất buồn khi biết mẹ đã “ăn cơm trước kẻng”, làm trái với gia phong của gia đình.
Một mình nuôi con khôn lớn khi ba đã không còn trên cõi đời là quyết định khó khăn của mẹ (ảnh minh hoạ)
Ba con sau khi sang đó cũng gặp nhiều khó khăn, trở ngại do bất đồng ngôn ngữ và điều kiện thời tiết. Mẹ thì một mình ở thành phố đối mặt với những cơn nghén sớm trong khi bài vở cuối năm chất chồng. Mọi thứ đều mù mịt, tối tắm cho cả ba và mẹ, đã có lúc mẹ có suy nghĩ độc ác rằng: “ Hay thôi, từ bỏ con đi vậy”. Ba còn cũng có đôi lần ám chỉ về chuyện này vì nghĩ đến quãng thời gian và tương lai phía trước cho mẹ trong khi còn một thời gian dài nữa ba mới về. Nhưng mẹ không thể cam tâm mà làm được việc đó, con là giọt máu, là kết tinh tình yêu của ba mẹ cơ mà. Giữ lại con đồng nghĩa với việc mẹ sẽ phải đương đầu với rất nhiều sóng gió và chắc chắn cuộc đời mẹ sẽ rẽ sang một hướng khác.
Nhưng có lẽ sẽ có nhiều bao nhiêu đau đớn trong cuộc sống này không thể nào bằng những ngày mẹ biệt tăm thông tin của ba con, mẹ ra ngóng vào trông chờ đợi email, tin nhắn từ ba con nhưng tất cả đều im lìm, trống trơn. Mẹ sợ hãi không biết có chuyện xấu gì đã xảy ra với ba con, rồi có lúc mẹ nghĩ hay ba con cố tính lảng tránh mẹ vì có niềm vui mới. 3 tuần lễ sau mẹ nhận được tin ba con bị tai nạn lao động và đã mất tại bệnh viện bên đó. Trời ơi! Đất dưới chân mẹ sụp xuống hoàn toàn, tại sao ông trời lại cướp đi tương lai của hai mẹ con ta? Ba con không người thân thích thì liệu rằng ai sẽ làm thủ tục đưa xác của ba con về Việt Nam.
Khi mẹ về quê vì điều kiện cách trở nên không thể biết thêm thông tin gì khác của ba con. Mẹ chỉ chờ ngày con chào đời rồi sẽ tự mình tìm về quê nội của con để kiểm chứng mọi thông tin và trả lại quê quán, nguồn gốc cho con.Những ngày sau đó sức khỏe của mẹ yếu dần, hai cô bạn cùng phòng mẹ phải gọi điện về cho ngoại con để ngoại đưa mẹ về quê. Con ạ! mẹ đã gục đầu khóc trong lòng ngoại cho thỏa bao nỗi buồn bấy lâu nay. Ngoại không trách mẹ mà chỉ thương mẹ con mình nhiều hơn. Khi ấy con gái mẹ đã được hơn 7 tháng.
***
Con của mẹ chào đời sớm hơn hẳn các bạn khác 1 tháng 10 ngày cơ đấy nhưng trộm vía con không bệnh tật, ốm đau như nhiều trẻ sinh non khác. Do có nhiều nguyên nhân nên đến khi con được 6 tháng tuổi mẹ mới tìm về đến quê nội của con….Vậy là ba con đã nằm lại nơi đất khách quê hương, nơi mà quanh năm chỉ có tuyết trắng bao phủ. Chắc chắn ba con lạnh lẽo lắm nhưng ba con có thể yên lòng rằng, từ nay về sau mẹ đã có con ở bên cạnh để sưởi ấm trái tim lẻ loi của mẹ. Họ hàng của ba con đã nắm chặt lấy tay mẹ và chào mừng hai mẹ con ta. Điều ấy khiến mẹ xúc động vô cùng con gái ạ. Họ đều là những người nông dân chất phác thật thà nên khi nghe mẹ kể đầu đuôi câu chuyện tình yêu giữa mẹ và ba con, rồi con đang lớn dần lên từng này mọi người đều rất yêu thương.
***
Một mùa xuân nữa lại về, vậy là 3 năm qua mẹ đã trở thành bà mẹ đơn thân, từ một cô sinh viên non nớt mẹ đã vững chãi đối mặt với nhiều khó khăn, thách thức trong cuộc sống. Con gái mẹ vẫn luôn hỏi mẹ về ba, hỏi xem ba đi làm xa ở đâu mãi chưa về để nghe con gái hát bài “Cả nhà thương nhau”.
Mẹ vẫn chưa thể nói sự thật với con vì con vẫn còn quá nhỏ để hiểu chuyện người lớn. Và dù có như thế nào thì con hãy luôn tự hào về mình có một người cha thực sự tuyệt vời đó con gái bé bỏng ạ!
*Tâm sự của độc giả ở địa chỉ mail thanhng.........@............*

X-CacheDebug-7: Starting wrote cachefile /home/webeva/cache/quickcache/5/49/qcc-4927c84c8cee9e3599b5e48391a1b42b

X-CacheDebug-8: quickcache_filewrite wrote cachefile /home/webeva/cache/quickcache/5/49/qcc-4927c84c8cee9e3599b5e48391a1b42b

X-CacheDebug-1: Cache scriptkey is set to /index.php

X-CacheDebug-2: Cache varkey is set to GET=a:3:{s:13:"SERVER_REGION";s:2:"US";s:7:"web_url";s:59:"lam-me/me-quyet-giu-con-lai-du-ba-da-roi-xa-c10a165014.html";s:15:"v_device_global";s:2:"pc";}

X-CacheDebug-5: Callback happened

X-CacheDebug-6: Writing cached data to storage

X-CacheDebug-3: Cachekey is set to 4927c84c8cee9e3599b5e48391a1b42b

Content-Type: text/html; charset=Utf-8

X-CacheDebug-4: No (valid) cachedata for 4927c84c8cee9e3599b5e48391a1b42b

X-Cache: QuickCache vv2.1.1rc1 - file

X-CacheDebug-10: Successfully wrote cachefile /home/webeva/cache/quickcache/5/49/qcc-4927c84c8cee9e3599b5e48391a1b42b

Cache-Control: public


text:
Nếu yêu thích các font của Google, bạn có thể sử dụng chúng ngay trong Office Word 2013/2010 chỉ bằng vài thao tác đơn giản sau đây.
Trước tiên, bạn truy cập vào kho Font của Google tại đây và tiến hành nhấn vào nút “Add to Collection” ở những font mình cần.
Sau khi đã chọn xong, bạn nhấn vào nút “Download” ở góc trên bên phải giao diện web.
Trang lựa chọn gói tập tin chứa các font sẽ xuất hiện, ở đây bạn hãy chọn định dạng .ZIP để dễ sử dụng.
Sau khi tải gói tập tin chứa các font mình cần về máy, bạn hãy tiến hành xả nén gói tập tin ra và lần lượt cài đặt (Install) chúng vào máy tính
Thế là xong, bây giờ bạn hãy mở Office Word 2013 hoặc 2010 lên và kiểm tra kết quả nhé.
Chúc bạn thành công.
Link gốc: http://genk.vn/thu-thuat/huong-dan-tai-ve-bo-font-chu-mien-phi-khong-lo-tu-google-20140627184940264.chn

markdown:
Nếu yêu thích các font của Google, bạn có thể sử dụng chúng ngay trong Office Word 2013/2010 chỉ bằng vài thao tác đơn giản sau đây.
Trước tiên, bạn truy cập vào kho Font của Google
*tại đây *và tiến hành nhấn vào nút “Add to Collection” ở những font mình cần.
Sau khi đã chọn xong, bạn nhấn vào nút “Download” ở góc trên bên phải giao diện web.
Trang lựa chọn gói tập tin chứa các font sẽ xuất hiện, ở đây bạn hãy chọn định dạng .ZIP để dễ sử dụng.
Sau khi tải gói tập tin chứa các font mình cần về máy, bạn hãy tiến hành xả nén gói tập tin ra và lần lượt cài đặt (Install) chúng vào máy tính
Thế là xong, bây giờ bạn hãy mở Office Word 2013 hoặc 2010 lên và kiểm tra kết quả nhé.
Chúc bạn thành công.
Link gốc:
[http://genk.vn/thu-thuat/huong-dan-tai-ve-bo-font-chu-mien-phi-khong-lo-tu-google-20140627184940264.chn](http://genk.vn/thu-thuat/huong-dan-tai-ve-bo-font-chu-mien-phi-khong-lo-tu-google-20140627184940264.chn)

WARC-Type: response

Content-Type: application/http; msgtype=response

WARC-Truncated: length

WARC-Identified-Payload-Type: text/html

Server: nginx

Connection: close

Vary: Cookie

X-hacker: If you're reading this, you should visit automattic.com/jobs and apply to join the fun, mention this header.

Content-Type: text/html; charset=UTF-8

X-ac: 1.dca _dca


text:
23:56 PM 18/05/11
Về giải pháp nâng cao chất lượng đào tạo hệ tại chức, Thứ trưởng Ga cho hay: Năm học tới triển khai đào tạo tín chỉ thì hệ tại chức cũng có thể học với hệ chính quy. Sinh viên của trường, cùng môn học, có thể đăng ký học chung với sinh viên hệ chính quy cũng với tín chỉ đó nếu điều kiện thời gian của người học tại chức cho phép. Người học sẽ cùng tham gia một kỳ thi cuối khóa để nâng cao chất lượng đào tạo. Sắp tới, Bộ cũng khuyến khích các trường liên thông đào tạo tại chức với chính quy để nâng cao chất lượng, để chính quy và tại chức có thể học chung. Và học tại chức cùng tham gia thi kết thúc. Nhưng chỉ khuyến khích chứ không bắt buộc, vì phương thức đào tạo của hệ tại chức khác chính quy, hình thức học phải mềm dẻo hơn.
Theo Dân Trí
Trường ĐH Quốc tế TPHCM tổ chức thi thử đánh giá năng lực dạng SAT II
Ngày 12/3, Trường ĐH Quốc tế (ĐH Quốc gia TP. Hồ Chí Minh) đã tổ chức cho hơn 1.500 học sinh lớp 12 thi thử bài kiểm tra năng lực theo dạng SAT II (Mỹ).

markdown:
23:56 PM 18/05/11
Về giải pháp nâng cao chất lượng đào tạo hệ tại chức, Thứ trưởng Ga cho hay: Năm học tới triển khai đào tạo tín chỉ thì hệ tại chức cũng có thể học với hệ chính quy. Sinh viên của trường, cùng môn học, có thể đăng ký học chung với sinh viên hệ chính quy cũng với tín chỉ đó nếu điều kiện thời gian của người học tại chức cho phép. Người học sẽ cùng tham gia một kỳ thi cuối khóa để nâng cao chất lượng đào tạo. Sắp tới, Bộ cũng khuyến khích các trường liên thông đào tạo tại chức với chính quy để nâng cao chất lượng, để chính quy và tại chức có thể học chung. Và học tại chức cùng tham gia thi kết thúc. Nhưng chỉ khuyến khích chứ không bắt buộc, vì phương thức đào tạo của hệ tại chức khác chính quy, hình thức học phải mềm dẻo hơn.
**Theo Dân Trí**
[
Trường ĐH Quốc tế TPHCM tổ chức thi thử đánh giá năng lực dạng SAT II ](https://kenhtuyensinh.vn/truong-dh-quoc-te-tphcm-to-chuc-thi-thu-danh-gia-nang-luc-dang-sat-ii)
Ngày 12/3, Trường ĐH Quốc tế (ĐH Quốc gia TP. Hồ Chí Minh) đã tổ chức cho hơn 1.500 học sinh lớp 12 thi thử bài kiểm tra năng lực theo dạng SAT II (Mỹ).

Server: cloudflare

Pragma: no-cache

Vary: Accept-Encoding


text:
Gọi ngay số: 028.3868.7686 - 0286.2719.222 - HOTLINE: 0933.775.148 - 0918.327.329
Lâm Quang Phát Sẽ tư vấn cho quý khách lựa chọn sản phẩm chất lượng tốt nhất và hài lòng nhất!
Tranh dán tường 3D_001
Tranh dán tường 3D_002
Tranh dán tường 3D_003
Tranh dán tường 3D_004
Tranh dán tường 3D_005
Tranh dán tường 3D_006
Tranh dán tường 3D_007
Tranh dán tường 3D_008
Tranh dán tường 3D_009
Tranh dán tường 3D_010
Tranh dán tường 3D_011
Tranh dán tường 3D_012
Tranh dán tường 3D_013
Tranh dán tường 3D_014
Tranh dán tường 3D_015
Tranh dán tường 3D_016
Tranh dán tường 3D_017
Tranh dán tường 3D_018
Tranh dán tường 3D_019
Tranh dán tường 3D_020
Tranh dán tường 3D_021
Tranh dán tường 3D_022
Tranh dán tường 3D_023
Tranh dán tường 3D_024
Tranh dán tường 3D_025
Tranh dán tường 3D_026
Tranh dán tường 3D_027
Tranh dán tường 3D_028
Tranh dán tường 3D_029
Tranh dán tường 3D_030
Tranh dán tường 3D_031
Tranh dán tường 3D_032
Tranh dán tường 3D_033
Tranh dán tường 3D_034
Tranh dán tường 3D_035
Tranh dán tường 3D_036
Tranh dán tường 3D_037
Tranh dán tường 3D_038
Tranh dán tường 3D_039
Tranh dán tường 3D_040
Tranh dán tường 3D_041
Tranh dán tường 3D_042
Tranh dán tường 3D_043
Tranh dán tường 3D_044
Tranh dán tường 3D_045
Tranh dán tường 3D_046
Tranh dán tường 3D_047
Tranh dán tường 3D_048
Tranh dán tường 3D_049
Tranh dán tường 3D_050
Tranh dán tường 3D_051
Tranh dán tường 3D_052
Tranh dán tường 3D_053
Tranh dán tường 3D_054
Tranh dán tường 3D_055
Tranh dán tường 3D_056
Tranh dán tường 3D_057
Tranh dán tường 3D_058
Tranh dán tường 3D_059
Tranh dán tường 3D_060

WARC-Identified-Payload-Type: application/xhtml+xml

Cache-Control: private

X-Powered-By: PleskWin

Content-Type: text/html; charset=utf-8


text:
Kinh nghiệm giữ dáng sau khi sinh:
- 6 chai thuốc Tây Tabame: ngày tắm ngày nghỉ
- 10 chai thuốc Tàu: Hoạt huyết, bổ huyết; uống theo hướng dẫn
- Thuốc xông: ngày hai lần sáng, chiều; nấu nước xông toàn thân (chừa mặt) trong 1 tháng:
- 1 kg ngãi cứu
- 1 kg bạc hà
- 1 kg kinh giới
- 1 kg quế chi
- Nghệ tươi giã lấy nước thoa da 1 tháng
(Sưu tầm)
Advertisements


text:
HỖ TRỢ 24/7
Hà Nội: 024 7109 9999
Hồ Chí Minh: 028 7109 9998
Bạn không có thông báo nào
XEM BÁO GIÁ QUA EMAIL

Server: Apache/2.2.15 (CentOS)

Connection: Close

Cache-Control: no-store, no-cache, must-revalidate, post-check=0, pre-check=0


text:
HỖ TRỢ 24/7
Hà Nội: 024 7109 9999
Hồ Chí Minh: 028 7109 9998
Bạn không có thông báo nào
30/12/2014
3326
Xem thêm
01/10/2014
5004
XEM BÁO GIÁ QUA EMAIL

Set-Cookie: night_booking=1; expires=Sat, 17-Feb-2018 14:17:49 GMT; path=/


text:
Điều kiện cấp giấy phép hoạt động đối với quân y cơ quan được quy định như thế nào? Xin chào Ban biên tập Thư Ký Luật. Tôi tên là Lê Ninh. Tôi đang công tác tại Cục Quân y – Bộ Quốc phòng. Để phục vụ cho nhu cầu công việc, tôi có thắc mắc muốn nhờ Ban biên tập tư vấn giúp tôi, cụ thể là điều kiện cấp giấy phép hoạt động đối với quân y cơ quan được quy định như thế nào? Văn bản pháp luật nào quy định vấn đề này? Tôi hy vọng sớm nhận được tư vấn từ Ban biên tập. Tôi xin chân thành cảm ơn Ban biên tập Thư Ký Luật! (leninh9***@yahoo.com.vn)
Điều kiện cấp giấy phép hoạt động đối với quân y cơ quan được quy định tại Điều 25 Thông tư 18/2014/TT-BQP quy định cấp chứng chỉ hành nghề đối với người hành nghề khám, chữa bệnh và cấp giấy phép hoạt động đối với cơ sở khám, chữa bệnh thuộc Bộ Quốc phòng như sau:
1. Cơ sở vật chất
a) Có các buồng, phòng đủ điều kiện đảm bảo cho việc khám bệnh; cấp thuốc, cấp cứu, điều trị theo phạm vi hoạt động chuyên môn quy định;
b) Bảo đảm các điều kiện về quản lý chất thải y tế; phòng cháy, chữa cháy theo quy định của pháp luật;
c) Bảo đảm có đủ điện, nước và các điều kiện khác để phục vụ cho chăm sóc người bệnh
2. Thiết bị y tế
Có đủ thiết bị, dụng cụ y tế phù hợp với phạm vi hoạt động chuyên môn theo quy định.
3. Tổ chức, biên chế
a) Số lượng nhân viên theo biểu tổ chức biên chế của cấp có thẩm quyền quyết định và đảm bảo để thực hiện được phạm vi chuyên môn theo quy định;
b) Người chịu trách nhiệm chuyên môn kỹ thuật của quân y cơ quan phải là bác sĩ hoặc y sĩ có chứng chỉ hành nghề phù hợp với phạm vi chuyên môn đăng ký và có quyết định phân công, bổ nhiệm của cấp có thẩm quyền;
c) Ngoài người chịu trách nhiệm chuyên môn kỹ thuật của quân y cơ quan, các đối tượng khác làm việc tại quân y cơ quan nếu thực hiện khám bệnh, chữa bệnh thì phải có chứng chỉ hành nghề và chỉ được thực hiện khám bệnh, chữa bệnh trong phạm vi công việc được phân công.
4. Phạm vi hoạt động chuyên môn
Thực hiện các kỹ thuật chuyên môn theo danh mục được Cục trưởng Cục Quân y quy định.
Ngoài ra, điều kiện này cũng được quy định tại Điều 43 Luật khám bệnh, chữa bệnh 2009 như sau:
1. Cơ sở khám bệnh, chữa bệnh được cấp giấy phép hoạt động phải có đủ các điều kiện sau đây:
a) Đáp ứng các quy định của quy chuẩn kỹ thuật quốc gia về cơ sở khám bệnh, chữa bệnh do Bộ trưởng Bộ Y tế ban hành.
b) Có đủ người hành nghề phù hợp với phạm vi hoạt động chuyên môn;
c) Người chịu trách nhiệm chuyên môn kỹ thuật của cơ sở khám bệnh, chữa bệnh phải có thời gian hành nghề khám bệnh, chữa bệnh ít nhất là 36 tháng.
2. Trường hợp đăng ký thành lập phóng khám chuyên khoa hoặc bác sỹ gia đình thì ngoài các điều kiện quy định tại khoản 1 Điều này, người đứng đầu cơ sở phải là người hành nghề có bằng cấp chuyên môn phù hợp với loại hình hành nghề.
3. Bộ trưởng Bộ Y tế, Bộ trưởng Bộ Quốc phòng quy định chi tiết điều kiện cấp giấy phép hoạt động quy định tại Điều này đối với từng hình thức tổ chức của cơ sở khám bệnh, chữa bệnh theo thẩm quyền quản lý.
Trên đây là nội dung tư vấn về điều kiện cấp giấy phép hoạt động đối với quân y cơ quan. Để hiểu rõ hơn về vấn đề này bạn nên tham khảo thêm tại Thông tư 18/2014/TT-BQP.
Trân trọng!


text:
Thư ngỏ Saigonpoolspa
Nhìn lại quảng thời gian hơn 10 năm phát triển và trưởng thành, quảng thời gian đó không phải là dài nhưng cũng không quá ngắn để khẳng định một thương hiệu. Hôm nay, trong những ngày đầu năm 2017 tập thể Ban lãnh đạo cùng toàn thể những con người đã gắn bó với Saigonpoolspa trong từng ấy năm nhìn lại những mặt đạt được và những mặt chưa làm được, để thấy được thành quả, đóng góp của mình vào lĩnh vực xây dựng, con đường mà chúng tôi đã đi trải dài dọc theo mảnh đất hình chữ S và nước bạn Campuchia, vô số những hạng mục công trình được tạo ra trên mảnh đất này, với mỗi công trình là một niềm tự hào, một dấu ấn ghi lại trên từng địa điểm. Là một công ty chuyên thiết kế xây dựng hồ bơi, thành quả có được xuất phát từ những Kiến trúc sư và kỹ sư đầy nhiệt huyết, dám nghĩ và dám đột phá trong cách làm. Khách hàng biết đến Saigonpoolspa như một Nhà thầu thi công, tư vấn thiết kế bể bơi những hạng mục mà chúng tôi đóng góp bao gồm thiết kế thi công hồ bơi cho gia đình, trường học, phục vụ kinh doanh resort, khách sạn và đặc biệt mẫu thiết kế xây dựng mà chúng tôi tâm đắc, được đầu tư kỹ lưỡng cả về mặt công nghệ lẫn con người hồ bơi chân mây, hồ bơi kính, bởi tính độc đáo và mang tính chất kỹ thuật cao trong từng bước thi công. Hơn thế nữa Saigonpoolspa còn cung cấp các dịch vụ về sửa chữa nâng cấp, vệ sinh, cung cấp các thiết bị, dụng cụ cho bể bơi.
Có trụ sở chính tại hcm vùng đất Sài gòn trẻ trung và năng động cùng các văn phòng đại diện tại Hà Nội, Đà Nẵng, bước vào năm mới với tinh thần mới Saigonpoolpsa xin tri ân đến những khách hàng thân thiết đã gắn bó với chúng tôi trong nhiều năm qua, chúng tôi xin hứa sẽ tiếp tục cống hiến đóng góp về kiến thức, ứng dụng những công nghệ, phương pháp thi công, vật liệu mới vào công trình để giảm giá thành và tối ưu hạng mục, lấy phương châm đưa chất lượng tốt nhất để phục phụ khách hàng.
Read More
Dự án nổi bật
Các dự án thi công bể bơi đang thực hiện & hoàn thành bàn giao
Sản phẩm nổi bật
-
5 mẫu máng tràn bể bơi đẹp
Liên hệ5 mẫu máng tràn bể bơi đẹpQua nhiều năm gắn bó với ngành thiết kế thi công bể bơi tạo ra cho chúng tôi cách nhìn khác về công việc này. Chúng tôi nghĩ để tạo ra một công trình mà người chủ sở hữu nó cảm thấy hài lòng, thật sự không hề đơn giản. Bởi ngoài yếu tố kết cấu chất lượng, yếu tố...Chi tiết
Hướng dẫn sử dụng các loại hóa chất hồ bơi
Liên hệHướng dẫn sử dụng các loại hóa chất hồ bơiChi tiết
Một điều chắc chắn, rõ ràng hóa chất thật sự rất cần thiết và không thể thiếu để giữ cho hồ bơi luôn sạch sẽ, an toàn đối với người bơi. Việc duy trì, lựa chọn hóa chất để sử dụng vệ sinh xử lý nước, cách...
Ống mềm hút cặn vệ sinh hồ bơi
Liên hệỐng mềm hút cặn vệ sinh hồ bơiỐng mềm vệ sinh hồ bơi là một dụng cụ không thể thiếu trong quá trình làm sạch bể bơi, nó được cấu tạo từ nhựa cao cấp, chất lượng tốt, có nhiều màu sắc và độ dài phù hợp với kích thước bể bơi, độ dài nó có thể là 9m, 12m, 15m, 30m để quý khách hàng có thể lựa...Chi tiết
Mẫu ghế nằm hồ bơi đẹp
Liên hệMẫu ghế nằm hồ bơi đẹpKhi nghĩ đến những sản phẩm phụ kiện cho bể bơi, người ta thường nghĩ tới các là các phụ kiện làm đẹp tô điểm cho ngoại cảnh thêm sinh động và tạo cảm giác lôi cuốn, thu hút được ánh mắt của nhiều người. Ghế nằm hồ bơi là một phụ kiện mà khi nghỉ đến chúng...Chi tiết
Ghế nằm hồ bơi ngoài trời bằng gỗ
Liên hệGhế nằm hồ bơi ngoài trời bằng gỗMột giải pháp trang trí, tạo điểm nhấn sang trọng và cũng rất cần thiết để thư giãn sau những ngày làm việc căng thẳng với ghế nằm hồ bơi, bể bơi. Thiết kế kiểu dáng phù hợp với tư thế nằm tắm nắng với chất liệu gỗ tự nhiên hoặc nhôm hợp kim an toàn cho sức khỏe,...Chi tiết
Ván lướt sóng bán ở đâu
Liên hệVán lướt sóng bán ở đâu Chi tiết

markdown:
## Thư ngỏ Saigonpoolspa
Nhìn lại quảng thời gian hơn 10 năm phát triển và trưởng thành, quảng thời gian đó không phải là dài nhưng cũng không quá ngắn để khẳng định một thương hiệu. Hôm nay, trong những ngày đầu năm 2017 tập thể Ban lãnh đạo cùng toàn thể những con người đã gắn bó với Saigonpoolspa trong từng ấy năm nhìn lại những mặt đạt được và những mặt chưa làm được, để thấy được thành quả, đóng góp của mình vào lĩnh vực xây dựng, con đường mà chúng tôi đã đi trải dài dọc theo mảnh đất hình chữ S và nước bạn Campuchia, vô số những hạng mục công trình được tạo ra trên mảnh đất này, với mỗi công trình là một niềm tự hào, một dấu ấn ghi lại trên từng địa điểm. Là một
**công ty** chuyên thiết kế [, thành quả có được xuất phát từ những Kiến trúc sư và kỹ sư đầy nhiệt huyết, dám nghĩ và dám đột phá trong cách làm. Khách hàng biết đến Saigonpoolspa như một Nhà thầu thi công, xây dựng hồ bơi](https://saigonpoolspa.com/) **tư vấn thiết kế bể bơi**những hạng mục mà chúng tôi đóng góp bao gồm thiết kế [cho gia đình, trường học, phục vụ kinh doanh resort, khách sạn và đặc biệt mẫu thiết kế xây dựng mà chúng tôi tâm đắc, được đầu tư kỹ lưỡng cả về mặt công nghệ lẫn con người hồ bơi chân mây, hồ bơi kính, bởi tính độc đáo và mang tính chất kỹ thuật cao trong từng bước thi công. Hơn thế nữa Saigonpoolspa còn cung cấp các dịch vụ về sửa chữa nâng cấp, vệ sinh, cung cấp các thiết bị, dụng cụ cho bể bơi.](https://saigonpoolspa.com/) **thi công hồ bơi**
Có trụ sở chính tại hcm vùng đất Sài gòn trẻ trung và năng động cùng các văn phòng đại diện tại Hà Nội, Đà Nẵng, bước vào năm mới với tinh thần mới Saigonpoolpsa xin tri ân đến những khách hàng thân thiết đã gắn bó với chúng tôi trong nhiều năm qua, chúng tôi xin hứa sẽ tiếp tục cống hiến đóng góp về kiến thức, ứng dụng những công nghệ, phương pháp thi công, vật liệu mới vào công trình để giảm giá thành và tối ưu hạng mục, lấy phương châm đưa chất lượng tốt nhất để phục phụ khách hàng.
Read More
## Dự án nổi bật
Các dự án
**thi công bể bơi** đang thực hiện & hoàn thành bàn giao
## Sản phẩm nổi bật
-
### 5 mẫu máng tràn bể bơi đẹp
Liên hệ
[5 mẫu máng tràn bể bơi đẹp](5-mau-mang-tran-be-boi-dep)Qua nhiều năm gắn bó với ngành thiết kế thi công bể bơi tạo ra cho chúng tôi cách nhìn khác về công việc này. Chúng tôi nghĩ để tạo ra một công trình mà người chủ sở hữu nó cảm thấy hài lòng, thật sự không hề đơn giản. Bởi ngoài yếu tố kết cấu chất lượng, yếu tố...Chi tiết
### Hướng dẫn sử dụng các loại hóa chất hồ bơi
Liên hệ
[Hướng dẫn sử dụng các loại hóa chất hồ bơi](huong-dan-su-dung-cac-loai-hoa-chat-ho-boi)Chi tiết
Một điều chắc chắn, rõ ràng hóa chất thật sự rất cần thiết và không thể thiếu để giữ cho hồ bơi luôn sạch sẽ, an toàn đối với người bơi. Việc duy trì, lựa chọn hóa chất để sử dụng vệ sinh xử lý nước, cách...
### Ống mềm hút cặn vệ sinh hồ bơi
Liên hệ
[Ống mềm hút cặn vệ sinh hồ bơi](ong-mem-hut-can-ve-sinh-ho-boi)Ống mềm vệ sinh hồ bơi là một dụng cụ không thể thiếu trong quá trình làm sạch bể bơi, nó được cấu tạo từ nhựa cao cấp, chất lượng tốt, có nhiều màu sắc và độ dài phù hợp với kích thước bể bơi, độ dài nó có thể là 9m, 12m, 15m, 30m để quý khách hàng có thể lựa...Chi tiết
### Mẫu ghế nằm hồ bơi đẹp
Liên hệ
[Mẫu ghế nằm hồ bơi đẹp](mau-ghe-nam-ho-boi-dep)Khi nghĩ đến những sản phẩm phụ kiện cho bể bơi, người ta thường nghĩ tới các là các phụ kiện làm đẹp tô điểm cho ngoại cảnh thêm sinh động và tạo cảm giác lôi cuốn, thu hút được ánh mắt của nhiều người. Ghế nằm hồ bơi là một phụ kiện mà khi nghỉ đến chúng...Chi tiết
### Ghế nằm hồ bơi ngoài trời bằng gỗ
Liên hệ
[Ghế nằm hồ bơi ngoài trời bằng gỗ](ghe-nam-ho-boi-ngoai-troi-bang-go)Một giải pháp trang trí, tạo điểm nhấn sang trọng và cũng rất cần thiết để thư giãn sau những ngày làm việc căng thẳng với ghế nằm hồ bơi, bể bơi. Thiết kế kiểu dáng phù hợp với tư thế nằm tắm nắng với chất liệu gỗ tự nhiên hoặc nhôm hợp kim an toàn cho sức khỏe,...Chi tiết
### Ván lướt sóng bán ở đâu
Liên hệ
[Ván lướt sóng bán ở đâu Chi tiết](van-luot-song-ban-o-dau)

Server: Apache

Vary: Accept-Encoding,User-Agent


text:
English
Thông tin tuyển dụng được đăng trên 5 website lớn Truy cập hơn 600 ngàn hồ sơ ứng viên Thông tin tuyển dụng được đăng trên 5 website lớn Truy cập hơn 600 ngàn hồ sơ ứng viên
Tìm thấy 9 việc làm
Tiếp thị / Marketing
tại
Khánh Hòa
Trực tiếp tìm kiếm, mở rộng và gia tăng mới nguồn khách hàng cho BAC A; Trực tiếp liên hệ, gặp gỡ, tư vấn, thuyết phục khách hàng sử dụng các sản...
Mức lương Thỏa thuận
Hạn chót nộp hồ sơ 15-02-2018
- Xây dựng kế hoạch bán hàng trong khu vực được giao theo định hướng của Công ty - Tổ chức việc bán hàng cho nhà phân phân phối thông qua việc:...
Mức lương 9.000.000 - 12.000.000 VND
Hạn chót nộp hồ sơ 11-02-2018
- Chủ động tìm kiếm thông tin khách hàng mới, thực hiện tiếp thị, phát triển khách hàng mới tại địa bàn được phân công phụ trách. - Thu thập thông...
- Triển khai thực hiện chiến lược phát triển khách hàng của Công ty đề ra. - Thường xuyên liên lạc, tiếp xúc trực tiếp từng khách hàng trong địa...
Mức lương 4.000.000 - 5.000.000 VND
Hạn chót nộp hồ sơ 09-02-2018
Thu thập thông tin về nhu cầu khách hàng, phân tích tình hình thị trường, phát triển và mở rộng thị trường phân bón, quảng bá hình ảnh và thương...
Hạn chót nộp hồ sơ 07-02-2018
- Tìm kiếm thông tin, tiếp cận các khách hàng tiềm năng - Tư vấn, giải thích cho khách hàng về dịch vụ Internet và dịch vụ Truyền Hình FPT do FPT...
Mức lương 5.000.000 - 15.000.000 VND
Hạn chót nộp hồ sơ 04-02-2018
Nhân viên Marketing - làm việc tại Nha Trang Số Lượng: 01 - Tối ưu hóa các công cụ tìm kiếm, đưa website Công ty lên top đầu các trang tìm kiếm; -...
Mức lương 0 - 12.000.000 VND
Hạn chót nộp hồ sơ 28-01-2018
Trưng bày sản phẩm và bán hàng ở các siêu thị
Mức lương Trên 4.500.000 VND
Hạn chót nộp hồ sơ 14-02-2018
Xác định, phát triển và theo dõi các khách hàng mới và tiềm năng. Lập kế hoạch bán hàng và khảo sát nhu cầu, thị hiếu của khách hàng từ đó mở rộng...
Mức lương 7.000.000 - 15.000.000 VND

markdown:
Thông tin tuyển dụng được đăng trên 5 website lớn Truy cập hơn 600 ngàn hồ sơ ứng viên Thông tin tuyển dụng được đăng trên 5 website lớn Truy cập hơn 600 ngàn hồ sơ ứng viên
Tìm thấy 9 việc làm
[Tiếp thị / Marketing](https://talentnetwork.vn/viec-lam-nganh-tiep-thi-marketing-i4-vi)
tại
[Khánh Hòa](https://talentnetwork.vn/viec-lam-tai-khanh-hoa-l58-vi)

Server: CareerBuilder Server

Set-Cookie: PHPSESSID=80u9iuc7jkuankkso7l000cfi6; expires=Sun, 28 Jan 2018 13:57:05 GMT; path=/


text:
Tải bản đầy đủ
Y Tế - Sức Khỏe
Y học thưởng thức
Pha chế môi trường nuôi cấy vi sinh vật
MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VÀ PHÂN LẬP
VI KHUẨN,NẤM GÂY BỆNH
1.Tầm quan trọng của môi trường:
Muốn nuôi cấy các vi khuẩn gây bệnh trong phòng thí nghiệm cần phải có các môi
trường dinh dưỡng,đó là hỗn hợp các chất đạm,đường,muối khoáng và vitamin thích
hợp,đảm bảo cho sự sinh sản và phát triển của vi khuẩn.
Việc pha chế các môi trường dinh dưỡng là một trong những khâu quan trọng nhất
trong công tác xét nghiệm vi khuẩn vì nếu môi trường không đảm bảo chất lượng sẽ cho
những kết quả sai lệch trong việc chẩn đoán,xác định các vi khuẩn gây bệnh.Vì vậy để đảm
bảo chất lượng của môi trường, việc pha chế môi trường phải được tiến hành một cách thận
trọng .
2. Các loại môi trường:
2.1. Dựa vào thành phần:
Môi trường được chia làm 2 loại: Môi trường tự nhiên và môi trường tổng hợp.
Môi trường tự nhiên là môi trường được điều chế từ các sản phẩm có nguồn
gốc động vật hoặc thực vật, ví dụ: môi trường khoai tây, môi trường nước mạch nha…
Môi trường tổng hợp là môi trường được điều chế từ các chất hoá học tinh
khiết, xác định và được lấy với những nồng độ cho trước.
2.2. Dựa vào trạng thái vật lý:
Môi trường được chia làm 3 loại:
Môi trường lỏng, ví dụ: môi trường canh thang…
Môi trường nửa lỏng nửa đặc, ví dụ: môi trường thạch mềm…
Môi trường đặc, ví dụ: môi trường thạch thường…
2.3. Dựa vào công dụng:
Dựa vào công dụng môi trường được chia ra làm 5 loại:
2.3.1. Môi trường cơ bản:
Môi trường cơ bản là môi trường phần lớn các vi khuẩn có thể phát triển được và là
nguyên liệu cơ bản để điều chế các môi trường khác. Môi trường cơ bản hay được sử dụng
nhất là môi trường thạch thường và canh thang.
2.3.2. Môi trường vận chuyển và bảo quản bệnh phẩm:
Trong những trường hợp sau khi lấy bệnh phẩm không có điều kiện cấy ngay vào
môi trường nuôi cấy thích hợp mà phải vận chuyển đi xa với một thời gian nhất định, bệnh
phẩm phải được bảo quản trong môi trường vận chuyển về phòng xét nghiệm. một trong
những môi trường hay được sử dụng là môi trường Cary – Blair.
2.3.3. Môi trường tăng sinh:
Môi trường tăng sinh được sử dụng trong một số trường hợp vi khuẩn trong bệnh
phẩm quá ít, chúng ta cần làm tăng số lượng trước khi cây vào môi trường phân lập. ví dụ:
môi trường Mueller – Kauffman…
1
2.3.4.Môi trường phân lập:
Môi trường phân lập nhằm mục đích tách vi khuẩn cần tìm ra khỏi bệnh phẩm có lẫn
tạp khuẩn. vi vậy trong môi trường phân lập ngoài chất dinh dưỡng còn có các chất đảm
bảo sự phát triển ưu thế cho một loài hoặc một nhóm vi khuẩn nào đó, nhưng đồng thời lại
có chất hạn chế hoặc ức chế sự phát triển của những loài vi sinh vật khác (môi trường ức
chế chọn lọc). do đó mỗi loài hoặc mỗi nhóm vi khuẩn sẽ có môi trường phân lập khác
nhau. Vi dụ: môi trường Endo, MC… sử dụng để phân lập vi khuẩn đường ruột, môi
trường Chapman để phân lập tụ cầu, môi trường Schoer phân lập vi khuẩn bạch hầu…
2.3.5. Môi trường xác định tính chất sinh vật hoá học:
Đây là môi trường sử dụng để phân biệt giữa loài vi khuẩn này với loài vi khuẩn
khác vi vây thành phần các môi trường này ngoài chất dinh dưỡng ra còn có các hoá chất
đặc biệt để phát hiện khả năng chuyển hoá của loại vi khuẩn cần định danh.
3..Các bước pha chế môi trường.
3.1 Pha chế từ các hóa chất riêng lẻ
Chuẩn bị dụng cụ và hóa chất:
Phải có các dụng cụ pha chế bằng men sứ hoặc thủy tinh.Thường dung bình
nón thủy tinh có dung tích gấp đôi thể tích môi trường đủ để lắc kĩ.Không pha quá 1
đến 2 lít môi trường cho mỗi bình.Các dụng cụ phải được rửa thật sạch không lẫn các
chất khác:
Hóa chất dung pha chế phải tinh khiết,khô,không vốn cục,không đổi màu.
Cân đong:
Phải cân đúng chính xác,đặc biệt các hóa chất gây ức chế cho vi khuẩn(muối
mật,selenit,v.v.v.) thì phải dung cân có độ chính xác tới milligram.
Để tránh bỏ sót hoặc cân nhiều lần,mỗi khi cân xong thứ nào thì để riêng thứ
đó sang một bên.
Hòa tan
Phải dung nước cất hoặc nước khử khoáng để pha chế.Tùy theo tính chất của
hóa chất mà có thể hòa tan nóng hoặc lạnh.Môi trường không có thạch gelatin chỉ cần
hòa tan trong nước lạnh hoặc nóng để đảm bảo môi trường được pha chế trong điều
kiện êm dịu,nên nhớ rằng mọi môi trường đều dễ hỏng nếu đun quá sự cần thiết.
Nếu môi trường có thạch gelatin thì phải đun nóng để hòa tan hoàn toàn,khi
không còn các tiểu phần thạch dính trên thành bình.
Điều chỉnh PH của môi trường.
Mỗi loại vi khuẩn chỉ phát triển được ở một độ PH nhất định,vì vậy làm môi
trường nhất thiết phải Điều chỉnh PH thích hợp.
Việc Điều chỉnh PH của môi trường được tiến hành ở 45-50 độ C để PH cuối
cùng của môi trường sau khi hấp và để nguội không bị thay đổi nhiều.
Hóa chất dùng để thay đổi PH là Natri Hydroxit ( NaOH) 10-20% và axit
Clohidric 10-12%.Chỉ thị màu là phenol hoặc Bromphenol.
Cách pha chỉ thị màu xem phần kĩ thuật pha chế.
2
-
Làm sáng trong môi trường.
Môi trường phải được làm sáng trong để quan sát tốt sự phát triển của vi
khuẩn.
Các phương pháp làm trong thông thường là:
Đối với môi trường lỏng: lọc qua vải mịn hoặc giấy lọc.
Đối với môi trường thịt: muốn môi trường trong suốt không lờ đục thì phải
dùng Natri hydroxit điều chỉnh pH = 7,8- 8 và hấp 120 độ C trong 30 phút, để lắng cặn
rồi hấp 120 độ C trong 30 phút, để lắng cặn rồi lọc qua 2 lần giấy lọc.
Phương pháp làm sáng mầu là: một số môi trường có màu sẫm như môi
trường casein thủy ngân, canh thang, có thể ding than hoạt để loại màu. tùy theo môi
trường sẫm màu nhiều hay ít mà có thể dùng từ 5 đến 10g than hoạt tính cho 1 lít môi
trường; đun sôi 10 phút rồi lọc qua giấy lọc hoặc vải dày.
Đóng ống môi trường:
Tùy theo yêu cầu sử dụng mà có thể đóng môi trường vào ống 12, 16 hoặc
18mm hoặc bình cầu.
Dụng cụ đơn giản để đóng môi trường có thể là phễu có vòi cao su hoặc bình
lắng gạn có van đóng mở. Các dụng cụ đóng môi trường phải sạch và vô trùng. Khi
đóng chú ý không để môi trường dính vào miệng ống, lọ.
Khử trùng môi trường
- Phải khử trùng ngay sau khi đóng vào ống hoặc vào bình, vì nếu để lâu nhiệt độ
thích hợp các tạp trùng sẽ phát triển làm ảnh hưởng đến chất lượng môi trường.
- Các môi trường có ure, hyposulfite dễ bị phân hủy bởi nhiệt độ cao phải khử trùng
bằng cách lọc qua Seitz hoặc hấp cách thủy ở nhiệt độ 60-70 độ C.
- Các môi trường có trứng hoặc huyết thanh thì khử trùng ở nhiệt độ 70-80 độ C
- Các môi trường thông thường khác thường khử trùng ở 110độC trong 30 phút hoặc
121độ C trong 15 phút. Nếu bình môi trường trên 1 lít thì khử trùng 121độ C trong 20
phút.
- Sau khi khử trùng và áp suet lò giảm xuống không thì chuyển môi trường ra lò ,
không nên để môi trường hâm nóng lâu trong lò, càng không nên để môi trường qua đêm
trong lò, vì như vậy môi trường sẽ bị sẫm màu và kém chất lượng.
- ở huyện, xã nếu không có lò hấp môi trường có thể đun sôi cách thủy 100độ C
trong 30 phút lion 3 ngày, các nha bào sẽ bị phá hủy ở tỷ lệ khá cao
Đổ đĩa môi trường:
- Một số môi trường cần đổ đĩa thì sau khi hấp khử trùng, để nguội 45- 50độ C rồi
đổ lên đĩa khi môi trường nóng trên 50 độ C để tránh hơi nước đọng lại trên mặt nắp hộp
lồng.
- Trước khi rót môi trường ra đĩa, phải quay tròn bình môi trường để trộn đều.
- Các bọt khí trên bề mặt môi trường được phá bằng cách dùng một ngọn đèn ga lia
nhẹ trên mặt bọt khí hoặc dùng dầu piopet đã đốt nóng, châm vào bọt khí.
3
- Nếu bề mặt môi trường ướt thì phải làm khô trong tủ ấm ở nhiệt độ 30-40 độ C
trong 20-30 phút trước khi cấy.
Kiểm tra vô trùng:
Môi trường được để vào tủ ấm qua đêm để kiểm tra vô trùng (3 – 5% số lượng đĩa sản
xuất).
Chuẩn bị dụng cụ, hóa
chất
Cân đong
Hoà tan
Điều chỉnh pH
Làm trong sáng môi
trường
Đóng ống môi
trường
Khử trùng môi trường
Đổ đĩa
Kiểm tra vô trùng
Các bước pha chế môi trường từ các chất riêng lẻ
3.2. Pha chế bột từ môi trường khô
Hiện nay nhiều phòng xét nghiệm vi sinh được cung cấp các loại môi trường chế sẵn
dưới dạng bột khô. Các môi trường này được làm từ các nguyện liệu, hóa chất tinh khiết
nên chất lượng môi trường được đảm bảo và ổn định hơn và việc cân đong pha chế cũng
đơn giản tiện lợi hơn. Tuy nhiên việc pha chế các môi trường từ bột khô cũng phải làm
theo các bước trên và cần chú ý một số điểm sau:
- Phải dùng nước mới cất hoặc nước khoáng trung tính để pha chế.
- Nếu môi trường còn mới và pha với nước trung tính thì không phải điều chỉnh lại
PH, nhưng nếu môi trường cũ, cần kiểm tra và điều chỉnh PH quy định trên lọ môi trường.
3.3. Các hiện tượng và nguyên nhân gây sai hỏng môi trường.
4
Có nhiều hiện tường và nguyên nhân gây sai hong môi trường, chúng ta cần biết để
tìm cách khắc phục. Dưới đây là 1 số hiện tượng và nguyên nhân chính:
3.3.1.Môi trường quá cứng là do
- Thạch không thích hợp hoặc cân đong không chính xác, làm tăng lượng thạch quá
quy định
3.3.2. Môi trường có độ cứng quá thấp là do
- Thạch không thích hợp hoặc lượng thạch quá ít
- Thạch chưa được tan hoàn toàn
3.3.3.Vi khuẩn phát triển kém là do:
- Có các chất úc chế trong bình chứa, trong mẫu thử
- Vi khuẩn trong mẫu thử bị phá hủy trước khi cấy
- Liều lượng các thành phần cơ bản trong môi trường không đúng
3.3.4. Vi khuẩn phát triển quá mạnh là do
- môi trường sấy, hấp quá nhiệt đọ quy định ,làm hỏng các chất ức chế tạp khuẩn
- cấy vào quá nhiều chất thử
3.3.5.Khuẩn lạc bị nhòe là do
- bề mặt môi trường quá ẩm ướt
- cấy vào môi trường quá nhiều chất thử
- hấp môi trường quá nhiệt độ quy định, làm hỏng chất ức chế
3.4.Bảo quản môi trường
3.4.1. đối với các môi trường khô
- bảo quản ở nôi khô, tránh ánh sang, nhiệt độ từ 10 đến 12 độ c.
- Lọ môi trường phải luôn luôn được đậy chặt sau khi dùng vì nếu bị hở môi
trương hấp thụ nước sẽ làm thay đổi độ PH và bị vón cục.
Trong điều kiện lý tưởng( khô mát tối) lọ môi trường có thể được nhất 5 năm,
kể từ khi sản xuất.
3.4.2. đối với môi trường đã pha chế
- Bảo quàn trong túi băng chất dẻo nhiệt độ 4-10°C các ống môi trường có Thể đẻ
được từ 1-2 tháng.
- Nếu ở nhiệt độ phòng chỉ được 1-2 tuần.
Tài liệu thâm khảo :
1. Kỹ thuật cơ bản và đảm bảo chất lượng trong xét nghiệm vi sinh y học – NXB Y Học2008.
2. Các kỹ thuật xét nghiệm vi sinh – Viện vệ sinh dịch tễ trung ương.
5
2. KỸ THUẬT PHA CHẾ MÔI TRƯỜNG
2.1. Môi trường nuôi cấy vi khuẩn
2.1.1. các môi trường cơ bản
+ môi trường cấy vi khuẩn ưa khí
nước thịt ½
Thịt bò hoặc trâu 500g
Nước cất 1000ml
- Thịt bò hoặc trâu loại tốt, lọc sạch gân, mở, xay hoặc băm nhỏ, lấy 500g ngâm vào
l000ml nước đựng trong nồi nhôm hoặc men để trong tủ lạnh qua một đêm (nếu trời lạnh
có thể để bên ngoài).
-Sáng hôm sau lấy ra đun từ từ cho tới sôi, vớt hết bọt và khuấy đều. Duy trì độ sôi âm ỉ
trong 1 giờ vứi lửa nhỏ, thỉnh thoảng khuấy đều.
- lọc qua giấy lọc để loại mỡ
- them nước cất vào cho đủ 1000ml
Có thể dùng ngay, nếu muốn để dành thì đóng chai hấp khử trùng 110độ c trong 30 phút
Để giảm thể tích có thể làm nước thịt 1/1( 1 kg thịt với 1 l nước) khi dùng sẽ pha đôi 1
phần nước thịt, 1 phần nước cất
Nước thịt tốt phải có từ 500 – 600 mg axitamin trong 1 lít
Nước thịt là môi trường cơ sở đẻ pha chế canh thang thường, thạch thường v.v...
canh thang thường
Pha chế từ nước thịt bò
- nước thịt bò 1000ml
- peptone bột 10g
- muối tinh khiết (NACL) 5g
- đun nóng khuấy đều cho tan hết muối và peptone
- điều chỉnh ph 7,8 – 8 bằng dung dịch NAOH
- hấp 120 độ c trong 30 phút và để nguội cho lắng cặn
- chắt lấy phần nước trong, điều chỉnh PH 7,4 – 7,6
- đun sôi lại rồi lọc qua giấy lọc cho trong
- đóng ống 16mm, mỗi ống 5mm. hấp khử trùng 110độ c trong 30 phút.
Pha chế từ cao thịt bò:
- cao thịt bò 5g
- peptone bột 10g
- muối tinh khiết 5g
- nước cất 1000ml
- đun nóng, khuấy đều cho tan hết các chất
- điều chỉnh ph 7,4-7,6 rồi lọc trong
- đóng ống 16mm, mỗi ống 5ml, hấp khử trùng 110độc trong 30phut.
Canh thanh thường dùng để cấy các loại vị khuẩn ưa khí nói chung, thường dùng để kiểm
tra vô khuẩn.
6
Thạch thường
Pha chế từ nước thịt bò:
- nước thịt bò 1000ml
- peptone bột 10g
- muối tinh khiết 5g
- thạch sợi 20g
ph=7- 7,2
- đun nóng nước thịt, peptone, muối cho tan
- điều chỉnh ph từ 7,8-8 bằng dung dich NAOH 20%
- cho thạch đã rửa sạch, cắt nhỏ vào
- hấp 120độ c trong 30 phút
- kiểm tra lại ph xem đã đạt yêu cầu chưa 7,4-7,6
- lọc qua bong gạc khi môi trường còn nóng rồi phân phối vào bình cầu 250ml
hoặc vào ống nghiệm mỗi ống từ 5-6ml
- hấp 110độ c trong 30 phút, các ống nghiệm phải để nằm nghiêng cho thật đông
Pha chế từ cao thịt bò
- Cao thịt bò
5g
- Pepton bột
lOg
- Muôi tinh khiết (NaCỈ)
5g
- Thạch bộl
18-20g
- Nước cất
1000 ml
Đun sôi cho tới khi các hóa chất tan hoàn toàn. Chú ý khuấy để thạch không bị khô cháy
(có the làm tan thạch trong nồi hấp 100°c trong 10 phút)
Đicu chỉnh pH 7,4 - 7,6
đóng ống nghiộm mỗi ống 5,6 ml hoặc binh cầu 250 ml
Hấp khử trùng 110°c trong 30 phút, đem ra để ống môi trường nằm nghiêng cho thạch
dông.
Môi trường làm từ cao thịt thì tinh khiết hơn nước thịt tươi nên không phải qua giai đoạn
hẩp lắng cặn 120°c trong 30 phút.
Thạch thường là môi trường cơ sở để chế ra nhiều loại môi trường khác.
canh thang glucoza 1%
Canh thang thường1000 ml
Glucoza
10g
Hòa tan glucoza trong canh thang, điều chinh pH = 7,6.Đóng ống môi ông 5-6 ml. Hấp
110°c trong 30 phút
Môi trường dùng nuôi cấy vi khuần ưa glucoza
thạch mềm giữ chủng
7
- Pepton
10g
- Muối tinh khiết
5g
* Cao thịt
3g
- Cao mcn
6g
- Thạch
6g
đun sôi khuấy đều hòa tan hoàn toàn các chất. Điều chinh pH = 7,6. Đóng ông 12 mm, mỗỉ
ổng 3-4 ml. Hấp 110°c trong 30 phút.
2.1.Môi trường cấy vi khuẩn kị khí.
2.1.1.Canh thang V.F. (Thịt-Gan, Viandc Foỉc) :
Thịt bò xay
Gan bò xay
Pcpsin hiệu giá 5o0
Axít clohydric nguyên chất
Nước cất nóng 600C
Cho tất cà vào nồi men, để tủ ấm 48-50°C trong 18 giờ, cứ 2 giờ khuấy một lần, sau đó
đem đun sôi từ từ lên 80°c trong 20 phút để hủy mcn pepsin. Diều chỉnh pH = 7,4, lọc và
hấp 120°c trong 30 phút.
Cứ một lít môi trường trên thêm vào 2g glucoza, lọc trong, đóng vào ống co, mỏi ống cho
1 bi thủy linh. Hấp 110°c trong 15 phút.
Chú ý : Nếu không có pcpsin, thì có the thay lOg pcpsin hằng 2000g dạ dày lợn băm nhỏ.
Trước khi dùng nên đun sôi cách thủy ống môi trường đê làm mất không khí có thể
sinh ra trong môi trường trong quá trình bào quản.
2.1.2.- M ôi trường thịt băm :
Canh (thang V.F (ph = 7,4)
12 ml
Thịt băm đã nấu chín
0,5g.
Đóng vào ống nghiệm, hấp 110°c trong 30 phút Thịt băm có khả năng khử oxy trong môi
trường.
Cách làm thịt băm :
Thịt bò đã ép hết nước, cho vào chai rộng miệng, đậy nút bông gạc, hấp 120°c trong 30
phút. Bảo quản ở 4°c. Trước khi dùng phải luộc bã thịt trong nước cất, ép hết nước thừa và
cho vào mỗi ống môi trường độ 0,5g.
Môi trường gan cục:
Canh thang V.F (pH = 7,4) 12ml
Gan bò luộc chín thái nhỏ hạt lựu
0,5g Đóng vào ống nghiệm. Hấp 110°c trong
30 phút
8
Gan bò cỏ khả năng khử oxy trong môi trường.
2.1.3.Thạch Veillon (Vây-ông) :
Thạch thường
1 lít
Glucoza
15 g
Kalinitrat 0,5 g
. Đun sôi thạch, cho glucoza và kali nitrat vào. Lắc đều rồi lọc
phân phối vào mỗi ống 15ml (nếu ống có đường kính nhỏ 8mm thì cho vào 7 ml).
. Hấp 110°c trong 20 phút. Để ống thẳng đứng cho thạch đông
không để nghiêng. Trước khi dùng phải tái sinh bằng cách đun sôi cách thủy 10 phút.
+ Môi trường dùng nuôi cấy chung cho vi khuần ưa khí và ki khí.
2.1.4. Môi trưòng thiognicolat:
- Pcpton bột
15g
- Cao mcn
5g
- Glucoza
5g
- L-cystin
' 0,5g
- Muối tinh khiết (NaCl)
*• 2,5g
- Natri thioglycolat
0,5g
- Thạch
0,5g
- Rcsa/urin
0,001 g
- Nước cất
1 lít
. đun nóng để hòa lan các chất, trừ glucoza, thiognicolat và rcsazurin. Riêng L-cyslin hòa
lan trong ít nước cất có pha thêm 5 - 6ml dung dịch natri hydroxyt 10% rồi đồ vào hỗn hợp
trên.
. Kiềm hóa pH = 8 - 8,2 bằng natri hiydroxyt
. Đun sôi 5 - 1 0 phút, khuấy đều cho tan hết thạch rồi bù nước vào cho đủ thể tích ban
đầu; thêm glucoza, thioglycolat,
. Lọc qua 2 lăn giấy lọc hoặc qua vải
. Điều chỉnh ph = 7,2 - 7,3, thêm rcsa/urin
đóng ống lOml.hấp khử trùng 110°c trong 30 phút
Hiệnn nay tại nhiều phòng thí nghỉệm lớn trên thế giới môi trường thioglycolat được dùng
đẻ thử vô trùng các chế phẩm sinh vật học và dược phẩm để tìm các vi khuần ưa khí và kị
khí.
Chú ý:
Môi trường không đề quá 7 ngày ở nhiệt độ phòng
9
-
Nếu là môi trường mới pha thì không phải đun lại
Trước khi dùng, nếuu môi trường đã để 2 - 3 ngày thì phải đun lại.
Môi trường không được dùng nếuu nó đã trở nên hồng và mầu hồng không mất di khi đun
sôi.
b/ CÁC MÔI TRƯỜNG PHÂN LẬP :
+ Môi trường phân lập vi khuẩn ưa khí.
7- Môi trường phân lập tụ cầu :
Môi trường Chapman (Sápman)
Thạch thường
1 lít
Muối tinh khiết
(NaCl)
65 g :
Dường manìt
10 g
Đỏ phcnol DD
1% 3 - 5 ml
. đun sôi thạch, điều chỉnh pH = 7,0 - 7,2, cho muối đường manit và dung dịch đỏ phcnol
vào.
. đóng vào ống nghiệm như đóng ống thạch thường. Hấp 110°c trong 30 phút. Ống môi
trường có màu đỏ da cam.
Tụ cầu gây bệnh có khả năng sử dụng đường manil làm cho môi trường bỉ axit hóa do đó
màu môi trưởng chuyển sang vàng.
Cách pha dung dịch đỏ phenol:
-Đỏ phenol .
•
lg
-Nước cất 100 ml
Hòa tan đỏ phcnol trong nước căt nóng 70°c, lọc qua giấy lọc, đựng lọ nút kín.
2« môi trường phân lập liên cầu và phế cầu:
Thạch máu:
Thạch thường
150 ml
Máu thỏ hoặc cừu 15 ml
Đun cho thạch tan chảy ra, để nguội 50°c, thêm máu đá loại tơ huyết và vô khuẩn vào bình
thạch. Quay tròn bình cho máu hòa tan đều trong thạc. Màu thạch đỏ tươi là tốt. Nếu màu
ngả đen là máu đã quá chín. Đóng ngay vào ống nghiệm l8mm bằng pipete vô khuần, mỗi
ống 10 ml.
Thạch máu có Gentainyxin :
Cách làm như thạch máu nhưng có thêm gêntamyxin 5 mcg trong 1 ml môi trường.
3- Môi trường phân lộp não mô cầu và lậu cầu :
Canh thang máu.
Một ống canh thang thường + 15-20 giọt máu thỏ hoặc cừu vô khuẩn.
Thạch máu Sôcôla (Chocolate) :
Làm như thạch máu rồi đun cách thủy 80°c trong 10 phút. Chú ý lắc tròn bình thạch luôn
để nguội 45 - 50°c đồ đĩa.
4Môi trường phân lập Pasteurella tularensis :
10
Môi trường trứng.
Dung đjch Natri clorua 9%
40 ml
Lồng đỏ trứng'
60 ml
Cho vào một bình nón vô khuằn lắc kĩ, đóng ổng 10 ml đề nghiêng hấp 75°c trong 1 giờ.
Thạch natri sunlfit
Thạch thường pH = 7,4 100 mỉ
Dung dịch natri sulíit 10%
0,25 ml
Dung dịch tím gcnlian 1 %o
2 - 4 ml
' Máu cừu hoặc huyết thanh
2 ml
Cho các dung dịch hóa chất vào bình thạch đun cho tan hết để nguội 45 – 50 0 c, cho thêm
máu cừu hoặc huyết thanh lắc đều tránh nổi bọt, đổ ra đĩa hoặc đóng vào ống nghiệm.
Chú ý : lượng tím gentian không cho quá qui định trên vì sẽ ức chế các loại vỉ khuẩn, kề cả
vi khuẩn dich hạch không mọc được.
Môi trường phân ìập Brucella:
Thạch Tryptosc (Tryptô):
- Tryptosc
20g
- Glucoza
lg
- Natrỉ Clorua
5g
- Thiamỉn Clorhyđrat
0,005g
- Thạch
15g
- Nước cất vừa đủ
1 lít
Đun cho tan thạch rồi cho các hóa chất vào, điều chỉnh pH = 7,2 - 7,4. Hấp 110°c trong 30
phút.
6-Môi trường phân lập Hacmophilus:
Thạch máu Socola có bacitraxin.
Làm như thạch máu socola có thêm bacitraxỉn 300 mcg trong 1 ml môi trường.
7- Môi trường phân lập vi khuẩn đường ruột:
Các vi khuẩn đường ruột lẩy từ các bệnh phẩm trước khi đưa vào phân lập cần cấy truyền
qua một số môi trường vận chuyển bảo quản và môi trường tăng sinh.
+ Môi trường vận chuyền và bảo quản.
Môi trrờng Cary - Bỉair:
Natri thioglycolat
Dinalri Pholíat (Na2HPƠ4)
Nalri Clorua
Thạch
Dung dịch Canxi Clorua (CaCb) 1%
Nước cốt vừa dủ
11
pH = 8-8,2
. Đun sôi cách thủy cho tan hết các chất và môi trường trở nên trong (không đun sôi trực
tiếp). Đề nguội 50°c thêm 9ml dung dịch Canxi Clorua 1% mới pha trong nước.
. Điểu chỉnh pH = 8,4 với Natri Hydroxyt 10%. Đóng ống 16 mm, mỗi ống 8 ml. Khử
trừng trong lò hấp 100°c hoặc đun sôi cách thủy trong 15 phút.
Môi trường Cary - Blair được dùng đểbảo quản và vận chuyển các vi khuẩn Salmonclla,
Shigclỉa, E.Coli, Vibrio.
Dung dịch đệm Glyxerin.
Glyxerin trung tính
1000 ml
Nước muối sinh lí 8,5%0
2000 ml
Điều chỉnh pH = 8 với dinatriphotíat (Na2HPƠ4). Hấp khử trùng 110°c trong 30 phút.
Dung dịch đệm glyxcrin dùng đề vận chuyển Salmonclla, Shigclla, E.Coli. Không dùng
cho Vibrio và Campylobacter.
+ Môi trường tăng sinh :
Môi trường Mueller - KauỊf mann.
. Chuẩn bị các dung dịch.
Dung dịch I: Canh thang thường
90 ml
Canxi cacbonat
5g
Cho canxi cacbonal vào bình cầu có canh thang. Hấp 110°c trong 30 phút
Dung dịch II: Natri hyposunif 50g
Nước cất 100 ml
Hòa tan, lọc qua nến lọc, dựng vào lọ vô trùng. Nếu không có nến lọc thì khử trùng trong
lò hấp 100°c trong 30 phút.
- Dung dịch III: Iot
25 g
Kaliuni Iodua
20 g
Nước cất 100 rnl
Trộn đều iot và kali iodua trong cối sứ, cho dẫn nước vào khuấy đều cho tan hết, đựng
trong lọ màu có nút thủy tinh dùng dần.
Dung dịch IV: Xanh brilỉan (Vert Briỉỉiant) Nước cất
Cho Xanh brilỉan vào cối, nghiền nhỏ, đồ dần nước cất vào khuấy cho tan
0,1 g 100 ml hết.
. Pha môi trường hoàn chinh.
Trong bình cầu đựng dung dịch I, dùng ống hút lấy lOml dung dịch II, 2 ml dung dịch III,
1 ml dung dịch IV, lắc đều, đề lắng cặn 24 giờ, sau đó đóng vào ống nghiệm, mỗi ống 5
ml.
Môi trường này có tác dụng hạn chế phần lớn các tạp khuằn và thích hợp cho Salmonella
phát triền. Từ môi trường này sẽ cấy truyền qua các môi trường đặc như ss, Endo để có
khuần lạc riêng biệt. Muốn tìm Shigella thì cấy thẳng vào các môi trường đặc nói trên,
không cần qua môi trường Mueller KauíTmann.
12
+ Môi trường Tetrathionat:
Dung dịch cơ bản :
I Pepton
5g
Muối mật 1 g
Canxicacbonat
10 g
Natrihyposuníìt 30 g
Nước cất
Đun nhỏ để hòa tan, điều chỉnh pH - 7,2 - 7,4. Hấp 100°c trong 30 phút. Trước khi dùng
cho 2 ml dung dịch iot dưới đây vào 100 ml dung dịch cơ bản.
Dung dịch iot:
-Iot
6g
- Kali iodua
5g
- Nước cất
20ml
Môi trường tctrathionat dùng để làm phong phú Salmonclla Nước peplon kỉềmt mặn :
Pcpton
10g
Natri Clorua
15g
Glyxerỉn
1,25g
Nước cất
1000ml
Hòa tan các chất, điều chỉnh pH = 9 - 9,2 với dung dịch nalri hydroxyt 40%. Đóng Ống,
hấp 110°c trong 30 phút. Nước pcptone kiềm mặn dùng để làm phong phú ỉbrỉo.
Môi trường Seỉcnil.
Pcpton
5g
Lactoza
4g
Photíat bipotasic (K2HPO4) 10g
Natrỉ sclcnỉt
4g
L-cyslin
0.01g
Nước cất
1000ml
Hòa (tan các chất trong nước cẩt, lọc qua nến lọc. Đóng vào ống nghiệm vô khuẩn, mỗi
ống 10 ml.
Môi trường này có khả năng tìm thấy Salmonclla nhiều hơn là môi trường Mucllcr
Kauíímann.
+ môi trương phân lập:
Thạch Bitmut sun/ lí (Wilson Blaỉr):
- Cao thịt
5g
- Pepton
10 g
- Glucoza
5g
13
- Natri photíal disodic (Na2HPƠ4)
4g
• Fcrơ suníat
03 g
- Bỉlmut suníit
8g
- Xanh brilian (dang dịch 0,5% trong nước)
5 ml
* Thạch
20g
- Nước cất
1000 ml
Cho tất cả các chất vào nước, đun sôi và khuấy liên tục tới khi các chất hòa tan hoàn loàn,
điều chỉnh pH 7,4 - 7,6 chất kết tủa được tạo thành mà không hòa tan, để nguội 45 - 50°c,
trộn đều và đồ đĩa. Môi trường này dùng dề phát hiện vi khuẩn nhóm Salmonella.
Môi trường Dezaxicolat Xiírat Lactoza (DCL Agar):
Pcpton
5g
Cao thịt
5g
Lactoza
10 s
Nalri Xitrat 8,5 g
Nalrỉ hyposuníit 8.5g
Feric Xilrat 1 8
Natrỉ dczoxycolat 5 g
Đỏ trung tính dung dịch 1%
2,5 ml
Thạch20 g
Nước cất 1000 ml
- Cho peplon, cao thịt, thạch vào nước đun tan hoàn toàn, rồi thêm lactoza, nalri Xỉtrat,
Fcric Xitrat, dczoxycolat.
. Điều chỉnh pH = 7,3 - 7,5 rồi thêm đỏ trung tính vào.
. Đóng bình cầu 200 ml. Hấp 110°c trong 15 phút đề nguội 80°c rồi thêm một cách vô khuẩn
10 ml dung dịch Natri hyposunttl 17% (17g Na hyposuníit pha trong 100 ml nước cất).
Trộn đều đồ đĩa.
Môi trường này dùng đc phân lập Samonella và Shigclỉa.
Môi trường En do :
Pepton
10 g
K2HPO4 3,5 g
Natri suníìt 2,5 g
Lactoza
10 g
Thạch
20 g
Dung dịch Fuchsỉn 10% trong cồn 90° 4 ml
14
. Đun sôi hòa tan các chất . Điều chinh pH = 7,6. Đóng bình cầu mỗi bình 100 ml. Hấp
110°c trong 20 phút. Đề nguội 45 - 50°c rồi đồ ra hộp lồng. Môi trường có màu hồng nhạt.
Môi trường Endo dừng để phân lập E.Coli. Trên môi trường này E.Coli có khuẩn lạc màu
đỏ với một nước bóng kim loại.
Môi trường McConkey (MăcConkây) :
*
■
- Pepton
20g
- Lactoza
10 g
- Muối mật
1,5 g
- Natrỉ Clorua
5g
- Thạch
20g
- Dung dịch đỏ trung tính 1%
0,6 mỉ
- Nước cất
1000 ml
. Đun nhỏ lửa, khuẩy đều để hòa tan các chất
. Điều chinh pH = 7,2 - 7,4 rồi cho đỏ trung tính và tím tinh thề vào.
. Phân phối vào bình cầu, hấp 110°c Irong 30 phút. Đc nguội 45 - 50°c rồi ra hộp lồng.
Môi trường này dùng để phân lập Samonclla, Shlgell;
1
Môi trường ss (Salmonclla - Shigcỉla Algar) :
E.Coli.
- Cao thịt
5g
- Pcpton • 'V
5g
- Lacto/a
10g 1
- Muối mật
8,5 g 1
- Natri Xỉtrat
8,5 g
- Natri hyposuníỉt
8,5 g
15
-SátXitrat
1g
- Xanh brilian (dung dịch 0,1% trong nước)
0,3 ml •
• Đỏ trung tính (dung dịch 1% trong nước)
2,5 ml
-
Nước cất 1000 ml
. đun sôi nhỏ lửa, khuẩy đều để hòa tan các chất.
. Điều chỉnh pH = 7 - 7,2. Để nguội 45 - 50°c rồi đổ ra hộp lồng. Không hấp.
Môi trường này dùng để phân lập Salmonclla và Shỉgclla.
Môi trường TCBS (Thiosulíate - Citratc Bile Saks) :
- Pcpton
10 g
- Cao men
5g
- Natri Xitrat
10 g
- Nalri ihiosuníat
. 10g
- Mật bò khô
5g
- Natri cholatc
3g
- Feric Xitrat
ig
- Natri Clorua
10 g
- Sacaroza
20g
- Xanh bromothymol (dung dịch 0,2%)
20 ml
- Xanh ihymol (dung dịch 1%)
4 ml
- Thạch
15 g
- Nước cất vừa đủ
1 lít.
Đun sôi khuấy đều tới khi tan hoàn toàn các chất. Không hấp. Để nguội 45-50°c, điều
chỉnh pH = 8,6 rồi đồ ra hộp.
Môi trường này dùng đè phân lập Vibrio cholerae có khuẩn lạc mầu vàng.
Pha dung dịch xanh bromthymol 0,2%:
Cho 2,5 ml dung dịch NaOH 0,1N vào 47,5 ml nước cất rồi thêm 0,lg xanh bromolhymol.
Pha dung dịch xanh thymoy 1%:
Cho 2,2 ml dung dịch NaOH 0,1N vào 7,8 ml nước cấl rồi thêm 0,lg xanh thymoy
- Pcpton
10g
16
- Natrỉ Clorua
5g
- Cao thịt
4g
- Thạch
20g
- Nước cất
1 lít
Đun sôi khuấy đều để hòa tan hoàn toàn các chất. Điều chỉnh pH = 8,4, đóng vào bình câu,
hấp 110°c trong 30 phút. Đề nguội 45-50°C rồi dồ ra hộp tông.
Môi trường này dùng để phân lập Vibrio cholerae. Trên môi trường này khuẩn lạc của V.
cholerac trong suốt. Còn các vi khuẩn đường ruột khác thì cỏ khuẩn lạc đục và lớn hơn.
Mói trường xanh brillian
- Cao thịt
3g
- Pcpton
10g
- Natri clorua
5g
- Lactoza
lOg
- Sacaroza
lOg
- Đỏ phenol (dung dịch 0,2%)
40 ml
•Xanh brilian (dungdịch 0,5%)
2,5 ml
- Thạch
20g
- Nước cất
960 ml
Cho tất cả các thành phần vào nước, đun sôi và khuấy liên tục tới khi các chất hòa tan hoàn
toàn. Đề nguội 50-60°C, điều chỉnh pH = 7-7,2, đóng bình cầu hấp 110°c trong 30 phuts, đc
nguội 45-50°C rồi đổ ra hộp pctric.
Môi trường xanh briliar dùng để phân lập Salmonclla. Trênn môi trường này Salmonclla có
khuẩn lạc mầu hồng nhạt mờ, đường kính 1-3 mm.
8- Môi trường phân lập trực khuẩn bạch hầu:
Môi trường huyết thanh đông (Lô’eff icr) :
Huyết thanh bò300 ml
Canh thang glucoza 1% 100 ml
Pha canh thang glucoza 1%, lọc trong, hấp 110°c trong 30 phút.
Hỗn hợp canh thang và huyết thanh theo công thức, lọc qua phễu có gạc đã hấp khử trùng.
Đóng ống 18 mm, tránh không có bọt trong ống, xếp nghiêng vào lò hấp, ngày đầu 75°c
trong 1 giờ, ngày hôm sau 75°c trong 30 phút.
17
Kiểm tra vô trùng ở 37°c trong 24 giờ.
Bảo quàn ở tủ lạnh.
Chú ý: Nhiệt độ nóng quá môi trường sẽ bị sủi bọt.
Môi trường Schroer (Xkrô-e) :
Thạch thường pH — 7,5-7,6
Dung dịch cơ bản
Máu cừu đã loại tơ huyết
Dung dịch kali tcnlurit 5%
Dung dịch cơ bản gồm có:
Canh thang thường
100ml
Pepton bột
18g
Natri axetat
0,62g
Glyxcrin
4ml
Hấp 110°c trong 30 phút.
Cách làm môi trường:
Đun sôi thạch cho tan đều, cho dung dịch cơ bản vào khi nhiệt độ xuống 45°c cho dung
dịch Kali tenlurit và máu cừu vào lắc thật đều, đổ ra hộp lồng. Tất cả các công tác pha chế
môi trường đều thực hiện trong đicu kiện vô khuẩn. Sau đó để tủ ấm 37°c trong 24 giờ để
kiểm tra vô khuẩn rồi đề tủ lạnh dùng dần.
Dung dịch kali tenlurit pha với nước cất vô khuẩn, pha xong không cần khử khuẩn, bảo
quản ở tủ lạnh.
Môi trường phân lập trực khuân lao:
Môi trường Lơvcnxlen (Lổwenstein):
* Dung dịch cơ bản
150 ml
- Bột khoai tây hấp
6g
- Dung dịch xanh malachit 2%
12 ml
-Trứng gà
9-10 quả
Dung dịc cơ bản gõm có:
- Asparagin
4
- Kali hydrophoơa! (KII2PO4)
1g
- Manhcgi sunfat
1g
- Natri Xitral
1g
- Glyxcerin
10 ml
g
18
- Nước cất
1 lít
Đun nhỏ lửa và khuấy đều cho tới khi tan hết các hóa chất. Điều chỉnh pH = 7,2 (nếu pH
cao thì hạ bằng axit xilric, nếu thấp thì cho ammoniac). Lọc qua giấy lọc cho thật trong.
Phân phối vào bình cầu mỗi bình 150 ml. hấp 110°c trong 30 phút.
Cách làm môi trường :
Trứng gà tươi, soi qua đèn soi trứng để kiểm tra nếu quả nào đốm đen thì loại ra.
Dùng bàn chải xà phòng cọ thật sạch, để ráo nước rồi ngầm trong cồn 90° trong 30 phút.
Lấy một ống có 6g bột khoai tây đã hấp khừ trùng 110°C/30 phút, đổ vào bình cầu
có 150 ml dung dịch cơ bản lắc đều rồi dun sôi cách thủy cho tới khi bột được hòa tan
dung dịch trờ nên sền sệt thì lấy ra.
Vớt trứng ra, đập từng quả vào trong cốc thủy tinh đã sấy, đánh tan đều rồi đổ vào
bình cầu có dung dịch cơ bản và bột khoai tây. Thêm xanh malachil dã hẫp rồi lác đều. Lọc
qua vải gạc đã khử khuẩn rồi đỏng vào ống nghiệm l8mm, mỗi ống 6-7 ml, tránh có bọt
trong ống. Để nằm nghiêng trong lò hấp cho nhiệt độ lên 85°c trong 45 phút. Để tủ ấm
37°c trong 24 giờ. Kiểm tra vô khuẩn, để tủ lạnh dùng đần.
+ Môi trường phân lập vi khuẩn kị khí.
/- Môi trường Wilson Blair
Môi trường chọn lọc của Beercns để phân lập Risiclla.
Thạch V.F glucoza800 ml
Mật bò lọc 200 ml
Natri azit 0,lg
Điều chỉnh pH = 7,4, phân phối vào ống nghiệm 18mm mỗi ống 6-7 ml. Hấp 110°c trong
30 phút.
Môi trường natri azit và lục ánh :
Để phân lập vi khuẩn loài Sphacrotilus, Vcillonella và Fusobacterium.
Cứ mỗi ống thạch đũa V.F glucoza đã đun chảy, cho thêm 0,5 ml dung dịch Natri azit và
lục ánh.
Cách pha:
Nalri azit 0,10g
Lục ánh
8 mg
Nước cất 100 ml.
C/MÔI TRƯƠNG PHÂN BIỆT HAY XÁC ĐỊNH:
Môi trường phân biệt là loại môi trường dùng để nghiên cứu những đặc tính sinh vật hóa
học để xác định các loại vi khuẩn gây bệnh.
Một số môi trường dược dùng hiện nay là :
1 - Môi trường Kligler ( K I A ) :
I
Cao thịt
3g
Cao men
3g
19
-
Pepton
2()g
Natri Clorua 5g
Lactoza
lOg
Fcric Xitrat 0,5g
Glucoza
lg
Natri thiosunfat 0 5g
Đỏ phenol dung dịch 0,5%
6 ml
Thạch 2g
-Nước cất 1 lít.
. Cho thạch vào nước, đun sôi khuấy liên tục cho tới khi tan hoàn toàn (hoặc hấp 100°C),
lần lượt thêm các hóa chất vào để hòa tan.
. Điều chỉnh pH = 7,4, rồi thêm 6 ml dung dịch đỏ phenol 0,5%, khuấy đều, phân phối vào
ống nghiệm 12 mm mỗi ống đóng 3 ml, hấp 110°c trong 30 phút, rồi để ống môi trường
nằm nghiêng, sao cho mặt nghiêng dài khoảng 2 cm. Môi trường dùng để tìm tính phân
giải đường lactoza, glucoza, tìm khí hydro sunfua và sinh hơi.
2- Môi trường Ure Indol:
- L-Tryptophan
3g
- Photfat monopotasic
lg
- Photfat dipotasic
1g
- Nalri Clorua
5g
- ure
20g
- Dung dịch đỏ phenol trong cồn
2 ml
- Nước cất
1 lít
Cách pha dung dịch đỏ phenol:
hòa lan 0,25g đỏ phenol trong 50 ml cồn 90° c và thêm 50 ml nước cất.
Cách pha môi trường:
đun nóng 50-60°C để hòa tan các hóa chất, điều chỉnh
ph
=
7,2, thêm dung dịch
dỏ phenol, lọc qua Seitz rồi đóng vào ống nghiệm vô khuẩn mỗi ống 1-2 ml
.Có thể khử khuẩn ở lò hấp : 75°c trong 1 giờ,
hôm sau : 65°c trong 30 phút
Môi trường dùng đề tìm tính phân giải ure và tìm indol. Sau khi cấy 24 gỉờ nếu mầu đỏ da
cam trở thành đỏ cánh sen là dương tính, nếu vẫn đỏ da cam như cũ là âm tính, ngay sau đó
20
nhỏ 2 giọt thuốc thừ côvắc vào nếu có ỉndol thì sẽ thấy vòng đỏ tươi xuất hiện. Nếu không
cố ỉndol thì vòng không có màu xuất hiện.
3'Môi trường mannit di dộng:
Phepton 20g
Kali natri 1g
Manittol
10g
Dung dịch dỏ phenol 1%trong nước 4ml
Thạch 4g
Nước cất 1lit
. đun sôi khuấy đều để hòa tan hoàn toàn các hóa chất. Điều chỉnh pH = 7,6. Thêm dung
dịch đỏ phenol, đóng vào ống 12mm, mỗi ống 3 ml, Hấp 1l0°c trong 3 phút.
. Môi trường này dùng để tìm tính di dộng và tính phân giải đường mannit. Nếu đường
mannit bị phân giải thì môi trường bị axit hóa do đó màu môi trường sẽ chuyển từ đỏ sang
vàng.
4. Môi trường Ornithin Decacboxylaza (ODC)
Acginin dehydrolaza (ADH) và môi trường lysine decacboxylaza (LDC):
ODC
ADH
LDC
L- lysine monoclohydray
5g
L- ocnithin
5g
l- acginin
5g
cao men
3g
3g
3g
glucoza
1g
1g
1g
bromocresol( 1,6g/100ml cồn 95°)
1ml
1ml
1ml
Đun nóng nhẹ để hòa tan các hóa chất. Điều chỉnh pH = 6,5. Thêm chỉ thị bromocresol,
môi trường có màu đỏ ánh tím. Lọc trong, đóng vào ống 12mm mỗi ống 1-2 ml. Hấp 1 10°c
trong 15 phút.
Những môi trường này dùng để tìm tính khử cacboxyl và khử hydro. Nếu phản ứng dương
tính thì môi trường bi kiềm hóa và chuyển sang màu tím.
- Nalri Clorua
.5g
- Manhesi sunfat
0,2g
- Amoni photfat (NH4)2HPƠ4
1g
- Dipotasic photfat (K2HPO4)
1g
- Natri Xitrat
2g
- Thạch
20g
- Nước cất vừa đủ
1 tít
21
- Xanh bromolhymọl (dung dịch.10 ml.
1,5% trong cồn 90°)
Đun sôi nhỏ lửa, khuấy đều tới khi các hóa chất tan hoàn toàn. Điều chỉnh pH = 7,2. Thêm
dung dịch xanh bromothymol. Môi trường có màu xanh lá cây. Đóng ống12mm mỗi ống 3
ml. Hấp 110°c trong 30 phút. Đem ra để nghiêng cho môi trường đông lại.
Môi trường này dùng để tìm các vi khuẩn chuyển hóa Xitrat. Nếu phản ứng dương tính thì
môi trường sẽ chuyển sang màu xanh nước biển.
6/ Môi trường Basikow:
Cao thịt
5g
Pcpton
10g
Natri Clorua 5g
Xanh bromothymol (dung dịch
1,5% rong cồn)
1,5 mỉ.
. Đun nóng, khuấy đều để hòa tan hóa chất . Điều chỉnh pH = 7,2
. Thêm xanh bromothymol, môi trường có màu xanh lá cây.
.Lọc, đóng ông 12mm, mỗi ống 3 ml cố 1 ống hơi. Hấp 110°c trong 30 phút
Môi trường Basikow dùng để thử tính lên men đường và sinh hơi. Khi dùng thì thêm 0,2
ml dung dịch đường, để 37°c trong 24 giờ. Nếu phảm ứng dương tính thì môi trưởng
chuyển sang màu vàng. Phải theo dõi trong 2 tuần hiện tượng mới dứt khoát đối với vi
khuẩn lên men chậm.
Nồng độ các dung dịch đuờng cần pha để dùng với môi trường Baslkovv.
Đường Mannil: 20%
Đường
Lactoza
:
20%
Glucoza: 20%
- Mannoza: 20%
Makoza: 30%
- Ramnoza: 10%
Sacarôza: 30%
- Arabinoza: 30%
7- Môi trường Clark-Lubs.
Pepton
5g
Bipotasic pholíat (K2HPO4) 5g
Glucoza
5g
Nước cất
1 lít
đun sôi để hòa tan các hóa chất, điều chỉnh pH = 7,5 lọc trong. Đóng ống 12mm, mỗi ống 3
ml, hấp 110°c trong 30 phút.
Môi trường Clark-Lubs dùng để tìm phản ứng đỏ melhyl và phản ứng axctyỉ melhyl
cacbinol (AMC).
Cách tìm phản ứng đỏ metliyl.
Cấy vi khuẩn vào môi trường Clark-Lubs, để tủ ấm 37°c trong 4 ngày, nhỏ
2-3 giọt dung dịch đỏ methyl 0,5% trong cồn 60°, nếu dương tính sẽ có màu đỏ, âm tính có
màu vàng nhạt hoặc không màu.
22
Cách tìm phản ứng Axetyl Meihyl Cacbinol (A MC)
Cấy vi khuẩn vào môi trường Clark-Lubs, đề tủ ấm 37°c trong 24 giờ, thêm 5 giọt dung
dịch NaOH 16% trong nước, lắc nhẹ. Nếu dương tính sẻ có màu đỏ, nếu âm tính sẽ có màu
vàng nhạt.
B- MỒI TRƯỜNG DÙNG TRONG CÔNG TÁC KIỀM TRA NƯỚC, THỰC PHẦM
Canh thang lactoza loãng
Cao thịt
5g
. - Pepton 10g
Natri Clorua 5g
Latza 5g
-Nước cất 1 lít
đun sôi hòa tan các hóa chất. Điều chỉnh pH = 7,2. Lọc trong, phân phối, vào ống nghiệm,
mỗi ống 10 ml, có ống Dơ- Ham. Hấp 110°c trong 30 phút.
2/Canh thang Lactoza đặc.
Cao thịt
5g
Pepton
10g
Natri Clorua 5g
lactoza.
lOg
Nước cất . 1 lít
Pha chế như canh thang loãng.
Canh thang zactoza - mật bò loãng:
- Cao thịt
5g
- Pcpton
10g
- Natri Clorua
5g
- Loctoza
10g
- Mật bò khô
1.5g
- Nước cất
1 lít
- Xanh brilian (dung dịch 1% trong0,2 ml.
cồn)
đun sôi hòa tan các chất. điều chỉnh pH = 7,4. Thêm dung dịch xanh brilian. Lọc trong,
đóng ống 16mm, mỗi ống 5-6 ml có ống Đơ-han. Hấp 110 c trong 20 phút.
4- Canh thang lactoza mật bò đặc:
- Cao thịt
5g
23
- Pepton
10g
- Natri Clorua
5g
- Giucoza
20g
- Mật bò khô
3g
- Xanh briỉian (dung dịch 1%
Irong côn)
0,4 m!
- Nước cất
1 lít.
Pha chế như canh thang loãng nhưng đóng ống 18 mm mỗi ống 10 ml có ống Dơ-ham. Hấp
110°c trong 20 phút.
5/Môi trường Uyn-xơn-Dle (wilson Blair)
(xct nghiệm nước uổng tìm CL. Welchi) :
Thạch thường
1 lít
Glucoza
20g
Đun thạch và glucoza cho tan đều, đóng ống to 20 ml mỗi ống. Hấp 110 c trong 30 phút.
6/Thạch Bilniut sunf it của Wiỉson Blair.
C- MÔI TRƯỜNG NƯỒI CẤY NẤM MỐC.
I/Môi trường Saboiiraud 2% (Saburô) :
Pepton
10g
Glucoza
20g
Thạch20g
Nước cất 1 lít.
đun sôi, khuấy đều cho tới khi tan hoàn toàn các hóa chất. Điều chỉnh pH = 6. Đóng ống
16mm, mỗi ống 5-6 ml. Hấp 110°c trong 30 phút. Đem ra để nghiêng cho môi trường đông
lại.
2- Môi trường giữ giống :
Pcpton
30g
Thạch
20g
Nước cất
1 lít
Làm như môi trường sabouraud.
CÁCH PIIA DUNG DỊCH CHỈ THỊ MÀU ĐO PHI MÔI TRƯỜNG
Dung dịch mẹ: Đỏ phenol 0,4%:
Đỏ phenol
0,1g
NaOH N/20
5,7ml
Nước cất vừa đủ 25ml
Nghiền đỏ phenol với NaOH, thêm nước cất.
24
Đo pH từ 6,8 - 8,4
Khi đo pH phải pha loãng 10 lần dung dịch mẹ và đựng chai thủy tinh trung tính. Thỉnh
thoảng màu dung dịch pha loãng ngà vàng thì nhúng NaOH N/20 ở đầu ống hút Pasteur rồi
cho vào lọ chi thị, màu đỏ sẽ lại có.
5Dung dịch mẹ xanh Bromothymol 0,4%:
Xanh Bromothymoỉ
0,1g
NaOH N/20
3,2ml
Nước cất vừa đủ
25ml
Đề đo pH từ 6-7,6. Khi đo pH cũng pha loãng 10 lần dung dịch mẹ này.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1
- Kĩ thuật xét nghiệm vi sinh vật và kí sinh trùng
NXBYhọc, 1972.
2
- Một số phương pháp nghiên cúu vi sinhvật.
NXB Khoa học kĩ thuật, 1972
3
-Handbook Culture Media, Merk, 1983.
4
-Manual for laboratory Investỉgations of Acute Kntcric Inĩections, 1983.
25
Tài liệu liên quan
Tận dụng bã men bia để chế biến men chiết xuất dùng làm thành phần bổ sung vào môi trường nuôi cấy vi sinh
Tận dụng bã men bia chế biến b=men chiết xuất dùng làm thành phần bổ sung vào môi trường nuôi cấy vi sinh
NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG đẠM THỦY PHÂN TỪ TRÙN QUẾ (Perionyx excavatus) đỂ NUÔI CẤY VI SINH VẬT
Tài liệu Thiết bị nuôi cấy vi sinh vật trên môi trường dinh dưỡng rắn_chương 9 doc
Tài liệu Chương 3: Những nguyên tắc cơ bản của nuôi cấy vi sinh vật công nghiệp docx
Tài liệu Những nguyên tắc cơ bản của nuôi cấy vi sinh vật công nghiệp_chương 3 pdf
báo cáo thực tập nghề nghiệp :kỹ thuật nuôi cấy vi sinh vật trong phòng thí nghiệm
chuẩn bị môi trường nuôi cấy vi sinh
Tối ưu hóa môi trường nuôi cấy vi khuẩn LACTOBACILLUS ACIDOPHILUS để sản xuất chế phẩm PROBITICS
THIẾT BỊ NUÔI CẤY VI SINH VẬT TRÊN MÔI TRƯỜNG DINH DƯỠNG RẮN
Tài liệu bạn tìm kiếm đã sẵn sàng tải về
(305.5 KB) - Pha chế môi trường nuôi cấy vi sinh vật
Tải bản đầy đủ ngay
×


text:
...loại rủi ro pháp lý, nắm cơ hội làm giàu...
VĂN BẢN GỐC
Điều 87 Nghị định 34/2016/NĐ-CP
X
Từ khoá: Số Hiệu, Tiêu đề hoặc Nội dung ngắn gọn của Văn Bản...
Thành Viên
BỘ THƯƠNG MẠI********
CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAMĐộc lập - Tự do - Hạnh phúc********
Số: 1352 TM/XNKV/v: xuất khẩu gạo sang Philippines
Hà Nội, ngày 07 tháng 8 năm 2002
Kính gửi: Tổng Công ty Lương thực miền Nam
Trả lời về việc số 980/TCT/KINH DOANH ngày 5/8/2002 của Tổng công ty Lương thực miền Nam về hợp đồng xuất khẩu 150.000 tấn gạo cho Philippines. Bộ Thương mại có ý kiến như sau:
- Hợp đồng xuất khẩu 150.000 tấn gạo loại 25% tấn cho Philippines với giá FOB thực thu 172,5 USD/MT của Tổng công ty Lương thực miền Nam (ký ngày 25/7/2002 với Tổng công ty Thương mại Quốc tế Philippines - PTTC) là hợp đồng thuộc thị trường tập trung của Chính phủ.
Tổng Công ty Lương thực miền Nam và các doanh nghiệp tham gia thực hiện hợp đồng xuất khẩu nói trên tự chịu trách nhiệm về hiệu quả kinh doanh. Những chi phí khác ngoài giá thực thu nêu trên theo yêu cầu của khách hàng Tổng công ty làm việc cụ thể với Bộ Tài chính để được hướng dẫn thực hiện.
KT. BỘ TRƯỞNG BỘ THƯƠNG MẠITHỨ TRƯỞNGMai Văn Dâu
Bạn Chưa Đăng Nhập Thành Viên!
Vì chưa Đăng Nhập nên Bạn chỉ xem được Thuộc tính của văn bản.
Bạn chưa xem được Hiệu lực của Văn bản,
Văn bản liên quan, Văn bản thay thế, Văn bản gốc, Văn
bản tiếng Anh,...
Nếu chưa là Thành Viên, mời Bạn Đăng ký Thành viên
tại đây
Tải Văn bản tiếng Việt
Bạn Đang Đăng Nhập Thành Viên Free!
Vì Đăng Nhập Thành Viên Free nên Bạn chỉ xem được
Thuộc tính và Nội dung của văn bản.
Bạn chưa xem được Nội dung toàn văn, Hiệu lực của Văn bản, Văn bản liên quan, Văn bản thay thế,
Văn bản gốc, Văn bản tiếng Anh,...
Nếu muốn làm Thành Viên Basic / Pro, mời Bạn Chuyển
Đổi loại Thành Viên
tại đây.
Bạn Đang Đăng Nhập Thành Viên Basic!
Vì Đăng Nhập Thành Viên Basic nên Bạn chỉ xem
được Thuộc tính, Nội dung của văn bản, Nội dung toàn
văn, Hiệu lực của Văn bản, Văn bản
liên quan, Văn bản thay thế,
Văn bản gốc.
Bạn chưa xem được Văn bản tiếng Anh, ...
Nếu muốn làm Thành Viên Pro, mời Bạn Chuyển Đổi
loại Thành Viên
tại đây.
Chú thích:
Rà chuột vào nội dụng văn bản để sử dụng.
<Nội dung> = Nội dung thay
thế tương ứng;
<Nội dung> =
Không có nội dung thay thế tương ứng;
<Nội dung> = Không có
nội dung bị thay thế tương ứng;
<Nội dung> = Nội dung được sửa đổi, bổ
sung.
Click trái để xem cụ thể từng nội dung cần so sánh
và cố định bảng so sánh.
Click phải để xem những nội dung sửa đổi, bổ sung.
Double click để xem tất cả nội dung không có thay
thế tương ứng.
Tắt so sánh [X] để
trở về trạng thái rà chuột ban đầu.
Họ & Tên:
Email:
Điện thoại:
Nội dung:
Tên truy cập:
Mật khẩu cũ:
Mật khẩu mới:
E-mail:
Email người nhận:
Tiêu đề Email:
Nội dung:
Email nhận thông báo:

Set-Cookie: Culture=vi; domain=thuvienphapluat.vn; expires=Fri, 18-Jan-2019 14:09:16 GMT; path=/

X-Frame-Options: SAMEORIGIN


text:
Loading...
Nghệ An
Tìm bạn trai, tìm bạn gái, tìm bạn đồng tính: gay, les, tìm bạn tình, kết bạn bốn phương tại Nghệ An
Trang 1 của 5 trang
Tùy chọn hiển thị chủ đề
Đang tải...
Trang 1 của 5 trang
Tìm bạn trai, tìm bạn gái, tìm bạn đồng tính: gay, les, tìm bạn tình, kết bạn bốn phương tại Nghệ An

markdown:
Loading...
# Nghệ An
Tìm bạn trai, tìm bạn gái, tìm bạn đồng tính: gay, les, tìm bạn tình, kết bạn bốn phương tại Nghệ An
Trang 1 của 5 trang
[Tùy chọn hiển thị chủ đề](#)
Đang tải...
Trang 1 của 5 trang
Tìm bạn trai, tìm bạn gái, tìm bạn đồng tính: gay, les, tìm bạn tình, kết bạn bốn phương tại Nghệ An

Set-Cookie: xf_session=713beed8e033a5e435f3e71fabe94b65; path=/; secure; httponly

Cache-control: private, max-age=0