text:
Tải bản đầy đủ
Luận Văn - Báo Cáo
Tiến sĩ
Tạo dòng chịu hạn và phân lập gen cystatin liên quan đến tính chịu hạn ở cây lạc (arachis hypogaea l )
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN
VŨ THỊ THU THỦY
TẠO DÒNG CHỊU HẠN BẰNG CÔNG NGHỆ TẾ BÀO VÀ
PHÂN LẬP GEN CYSTATIN LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH
CHỊU HẠN Ở CÂY LẠC (Arachis hypogaea L.)
LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC
Thái Nguyên - 2011
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN
VŨ THỊ THU THỦY
TẠO DÒNG CHỊU HẠN BẰNG CÔNG NGHỆ TẾ BÀO VÀ
PHÂN LẬP GEN CYSTATIN LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH
CHỊU HẠN Ở CÂY LẠC (Arachis hypogaea L.)
LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC
Chuyên ngành: DI TRUYỀN HỌC
Mã số: 62 42 70 01
Hướng dẫn khoa học: 1. PGS.TS. CHU HOÀNG MẬU
2. PGS. TS. NGUYỄN THỊ TÂM
Thái Nguyên - 2011
LỜI CAM ĐOAN
Tôi xin cam đoan bản luận án là công trình nghiên cứu của tôi dưới sự
hướng dẫn của PGS.TS. Chu Hoàng Mậu và PGS.TS. Nguyễn Thị Tâm, sự
giúp đỡ của các cán bộ Khoa Sinh – Trường Đại học Sư phạm, Khoa Khoa
học Sự sống- Trường Đại học Khoa học, Đại học Thái Nguyên. Các số liệu
nêu trong luận án là trung thực. Một số kết quả đã được công bố riêng hoặc
đồng tác giả, phần còn lại chưa được ai công bố trong bất kỳ các công trình
nào khác.
Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm về những số liệu trong luận án này.
Tác giả
Vũ Thị Thu Thủy
i
LỜI CẢM ƠN
Trước hết, tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS. Chu
Hoàng Mậu và PGS.TS. Nguyễn Thị Tâm, những người thầy đã nhiệt tình
hướng dẫn tôi trong nghiên cứu khoa học, đã hết lòng giúp đỡ tôi cả về vật
chất và tinh thần trong suốt thời gian tôi làm nghiên cứu sinh để tôi hoàn
thành bản luận án này.
Tôi xin chân thành cảm ơn Ban chủ nhiệm Khoa Sinh-KTNN, Ban
giám hiệu Trường Đại học Sư Phạm – Đại học Thái Nguyên và các bạn đồng
nghiệp đã ủng hộ, tạo mọi điều kiện thuận lợi giúp tôi hoàn thành luận án.
Tôi xin chân thành cảm ơn TS. Nguyễn Vũ Thanh Thanh, Trường Đại
học Khoa học, Đại học Thái Nguyên; TS. Lê Văn Sơn và phòng Công nghệ tế
bào thực vật- Viện Công nghệ Sinh học.
Xin cảm ơn Viện Khoa học Sự sống thuộc Đại học Thái Nguyên, Ban
Giám đốc Trung tâm chiếu xạ Quốc Gia (Từ Liêm-Hà Nội) và gia đình bà
Ngô Thị Thường, tổ Rừng Vầu, phường Quang Vinh, thành phố Thái Nguyên
đã tạo điều kiện để tôi hoàn thành luận án.
Lời cảm ơn sau cùng xin dành cho gia đình và những người thân đã
luôn động viên, giúp đỡ, tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong suốt quá
trình làm nghiên cứu sinh.
Tác giả luận án
Vũ Thị Thu Thủy
ii
MỤC LỤC
Trang
Lời cam đoan
i
Lời cảm ơn
ii
Mục lục
iii
Danh mục các ký hiệu, chữ viết tắt
vi
Danh mục bảng
viii
Danh mục hình
x
MỞ ĐẦU . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1
Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4
Cây lạc và đặc tính chịu hạn của cây lạc . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4
1.1.1. Nguồn gốc và đặc điểm nông sinh học của cây lạc . . . . . . . . . . . . .
4
1.1.2. Đặc tính chịu hạn của thực vật và của cây lạc . . . . . . . . . . . . . . . . .
8
1.1.
1.2.
Nghiên cứu nâng cao khả năng chịu hạn của cây trồng bằng công
nghệ tế bào thực vật . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
15
1.2.1. Chọn dòng tế bào soma trong chọn giống cây trồng . . . . . . . . . . . .
16
1.2.2. Phát sinh biến dị trong quá trình nuôi cấy. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
19
1.2.3. Các phương pháp chọn dòng tế bào . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
20
1.2.4. Một số thành tựu trong chọn dòng chống chịu yếu tố bất lợi của
ngoại cảnh . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3.
21
Phân tích, đánh giá các dòng chọn lọc có nguồn gốc từ nuôi cấy
mô sẹo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
23
1.3.1. Đánh giá khả năng chịu mất nước của mô, tế bào thực vật . . . . . . .
23
1.3.2. Đánh giá khả năng chịu hạn ở giai đoạn hạt nảy mầm và giai đoạn
cây non. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1.3.3. Kỹ thuật RAPD trong đánh giá hệ gen của các dòng chọn lọc . . . .
iii
24
26
Gen liên quan đến tính chịu hạn ở cây lạc . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
28
1.4.1. Các gen liên quan đến khả năng chịu hạn của cây lạc . . . . . . . . . . .
28
1.4.
1.4.2. Nhóm gen mã hóa protein điều khiển hoạt động phiên mã của các
gen chịu hạn . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
29
1. 5.
Cystatin và vai trò của cystatin ở thực vật . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
30
1.5.1
Đặc điểm cấu tạo và phân loại cystatin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
30
1.5.2. Cấu trúc không gian và cơ chế ức chế của cystatin . . . . . . . . . . . . .
33
1.5.3. Chức năng của cystatin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
37
1.5.4. Gen mã hóa cystatin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
38
Chương 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . . . . . . . .
43
2.1.
Vật liệu thực vật . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
43
2.2.
Hoá chất và thiết bị . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
45
2.3.
Phương pháp nghiên cứu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
45
2.3.1. Phương pháp nuôi cấy in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
46
2.3.2. Phương pháp nghiên cứu đồng ruộng . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
49
2.3.3. Phương pháp sinh lý, hoá sinh . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
50
2.3.4. Phương pháp sinh học phân tử . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
52
2.3.5. Phương pháp phân tích số liệu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
55
Địa điểm nghiên cứu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
56
2.4.
Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN . . . . . . . . . . .
31.
57
Kết quả tạo dòng chịu hạn bằng kỹ thuật xử lý mô sẹo trong hệ
thống nuôi cấy in vitro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
57
3.1.1
Sàng lọc dòng mô sẹo chịu tác động của thổi khô . . . . . . . . . . . . . .
57
3.1.2
Ảnh hưởng của tia gamma kết hợp với thổi khô đến tỷ lệ sống sót
và tái sinh cây của giống lạc L18 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
66
3.1.3
Đặc điểm nông sinh học của các quần thể lạc R0 và RM0 . . . . . . . .
69
3.2.
Kết quả phân tích những dòng lạc chọn lọc qua các thế hệ . . . . . . .
74
iv
3.2.1. Đặc điểm nông sinh học các dòng lạc chọn lọc ở thế hệ thứ Nhất
và thứ Ba . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
74
3.2.2. Đánh giá các dòng chọn lọc ở thế hệ thứ Năm . . . . . . . . . . . . . . . . .
78
3.2.3. Đặc điểm của một số dòng lạc ưu việt . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
94
Phân lập và xác định trình tự gen cystatin từ cây lạc . . . . . . . . . . . .
97
3.3.1. Khuyếch đại gen cystatin từ DNA hệ gen của cây lạc . . . . . . . . . . .
97
3.3.
3.3.2. Kết quả tách dòng và xác định trình tự gen cystatin . . . . . . . . . . . . . 98
3.3.3. Kết quả so sánh trình tự gen và protein cystatin . . . . . . . . . . . . . . . . 102
KẾT LUẬN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
111
CÁC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN . . . . . . 113
TÀI LIỆU THAM KHẢO .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 114
PHỤ LỤC
v
DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT
ABA
: absicis acid
AhNCED
: Arachis hypogaea 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase
AhSP
: Arachis hypogaea serine proteinase
BAP
: 6 Benzyl amino purin
bp
: base pair
CC
: Corn Cystatin
CHP
: cây hồi phục
CKH
: cây không héo
CTAB
: Cetyltrimethylammonium bromide
CYS
: cystatin
DNA
: Deoxyribose nucleic acid
đtg
: đồng tác giả
EDTA
: Ethylene diamine tetraacetic acid
HSP
: heat shock protein
HvCPI
: Hodeum vulgare cysteine proteinase inhibitor
IPTG
: Isopropyl β-D-1 thiogalactopyranoside
kb
: kilo base
kDa
: kilo dalton
KLK
: khối lượng khô
krad
: kilorad
LB
: Luria- Bertani
LEA
: late embryogenesis abudant
LTPs
: lipid transfer proteins
MS
: Murashige- Skoog
mRNA
: messenger Ribonucleic acid
vi
OC
: Oryza Cystatin
OD
: Optical Density
PCR
: Polymerase chain reaction
PEG
: Polyethylene glycol
PLDα
: Phospholipase Dα
RAPD
: Random amplified polymorphic DNA
SDS
: Sodium Dodesyl Sulphate
TAE
: Tris Acetate EDTA
TTC
: 2,3,5 Trichlo tetrazolium chlorit
VuC
: Vigna unguiculata cystatin
X-gal
: 5- Bromo- 4 Cloro- 3 indolyl D galactopyranoside
WC
: Wheat cystatin
2,4-D
: 2.4 Dichlorphenoxyacetic acid
α- NAA
: α- Naphthaleneacetic acid
vii
DANH MỤC BẢNG
Trang
Bảng 1.1.
Diện tích, năng suất và sản lượng lạc của Việt Nam giai
đoạn 2005-2009 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Bảng 1.2.
5
Gen cystatin liên quan với khả năng chống chịu hạn ở
một số loài thực vật . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
41
Bảng 2.1.
Một số đặc điểm của 10 giống lạc nghiên cứu . . . . . . . .
43
Bảng 3.1.
Tỷ lệ tạo mô sẹo và khối lượng mô sẹo của 10 giống lạc
58
Bảng 3.2.
Độ mất nước của mô sẹo sau xử lý bằng kỹ thuật thổi khô
59
Bảng 3.3.
Kết quả kiểm tra khả năng chịu mất nước của mô sẹo 10
giống lạc bằng phương pháp nhuộm TTC . . . . . . . . . . . .
Bảng 3.4.
61
Tỷ lệ sống sót của mô sẹo bị xử lý bằng thổi khô sau 4
tuần nuôi phục hồi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
63
Bảng 3.5.
Tỷ lệ tái sinh cây của mô sẹo sống sót sau 6 tuần . . . . . .
65
Bảng 3.6.
Ảnh hưởng của chiếu xạ kết hợp với thổi khô 9 giờ đến
tỷ lệ sống sót và tái sinh cây của mô sẹo ở giống lạc L18
Bảng 3.7.
Đặc điểm nông học của quần thể R0, RM0 tái sinh từ mô
sẹo mất nước . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Bảng 3.8.
66
70
Đặc điểm nông sinh học các dòng lạc chọn lọc ở thế hệ
thứ Nhất . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
75
Bảng 3.9.
Đặc điểm nông học các dòng lạc chọn lọc thế hệ thứ Ba
77
Bảng 3.10.
Đặc điểm nông sinh học và chất lượng hạt các dòng
chọn lọc ở thế hệ thứ Năm . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Bảng 3.11.
Tương quan giữa hoạt độ của α-amylase và hàm lượng
đường ở giai đoạn hạt nảy mầm . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Bảng 3.12.
79
84
Tỷ lệ cây sống, cây phục hồi và chỉ số chịu hạn tương
đối của các dòng chọn lọc ở thế hệ thứ Năm . . . . . . . . . .
viii
86
Bảng 3.13.
Số phân đoạn DNA nhân bản ngẫu nhiên và tỷ lệ phân
đoạn đa hình của 25 mồi trong phản ứng RAPD . . . . . . .
Bảng 3.14.
90
Tỷ lệ sai khác về hệ gen của các dòng chọn lọc và giống
gốc L18 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
91
Bảng 3.15.
Chỉ thị RAPD đặc trưng của các dòng lạc chọn lọc . . . .
93
Bảng 3.16.
Một số đặc điểm của 3 dòng chọn lọc và giống L18 . . . .
95
Bảng 3.17.
Sự sai khác về trình tự nucleotide trên gen cystatin của
giống và dòng lạc nghiên cứu . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Bảng 3.18.
Bảng 3.19.
103
Độ tương đồng và độ sai khác đoạn mã hoá một số trình
tự gen cystatin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
104
Thành phần amino acid của protein cystatin ở cây lạc . .
109
ix
DANH MỤC HÌNH
Trang
Hình 1.1.
Trình tự 102 amino acid của OCI . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
32
Hình 1.2.
Cấu trúc không gian ba chiều của cystatin thực vật . . . . . .
34
Hình 1.3.
Mô hình cấu trúc ức chế hoạt động của oryzacystatin . . . . .
36
Hình 2.1.
Mô hình thí nghiệm tổng quát . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
46
Hình 3.1.
Độ mất nước của mô sẹo các giống lạc . . . . . . . . . . . . . . .
60
Hình 3.2.
Dung dịch nhuộm TTC của mô sẹo giống lạc L18 ở các
ngưỡng xử lý thổi khô . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Hình 3.3.
62
Một số hình ảnh cây tái sinh của giống lạc L18 ở giai đoạn
6 tuần tuổi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
68
Hình 3.4.
Các dòng lạc chọn lọc trồng ở vụ xuân 2008 . . . . . . . . . . . .
70
Hình 3.5.
Hình ảnh trong chọn dòng chịu hạn ở lạc bằng kỹ thuật
nuôi cấy in vitro. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Hình 3.6.
Sự biến động về hoạt độ của α-amylase trong điều kiện
hạn sinh lý . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Hình 3.7
81
Sự biến động của hàm lượng đường trong điều kiện hạn
sinh lý . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Hình 3.8
72
83
Đồ thị hình rada biểu thị sự khác nhau về khả năng chịu
hạn của các dòng lạc chọn lọc, giống L18 và giống L23 . .
87
Hình 3.9.
Hình ảnh điện di sản phẩm RAPD với một số mồi . . . . . . ..
89
Hình 3.10.
Sơ đồ mô tả mối quan hệ của 7 dòng chọn lọc với giống
gốc L18 ở mức phân tử . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Hình 3.11.
Hình 3.12.
92
Hình ảnh quả và hạt của các dòng chọn lọc ở thế hệ thứ
Năm . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
96
Hình ảnh điện di sản phẩm nhân gen cystatin từ cây lạc . . .
97
x
Hình 3.13.
Hình ảnh điện di sản phẩm colony-PCR . . . . . . . . . . . . . . .
99
Hình 3.14.
Kết quả so sánh trình tự nucleotide gen cystatin của cây lạc
102
Hình 3.15.
Mối quan hệ di truyền của một số đoạn mã hoá gen
Hình 3.16.
cystatin thực vật . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
105
So sánh trình tự amino acid của 4 mẫu nghiên cứu . . . . . . .
107
xi
MỞ ĐẦU
1. Lý do chọn đề tài
Lạc (Arachis hypogaea L.) là cây thực phẩm, cây công nghiệp lấy dầu
trong nhóm cây trồng cạn. Mặc dù cây lạc đã có từ lâu đời nhưng vai trò của
cây lạc mới được công bố từ khoảng 100 năm trở lại đây. Trồng lạc mang lại
nguồn lợi có giá trị về kinh tế, về dinh dưỡng, đồng thời còn để cải tạo đất rất
tốt nhờ khả năng cộng sinh với vi khuẩn Rhizobium….. [3]. Trên thế giới, nhu
cầu sử dụng và tiêu thụ lạc ngày càng tăng, đó cũng là lý do khuyến khích
nhiều nước đầu tư phát triển sản xuất lạc với quy mô liên tục mở rộng [145].
Ở Việt Nam, sản xuất lạc được phân bố trên tất cả các vùng sinh thái
nông nghiệp, với khoảng 40% tổng diện tích gieo trồng các cây công nghiệp
ngắn ngày. Trong đó, 2/3 diện tích đất trồng lạc phụ thuộc vào nước trời. So
với nhiều cây trồng khác, cây lạc có nhu cầu đặc biệt về nước bởi rễ không có
lông hút và quả lạc được hình thành dưới đất. Sự biến đổi khí hậu làm cho
lượng mưa hàng năm phân bố không đều giữa các vùng miền và các thời điểm
trong năm. Trong khi đó, quá trình sinh trưởng và phát triển của cây lạc có
những giai đoạn rất mẫn cảm với độ ẩm, nếu những giai đoạn này thiếu nước
sẽ làm giảm năng suất, chất lượng của lạc. Chính vì vậy, việc đánh giá để có
biện pháp cải tạo giống lạc theo hướng nâng cao khả năng chịu hạn là rất cần
thiết.
Các phương pháp đã và đang được nghiên cứu ứng dụng để cải tạo, phát
huy tiềm năng của nhiều loại cây trồng như: lai giống, đột biến thực nghiệm,
công nghệ tế bào thực vật và chuyển gen …[30], [76], [131]. Hiệu quả việc
ứng dụng công nghệ tế bào thực vật để nâng cao tính chống chịu với các điều
kiện bất lợi của môi trường liên tục được khẳng định. Trong quá trình nuôi
cấy in vitro, do ảnh hưởng của môi trường, đặc biệt là chất kích thích sinh
trưởng, các tế bào có thể bị biến đổi vật chất di truyền. Larkin và Scowcroft
(1981) gọi những biến dị đó là “biến dị soma” hay “biến dị sinh dưỡng”. Nếu
1
kết hợp nuôi cấy mô tế bào với xử lý đột biến bằng các tác nhân vật lý hay
hoá học thì tần số đột biến có thể tăng thêm [85]. Điều này có ý nghĩa đặc biệt
quan trọng trong việc tạo ra nguồn vật liệu khởi đầu cho chọn giống [87]. Ở
Việt Nam, sự ra đời của 2 giống lúa DR1 và DR2 có khả năng chịu hạn và
chịu lạnh tốt là minh chứng đầu tiên cho những khả năng đó [1]. Đến nay,
nhiều dòng cây có nguồn gốc in vitro mang tính trạng mong muốn được tạo ra
từ quá trình xử lý và nuôi cấy mô sẹo đã được công bố [6], [34], [39], [130].
Khả năng chịu hạn của thực vật là tính trạng do nhiều gen quy định. Do
vậy, việc tìm kiếm và phân tích gen liên quan đến đặc tính chịu hạn được
nhiều nhà khoa học quan tâm nghiên cứu. Một số gen liên quan đến tính chịu
hạn của cây trồng đã được phân lập và công bố như: gen LEA [32]; gen DREB
[113]; gen P5CS [10]; gen NCED, AhPLD [104], [128]... Gen cystatin (CYS)
của thực vật được công bố đầu tiên trên cây lúa bởi Abe và đtg (1987) [40].
Đến nay, gen CYS được phân lập ở nhiều loài thực vật bậc cao, cây một lá
mầm và hai lá mầm [17], [92], [95]... Các nghiên cứu về gen cystatin đã bàn
luận nhiều tới mối liên quan của nó với khả năng chống chịu hạn, lạnh, mặn
[52], [57], [96], [125]...
Xuất phát từ nhu cầu thực tiễn của việc chọn tạo giống lạc theo hướng
nâng cao khả năng chịu hạn, chúng tôi đã tiến hành đề tài của luận án: “Tạo
dòng chịu hạn và phân lập gen cystatin liên quan đến tính chịu hạn ở cây
lạc (Arachis hypogaea L.)”.
2. Mục tiêu nghiên cứu
− Tạo được dòng lạc có khả năng chịu hạn cao hơn giống gốc bằng công
nghệ nuôi cấy mô tế bào thực vật.
− Xác định được sự khác biệt trong trình tự của gen cystatin giữa dòng lạc
chọn lọc có nguồn gốc từ mô sẹo và các giống lạc có khả năng chịu hạn
khác nhau.
3. Nội dung nghiên cứu
− Sàng lọc dòng mô sẹo chịu mất nước dưới tác động của thổi khô và tác
động của chiếu xạ tia gamma kết hợp với thổi khô.
2
− Phân tích sự biến động một số tính trạng số lượng, chất lượng hạt và khả năng
chịu hạn của các dòng chọn lọc.
− So sánh và xác định sự sai khác trong hệ gen của các dòng chọn lọc bằng
kỹ thuật RAPD.
− Khuếch đại, tách dòng, xác định trình tự gen cystatin từ một số dòng và
giống lạc chọn lọc.
4. Những đóng góp mới của luận án
i) Luận án xây dựng được quy trình chọn dòng lạc chịu hạn theo cách sử dụng kết
hợp các phương pháp nuôi cấy mô tế bào, gây đột biến bằng tia gamma và sử
dụng chỉ thị phân tử RAPD; tách dòng và so sánh sự khác biệt trình tự gen
cystatin liên quan đến tính chịu hạn. Quy trình này có thể rút ngắn thời gian cần
thiết và nâng cao hiệu quả cho công tác chọn giống lạc.
ii) Xử lý mô sẹo bởi tia gamma đã làm giảm chiều cao và tỷ lệ tái sinh cây,
biến đổi màu sắc và hình dạng lá. Phát hiện được 5 chỉ thị RAPD đặc trưng cho
hai dòng lạc chọn lọc RM47 và RM48: RM48/OPA07-750bp; RM48/OPA08500bp; RM48/OPB05-900bp; RM48/UPC348-200bp; RM47/OPH08-250bp.
Phát hiện gen cystatin của cây lạc thuộc nhóm I của phytocystatin, có sự tương
đồng cao nhất với cystatin của đậu xanh (81,3%), thấp nhất với cystatin của
quả kiwi (42,9%). Gen cystatin có 1 intron và 2 exon, mã hóa cho protein có 98
amino acid. Cystatin của dòng RM48 có nguồn gốc từ mô sẹo được xử lý bởi tia
gamma kết hợp với thổi khô đã có 7 vị trí amino acid sai khác so với giống gốc
L18. Sự thay thế amino acid của dòng RM48 bởi amino acid của giống gốc ở
các vị trí 29 (Glu →Asp), 30 (His→Thr), 31 (Asn→Thr), 32 (Lys →Arg), 33
(Lys →Asn), 34 (Glu →Arg), 36 (Gly →Ala).
iii) Xác định được sự khác biệt so với giống gốc L18 về khả năng chịu hạn
của ba dòng lạc RM48, RM47, R46 có nguồn gốc từ mô sẹo chịu mất nước
được xử lý bởi tia gamma (2krad) kết hợp với thổi khô liên tục 9 giờ trong hệ
thống nuôi cấy in vitro.
3
Chương 1
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. CÂY LẠC VÀ ĐẶC TÍNH CHỊU HẠN CỦA CÂY LẠC
1.1.1. Nguồn gốc và đặc điểm nông sinh học của cây lạc
Cùng với thời gian khám phá ra châu Mỹ, nhiều dẫn liệu đã chứng minh
cây lạc có nguồn gốc tự nhiên từ các nước thuộc vùng Nam Mỹ. Theo các nhà
nghiên cứu lịch sử tự nhiên, người Inca đã trồng lạc như một loại rau có tên là
“ynchis” dọc vùng duyên hải của Peru. Sau đó xuất hiện phổ biến ở châu Âu,
châu Phi, châu Á, quần đảo Thái Bình Dương và cuối cùng tới vùng Đông
Nam Hoa Kỳ. Tuy nhiên, sản xuất lạc rộng rãi thuộc các nước vùng nhiệt đới
và các vùng trên thế giới từ 400 vĩ độ Bắc đến 400 vĩ độ Nam [4].
Đầu tiên, trong nghiên cứu của Linnaeu (1753) đã công bố Arachis
hypogaea L. là tên một loài. Từ đó cho đến năm 1939 chỉ có chi lạc trồng
Arachis hypogaea L. được mô tả. Hiện tại, Arachis là một chi trong tông
Hedysareae của bộ đậu (Leguminosae). Chi Arachis có 22 loài, đều là loại
cây hàng năm sống trên môi trường cạn; có lá kèm và 3 đến 4 lá chét; hoa
dạng cánh bướm, màu vàng; có mô phân sinh đốt; quả hình thành dưới đất.
Cấu trúc thống nhất trong chi là “tia quả” phình to từ noãn, mỗi quả thắt
khoảng 1 đến 5 đốt, mỗi đốt chứa một hạt với 2 lá mầm và một phôi thẳng
[8].
Cây lạc có nguồn gốc từ Nam Mỹ và có mặt ở nước ta vào khoảng thế kỷ
XVII-XVIII. Theo Tổng cục thống kê năm 2009, với chiều dài hơn 3000 km,
trải dọc từ vị trí 80 27’ đến 230 23’ vĩ độ Bắc, cây lạc được trồng ở tất cả các
vùng sinh thái nông nghiệp của nước ta [145].
4
Mặc dù còn khó khăn, nhưng ở nhiều địa phương cây lạc vẫn được coi là
cây trồng chủ đạo. Năm 2008, FAO đã đánh giá Việt Nam là một trong 10
nước đứng đầu thế giới về sản xuất lạc, với tổng sản lượng đạt 490.000 tấn
[144], tuy nhiên sự phát triển cây lạc ở nước ta vẫn ở mức chưa tương xứng
với tiềm năng của nó [3]. Kết quả nghiên cứu trên bảng 1.1 cho thấy sự không
ổn định về các chỉ số phát triển của cây lạc (các chỉ số được tính so với năm
trước bằng 100%). Có nhiều nguyên nhân hạn chế sự phát triển của cây lạc,
trong đó có nguyên nhân do hạn hán [145].
Bảng 1.1. Diện tích, năng suất và sản lượng lạc của Việt Nam
giai đoạn 2005- 2009
Diện tích
Năm
x
Chỉ số
1000 ha
phát triển
Năng suất
tạ/ ha
Chỉ số
Sản lượng
x
Chỉ số
phát triển 1000 tấn phát triển
(%)
(%)
(%)
2005
169,6
102,2
18,1
102,0
489,3
104,3
2006
246,7
91,5
18,7
103,0
462,5
94,5
2007
254,5
103,2
20,0
107,0
510,0
110,3
2008
255,3
100,0
20,8
104,0
530,2
104,0
2009
249,2
97,6
21,1
101,0
525,1
99,0
Nguồn: Tổng cục thống kê (2009)[145]
Các giống lạc của Việt Nam được tuyển chọn từ nhiều nguồn khác nhau,
và chúng đều thuộc loại hình thực vật spanish, có tập tính sinh trưởng thành
cụm [3].
5
Sản xuất lạc ở miền Bắc thường tập trung vào hai vụ chính: vụ Xuân Hè
(gieo hạt khoảng từ trung tuần tháng 1 đến trung tuần tháng 2 dương lịch) và
vụ Thu Đông (gieo hạt khoảng từ trung tuần tháng 8 đến trung tuần tháng 9
dương lịch). Ở thời điểm đầu vụ và cuối vụ thường xảy ra hạn hán, do đó
tuyển chọn những giống lạc có thời gian sinh trưởng ngắn để khắc phục
những tác động xấu của hạn được nhiều nhà khoa học quan tâm nghiên cứu
[4], [8].
Cây lạc mọc từ hạt, sự phát triển của cây lạc chịu ảnh hưởng của nhiều
yếu tố sinh thái như nhiệt độ, độ ẩm…Ở điều kiện nhiệt độ từ 250C đến 300C,
độ ẩm 50-60% là môi trường rất thích hợp cho sự nảy mầm và phát triển cây
lạc [4].
Cây lạc trưởng thành gồm có một thân chính (n) mọc từ đốt cuối trụ trên
lá mầm, có độ cao từ 12cm đến 65cm, hai lá mầm đối xứng (n+1). Hệ rễ của
cây lạc gồm 1 rễ cọc và các rễ con. Bộ rễ cây lạc phát triển mạnh ở độ sâu từ
5cm đến 35cm, lan rộng khoảng 12- 14cm. Trên đất cát pha, bộ rễ có thể dài
90-130cm. Trên rễ cây lạc có thể có các nốt sần chứa các vi sinh vật thuộc
chủng Rhizobium làm nhiệm vụ cố định đạm. Vì vậy, việc trồng lạc vừa đem
lại nguồn kinh tế có giá trị vừa có tác dụng cải tạo đất [8].
Cây lạc bắt đầu có hoa khoảng từ 20 ngày đến 30 ngày sau khi nảy mầm.
Hoa lạc tự thụ phấn (thụ phấn chéo chỉ khoảng 1,0% - 3,9%). Hoa thường nở
vào thời điểm có ánh sáng, khi thời tiết lạnh, ẩm ướt hoa có thể nở muộn hơn.
Trước khi hoa nở 7- 8 giờ, bao phấn nứt ra, nhụy chỉ tiếp nhận hạt phấn trước
24 giờ và sau 12 giờ khi hoa nở. Khi thụ phấn được khoảng 6 giờ thì sự thụ
tinh diễn ra hoàn toàn và sau khi thụ tinh, noãn phát triển xuyên qua hoa để lộ
ra tia củ dài, tia củ phát triển đâm xuống đất 2cm mới phát triển thành quả.
Nếu sự phát triển của tia củ đã dài tới 15cm mà không tiếp xúc được với đất
6
sẽ héo ngay. Từ khi hoa lạc thụ tinh đến khi quả chín khoảng 60 ngày [4],
[8]...
Theo Ngô Thế Dân và đtg (2000), thời gian sinh trưởng của lạc có thể
xác định theo hai cách: (i) cách thứ nhất, tính thời gian sinh trưởng là khoảng
thời gian từ khi gieo hạt đến khi thu hoạch, (ii) hoặc cách tính thứ 2 là khoảng
thời gian từ khi hạt nảy mầm đến khi thu hoạch. Trong đó, cách thứ hai được
dùng nhiều hơn, vì khi gieo hạt nếu gặp điều kiện không thuận lợi như hạn
đầu vụ hay lạnh đầu vụ (điều kiện thường gặp ở miền Bắc), hạt lạc có thể nằm
trong đất từ 10 ngày đến 20 ngày mới nảy mầm. Đối với cây lạc, sinh trưởng
là một đặc điểm của kiểu gen mặc dù chịu ảnh hưởng rất lớn của mùa vụ và
môi trường [4]. Thực tế ở miền Bắc, không có giống lạc nào có thời gian sinh
trưởng ít hơn 120 ngày. Do đó, dựa vào thời gian sinh trưởng người ta chia
các giống lạc thành 3 nhóm: các giống sinh trưởng ngắn ngày (thời gian sinh
trưởng ít hơn 120 ngày), giống sinh trưởng trung bình (120 ngày- 140 ngày)
và các giống sinh trưởng dài ngày (có thời gian sinh trưởng trên 140 ngày).
Có ba giai đoạn phát triển của cây lạc được xác định rất mẫn cảm với độ
ẩm, đó là: (i) thời kỳ đầu của sinh trưởng dinh dưỡng; (ii) thời kỳ ra hoa và
đâm tia xuống đất; (iii) thời kỳ quả chín. Những ảnh hưởng rõ rệt của sự thiếu
nước đến cây lạc có thể dễ dàng quan sát như: thiếu nước làm giảm diện tích
lá, thiếu nước làm cho cây có ngọn nhỏ hơn, cành và hoa ít hơn... do đó ảnh
hưởng đến năng suất và chất lượng lạc [4], [111]... đó cũng là nguyên nhân
khiến cho các vùng trồng lạc nhờ nước trời chưa có những đầu tư thích đáng
vào cây lạc [4].
Kết quả nghiên cứu đánh giá khả năng chịu hạn của một số giống lạc
trong điều kiện có mái che với trồng lạc có sự tưới nước bổ sung giữ ẩm ổn
định trên đồng ruộng, cho thấy các yếu tố cấu thành năng suất (số quả chắc, tỷ
lệ nhân, năng suất quả khô) của nhóm bị hạn giảm so với nhóm được cung
7
cấp độ ẩm đầy đủ. Tuy nhiên, các đặc điểm hình thái (hệ sắc tố thân, màu sắc
lá, dạng hình sinh trưởng) không liên quan hoặc ít liên quan đến khả năng
chịu hạn của cây lạc [7], [14].
1.1.2. Đặc tính chịu hạn của thực vật và của cây lạc
1.1.2.1. Cơ sở sinh lý, hóa sinh và sinh học phân tử của tính chịu hạn
Khả năng của thực vật ngăn ngừa tổn thương khi bị ảnh hưởng các yếu
tố bất lợi đó là tính chống chịu (stress resistance) [1].
Trong tự nhiên, hạn hán là hiện tượng thường xuyên xảy ra và liên
quan trực tiếp đến vấn đề nước trong cây. Kramer (1983) cho rằng, những tác
động của môi trường xung quanh đủ để gây nên mất nước ở thực vật đó là hạn
[82]. Khi hạn là yếu tố bất lợi với thực vật sẽ gây ra các mức độ thiệt hại khác
nhau. Để chống lại sự mất nước do nguyên nhân từ các tác động bên ngoài, ở
thực vật có ba cơ chế sinh lý chủ yếu được thảo luận, đó là cơ chế trốn hạn, cơ
chế tránh hạn và cơ chế chịu hạn.
Thực vật có thể hoàn thành chu kỳ sống sớm hơn trước khi sự thiếu
nước nghiêm trọng trong đất và trong cây xảy ra. Kiểu chịu mất nước này gọi
là trốn hạn (drought escape). Muốn trốn được hạn, cây phải có sức sinh
trưởng và phát triển mạnh, có thể ra hoa và tạo quả sớm để thời điểm thiếu
nước không ảnh hưởng đến chu kỳ sống của cây. Nhóm cây trốn hạn thường
là cây sống ở vùng sa mạc, cây có thời gian sinh trưởng ngắn. Chu trình sống
của chúng thường hoàn thành trước khi mùa khô hạn tới [63].
Để tránh hạn, thực vật có thể giữ nước trong tế bào hoặc giảm sự thoát
nước ra ngoài cơ thể. Trong đó, phương thức tránh hạn (drought avoidance)
chủ yếu của thực vật là hạn chế sự mất nước. Ví dụ, thay đổi độ mở khí
khổng, giảm diện tích lá… hoặc nhanh chóng bù lại sự thiếu hụt nước thông
qua những biến đổi về hình thái. Định hướng sự phát triển của lá theo hướng
giảm sự hấp thụ bức xạ, tăng cường sự hấp thu nước theo hướng phát triển
sâu và rộng của bộ rễ… [49], [60].
8
Duy trì áp suất thẩm thấu nội bào có tác dụng bảo vệ hoặc duy trì sức
sống, độ đàn hồi của tế bào ngay cả khi bị mất nước cực đoan, đó là khả năng
chịu hạn (drought tolerance). Trong điều kiện hạn hán, áp suất thẩm thấu của
tế bào được điều chỉnh tăng lên giúp cho tế bào có thể duy trì lượng nước.
Tuy nhiên, ở cùng một thời điểm bị hạn, thực vật sử dụng nhiều hơn một cơ
chế để chống hạn [60], [98].
Tìm hiểu bản chất hoá sinh và sinh học phân tử của tính chịu hạn là mối
quan tâm của nhiều nghiên cứu [12], [47], [48], [49], [60]…. Nghiên cứu tính
chống chịu hạn và cấu trúc tế bào người ta nhận thấy, hàng loạt những biến
đổi sâu sắc xảy ra ở nhiều cấp độ trong các giai đoạn khác nhau và liên quan
đến hoạt động của các gen. Nghiên cứu của Bray (1993) về những sản phẩm
của gen tham gia bảo vệ tế bào khi tế bào bị thiếu nước được tiếp cận theo
hướng: (1) hoạt động của nhóm gen tạo sản phẩm bảo vệ tế bào (protection of
cellular) và (2) hoạt động của nhóm gen tham gia điều chỉnh áp suất thẩm
thấu trong tế bào (osmotic adjustment) [51].
Theo hướng thứ nhất, (i) Sản phẩm của gen là các chất môi giới phân
tử. Chất môi giới phân tử tham gia vào quá trình tạo cấu trúc không gian đúng
cho các phân tử protein được tạo thành trong tế bào, hay tạo cấu trúc đúng
cho những phân tử protein bị biến tính trong điều kiện cực đoan. Một protein
lạ được xác định là cần thiết để sắp xếp cấu trúc đúng của một phức hợp
enzyme lớn trong lạp lục, nhưng protein lạ này không liên quan đến việc lắp
ráp cuối cùng của phức enzyme. Điều này nhanh chóng được xác định rằng,
cùng với những protein chỉ đạo lắp ráp chính, loại protein lạ giống hệt với
một trong nhiều protein được tổng hợp mạnh khi các tế bào gặp nhiệt độ cao.
Vì thế, nhóm chất môi giới phân tử thứ nhất gọi là "protein sốc nhiệt", hoặc
HSP (HSP- heat shock protein).
Trong điều kiện bình thường các HSP vẫn được tổng hợp, nhưng khi
gặp các điều kiện bất lợi như hạn hán, nhiệt độ cao, muối cao... chúng được
9
tổng hợp gia tăng. HSP ở thực vật gồm nhiều loại khác nhau về kích thước,
khối lượng và sự khu trú trong tế bào. HSP70 là chất môi giới phân tử có kích
thước khoảng 70kDa, nhóm này tìm thấy trong chất nguyên sinh của các tế
bào. Bình thường, HSP70 gắn với polypeptide đang tổng hợp trên ribosome,
do đó chuỗi polypeptide được ổn định cho đến khi tổng hợp xong. Trong điều
kiện cực đoan, HSP70 ngăn chặn sự co cụm kết tủa protein [71]. HSP60 (chất
môi giới phân tử có kích thước khoảng 60kDa) được tìm thấy trong một số
bào quan của sinh vật nhân thực như ty thể, lục lạp. HSP60 có cấu trúc hình
trụ, có vai trò tạo cấu trúc đúng cho protein.
(ii) Các sản phẩm của gen tham gia đào thải những chất bị biến tính,
những chất có khả năng gây độc cho tế bào khi tế bào gặp tác động của điều
kiện bất lợi. Các chất này bao gồm ubiquitin, protease, catalase, supeoxid
dismutase... Do vậy, hoạt động của nhóm chất này sẽ góp phần giải độc và
bảo vệ tế bào.
(iii) Các chất bảo vệ enzyme, ức chế hoạt động của các enzyme thủy
phân khác...do đó làm hạn chế sự phân giải những chất có hoạt tính enzyme
và bảo vệ các cấu trúc trong tế bào, nhóm này gọi chung là protease inhibitor.
Nhóm chất ức chế enzyme gồm nhiều loại, tuy nhiên sự hiểu biết về chúng
còn hạn chế [70].
Theo hướng thứ 2, việc điều chỉnh áp suất thẩm thấu của tế bào khi bị
mất nước là rất quan trọng. Các chất điều hòa áp suất thẩm thấu có vai trò
khác nhau trong việc giữ và lấy nước vào tế bào. Đó là, việc điều chỉnh các
kênh ion trên màng tế bào. Sản phẩm của gen thay thế vị trí nước nơi xảy ra
các phản ứng hoá sinh, hoặc tương tác với lipid, protein màng tế bào, ngăn
chặn sự phá huỷ màng tế bào và ngăn chặn sự phá hủy các protein khác. LEA
(late embryogenesis abudant) là protein giàu amino acid ưa nước, không chứa
cysteine và tryptophan, do đó rất thích hợp với vai trò mang nước và giúp duy
trì nhu cầu nước của tế bào [110]. LTPs (lipid transfer proteins) là một nhóm
protein hỗ trợ hình thành lớp cutin, lớp sáp do đó bảo vệ mô tránh mất nước.
10
LTP tăng vận chuyển phospholipid tới màng, do đó tăng độ bền của màng và
khả năng giữ nước của tế bào [78]. Sản phẩm của gen điều chỉnh áp suất thẩm
thấu bằng cách điều khiển sự ra vào nước qua màng không bào. Bên cạnh đó,
các chất như: ion K+, proline, estoine, các chất đường sucrose, manitol...là
những chất đóng vai trò quan trọng trong việc tăng cường áp suất thẩm thấu
của tế bào.
1.1.2.2. Đặc tính chịu hạn của cây lạc
Đặc tính chịu hạn của cây trồng nói chung và của cây lạc nói riêng
được cấu thành bởi một số yếu tố như diện tích lá, hàm lượng diệp lục trong
lá, hiệu suất quang hợp, thoát hơi nước và hiệu quả sử dụng nước, bộ rễ cây
lạc.
Diện tích lá và hàm lượng diệp lục trong lá
Lá lạc thuộc loại lá kép, với 3 hoặc 4 lá chét. Tổng số lá trên cây tăng
khoảng từ ngày 21 đến ngày thứ 90-100 sau khi trồng. Ảnh hưởng của thiếu
nước rõ nhất là giảm độ tăng trưởng của tế bào trên toàn bộ cây, như vậy diện
tích quang hợp sẽ giảm dẫn đến giảm sức phát triển của cây.
Chỉ số diện tích lá có thể được cải thiện bởi tổ hợp các chất kích thích
sinh trưởng và nguyên tố vi lượng [33]. Nghiên cứu xác định chỉ số diện tích
lá cho thấy, đây là chỉ tiêu có mối liên quan với hàm lượng diệp lục, mật độ
chất diệp lục, hiệu quả sử dụng nước... [119], [120].
Diệp lục là sắc tố quang hợp chủ yếu của cây trồng. Vì vậy, mật độ chất
diệp lục rất quan trọng trong việc đánh giá khả năng quang hợp của cây. Mật
độ chất diệp lục được tính bằng hàm lượng chất diệp lục trên một đơn vị diện
tích lá. Mật độ chất diệp lục ổn định trong thời gian hạn hán có thể là một chỉ
tiêu đầy hứa hẹn trong việc lựa chọn dòng, giống lạc có khả năng chịu hạn
[44]. Đó cũng là lý do để nhóm tác giả Nguyễn Tấn Lê và Vũ Đình Ngàn
(2010) tiến hành thăm dò ảnh hưởng của CaCl2 và tổ hợp một số nguyên tố vi
lượng để cải thiện hàm lượng diệp lục trong lá [11].
11
SCMR (SPAD chlophyll meter reading) phản ánh đặc tính hoạt động
hấp thụ ánh sáng của lá. Chỉ số SCMR phụ thuộc vào hàm lượng diệp lục trên
mỗi đơn vị diện tích lá. Arunyanark và đtg (2009) cho rằng, có thể sử dụng
SCMR như một công cụ để đánh giá nhanh về tình trạng chất diệp lục tương
đối của lạc cũng như gián tiếp lựa chọn khả năng chịu hạn của cây lạc [43].
Hiệu suất quang hợp
Hiệu suất quang hợp là chỉ tiêu đánh giá trên cơ sở hàm lượng vật chất
khô của cây trồng. Hiệu suất quang hợp phản ánh năng suất cây trồng. Hiệu
suất quang hợp thay đổi theo các giai đoạn sinh trưởng của cây. Giai đoạn nào
có hoạt động quang hợp mạnh nhất thì có hiệu suất quang hợp cao nhất.
Có nhiều cách xác định hiệu suất quang hợp của cây như: xác định
cường độ quang hợp; xác định khối lượng vật chất khô.... Trong đó, cường độ
quang hợp của cây được tính thông qua lượng CO2 cây hấp thu, lượng O2 cây
thải ra hay lượng chất hữu cơ được tích luỹ trên một đơn vị diện tích lá trong
một đơn vị thời gian xác định [11], [33], [44]... Cường độ quang hợp đánh giá
khả năng quang hợp của các quần thể cây trồng khác nhau. Cường độ quang
hợp là một chỉ tiêu thay đổi, tuỳ thuộc vào giống cây trồng, các cơ quan, giai
đoạn sinh trưởng khác nhau của cây, điều kiện ngoại cảnh… Theo
Arunyanark và đtg (2008) hạn hán làm giảm đáng kể khối lượng chất khô của
cây [44].
Ở thực vật, khi mất một lượng nước khoảng 5-10% sẽ thuận lợi cho quá
trình quang hợp. Nếu độ bão hoà của nước trong cây thiếu hơn 10% thì hiệu
suất quang hợp bị giảm sút. Quang hợp ngừng khi hàm lượng nước trong cây
thiếu khoảng từ 30% trở lên. Đặc tính này là biểu hiện thích nghi của bộ máy
quang hợp trên môi trường cạn. Tuy nhiên, tuỳ theo khả năng chống chịu hạn
của cây mà mức độ giảm sút quang hợp sẽ khác nhau. Thực vật có khả năng
chống chịu hạn tốt, khi thiếu nước hiệu suất quang hợp sẽ giảm ít hơn.
Ribulose 1,5 diphosphat cacboxylase xúc tác sự chuyển hóa ribulose
1,5 diphosphat (RiDP) trong giai đoạn đầu tiên của quá trình cố định CO2.
12
Tài liệu liên quan
Nghiên cứu đặc điểm hóa sinh vì phân lập gen chaperonin liên quan đến tính chịu hạn của một số giống đậu tương địa phươngtrồng ở vùng tây nguyên
Đánh giá chất lượng hạt, khả năng chịu hạn và phân lập gen cystatin của một số giống đậu xanh (Vigna radiata (L.) Wilczek)
XÁC ĐỊNH CÁC ĐỘT BIẾN GEN KatG LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH KHÁNG THUỐC I SONIAZID CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN LAO TẠI VIỆT NAM
Xác định các đột biến trên gen katG liên quan đên tính kháng thuốc isoniazid của một số chủng vi khuẩn lao tại Việt Nam
Tài liệu Đề tài" Đánh giá chất lượng hạt, khả năng chịu hạn và phân lập gen cystatin của một số giống đậu xanh" ppt
luận văn: NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÓA SINH VÌ PHÂN LẬP GEN CHAPERONIN LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH CHỊU HẠN CỦA MỘT SỐ GIỐNG ĐẬU TƯƠNG ĐỊA PHƯƠNGTRỒNG Ở VÙNG TÂY NGUYÊN pot
Phân lập, tạo đột biến điểm ở gen P5CS liên quan đến tính chịu hạn và thử nghiệm chuyển vào cây đậu tương việt nam
Luận văn: XÁC ĐỊNH CÁC ĐỘT BIẾN GEN KatG LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH KHÁNG THUỐC I SONIAZID CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN LAO TẠI VIỆT NAM pdf
Luận văn: NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÓA SINH VÌ PHÂN LẬP GEN CHAPERONIN LIÊN QUAN ĐẾN TÍNH CHỊU HẠN CỦA MỘT SỐ GIỐNG ĐẬU TƯƠNG ĐỊA PHƯƠNG TRỒNG Ở VÙNG TÂY NGUYÊN potx
Tóm tắt luận án tiến sĩ sinh học phân lập, tạo đột biến điểm ở gen P5CS liên quan đến tính chịu hạn và thử nghiệm chuyển vào cây đậu tương việt nam
Tài liệu bạn tìm kiếm đã sẵn sàng tải về
(1.18 MB) - Tạo dòng chịu hạn và phân lập gen cystatin liên quan đến tính chịu hạn ở cây lạc (arachis hypogaea l )
Tải bản đầy đủ ngay
×


text:
Thành lập đoàn thường xuyên tổ chức truy quét; huy động các đoàn thể vào cuộc vận động tuyên truyền, làm tốt công tác quản lý địa bàn… là những biện pháp mà huyện Đắk Glei đang triển khai quyết liệt nhằm không để tái diễn tình trạng khai thác vàng trái pháp luật trên địa bàn.
Tháng 6 và tháng 7 vừa qua, dưới sự chỉ đạo của huyện Đăk Glei, xã Đăk Long đã tổ chức tuần tra, truy quét những trường hợp khai thác vàng trái pháp luật trên địa bàn xã. Quá trình truy quét, xã đã thu giữ, tiêu hủy nhiều máy móc, thiết bị như máy nổ, đầu bơm, ống nước, cối xay đá…; đồng thời xử lý hành chính 2 trường hợp về lĩnh vực đất đai, 8 trường hợp về lĩnh vực cư trú. Vì thế, tình trạng khai thác vàng trái pháp luật trên địa bàn xã lắng xuống.
Tuy nhiên, trong khoảng 2 tuần giữa tháng 8 trên địa bàn xã Đăk Long lại tái diễn việc khai thác vàng nhỏ lẻ ở khu vực hồ Đăk Blóc. Đối tượng khai thác chủ yếu là người dân địa phương ở thôn Đăk Ôn như: Y Bông, Y Jú, Y Tiên, A Tần, A Khéc… Các đối tượng này đã dùng máy nổ, đầu bơm, ống nước, máng xổ theo hình thức hút xịt để khai thác vàng.
Trước tình hình đó, UBND huyện Đắk Glei tiếp tục chỉ đạo UBND xã Đăk Long phối hợp với Đồn Biên phòng 673 tuyên truyền vận động người dân không khai thác vàng trái pháp luật; đồng thời, thành lập đoàn liên ngành tổ chức truy quét thường xuyên trong khu vực xã. Quá trình truy quét, lực lượng liên ngành đã lập biên bản tạm giữ 2 máy nổ, 2 van thể, 110m ống nước của các hộ dân không chấp hành tháo dỡ di dời.
Theo ông A Phương – Phó Chủ tịch UBND huyện Đăk Glei, tình trạng khai thác vàng trái pháp luật trên địa bàn xã Đăk Long chủ yếu là do một số người dân ở địa phương thỉnh thoảng lén lút hoạt động vào thời gian mà lực lượng ít đi tuần. Từ khi Công ty thép Đông Á ngừng khai thác, trên địa bàn xã không có đối tượng nào khai thác vàng trái phép một cách quy mô, hoặc dùng máy đào để hoạt động đào đãi vàng.
“Trong đợt truy quét vừa qua, vẫn còn tình trạng người dân chống đối lại lực lượng liên ngành nhưng khi được giải thích người dân đã cam kết không khai thác nữa. Vì vậy, đến nay tình trạng khai thác vàng trái pháp luật tại địa bàn xã Đăk Long đã chấm dứt” – ông Phương cho hay.
Theo nhận định của ông Phương, hoạt động khai thác vàng trái pháp luật ở xã Đăk Long có thể tái diễn bất cứ lúc nào nếu không có các biện pháp ngăn chặn và xử lý triệt để. Vì thế, huyện Đắk Glei đã chỉ đạo UBND xã Đăk Long thường xuyên phối hợp với Đồn Biên phòng 673 tăng cường công tác quản lý địa bàn, tổ chức tuần tra, kiểm soát hàng ngày, xử lý quyết liệt hơn nữa trong công tác bảo vệ tài nguyên khoáng sản chưa khai thác, không để hoạt động khai thác vàng trái pháp luật tái diễn.
Ông A Phương nhấn mạnh: UBND huyện cũng đã thành lập đoàn liên ngành và sẽ thường xuyên tổ chức tuần tra, kiểm soát, truy quét hoạt động khai thác khoáng sản trên địa bàn huyện, trong đó quyết tâm ngăn chặn triệt để tình trạng khai thác vàng trái pháp luật tại xã Đăk Long nói riêng, toàn huyện nói chung.
“Cùng với đó, huyện cũng kiến nghị tỉnh đề nghị Bộ Chỉ huy BĐBP tỉnh tiếp tục chỉ đạo các đồn Biên phòng đóng trên địa bàn phối hợp chặt chẽ với chính quyền địa phương trong việc xử lý hoạt động khai thác vàng trái pháp luật trong khu vực quản lý…” – ông A Phương cho biết
Hy vọng, với sự quyết liệt và cương quyết của chính quyền huyện Đắk Glei, hoạt động khai thác vàng trái pháp luật ở xã Đăk Long nói riêng, trên địa bàn huyện Đắk Glei nói chung sẽ không tái diễn.

markdown:
Thành lập đoàn thường xuyên tổ chức truy quét; huy động các đoàn thể vào cuộc vận động tuyên truyền, làm tốt công tác quản lý địa bàn… là những biện pháp mà huyện Đắk Glei đang triển khai quyết liệt nhằm không để tái diễn tình trạng khai thác vàng trái
[pháp luật](https://tintaynguyen.com/phap-luat/anh-ninh-trat-tu/) trên địa bàn.
Tháng 6 và tháng 7 vừa qua, dưới sự chỉ đạo của huyện Đăk Glei, xã Đăk Long đã tổ chức tuần tra, truy quét những trường hợp khai thác vàng trái pháp luật trên địa bàn xã. Quá trình truy quét, xã đã thu giữ, tiêu hủy nhiều máy móc, thiết bị như máy nổ, đầu bơm, ống nước, cối xay đá…; đồng thời xử lý hành chính 2 trường hợp về lĩnh vực đất đai, 8 trường hợp về lĩnh vực cư trú. Vì thế, tình trạng khai thác vàng trái pháp luật trên địa bàn xã lắng xuống.
Tuy nhiên, trong khoảng 2 tuần giữa tháng 8 trên địa bàn xã Đăk Long lại tái diễn việc khai thác vàng nhỏ lẻ ở khu vực hồ Đăk Blóc. Đối tượng khai thác chủ yếu là người dân địa phương ở thôn Đăk Ôn như: Y Bông, Y Jú, Y Tiên, A Tần, A Khéc… Các đối tượng này đã dùng máy nổ, đầu bơm, ống nước, máng xổ theo hình thức hút xịt để khai thác vàng.
Trước tình hình đó, UBND huyện Đắk Glei tiếp tục chỉ đạo UBND xã Đăk Long phối hợp với Đồn Biên phòng 673 tuyên truyền vận động người dân không khai thác vàng trái pháp luật; đồng thời, thành lập đoàn liên ngành tổ chức truy quét thường xuyên trong khu vực xã. Quá trình truy quét, lực lượng liên ngành đã lập biên bản tạm giữ 2 máy nổ, 2 van thể, 110m ống nước của các hộ dân không chấp hành tháo dỡ di dời.
![ kon-tum-khong-de-tai-dien-khai-thac-vang-trai-phep-tai-huyen-dak-glei](https://tintaynguyen.com/wp-content/uploads/2016/09/kon-tum-khong-de-tai-dien-khai-thac-vang-trai-phep-tai-huyen-dak-glei-1.jpg)
Dụng cụ khai thác vàng trái phép bị thu giữ. Ảnh: HN
Theo ông A Phương – Phó Chủ tịch UBND huyện Đăk Glei, tình trạng khai thác vàng trái pháp luật trên địa bàn xã Đăk Long chủ yếu là do một số người dân ở địa phương thỉnh thoảng lén lút hoạt động vào thời gian mà lực lượng ít đi tuần. Từ khi Công ty thép Đông Á ngừng khai thác, trên địa bàn xã không có đối tượng nào khai thác vàng trái phép một cách quy mô, hoặc dùng máy đào để hoạt động đào đãi vàng.
“Trong đợt truy quét vừa qua, vẫn còn tình trạng người dân chống đối lại lực lượng liên ngành nhưng khi được giải thích người dân đã cam kết không khai thác nữa. Vì vậy, đến nay tình trạng khai thác vàng trái pháp luật tại địa bàn xã Đăk Long đã chấm dứt” – ông Phương cho hay.
Theo nhận định của ông Phương, hoạt động khai thác vàng trái pháp luật ở xã Đăk Long có thể tái diễn bất cứ lúc nào nếu không có các biện pháp ngăn chặn và xử lý triệt để. Vì thế, huyện Đắk Glei đã chỉ đạo UBND xã Đăk Long thường xuyên phối hợp với Đồn Biên phòng 673 tăng cường công tác quản lý địa bàn, tổ chức tuần tra, kiểm soát hàng ngày, xử lý quyết liệt hơn nữa trong công tác bảo vệ tài nguyên khoáng sản chưa khai thác, không để hoạt động khai thác vàng trái pháp luật tái diễn.
Ông A Phương nhấn mạnh: UBND huyện cũng đã thành lập đoàn liên ngành và sẽ thường xuyên tổ chức tuần tra, kiểm soát, truy quét hoạt động khai thác khoáng sản trên địa bàn huyện, trong đó quyết tâm ngăn chặn triệt để tình trạng khai thác vàng trái pháp luật tại xã Đăk Long nói riêng, toàn huyện nói chung.
“Cùng với đó, huyện cũng kiến nghị tỉnh đề nghị Bộ Chỉ huy BĐBP tỉnh tiếp tục chỉ đạo các đồn Biên phòng đóng trên địa bàn phối hợp chặt chẽ với chính quyền địa phương trong việc xử lý hoạt động khai thác vàng trái pháp luật trong khu vực quản lý…” – ông A Phương cho biết
Hy vọng, với sự quyết liệt và cương quyết của chính quyền huyện Đắk Glei, hoạt động khai thác vàng trái pháp luật ở xã Đăk Long nói riêng, trên địa bàn huyện Đắk Glei nói chung sẽ không tái diễn.

WARC-Type: response

Content-Type: application/http; msgtype=response

WARC-Truncated: length

WARC-Identified-Payload-Type: text/html

Server: nginx

Content-Type: text/html; charset=UTF-8

Connection: close

Vary: Accept-Encoding

Link: <https://goo.gl/Wc55a6>; rel=shortlink


text:
Võ sư Bùi Văn Hải theo chế độ ăn uống nghiêm ngặt, hạn chế tinh bột, tăng cường rau củ quả, chỉ dùng thịt bò hạn chế thịt heo…
Anh Hải thường được gọi là Hải Long An, cho rằng ăn uống ở độ tuổi 40 cần phải theo chế độ nghiêm ngặt. Võ sư chia sẻ: “Tôi ăn uống theo phương châm ‘Sáng ăn như vua, trưa ăn như hoàng tử và tối thì ăn kiểu ăn mày'”. Bữa sáng đối với anh rất quan trọng bởi nó tạo năng lượng cho cơ thể hoạt động cả ngày.
Sáng anh thường ăn thịt bò, cá, hạn chế thịt heo, tăng cường rau củ quả. Võ sư uống khoảng 500 ml nước trước khi ăn 30 phút. Điểm tâm xong đi làm, anh mang theo một chai nước ép trái cây để uống bổ sung với nước suối.
Buổi trưa và tối chỉ cần một chén cơm cùng trái cây, nước trái cây và nước lọc là đủ với ông thầy dạy võ này. Quan điểm của anh là sau 6h tối không nên ăn tinh bột bởi nó sẽ khó đào thải trong giấc ngủ khiến cho sức khỏe không tốt. Nếu chưa quen với việc kiêng tinh bột buổi tối thì bạn có thể ăn một chén súp cùng với trái cây và sữa.
Ngoài chế độ ăn uống nghiêm ngặt, anh Hải thường xuyên tập luyện yoga, võ thuật và chạy bộ. Tập võ từ nhỏ và duy trì đến nay giúp anh có vóc dáng rắn chắc mà không cần phải đi tập gym hay thể hình.
Chế độ dinh dưỡng và tập luyện của võ sư
An Nguyên

markdown:
**Võ sư Bùi Văn Hải theo chế độ ăn uống nghiêm ngặt, hạn chế tinh bột, tăng cường rau củ quả, chỉ dùng thịt bò hạn chế thịt heo… **
Anh Hải thường được gọi là Hải Long An, cho rằng ăn uống ở độ tuổi 40 cần phải theo chế độ nghiêm ngặt. Võ sư chia sẻ: “Tôi ăn uống theo phương châm ‘Sáng ăn như vua, trưa ăn như hoàng tử và tối thì ăn kiểu ăn mày'”. Bữa sáng đối với anh rất quan trọng bởi nó tạo năng lượng cho cơ thể hoạt động cả ngày.
Sáng anh thường ăn thịt bò, cá, hạn chế thịt heo, tăng cường rau củ quả. Võ sư uống khoảng 500 ml nước trước khi ăn 30 phút. Điểm tâm xong đi làm, anh mang theo một chai nước ép trái cây để uống bổ sung với nước suối.
Buổi trưa và tối chỉ cần một chén cơm cùng trái cây, nước trái cây và nước lọc là đủ với ông thầy dạy võ này. Quan điểm của anh là sau 6h tối không nên ăn tinh bột bởi nó sẽ khó đào thải trong giấc ngủ khiến cho
[sức khỏe](https://tintaynguyen.com/xa-hoi/y-te/) không tốt. Nếu chưa quen với việc kiêng tinh bột buổi tối thì bạn có thể ăn một chén súp cùng với trái cây và sữa.
Ngoài chế độ ăn uống nghiêm ngặt, anh Hải thường xuyên tập luyện yoga, võ thuật và chạy bộ. Tập võ từ nhỏ và duy trì đến nay giúp anh có vóc dáng rắn chắc mà không cần phải đi tập gym hay thể hình.
Chế độ dinh dưỡng và tập luyện của võ sư
|Bùi Văn Hải sinh năm 1975, quê Long An. Xuất thân là một võ sĩ, anh tìm tòi và đưa võ thuật vào điện ảnh. Hiện anh là Chủ nhiệm Câu lạc bộ Cascadeur Bảo An. Những phim mà Hải Long An tham gia đóng gồm: Long Ruồi , Lửa Phật , Để Mai Tính …|** An Nguyên**

Link: <http://goo.gl/i61F35>; rel=shortlink


text:
Mạng Beeline là một mạng di động giá rẻ với nhiều ưu đãi phù hợp với học sinh, sinh viên, trong đó nạp tiền điện thoại Beeline 30K rất phù hợp với túi tiền của người dùng.
Sử dụng dịch vụ nạp tiền điện thoại Beeline 30K online sẽ giúp bạn tiết kiệm thời gian và rút ngắn công đoạn so với nạp thẻ thông thường. Thay vì việc bạn phải mua 2 thẻ cào giấy với mệnh giá 20 và 10 thì giờ đây bạn chỉ cần 1 lần thanh toán đã có ngay trong tài khoản của mình 30K.
Để nạp tiền Beeline 30K online bạn chỉ cần truy cập website Vienthong.com.vn và thực hiện một vào thao tác đơn giản là bạn đã có trong tài khoản điện thoại của mình 30,000 VNĐ
Các mệnh giá khác: Nạp tiền Beeline 10K - Nạp tiền Beeline 20K - Nạp tiền Beeline 50K - Nạp tiền Beeline 100K - Nạp tiền Beeline 200K - Nạp tiền Beeline 300K - Nạp tiền Beeline 500K

markdown:
Mạng Beeline là một mạng di động giá rẻ với nhiều ưu đãi phù hợp với học sinh, sinh viên, trong đó
** 30K rất phù hợp với túi tiền của người dùng. nạp tiền điện thoại Beeline**
Sử dụng dịch vụ nạp tiền điện thoại Beeline 30K online sẽ giúp bạn tiết kiệm thời gian và rút ngắn công đoạn so với nạp thẻ thông thường. Thay vì việc bạn phải mua 2 thẻ cào giấy với mệnh giá 20 và 10 thì giờ đây bạn chỉ cần 1 lần thanh toán đã có ngay trong tài khoản của mình 30K.
Để
** online bạn chỉ cần truy cập website Vienthong.com.vn và thực hiện một vào thao tác đơn giản là bạn đã có trong tài khoản điện thoại của mình 30,000 VNĐ nạp tiền Beeline 30K**
**Các mệnh giá khác: Nạp tiền Beeline 10K - Nạp tiền Beeline 20K - Nạp tiền Beeline 50K - Nạp tiền Beeline 100K - Nạp tiền Beeline 200K - Nạp tiền Beeline 300K - Nạp tiền Beeline 500K**

Cache-Control: no-store, no-cache, must-revalidate, post-check=0, pre-check=0

Pragma: no-cache


text:
Huyền My và dàn mỹ nhân Miss Grand diễn bikini ở Phú Quốc
Gần 80 thí sinh của Hoa hậu Hòa bình Quốc tế trình diễn trang phục áo tắm sáng 17/10. ...
Bên trong ngôi nhà dát vàng đắt nhất Thụy Sĩ
Với các thiết bị cao cấp, góc nhìn đẹp ra núi tuyết, tòa nhà này hiện có giá đắt nhất Thụy Sĩ.
Những tai nạn khủng khiếp nhất với các thủ môn khi thi đấu
Công việc trấn giữ khung thành có lúc khiến cầu thủ dính chấn thương nặng, thậm chí đánh đổi cả mạng sống.

markdown:
[Huyền My và dàn mỹ nhân Miss Grand diễn bikini ở Phú Quốc](https://giaitri.vnexpress.net/photo/quoc-te/huyen-my-va-dan-my--nhan-miss-grand-dien-bikini-o--phu--quo-c-3657023.html)
Gần 80 thí sinh của Hoa hậu Hòa bình Quốc tế trình diễn trang phục áo tắm sáng 17/10.
[...](https://giaitri.vnexpress.net/photo/quoc-te/huyen-my-va-dan-my--nhan-miss-grand-dien-bikini-o--phu--quo-c-3657023.html) [Bên trong ngôi nhà dát vàng đắt nhất Thụy Sĩ](https://giadinh.vnexpress.net/photo/tu-van-nha-dep/ben-trong-ngoi-nha-dat-vang-dat-nhat-thuy-si-3656823.html)
Với các thiết bị cao cấp, góc nhìn đẹp ra núi tuyết, tòa nhà này hiện có giá đắt nhất Thụy Sĩ.
[Những tai nạn khủng khiếp nhất với các thủ môn khi thi đấu](https://thethao.vnexpress.net/photo/hau-truong/nhung-tai-nan-khung-khiep-nhat-voi-cac-thu-mon-khi-thi-dau-3656587.html)
Công việc trấn giữ khung thành có lúc khiến cầu thủ dính chấn thương nặng, thậm chí đánh đổi cả mạng sống.

Cache-Control: max-age=120, stale-while-revalidate=6, stale-if-error=864000, private

Set-Cookie: device_env=4; expires=Tue, 24-Oct-2017 20:41:57 GMT; path=/; domain=vnexpress.net

Content-Type: text/html; charset=utf-8


text:
Thông tin
Tin tức các hãng xe
Kết nối
Kinh doanh
Xe đạp điện Nijia nhập khẩu nguyên chiếc chính hãng rẻ nhất Hà Nội, có bán trả góp | 2banh.vn | Page 348
Thảo luận trong 'Xe đạp - Xe đạp điện - Xe điện' bắt đầu bởi vivuxedien, 11 Tháng mười một 2014.
__[ honda cbr 600 rr 2015 giá cực tốt ]__ hải quan chính ngạch !!! bởi Thưởng moto, 17 Tháng mười 2017 lúc 11:01
___[ cần bán ]___kawasaki versys 650 abs 2017___ bởi HITMEN_BI, 16 Tháng mười 2017 lúc 21:39
shop phúc lâm chuyên cung cấp nhông sên đĩa did nhập khẩu chính hãng bởi thinhphuclam, 17 Tháng mười 2017 lúc 22:25
niền super drag phiên bản rossi 46 và maquez 93 bởi jaythai, 17 Tháng mười 2017 lúc 18:32
Trang 348 của 512 trang
Quan tâm nhiều
Lộ ảnh Exciter 150 độ nhẹ nhàng khoe dáng khi ' tắm ' bởi yêu râu xanh, 17 Tháng mười 2017 lúc 17:29
Wave S 100 độ thướt tha với dàn đồ chơi hàng chục bởi Doremon, 17 Tháng mười 2017 lúc 15:13
Winner 150 độ ngầu đầy ấn tượng trong phong cách Touring bởi fan2banh, 17 Tháng mười 2017 lúc 16:43
Super Dream kiểng nhẹ của học sinh An giang bởi hồ thành trung, 17 Tháng mười 2017 lúc 17:58
Tin công nghệ nổi bật
Ra mắt Fujifilm X-E3 tại thị trường Việt Nam 9 Tháng mười 2017
Tự làm đồ trang trí cực lạ từ gỗ mục 17 Tháng mười 2017 lúc 14:37
Ra mắt Motorola G5S Plus có camera kép, giá khoảng 7 triệu đồng 17 Tháng mười 2017 lúc 11:56
Tự chế chậu trồng cây từ gỗ vụn 16 Tháng mười 2017 lúc 15:09

markdown:
## Thông tin
## Tin tức các hãng xe
## Kết nối
## Kinh doanh
# Xe đạp điện Nijia nhập khẩu nguyên chiếc chính hãng rẻ nhất Hà Nội, có bán trả góp | 2banh.vn | Page 348
Thảo luận trong '
[Xe đạp - Xe đạp điện - Xe điện](forums/xe-dap-xe-dap-dien-xe-dien.106/)' bắt đầu bởi [vivuxedien](members/vivuxedien.16588/), [11 Tháng mười một 2014](threads/xe-dap-dien-nijia-nhap-khau-nguyen-chiec-chinh-hang-re-nhat-ha-noi-co-ban-tra-gop.20699/).
[](threads/__-honda-cbr-600-rr-2015-gia-cuc-tot-__-hai-quan-chinh-ngach.76725/)
![ __[ honda cbr 600 rr 2015 giá cực tốt ]__ hải quan chính ngạch !!!](https://s1.cache.2banh.vn/70x70/image/2017/10/__-honda-cbr-600-rr-2015-gia-cuc-tot-__-hai-quan-chinh-ngach-53506-1508212704-59e57fe0e9931.jpg)
[__[ honda cbr 600 rr 2015 giá cực tốt ]__ hải quan chính ngạch !!!](threads/__-honda-cbr-600-rr-2015-gia-cuc-tot-__-hai-quan-chinh-ngach.76725/)bởi [Thưởng moto](members/), 17 Tháng mười 2017 lúc 11:01 [](threads/___-can-ban-___kawasaki-versys-650-abs-2017___.76693/)
[___[ cần bán ]___kawasaki versys 650 abs 2017___](threads/___-can-ban-___kawasaki-versys-650-abs-2017___.76693/)bởi [HITMEN_BI](members/), 16 Tháng mười 2017 lúc 21:39 [](threads/shop-phuc-lam-chuyen-cung-cap-nhong-sen-dia-did-nhap-khau-chinh-hang.76770/)
![ shop phúc lâm chuyên cung cấp nhông sên đĩa did nhập khẩu chính hãng](https://s1.cache.2banh.vn/70x70/image/2017/10/shop-phuc-lam-chuyen-cung-cap-nhong-sen-dia-did-nhap-khau-chinh-hang-55568-1508253715-59e62013ce7d4.jpeg)
[shop phúc lâm chuyên cung cấp nhông sên đĩa did nhập khẩu chính hãng](threads/shop-phuc-lam-chuyen-cung-cap-nhong-sen-dia-did-nhap-khau-chinh-hang.76770/)bởi [thinhphuclam](members/), 17 Tháng mười 2017 lúc 22:25 [](threads/nien-super-drag-phien-ban-rossi-46-va-maquez-93.76761/)
![ niền super drag phiên bản rossi 46 và maquez 93](https://s1.cache.2banh.vn/70x70/image/2017/10/phu-tung-phu-kien-xe-may-25157-1508239895-59e5ea178916c.jpg)
[niền super drag phiên bản rossi 46 và maquez 93](threads/nien-super-drag-phien-ban-rossi-46-va-maquez-93.76761/)bởi [jaythai](members/), 17 Tháng mười 2017 lúc 18:32
Trang 348 của 512 trang
Quan tâm nhiều
[](threads/lo-anh-exciter-150-do-nhe-nhang-khoe-dang-khi-tam.76713/)
![ Lộ ảnh Exciter 150 độ nhẹ nhàng khoe dáng khi ' tắm '](https://s1.cache.2banh.vn/70x70/image/2017/10/lo-anh-exciter-150-do-nhe-nhang-khoe-dang-khi-tam-5499-1508208166-59e56e2673e51.jpg)
[Lộ ảnh Exciter 150 độ nhẹ nhàng khoe dáng khi ' tắm '](threads/lo-anh-exciter-150-do-nhe-nhang-khoe-dang-khi-tam.76713/)bởi [yêu râu xanh](members/), 17 Tháng mười 2017 lúc 17:29 [](threads/wave-s-100-do-thuot-tha-voi-dan-do-choi-hang-chuc.76666/)
![ Wave S 100 độ thướt tha với dàn đồ chơi hàng chục](https://s1.cache.2banh.vn/70x70/image/2017/10/wave-s-100-do-thuong-tha-voi-dan-do-choi-tien-hang-chuc-7120-1508129053-59e4391d35161.jpg)
[Wave S 100 độ thướt tha với dàn đồ chơi hàng chục](threads/wave-s-100-do-thuot-tha-voi-dan-do-choi-hang-chuc.76666/)bởi [Doremon](members/), 17 Tháng mười 2017 lúc 15:13 [](threads/winner-150-do-ngau-day-an-tuong-trong-phong-cach-touring.76684/)
![ Winner 150 độ ngầu đầy ấn tượng trong phong cách Touring](https://s1.cache.2banh.vn/70x70/image/2017/10/winner-150-do-ngau-day-an-tuong-trong-phong-cach-touring-30-1508140535-59e465f71a8ca.jpg)
[Winner 150 độ ngầu đầy ấn tượng trong phong cách Touring](threads/winner-150-do-ngau-day-an-tuong-trong-phong-cach-touring.76684/)bởi [fan2banh](members/), 17 Tháng mười 2017 lúc 16:43 [](threads/super-dream-kieng-nhe-cua-hoc-sinh-an-giang.76759/)
![ Super Dream kiểng nhẹ của học sinh An giang](https://s1.cache.2banh.vn/70x70/image/2017/10/super-dream-kieng-nhe-cua-hoc-sinh-an-giang-55545-1508236473-59e5dcb9a3997.jpg)
[Super Dream kiểng nhẹ của học sinh An giang](threads/super-dream-kieng-nhe-cua-hoc-sinh-an-giang.76759/)bởi [hồ thành trung](members/), 17 Tháng mười 2017 lúc 17:58
Tin công nghệ nổi bật
[](http://congnghe5giay.com/threads/ra-mat-fujifilm-x-e3-tai-thi-truong-viet-nam.78652/)
![ Ra mắt Fujifilm X-E3 tại thị trường Việt Nam](https://s1.cache.2banh.vn/75x75/?ext=https%3A%2F%2Fs1.storage.5giay.vn%2Fimage%2F2017%2F10%2F20171009_974ef6e5145bfb8c3fb72992dbbe28f3_1507518237.jpg)
[Ra mắt Fujifilm X-E3 tại thị trường Việt Nam](http://congnghe5giay.com/threads/ra-mat-fujifilm-x-e3-tai-thi-truong-viet-nam.78652/)9 Tháng mười 2017 [](http://congnghe5giay.com/threads/tu-lam-do-trang-tri-cuc-la-tu-go-muc.79038/)
![ Tự làm đồ trang trí cực lạ từ gỗ mục](https://s1.cache.2banh.vn/75x75/?ext=https%3A%2F%2Fmedia.lamsao.com%2F%2FResources%2FData%2FNews%2FAuto%2Fvannn%2F201405%2F918dba0e223ad691fdee6148e1bace55635361056815731165.jpg)
[Tự làm đồ trang trí cực lạ từ gỗ mục](http://congnghe5giay.com/threads/tu-lam-do-trang-tri-cuc-la-tu-go-muc.79038/)17 Tháng mười 2017 lúc 14:37 [](http://congnghe5giay.com/threads/ra-mat-motorola-g5s-plus-co-camera-kep-gia-khoang-7-trieu-dong.79025/)
![ Ra mắt Motorola G5S Plus có camera kép, giá khoảng 7 triệu đồng](https://s1.cache.2banh.vn/75x75/?ext=https%3A%2F%2Fs1.storage.5giay.vn%2Fimage%2F2017%2F10%2F20171017_c0f2517e0aab783bb41730c559fde44c_1508215954.jpg)
[Ra mắt Motorola G5S Plus có camera kép, giá khoảng 7 triệu đồng](http://congnghe5giay.com/threads/ra-mat-motorola-g5s-plus-co-camera-kep-gia-khoang-7-trieu-dong.79025/)17 Tháng mười 2017 lúc 11:56 [](http://congnghe5giay.com/threads/tu-che-chau-trong-cay-tu-go-vun.78989/)
![ Tự chế chậu trồng cây từ gỗ vụn](https://s1.cache.2banh.vn/75x75/?ext=https%3A%2F%2Fs1.storage.5giay.vn%2Fimage%2F2017%2F10%2F20171016_07553c9db654f106acdeed2196409029_1508140854.jpg)
[Tự chế chậu trồng cây từ gỗ vụn](http://congnghe5giay.com/threads/tu-che-chau-trong-cay-tu-go-vun.78989/)16 Tháng mười 2017 lúc 15:09

Server: Nhat Nguyet Websphere 12.3 build 3.456.234.2600

X-Frame-Options: SAMEORIGIN

Set-Cookie: 2b_session=045d9710da6e4f142a1123654c86deaa; path=/; domain=.2banh.vn; secure; httponly

Cache-control: private, max-age=0


text:
Công ty Mỹ Johnson & Johnson (J&J) cho biết Alex Gorsky, Phó Chủ tịch điều hành các dịch vụ y tế và chẩn đoán của J&J, sẽ là người đảm nhận vị trí CEO thay cho William Weldon sau cuộc họp cổ đông vào tháng 4.2012. Weldon là CEO của J&J từ năm 2002; những năm gần đây, ông đã đối mặt với hàng loạt vụ thu hồi sản phẩm và kiện tụng, làm tổn hại tiếng tăm của Công ty.
(Theo FT)

markdown:
Công ty Mỹ Johnson & Johnson (J&J) cho biết Alex Gorsky, Phó Chủ tịch điều hành các dịch vụ y tế và chẩn đoán của J&J, sẽ là người đảm nhận vị trí CEO thay cho William Weldon sau cuộc họp cổ đông vào tháng 4.2012. Weldon là CEO của J&J từ năm 2002; những năm gần đây, ông đã đối mặt với hàng loạt vụ thu hồi sản phẩm và kiện tụng, làm tổn hại tiếng tăm của Công ty.
*(Theo FT) *

WARC-Identified-Payload-Type: application/xhtml+xml

Cache-Control: private

X-Cache: MISS from cache30


text:
Vấn đề đầu ra cho sản phẩm vẫn đang thực sự là trăn trở của các mô hình rau an toàn nói chung và rau sản xuất theo phương pháp hữu cơ của Pfarm nói riêng. Ảnh: DN.
"Vũ khí" tự nhiên
Có mặt tại trang trại của Dự án sản xuất và kinh doanh dịch vụ cung cấp gói thuê bao rau (Pfarm) ở Vĩnh Tường, Vĩnh Phúc, phóng viên thấy rất nhiều loại rau được trồng theo phương pháp hữu cơ. Qua quan sát, phóng viên nhận thấy một điểm khá lạ trong cách trồng rau nơi đây đó chính là việc một số loại rau được trồng xen kẽ với nhau chứ không trồng riêng rẽ từng loại như ở một số cơ sở khác. Đem thắc mắc này hỏi những người nông dân tại đây được biết, sở dĩ trồng xen kẽ các loại rau với nhau là thực hiện cơ chế xung khắc. Như khi trồng cải xen lẫn với hành là vì sâu ăn rau cải, nhưng sâu lại sợ hành nên khi trồng xen, sâu sẽ không dám tấn công rau cải.
Khi được hỏi về quy trình sản xuất rau theo phương pháp hữu cơ có gì khác so với phương pháp thông thường, anh Phan Chí Nhân, chủ Dự án cho biết, quy trình sản xuất rau hữu cơ đều đảm bảo nguyên tác không được phép sử dụng chất hóa học tổng hợp trong các vật tư đầu vào. Thay vào đó là phân hữu cơ đã ủ, ngâm hoại mục. Tuyệt đối không sử dụng thuốc bảo vệ thực vật, thuốc kích thích tăng trưởng, các vật liệu biến đổi gen.
Để tiến hành canh tác rau trên diện tích đất hiện có, những người thực hiện phải tiến hành khâu đầu tiên cải tạo đất, sau đó gửi mẫu đất, mẫu nước kiểm nghiệm chất lượng, khi các mẫu được gửi đi đạt chất lượng mới tiến hành gieo trồng. Khi gieo trồng điều tối quan trọng là khâu chọn giống. Giống được chọn tại những cơ sở uy tín, có nguồn gốc rõ ràng, chọn giống kháng sâu bệnh được cung ứng từ các cơ sở có uy tín, được phép sản xuất giống. Trước khi sử dụng rửa hạt giống bằng nước sạch để loại bỏ hóa chất. Sau đó tiến hành gieo trồng theo phương pháp hữu cơ, phân bón là các loại như phân gà ủ trấu, giun quế hay những chế phẩm sinh học an toàn của Nhật.
Theo lời những người nông dân tại đây thì với trồng rau hữu cơ, việc tận dụng các “mẹo” để tránh sâu ăn là việc làm rất cần thiết bởi rau hữu cơ tuyệt đối không được sử dụng thuốc bảo vệ thực vật nên khi sâu bọ tấn công sẽ khiến sản xuất bị ảnh hưởng. “Vũ khí” để chống lại sâu bệnh của phương pháp trồng rau hữu cơ là gừng, ớt, tỏi. Theo đó, người nông dân sẽ giã hoặc xay nhuyễn hỗn hợp tỏi, ớt, gừng sau đó đem ngâm với rượu trong thùng kín. Trong suốt quá trình ngâm ủ, chỉ được để thùng ở nơi thoáng mát, tránh ánh nắng trực tiếp. Ngâm trong khoảng 15-20 ngày để cho tinh dầu cay của nguyên liệu ngấm đều với rượu rồi mới đem ra sử dụng. Để rau hữu cơ phát triển, các hộ nông dân phải thực hiện nghiêm ngặt các tiêu chuẩn, quy định để đảm bảo rau giống được gieo trồng cùng thời điểm, cùng giống cây, cùng kỹ thuật, cùng sử dụng các chế phẩm men vi sinh… Hàng tháng và theo từng mùa vụ, nhóm trồng rau tổ chức sinh hoạt định kỳ để cùng trao đổi, giải quyết những khó khăn, vướng mắc về cách chăm sóc diện tích rau đảm bảo đạt năng suất, chất lượng, ít sâu bệnh.
Việc tận dụng các “mẹo” để tránh sâu ăn là việc làm rất cần thiết bởi rau hữu cơ tuyệt đối không được sử dụng thuốc bảo vệ thực vật. Ảnh: DN.
Nỗi lo đầu ra
Theo lời anh Phan Chí Nhân, có đi sâu vào làm nông nghiệp, những người trẻ làm nông ở Pfarm mới thực sự thấm thía về nỗi vất vả, cực nhọc, khó khăn, thách thức của người nông dân lớn đến như thế nào. Đó là quá nhiều nỗi lo phải đối diện nào là sâu bệnh, nào là thiên tai, nào là thời tiết khí hậu biến đổi thất thường. Chỉ một cơn giông đi qua, đôi khi có thể khiến cả 1 mảng ruộng vườn với bao công sức trở nên vỡ vụn. Rồi kể cả khi “được mùa”, thì cũng không lấy gì làm đảm bảo, giá cao, câu chuyện “được mùa rớt giá, được giá mất mùa” luôn đe dọa.
Từ thực tế ấy mới thôi thúc anh Phan Chí Nhân hình thành ý tưởng kinh doanh dịch vụ cung cấp gói thuê bao rau (Pfarm) trọn gói, từ trang trại đến bàn ăn của người tiêu dùng. Theo đó, tùy theo lượng khách hàng thuê bao cố định hàng tháng, mà cơ sở sẽ sản xuất lượng rau an toàn cho phù hợp. Theo mô hình thuê bao của Pfarm, mỗi tháng người tiêu dùng phải chi trả khoảng 1,6 triệu đồng cho nhu cầu sử dụng các loại rau ăn. Hàng tuần cứ thứ Ba và thứ Sáu, nhân viên sẽ tiến hành giao rau tại nhà cho khách với trọng lượng khoảng 5 kg, gồm 4 loại rau ăn lá chính và 10 loại rau bổ trợ. “Tuy nhiên mô hình này, người tiêu dùng phải trả trước chi phí, do vậy tâm lý của nhiều người khá e dè, lo ngại nhất là khi phải bỏ ra hàng triệu đồng để chi trả cho việc sử dụng rau thay bằng chỉ bỏ ra vài nghìn cho việc mua mớ rau không rõ nguồn gốc chất lượng ngoài chợ”, chủ dự án Pfarm lo lắng.
Người nông dân đang cần mẫn chăm sóc vườn rau hữu cơ
Dù kỳ công chăm sóc, đầu tư song theo tìm hiểu nhược điểm khá lớn của rau hữu cơ là mẫu mã không được đẹp như rau trồng theo phương pháp khác. Bên cạnh đó do giá nguyên liệu và quy trình chế biến mất nhiều thời gian nên chi phí của rau theo phương pháp hữu cơ cao hơn so với các loại rau khác, đây là cản trở khá lớn cho việc tìm kiếm đầu ra. Bên cạnh đó thói quen tiêu dùng của người Việt vẫn chưa thay đổi, họ cho rằng rau là thứ rẻ nhất trong các loại thực phẩm nên khi rau hữu cơ bán giá cao thường không được người tiêu dùng ưa chuộng. “Một số người tiêu dùng khó chấp nhận được việc một ngày họ phải bỏ ra vài chục nghìn để sử dụng các loại rau hữu cơ thay cho việc chỉ cần vài nghìn đồng một bó rau không rõ nguồn gốc, chất lượng ngoài chợ”, chủ cơ sở Pfarm trăn trở.
Vấn đề đầu ra cho sản phẩm vẫn đang thực sự là trăn trở của các mô hình rau an toàn nói chung và rau sản xuất theo phương pháp hữu cơ của Pfarm nói riêng bởi thói quen tiêu dùng và tâm lý của người dân vẫn chưa thực sự tin tưởng vào các loại rau này. Tuy nhiên, để hình thành các vùng sản xuất rau an toàn, điều tiên quyết là phải nâng cao nhận thức của người sản xuất về tầm quan trọng của thực phẩm sạch đối với sức khỏe con người để mỗi người sản xuất tự ý thức thay đổi tập quán, thói quen canh tác.
Bên cạnh đó, để người sản xuất rau an toàn yên tâm duy trì và mở rộng vùng sản xuất rau, yếu tố đầu ra cho sản phẩm cũng phải được các ban, ngành chức năng quan tâm giải quyết. Bởi hiện nay, rau an toàn vẫn được tiêu thụ một cách “tự phát”, do mối quan hệ của các hộ trồng rau với người tiêu dùng. Theo lời của anh Phan Chí Nhân, mấu chốt của việc phát triển sản xuất đó chính là kế hoạch canh tác và tìm đầu ra, vấn đề chất lượng sản phẩm, chỉ cần có quyết tâm, kiểm soát chặt, chất lượng sẽ được bảo đảm.
“Dẫu biết phía trước sẽ còn nhiều khó khăn, thách thức cũng như phải đối diện với nhiều hoài nghi, nhưng phương châm làm việc của em và cộng sự vẫn luôn là ‘cặm cụi mà đi, theo đuổi mục tiêu đến cùng’, thực hiện giấc mơ thực phẩm sạch trên mảnh ruộng của người nông dân”, anh Nhân cho biết.
D.Ngân

markdown:
Vấn đề đầu ra cho sản phẩm vẫn đang thực sự là trăn trở của các mô hình rau an toàn nói chung và rau sản xuất theo phương pháp hữu cơ của Pfarm nói riêng. Ảnh: DN.
** "Vũ khí" tự nhiên**
Có mặt tại trang trại của Dự án sản xuất và kinh doanh dịch vụ cung cấp gói thuê bao rau (Pfarm) ở Vĩnh Tường, Vĩnh Phúc, phóng viên thấy rất nhiều loại rau được trồng theo phương pháp hữu cơ. Qua quan sát, phóng viên nhận thấy một điểm khá lạ trong cách trồng rau nơi đây đó chính là việc một số loại rau được trồng xen kẽ với nhau chứ không trồng riêng rẽ từng loại như ở một số cơ sở khác. Đem thắc mắc này hỏi những người nông dân tại đây được biết, sở dĩ trồng xen kẽ các loại rau với nhau là thực hiện cơ chế xung khắc. Như khi trồng cải xen lẫn với hành là vì sâu ăn rau cải, nhưng sâu lại sợ hành nên khi trồng xen, sâu sẽ không dám tấn công rau cải.
Khi được hỏi về quy trình sản xuất rau theo phương pháp hữu cơ có gì khác so với phương pháp thông thường, anh Phan Chí Nhân, chủ Dự án cho biết, quy trình sản xuất rau hữu cơ đều đảm bảo nguyên tác không được phép sử dụng chất hóa học tổng hợp trong các vật tư đầu vào. Thay vào đó là phân hữu cơ đã ủ, ngâm hoại mục. Tuyệt đối không sử dụng thuốc bảo vệ thực vật, thuốc kích thích tăng trưởng, các vật liệu biến đổi gen.
Để tiến hành canh tác rau trên diện tích đất hiện có, những người thực hiện phải tiến hành khâu đầu tiên cải tạo đất, sau đó gửi mẫu đất, mẫu nước kiểm nghiệm chất lượng, khi các mẫu được gửi đi đạt chất lượng mới tiến hành gieo trồng. Khi gieo trồng điều tối quan trọng là khâu chọn giống. Giống được chọn tại những cơ sở uy tín, có nguồn gốc rõ ràng, chọn giống kháng sâu bệnh được cung ứng từ các cơ sở có uy tín, được phép sản xuất giống. Trước khi sử dụng rửa hạt giống bằng nước sạch để loại bỏ hóa chất. Sau đó tiến hành gieo trồng theo phương pháp hữu cơ, phân bón là các loại như phân gà ủ trấu, giun quế hay những chế phẩm sinh học an toàn của Nhật.
Theo lời những người nông dân tại đây thì với trồng rau hữu cơ, việc tận dụng các “mẹo” để tránh sâu ăn là việc làm rất cần thiết bởi rau hữu cơ tuyệt đối không được sử dụng thuốc bảo vệ thực vật nên khi sâu bọ tấn công sẽ khiến sản xuất bị ảnh hưởng. “Vũ khí” để chống lại sâu bệnh của phương pháp trồng rau hữu cơ là gừng, ớt, tỏi. Theo đó, người nông dân sẽ giã hoặc xay nhuyễn hỗn hợp tỏi, ớt, gừng sau đó đem ngâm với rượu trong thùng kín. Trong suốt quá trình ngâm ủ, chỉ được để thùng ở nơi thoáng mát, tránh ánh nắng trực tiếp. Ngâm trong khoảng 15-20 ngày để cho tinh dầu cay của nguyên liệu ngấm đều với rượu rồi mới đem ra sử dụng. Để rau hữu cơ phát triển, các hộ nông dân phải thực hiện nghiêm ngặt các tiêu chuẩn, quy định để đảm bảo rau giống được gieo trồng cùng thời điểm, cùng giống cây, cùng kỹ thuật, cùng sử dụng các chế phẩm men vi sinh… Hàng tháng và theo từng mùa vụ, nhóm trồng rau tổ chức sinh hoạt định kỳ để cùng trao đổi, giải quyết những khó khăn, vướng mắc về cách chăm sóc diện tích rau đảm bảo đạt năng suất, chất lượng, ít sâu bệnh.
Việc tận dụng các “mẹo” để tránh sâu ăn là việc làm rất cần thiết bởi rau hữu cơ tuyệt đối không được sử dụng thuốc bảo vệ thực vật. Ảnh: DN.
**Nỗi lo đầu ra**
Theo lời anh Phan Chí Nhân, có đi sâu vào làm nông nghiệp, những người trẻ làm nông ở Pfarm mới thực sự thấm thía về nỗi vất vả, cực nhọc, khó khăn, thách thức của người nông dân lớn đến như thế nào. Đó là quá nhiều nỗi lo phải đối diện nào là sâu bệnh, nào là thiên tai, nào là thời tiết khí hậu biến đổi thất thường. Chỉ một cơn giông đi qua, đôi khi có thể khiến cả 1 mảng ruộng vườn với bao công sức trở nên vỡ vụn. Rồi kể cả khi “được mùa”, thì cũng không lấy gì làm đảm bảo, giá cao, câu chuyện “được mùa rớt giá, được giá mất mùa” luôn đe dọa.
Từ thực tế ấy mới thôi thúc anh Phan Chí Nhân hình thành ý tưởng kinh doanh dịch vụ cung cấp gói thuê bao rau (Pfarm) trọn gói, từ trang trại đến bàn ăn của người tiêu dùng. Theo đó, tùy theo lượng khách hàng thuê bao cố định hàng tháng, mà cơ sở sẽ sản xuất lượng rau an toàn cho phù hợp. Theo mô hình thuê bao của Pfarm, mỗi tháng người tiêu dùng phải chi trả khoảng 1,6 triệu đồng cho nhu cầu sử dụng các loại rau ăn. Hàng tuần cứ thứ Ba và thứ Sáu, nhân viên sẽ tiến hành giao rau tại nhà cho khách với trọng lượng khoảng 5 kg, gồm 4 loại rau ăn lá chính và 10 loại rau bổ trợ. “Tuy nhiên mô hình này, người tiêu dùng phải trả trước chi phí, do vậy tâm lý của nhiều người khá e dè, lo ngại nhất là khi phải bỏ ra hàng triệu đồng để chi trả cho việc sử dụng rau thay bằng chỉ bỏ ra vài nghìn cho việc mua mớ rau không rõ nguồn gốc chất lượng ngoài chợ”, chủ dự án Pfarm lo lắng.
Người nông dân đang cần mẫn chăm sóc vườn rau hữu cơ
Dù kỳ công chăm sóc, đầu tư song theo tìm hiểu nhược điểm khá lớn của rau hữu cơ là mẫu mã không được đẹp như rau trồng theo phương pháp khác. Bên cạnh đó do giá nguyên liệu và quy trình chế biến mất nhiều thời gian nên chi phí của rau theo phương pháp hữu cơ cao hơn so với các loại rau khác, đây là cản trở khá lớn cho việc tìm kiếm đầu ra. Bên cạnh đó thói quen tiêu dùng của người Việt vẫn chưa thay đổi, họ cho rằng rau là thứ rẻ nhất trong các loại thực phẩm nên khi rau hữu cơ bán giá cao thường không được người tiêu dùng ưa chuộng. “Một số người tiêu dùng khó chấp nhận được việc một ngày họ phải bỏ ra vài chục nghìn để sử dụng các loại rau hữu cơ thay cho việc chỉ cần vài nghìn đồng một bó rau không rõ nguồn gốc, chất lượng ngoài chợ”, chủ cơ sở Pfarm trăn trở.
Vấn đề đầu ra cho sản phẩm vẫn đang thực sự là trăn trở của các mô hình rau an toàn nói chung và rau sản xuất theo phương pháp hữu cơ của Pfarm nói riêng bởi thói quen tiêu dùng và tâm lý của người dân vẫn chưa thực sự tin tưởng vào các loại rau này. Tuy nhiên, để hình thành các vùng sản xuất rau an toàn, điều tiên quyết là phải nâng cao nhận thức của người sản xuất về tầm quan trọng của thực phẩm sạch đối với sức khỏe con người để mỗi người sản xuất tự ý thức thay đổi tập quán, thói quen canh tác.
Bên cạnh đó, để người sản xuất rau an toàn yên tâm duy trì và mở rộng vùng sản xuất rau, yếu tố đầu ra cho sản phẩm cũng phải được các ban, ngành chức năng quan tâm giải quyết. Bởi hiện nay, rau an toàn vẫn được tiêu thụ một cách “tự phát”, do mối quan hệ của các hộ trồng rau với người tiêu dùng. Theo lời của anh Phan Chí Nhân, mấu chốt của việc phát triển sản xuất đó chính là kế hoạch canh tác và tìm đầu ra, vấn đề chất lượng sản phẩm, chỉ cần có quyết tâm, kiểm soát chặt, chất lượng sẽ được bảo đảm.
“Dẫu biết phía trước sẽ còn nhiều khó khăn, thách thức cũng như phải đối diện với nhiều hoài nghi, nhưng phương châm làm việc của em và cộng sự vẫn luôn là ‘cặm cụi mà đi, theo đuổi mục tiêu đến cùng’, thực hiện giấc mơ thực phẩm sạch trên mảnh ruộng của người nông dân”, anh Nhân cho biết.
D.Ngân

X-Cache: MISS from xCache11-02


text:
Thứ tư - 11/05/2016 10:19
Thiết bị di động đang nhanh chóng thay thế máy tính để bàn và trở thành một công cụ quan trọng. Do đó, việc bạn cần quan tậm là làm cách nào để cải thiện thiết kế website khách sạn trên giao diện di động theo cách tốt nhất ?
Theo Shaun Aukland, giám đốc cấp cao của Google, có 58% tìm kiếm trên Internet được sử dụng thông qua thiết bị di động. Điện thoại di động đang dần trở thành công cụ thống trị. Vì vậy, các thiết kế web khách sạn cần phải đảm bảo hiệu quả khi chuyển đổi từ giao diện máy tính sang giao diện trên điện thoại đi động.
(08) 6292-0000 Hỗ trợ giờ hành chính
NGOÀI GIỜ:
0945.82.82.79

markdown:
Thứ tư - 11/05/2016 10:19
Thiết bị di động đang nhanh chóng thay thế máy tính để bàn và trở thành một công cụ quan trọng. Do đó, việc bạn cần quan tậm là làm cách nào để cải thiện thiết kế website khách sạn trên giao diện di động theo cách tốt nhất ?
Theo Shaun Aukland, giám đốc cấp cao của Google, có 58% tìm kiếm trên Internet được sử dụng thông qua thiết bị di động. Điện thoại di động đang dần trở thành công cụ thống trị. Vì vậy, các
**thiết kế web khách sạn** cần phải đảm bảo hiệu quả khi chuyển đổi từ giao diện máy tính sang giao diện trên điện thoại đi động.
(08) 6292-0000 Hỗ trợ giờ hành chính
**NGOÀI GIỜ:**
0945.82.82.79

Cache-Control: no-cache, pre-check=0, post-check=0

Set-Cookie: nss3c_Vz5p4_nvvithemever=mQ%2C%2C; expires=Wed, 17-Oct-2018 20:04:48 GMT; Max-Age=31536000; path=/; domain=.ngoisaoso.vn; httponly

Vary: Accept-Encoding,User-Agent

Content-Language: vi


text:
– Rainstorm đã tự hào nhận được gói thầu thiết kế 3D kien truc phối cảnh và tăng cao giá trị của gói sale kit phục vụ công việc marketing bằng phim 3d kien truc. Nhà thầu MVK đã rất mãn nguyện khi nhận được giá trị hồi đáp do kết quả thực hiện được.
Đoạn phim 3d kien truc đã được yêu cầu từ chính chủ đầu tư và marketing chief phải thể hiện được lối sống mới trong khu dân cư hiện đại an ninh biệt lập, tạo được hình ảnh cuộc sống hiện đại, một phong cách sống hấp dẫn tại khu vực đầy những đồi trà thi vị, tỉnh Lâm Đồng. Đoạn phim 3D kien truc đã được Rainstorm chăm chúc thể hiện các mẫu nhà giữa những đồi thông thơ mộng, thành phố Bảo Lộc, tạo một cảm xúc se lạnh, nhộn nhịp người hoa, từ những đồi chè đi vào thành phố Bảo Lộc, con người nơi đây nhận thêm giá trị mới, một kiểu cách mới, thanh khiết và đầy những đam mê, mong muốn cuộc sống an bình phát triển cho chủ nhân tương lai tại Beacon Pass nói riêng và Lâm Đồng nói chung.
Kết hợp cùng với hình ảnh chân thật từ phim 3d kien truc, những đoạn phim quay người thật, cảnh thật (live footage) hoà quyện vào càng đem Beacon Pass gần với hiện tại hơn, như chỉ muốn sỡ hữu ngay từ khi nhìn thấy các phối cảnh 3d kien truc hay những âm thanh nhộn nhịp, thanh bình vang lên từ những hình ảnh trong phim 3d kien truc Beacon Pass.
3D Rendering on new development at Bao Loc – Lam Dong province for MVK company.
Here are some of our works similar to this type of project. Please visit.
Thành công và đạt được uy tín là đơn vị sản xuất TVC quảng cáo & thiết kế 3D kiến trúc tin cậy, Rainstorm Film được chọn một lần nữa […]
Mapletree Singapore phát triển dự án căn hộ liền kề khu thương mại Vivo SC trong quần thể phức hợp tại khu Nam Sài Gòn. Rainstorm Film thiết kế diễn họa […]
Rainstorm Film nhận được hợp đồng từ chủ đầu tư Cityland để hoàn thiện dự án làm phim kiến trúc, quảng cáo giới thiệu dự án Park Hill tại Gò […]
Rainstorm Film commits your email will not be shared. Your privacy was respected. Cheers.
© Copyright 2017 RainStormFilm. All rights reserved.
RainstormFilm Joint Stock Company
Address: 8th floor, 614-616-618, 3/2 Street, Ward 14, District 10. HCMC.
Phone: (84-028) 38 688 117 | Fax: (84-028) 38 688 114
Mobile: 0909 122 883
Email: info@vubao.com.vn
http://www.vubao.com.vn | https://www.rainstormfilm.com

Server: Apache/2.2.15 (CentOS)

Cache-Control: max-age=0, no-cache


text:
Theo thống kê của Ovum - một công ty nghiên cứu thị trường có trụ sở tại London, tỷ lệ tăng trưởng của thị trường điện thoại thông minh sẽ đạt mức trung bình 24,9% trong giai đoạn từ năm 2011 - 2017.
Adam Leach, chuyên gia phân tích tại Ovum cho biết các smartphone chạy Android sẽ là loại thiết bị thống lĩnh thị trường. Theo Adam Leach, tính đến năm 2010, các smartphone chạy Android đã chiếm 44% thị phần và sẽ tăng lên mức 48% trong năm 2017.
Xếp sau các smartphone chạy Android sẽ là điện thoại iPhone của Apple với tỷ lệ thị phần 27% trong năm 2017. Năm 2011, tỷ lệ thị phần của iPhone đã là 23%.
Adam Leach cũng đánh giá cao sự tăng trưởng của các thiết bị chạy hệ điều hành Windows Phone, dự kiến sẽ chiếm 13% thị phần tính đến năm 2017. RIM sẽ là tên tuổi đứng kế tiếp với 10% thị phần./.
Adam Leach, chuyên gia phân tích tại Ovum cho biết các smartphone chạy Android sẽ là loại thiết bị thống lĩnh thị trường. Theo Adam Leach, tính đến năm 2010, các smartphone chạy Android đã chiếm 44% thị phần và sẽ tăng lên mức 48% trong năm 2017.
Xếp sau các smartphone chạy Android sẽ là điện thoại iPhone của Apple với tỷ lệ thị phần 27% trong năm 2017. Năm 2011, tỷ lệ thị phần của iPhone đã là 23%.
Adam Leach cũng đánh giá cao sự tăng trưởng của các thiết bị chạy hệ điều hành Windows Phone, dự kiến sẽ chiếm 13% thị phần tính đến năm 2017. RIM sẽ là tên tuổi đứng kế tiếp với 10% thị phần./.

Connection: keep-alive

Cache-Control: no-cache


text:
Tổng thống Nga Vladimir Putin gặp với Thủ tướng Ấn Độ Narendra Modi bên lề Diễn đàn Kinh tế quốc tế Saint Peterburg. (Nguồn: hindustantimes.com)
Ngày 1/6, Tổng thống Nga Vladimir Putin đã có cuộc gặp với Thủ tướng Ấn Độ Narendra Modi bên lề Diễn đàn Kinh tế quốc tế Saint Peterburg.
Cuộc gặp diễn ra trong chặng dừng chân thứ 3 của ông Modi trong khuôn khổ chuyến công du bốn nước châu Âu, trong đó hai nhà lãnh đạo Nga và Ấn Độ tìm cách thúc đẩy hoạt động thương mại đang suy giảm giữa hai nước từng là đối tác chủ chốt. Thủ tướng Modi là khách mời danh dự tại Diễn đàn Kinh tế thế giới kéo dài ba ngày ở Saint Peterburg.
Tại cuộc gặp, Tổng thống Putin tuyên bố Ấn Độ sẽ chính thức trở thành thành viên của Tổ chức Hợp tác Thượng Hải (SCO) sau một tuần nữa và Nga luôn ủng hộ quyết định này.
Ông Putin cũng nhấn mạnh năm nay hai nước kỷ niệm 70 năm ngày thiết lập quan hệ ngoại giao. Theo ông, trong những năm qua, nhiều vấn đề đã xảy ra và thay đổi, nhưng điều quan trọng nhất trong lịch sử quan hệ hai nước vẫn được duy trì, đó là mối quan hệ trên cơ sở tin cậy đặc biệt giữa hai quốc gia và nhân dân hai nước.
Nhà lãnh đạo Nga cũng bày tỏ rất vui được gặp Thủ tướng Modi và thảo luận một loạt vấn đề trong quan hệ song phương.
Về phần mình, Thủ tướng Ấn Độ nhấn mạnh Ấn Độ và Nga đã thiết lập được mối quan hệ tin cậy có lịch sử lâu dài. Ông Modi cũng bày tỏ cảm ơn Tổng tống Putin đã ủng hộ tiến trình Ấn Độ gia nhập SCO. Theo Thủ tướng Modi, mối quan hệ Ấn Độ-Nga ổn định, chưa bao giờ suy giảm, New Delhi và Moskva luôn cùng nhau tiến về phía trước.
Theo kế hoạch, Ấn Độ sẽ chính thức gia nhập SCO tại hội nghị thượng đỉnh của tổ chức này dự kiến diễn ra vào đầu tháng Sáu này ở Astana (Kazakhstan). SCO hiện có các thành viên là Nga, Trung Quốc, Kazakhstan, Kyrgyzstan, Tajikistan và Uzbekistan.
Cùng ngày 1/6, Tổng thống Putin có cuộc gặp đại diện giới kinh doanh Nga và Ấn Độ trong khuôn khổ Diễn đàn Kinh tế Saint Petersburg, trong đó ông kêu gọi các doanh nghiệp Ấn Độ mở sản xuất tại Nga, bằng cách đó nâng tầm hợp tác giữa hai nước.
Tại cuộc gặp, ông Putin cũng nhấn mạnh hai nước cần hỗ trợ lẫn nhau và trao đổi công nghệ trong các lĩnh vực hai nước có khả năng cạnh tranh với nhau. Lãnh đạo Nga tin tưởng rằng khi hợp tác chặt chẽ, doanh nghiệp hai nước có khả năng tạo ra những sản phẩm mới có giá trị gia tăng cao, xây dựng được các chuỗi sản xuất, thúc đẩy được hàng hóa và dịch vụ của nhau tại thị trường các nước thứ ba.
Tồng thống Putin cho biết kim ngạch thương mại giữa Nga và Ấn Độ đã tăng lên 7,7 tỷ USD trong năm 2016 sau một số suy giảm trước đó. Ông khẳng định rằng tiếp tục tăng kim ngạch là đáp ứng lợi ích của cả hai bên.
Diễn đàn Kinh tế quốc tế Saint Petersburg lần thứ 21 diễn ra từ ngày 1-3/6 dưới chủ đề “Tìm kiếm sự cân bằng mới trong kinh tế toàn cầu”./.

markdown:
[Tổng thống Nga Vladimir Putin gặp với Thủ tướng Ấn Độ Narendra Modi bên lề Diễn đàn Kinh tế quốc tế Saint Peterburg. (Nguồn: hindustantimes.com)](https://img.vietnamplus.vn/t660/Uploaded/pcfo/2017_06_02/0206_modi_putin.jpg) ![ ](https://img.vietnamplus.vn/t660/Uploaded/pcfo/2017_06_02/0206_modi_putin.jpg)
![ ](https://img.vietnamplus.vn/t660/Uploaded/pcfo/2017_06_02/0206_modi_putin.jpg)
Ngày 1/6, Tổng thống Nga Vladimir Putin đã có cuộc gặp với Thủ tướng Ấn Độ Narendra Modi bên lề Diễn đàn Kinh tế quốc tế Saint Peterburg.
Cuộc gặp diễn ra trong chặng dừng chân thứ 3 của ông Modi trong khuôn khổ chuyến công du bốn nước châu Âu, trong đó hai nhà lãnh đạo Nga và Ấn Độ tìm cách thúc đẩy hoạt động thương mại đang suy giảm giữa hai nước từng là đối tác chủ chốt. Thủ tướng Modi là khách mời danh dự tại Diễn đàn Kinh tế thế giới kéo dài ba ngày ở Saint Peterburg.
Tại cuộc gặp, Tổng thống Putin tuyên bố Ấn Độ sẽ chính thức trở thành thành viên của Tổ chức Hợp tác Thượng Hải (SCO) sau một tuần nữa và Nga luôn ủng hộ quyết định này.
Ông Putin cũng nhấn mạnh năm nay hai nước kỷ niệm 70 năm ngày thiết lập quan hệ ngoại giao. Theo ông, trong những năm qua, nhiều vấn đề đã xảy ra và thay đổi, nhưng điều quan trọng nhất trong lịch sử quan hệ hai nước vẫn được duy trì, đó là mối quan hệ trên cơ sở tin cậy đặc biệt giữa hai quốc gia và nhân dân hai nước.
Nhà lãnh đạo Nga cũng bày tỏ rất vui được gặp Thủ tướng Modi và thảo luận một loạt vấn đề trong quan hệ song phương.
Về phần mình, Thủ tướng Ấn Độ nhấn mạnh Ấn Độ và Nga đã thiết lập được mối quan hệ tin cậy có lịch sử lâu dài. Ông Modi cũng bày tỏ cảm ơn Tổng tống Putin đã ủng hộ tiến trình Ấn Độ gia nhập SCO. Theo Thủ tướng Modi, mối quan hệ Ấn Độ-Nga ổn định, chưa bao giờ suy giảm, New Delhi và Moskva luôn cùng nhau tiến về phía trước.
Theo kế hoạch, Ấn Độ sẽ chính thức gia nhập SCO tại hội nghị thượng đỉnh của tổ chức này dự kiến diễn ra vào đầu tháng Sáu này ở Astana (Kazakhstan). SCO hiện có các thành viên là Nga, Trung Quốc, Kazakhstan, Kyrgyzstan, Tajikistan và Uzbekistan.
Cùng ngày 1/6, Tổng thống Putin có cuộc gặp đại diện giới kinh doanh Nga và Ấn Độ trong khuôn khổ Diễn đàn Kinh tế Saint Petersburg, trong đó ông kêu gọi các doanh nghiệp Ấn Độ mở sản xuất tại Nga, bằng cách đó nâng tầm hợp tác giữa hai nước.
Tại cuộc gặp, ông Putin cũng nhấn mạnh hai nước cần hỗ trợ lẫn nhau và trao đổi công nghệ trong các lĩnh vực hai nước có khả năng cạnh tranh với nhau. Lãnh đạo Nga tin tưởng rằng khi hợp tác chặt chẽ, doanh nghiệp hai nước có khả năng tạo ra những sản phẩm mới có giá trị gia tăng cao, xây dựng được các chuỗi sản xuất, thúc đẩy được hàng hóa và dịch vụ của nhau tại thị trường các nước thứ ba.
Tồng thống Putin cho biết kim ngạch thương mại giữa Nga và Ấn Độ đã tăng lên 7,7 tỷ USD trong năm 2016 sau một số suy giảm trước đó. Ông khẳng định rằng tiếp tục tăng kim ngạch là đáp ứng lợi ích của cả hai bên.
Diễn đàn Kinh tế quốc tế Saint Petersburg lần thứ 21 diễn ra từ ngày 1-3/6 dưới chủ đề “Tìm kiếm sự cân bằng mới trong kinh tế toàn cầu”./.


text:
Mùa thu nơi đâyDiệu Hương
Intro: [Am] Nhớ ôi là nhớ, khung trời xa [Dm] xưa Nhớ ôi là nhớ, con đường nên [C] thơ Nhớ ôi là nhớ, khung trời xa [Dm] xưa Nhớ ôi là nhớ, con đường nên [Am] thơ [E7] 1. Mùa [Am] thu nơi đây tôi [F] nhớ Nhớ [E7] thương thành phố xa mờ Mà [Am] bao năm qua tôi [F] đã Đi [E7] về trên những đường [Am] xưa Mùa [Dm] Thu nơi đây lạnh [G] lùng Từ [C] nay phương xa trời [E7] rộng Lòng ai có nhớ ai [F] không Còn [E7] tôi nỗi nhớ vô [Am] cùng ĐK: Mùa [F] Thu nơi xưa dịu [Dm] dàng Giờ [G] trong tôi nghe muộn [C] màng Tình [F] yêu cho anh một [B7] ngày Rồi một ngày nào đã [E7] phai Về [F] đây khi tôi ngồi [Dm] lại Niềm [G] đơn ôi còn [C] dài Từng [F] đêm xuôi vai rã [B7] rời Một [E7] đời chưa giất ngủ [Am] say 2. Mùa [Am] Thu im trong đêm [F] vắng Có [E7] ai hiểu thấu cho lòng Từ [Am] nơi con tim say [F] đắm Không [E7] còn yêu mãi ngàn [Am] năm Mùa [Dm] Thu không bao giờ [G] gần Về [C] bên tôi xin một [E7] lần Một lần thôi hết xa [F] xăm Một [E7] lần đưa thấy âm [Am] thầm Outro: [Am] Nhớ ôi là nhớ, khung trời xa [Dm] xưa Nhớ ôi là nhớ, con đường nên [C] thơ Nhớ bao ngày tháng bên đời cho [Dm] nhau Nhớ ôi [E7] nhớ, ngày [Am] xưa
Nguồn: hopamviet.vn

markdown:
# Mùa thu nơi đây
**** [Diệu Hương](/mychord/search/author/Diệu Hương)
Intro: [Am] Nhớ ôi là nhớ, khung trời xa [Dm] xưa Nhớ ôi là nhớ, con đường nên [C] thơ Nhớ ôi là nhớ, khung trời xa [Dm] xưa Nhớ ôi là nhớ, con đường nên [Am] thơ [E7] 1. Mùa [Am] thu nơi đây tôi [F] nhớ Nhớ [E7] thương thành phố xa mờ Mà [Am] bao năm qua tôi [F] đã Đi [E7] về trên những đường [Am] xưa Mùa [Dm] Thu nơi đây lạnh [G] lùng Từ [C] nay phương xa trời [E7] rộng Lòng ai có nhớ ai [F] không Còn [E7] tôi nỗi nhớ vô [Am] cùng ĐK: Mùa [F] Thu nơi xưa dịu [Dm] dàng Giờ [G] trong tôi nghe muộn [C] màng Tình [F] yêu cho anh một [B7] ngày Rồi một ngày nào đã [E7] phai Về [F] đây khi tôi ngồi [Dm] lại Niềm [G] đơn ôi còn [C] dài Từng [F] đêm xuôi vai rã [B7] rời Một [E7] đời chưa giất ngủ [Am] say 2. Mùa [Am] Thu im trong đêm [F] vắng Có [E7] ai hiểu thấu cho lòng Từ [Am] nơi con tim say [F] đắm Không [E7] còn yêu mãi ngàn [Am] năm Mùa [Dm] Thu không bao giờ [G] gần Về [C] bên tôi xin một [E7] lần Một lần thôi hết xa [F] xăm Một [E7] lần đưa thấy âm [Am] thầm Outro: [Am] Nhớ ôi là nhớ, khung trời xa [Dm] xưa Nhớ ôi là nhớ, con đường nên [C] thơ Nhớ bao ngày tháng bên đời cho [Dm] nhau Nhớ ôi [E7] nhớ, ngày [Am] xưa
Nguồn: hopamviet.vn

Cache-Control: max-age=0, private, must-revalidate

X-XSS-Protection: 1; mode=block

X-Content-Type-Options: nosniff

X-Powered-By: Phusion Passenger 5.1.8

Server: nginx + Phusion Passenger 5.1.8


text:
Quên Người Đã Quá YêuHà Duy Thái
[C]Đã Quá xa [D]vời con đường anh [Bm]đi giờ đây đã vắng [Em]bóng một người Mình anh [C]bước anh bước trên cô [D]đơn từng giọt nước [Bm]mắt anh rơi bao [Em]ngày Chỉ muốn nói [C]yêu lắm yêu em yêu nhiều [D]lắm nhưng anh không thể Giữ được [Bm]hết tất cả yêu thương như ngày [Em]xưa Dấu biết em [Em]xa lắm xa em xa nhiều [D]lắm xa anh trọn kiếp Bời vì [Bm]hai chúng ta không thuộc về [Em]nhau !! ĐK: Anh muốn xóa đi [C]hết tất cả kỉ niêm [D]buồn trong anh Mặc Dù em [Bm]ơi anh đang chơi vơi giữa dòng [Em]đời Vì cứ nhớ mãi một [C]người đã quá xa [D]vời Yêu thêm cho con tim [Bm]anh trở nên lạc [Em]lối! Anh muốn xóa [C]hết tất cả bao hy [D]vọng trong anh Mặc dù con [Bm]tim anh đang trở nên rất rối [Em]bời Vì phải cố quên một [C]người đã quá yêu [D]rồi Nhưng em [Bm]ơi anh không tim ra [Em]lối!!
Nguồn: hopamchuan.com

markdown:
# Quên Người Đã Quá Yêu
**** [Hà Duy Thái](/mychord/search/author/Hà Duy Thái)
[C]Đã Quá xa [D]vời con đường anh [Bm]đi giờ đây đã vắng [Em]bóng một người Mình anh [C]bước anh bước trên cô [D]đơn từng giọt nước [Bm]mắt anh rơi bao [Em]ngày Chỉ muốn nói [C]yêu lắm yêu em yêu nhiều [D]lắm nhưng anh không thể Giữ được [Bm]hết tất cả yêu thương như ngày [Em]xưa Dấu biết em [Em]xa lắm xa em xa nhiều [D]lắm xa anh trọn kiếp Bời vì [Bm]hai chúng ta không thuộc về [Em]nhau !! ĐK: Anh muốn xóa đi [C]hết tất cả kỉ niêm [D]buồn trong anh Mặc Dù em [Bm]ơi anh đang chơi vơi giữa dòng [Em]đời Vì cứ nhớ mãi một [C]người đã quá xa [D]vời Yêu thêm cho con tim [Bm]anh trở nên lạc [Em]lối! Anh muốn xóa [C]hết tất cả bao hy [D]vọng trong anh Mặc dù con [Bm]tim anh đang trở nên rất rối [Em]bời Vì phải cố quên một [C]người đã quá yêu [D]rồi Nhưng em [Bm]ơi anh không tim ra [Em]lối!!
Nguồn: hopamchuan.com