text:
Hướng dẫn fix lỗi không xem được "Error loading media": Xem tại đây
Tắt Đèn
Phóng To
Click để gửi tin nhắn về phim cho bạn bè trong messages.
- Để Download phim bằng IDM, bạn nhớ active tiện ích IDM CC trên Google Chrome.
- Khi xem phim, bạn vui lòng khoảng chờ 3s-5s và bấm để bỏ qua nhanh quảng cáo.
- » [Từ 11/11/2013] Phim14.NET hỗ trợ xem phim trên các dòng điện thoại iOS, Android...tại địa chỉ: M.PHIM14.NET.
- » Hãy PAUSE (tạm dừng) 30s Nếu xem phim bị giật.
Phim14 FacebookBình luận phim
Các link phim bị die/chết link... đang được sửa lỗi liên tục nhé các bạn..
Phim liên quan
-
Cuộc Đối Đầu ... (2014)ResetFull 10/10
-
Nông Dân Hiện Đại (2014)Modern Farmer Lee Hong KiFull 20/20 VIETSUB
-
Tiếng Hát Trước ... (2014)Rockin' On Heaven's DoorHD
-
Anh Chàng Xúi Quẩy (2015)My Unfortunate BoyfriendFull 16/16 VIETSUB
-
Hoa Cải Vàng (2016)CanolaHD VIETSUB

markdown:
Hướng dẫn fix lỗi không xem được "Error loading media":
[Xem tại đây](http://phim14.net/ads/guide/huong-dan-fix-loi-play-phim14.html)
Tắt Đèn
Phóng To
Click để gửi tin nhắn về phim cho bạn bè trong messages.
-
**Để Download phim bằng IDM, bạn nhớ active tiện ích IDM CC trên Google Chrome.**
-
**Khi xem phim, bạn vui lòng khoảng chờ 3s-5s và bấm**
để bỏ qua nhanh quảng cáo.
- » [Từ 11/11/2013] Phim14.NET hỗ trợ xem phim trên các dòng điện thoại iOS, Android...tại địa chỉ: M.PHIM14.NET.
- » Hãy PAUSE (tạm dừng) 30s Nếu xem phim bị giật.
Phim14 FacebookBình luận phim
Các link phim bị die/chết link... đang được sửa lỗi liên tục nhé các bạn..
Phim liên quan
-
[Cuộc Đối Đầu ... (2014)](http://phim14.net/phim/cuoc-doi-dau-ngoan-muc_reset.6895.html)ResetFull 10/10
-
[Nông Dân Hiện Đại (2014)](http://phim14.net/phim/nong-dan-hien-dai_modern-farmer-lee-hong-ki.7323.html)Modern Farmer Lee Hong KiFull 20/20 VIETSUB
-
[Tiếng Hát Trước ... (2014)](http://phim14.net/phim/tieng-hat-truoc-cua-thien-duong_rockin-on-heaven-s-door.7822.html)Rockin' On Heaven's DoorHD
-
[Anh Chàng Xúi Quẩy (2015)](http://phim14.net/phim/anh-chang-xui-quay_my-unfortunate-boyfriend.7954.html)My Unfortunate BoyfriendFull 16/16 VIETSUB
-
[Hoa Cải Vàng (2016)](http://phim14.net/phim/hoa-cai-vang_canola.8620.html)CanolaHD VIETSUB

WARC-Type: response

Content-Type: application/http; msgtype=response

Connection: close

Server: cloudflare-nginx

X-Cache: MISS

Vary: Accept-Encoding

Content-Type: text/html; charset=utf-8


text:
4107 Lượt Xem
Trọn BộTình Cảm Võ Thuật Phim Bộ TVB
Diễn viên: Hồ Ca,Hà Nhuận Đông,Bành Vu Yến,Viên Hoằng
Quốc gia: Trung Quốc
Thời lượng: 43 Tập
Năm phát hành: 2006
Phim Thiếu Niên Dương Gia Tướng Phim Thiếu Niên Dương Gia Tướng Trọn Bộ 43 Tập,Thuyết Minh,Phim TVB,Phim Hong Kong.Không lập lại mô típ kịch bản của các bản phim trước ,Dương Gia Tướng khai thác quá trình trưởng thành của 7 người con nhà họ Dương,bên cạnh những chiến công lẫy lừng của từng người là những mâu thuẫn trong thế giới tình cảm của họ ,bao gồm tình thân ,tình yêu và tình bạn.Câu chuyện bắt đầu từ giai đoạn Dương gia quy thuận Tống triều và số phận của những vị tướng trẻ tuổi đầy nhiệt huyết này đã kết thúc trong trận chiến Kim Sa .
Xem Phim Thiếu Niên Dương Gia Tướng Thieu Nien Duong Gia Tuong
Tập 1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30, tập cuối và trọn bộ. Chúc các bạn xem phim Thiếu Niên Dương Gia Tướng vui vẻ.

markdown:
4107 Lượt Xem
Trọn Bộ
[Tình Cảm](http://phim8.org/the-loai-phim-tinh-cam_3/page-1.html) [Võ Thuật ](http://phim8.org/the-loai-phim-vo-thuat_2/page-1.html) [Phim Bộ TVB](http://phim8.org/the-loai-phim-phim-bo-tvb_38/page-1.html)
Diễn viên: Hồ Ca,Hà Nhuận Đông,Bành Vu Yến,Viên Hoằng
Quốc gia:
[Trung Quốc](http://phim8.org/quoc-gia-trung-quoc_4/page-1.html)
Thời lượng: 43 Tập
Năm phát hành: 2006
[ Phim Thiếu Niên Dương Gia Tướng Trọn Bộ 43 Tập,Thuyết Minh,Phim TVB,Phim Hong Kong.Không lập lại mô típ kịch bản của các bản phim trước ,Dương Gia Tướng khai thác quá trình trưởng thành của 7 người con nhà họ Dương,bên cạnh những chiến công lẫy lừng của từng người là những mâu thuẫn trong thế giới tình cảm của họ ,bao gồm tình thân ,tình yêu và tình bạn.Câu chuyện bắt đầu từ giai đoạn Dương gia quy thuận Tống triều và số phận của những vị tướng trẻ tuổi đầy nhiệt huyết này đã kết thúc trong trận chiến Kim Sa . Phim Thiếu Niên Dương Gia Tướng](http://phim8.org/phim/thieu-nien-duong-gia-tuong-thieu-nien-duong-gia-tuong-2006/m8525.html)
Xem Phim
[ Thieu Nien Duong Gia Tuong Thiếu Niên Dương Gia Tướng](http://phim8.org/phim/thieu-nien-duong-gia-tuong-thieu-nien-duong-gia-tuong-2006/m8525.html)

Pragma: no-cache

Cache-Control: no-store, no-cache, must-revalidate, post-check=0, pre-check=0

Vary: Accept-Encoding,User-Agent

Content-Type: text/html; charset=UTF-8


text:
Phim8k.Net
Trang chủ
Thể loại
Phim 18+
Phim Hành Động
Phim Viễn Tưởng
Phim Chiến Tranh
Phim Hình Sự
Phim Phiêu Lưu
Phim Hài Hước
Phim Võ Thuật
Phim Hoạt Hình
Phim Kinh Dị
Phim Thần Thoại
Phim Tâm Lý
Phim Âm Nhạc
Phim Tình Cảm
Phim Tội Phạm
TV - Show
Quốc gia
Việt Nam
Trung Quốc
Mỹ
Hàn Quốc
Nhật Bản
Hồng Kông
Ấn Độ
Thái Lan
Đài Loan
Pháp
Xem phim mới
Phim 2017
Phim 2016
Phim 2015
Phim 2014
Phim 2013
Phim 2012
Phim 2011
Phim 2010
Phim 2009
Phim 2008
Phim 2007
Phim 2006
Phim 2005
Phim 2004
Phim 2003
Phim 2002
Phim 2001
Phim 2000
Phim 1999
Phim 1998
Phim 1997
Phim 1996
Phim lẻ
Phim lẻ 2017
Phim lẻ 2016
Phim lẻ 2015
Phim lẻ 2014
Phim lẻ 2013
Phim lẻ 2012
Phim lẻ 2011
Phim lẻ 2010
Phim lẻ 2009
Phim lẻ 2008
Phim lẻ 2007
Phim lẻ 2006
Phim lẻ 2005
Phim lẻ 2004
Phim lẻ 2003
Phim lẻ 2002
Phim lẻ 2001
Phim lẻ 2000
Phim bộ
Phim chiếu rạp
Diễn Viên
Hài Tết
Hài Tết 2017
Hài Tết 2016
Trang chủ
Diễn viên
James Durham
James Durham
Tên khác:
Ngày sinh:
Nghề nghiệp:
Diễn viên
Quốc gia:
Chiều cao:
Cân nặng:
Chưa có thông tin
Nhóm máu:
Chưa có thông tin
Ngôn ngữ:
Chưa có thông tin
Sở trường:
Chưa có thông tin
Sở thích:
Chưa có thông tin
Tiểu sử
Một số phim đã tham gia
Phim8k.Net
Trailer phim mới
Người Nhện: Về Nhà
Spider-man: Homecoming
Lượt xem: 6655
Thần Sấm 3: Thời Khắc Tận Thế
Thor 3: Ragnarok
Lượt xem: 6548
Điệp Viên Xxx 3: Xxx Phản Đòn
Xxx 3: The Return Of Xander Cage
Lượt xem: 8964
Nữ Siêu Nhân
Wonder Woman
Lượt xem: 34054
Liên Minh Công Lý
Justice League
Lượt xem: 18176
Hộ Vệ
Guardians (zashchitniki)
Lượt xem: 7171
Vùng Đất Quỷ Dữ 6
Resident Evil 6: The Final Chapter
Lượt xem: 6381
Chiếc Xe Tải Quái Vật
Monster Trucks
Lượt xem: 4456
Phù Thủy Tối Thượng
Dr. Strange
Lượt xem: 3975
Stonewall
Stonewall
Lượt xem: 3720
Phim xem nhiều trong ngày
Nhân Viên Massage
The Masseurs
Lượt xem: 2639
Love Is Dead
Love Is Dead
Lượt xem: 1997
Newlyweds Voyeurism
Newlyweds Voyeurism
Lượt xem: 1562
Tân Kim Bình Mai 3d
Tan Kim Binh Mai 3d
Lượt xem: 1243
Erotic Agent Ii
Erotic Agent Ii
Lượt xem: 1204
Gia Đình Sung Sướng
Family Reconstruction
Lượt xem: 977
Tiger Women
Tiger Women
Lượt xem: 969
Người Phụ Nữ Sống Buông Thả
Loose Women
Lượt xem: 927
Mẹ Kế 1
Jan Dara 1: The Beginning
Lượt xem: 895
Người Yêu Cũ
Our Ex-girlfriend
Lượt xem: 872
Phim lẻ hot trong tuần
Nhân Viên Massage
The Masseurs
Lượt xem: 54034
Love Is Dead
Love Is Dead
Lượt xem: 33847
Newlyweds Voyeurism
Newlyweds Voyeurism
Lượt xem: 27782
Tân Kim Bình Mai 3d
Tan Kim Binh Mai 3d
Lượt xem: 1530908
Erotic Agent Ii
Erotic Agent Ii
Lượt xem: 22080
Gia Đình Sung Sướng
Family Reconstruction
Lượt xem: 19386
Tiger Women
Tiger Women
Lượt xem: 21694
Người Phụ Nữ Sống Buông Thả
Loose Women
Lượt xem: 18705
Mẹ Kế 1
Jan Dara 1: The Beginning
Lượt xem: 16296
Người Yêu Cũ
Our Ex-girlfriend
Lượt xem: 55566
Phim bộ hot trong tuần
Bậc Thầy Tình Dục Phần 1
Masters of Sex Season 1
Lượt xem: 17088
7 Viên Ngọc Rồng - Dragon Ball
Dragon Ball
Lượt xem: 26532
Khoai To (phần 2)
Hung Season 2
Lượt xem: 113812
7 Viên Ngọc Rồng - Dragon Ball Z
Dragon Ball Z
Lượt xem: 20043
Doraemon Phần Mới
Doraemon New Series
Lượt xem: 6843
Truyền Thuyết Ju Mông
Jumong
Lượt xem: 43003
Vua Trò Chơi Phần 4
Yu-gi-oh! Zexal
Lượt xem: 22592
Hội Pháp Sư 2
Fairy Tail 2
Lượt xem: 13444
Khoai To (phần 1)
Hung (season 1)
Lượt xem: 169285
Nhất Đại Võ Thần
God Of War
Lượt xem: 50909

WARC-Truncated: length

X-XSS-Protection: 1; mode=block

X-Content-Type-Options: nosniff

X-Frame-Options: SAMEORIGIN


text:
© Copyright 2016 PhimChatLuong.com, All rights reserved.
® Mọi VIDEO đều được tải về từ các site chia sẻ video khác. PhimChatLuong không giữ bản quyền nội dung trên website này.
Đang online:
Liên kết:
Troublesome Night 3 (1998)
Đạo diễn:
Diễn viên: Louis Koo, Fennie Yuen, Simon Lui
Thể loại: Kinh Dị - Ma, Hài Hước
Quốc gia: Trung Quốc
Nhà sản xuất: N/A
Năm sản xuất: 1998
Share NGAY để ủng hộ người upload!
Tập: 1-End
Chúc mừng bạn đã đăng Ký thành công, một email xác nhận đã được gửi tới email bạn vừa đăng ký, vui lòng kiểm tra trong spam email hoặc hộp thư đến, hoặc click vào đây để đăng nhập!
Thông tin của bạn đã được cập nhật thành công. Chúng tôi sẽ gửi lại mật khẩu mới cho bạn thông qua email này. Xin cảm ơn!
Comments • 0

markdown:
© Copyright 2016 PhimChatLuong.com, All rights reserved.
® Mọi VIDEO đều được tải về từ các site chia sẻ video khác. PhimChatLuong không giữ bản quyền nội dung trên website này.
Đang online:
Liên kết:
Troublesome Night 3 (1998)
Đạo diễn:
Diễn viên:
[Louis Koo](http://phimchatluong.com/dien-vien/louis-koo), [Fennie Yuen](http://phimchatluong.com/dien-vien/fennie-yuen), [Simon Lui](http://phimchatluong.com/dien-vien/simon-lui)
Thể loại:
[Kinh Dị - Ma](http://phimchatluong.com/the-loai/kinh-di-ma), [Hài Hước](http://phimchatluong.com/the-loai/hai-huoc)
Quốc gia:
[Trung Quốc](http://phimchatluong.com/quoc-gia/trung-quoc)
Nhà sản xuất:
[N/A](http://phimchatluong.com/nha-san-xuat/N/A)
Năm sản xuất: 1998
Share NGAY để ủng hộ người upload!
**Tập:**
[1-End](http://phimchatluong.com/xem/am-duong-lo-3-troublesome-night-3-1998.html/tap-1-End)
Chúc mừng bạn đã đăng Ký thành công,
một email xác nhận đã được gửi tới email bạn vừa đăng ký,
vui lòng kiểm tra trong spam email hoặc hộp thư đến, hoặc click
[vào đây](http://phimchatluong.com?login=1) để đăng nhập!
Thông tin của bạn đã được cập nhật thành công. Chúng tôi sẽ gửi lại mật khẩu mới cho bạn thông qua email này. Xin cảm ơn!
## Comments • 0

Server: CZ

Cache-Control: no-cache

Access-Control-Allow-Headers: Origin, Content-Type

Accept-Ranges: bytes


markdown:
[Sex Nhat](http://phimsexporn.com/phim-sex-nhat-ban/)| [Xvideos](http://phimsexporn.com/xvideos-com-phim-sex-lam-tinh-khong-che-full-hd.html)| [XxX](http://phimsexporn.com/phim-xxx-tokyo-nhat-ban.html)
Phim 2 chàng trai thay phiên nhau đụ cô gái bé nhỏ trắng trẻo với cái lồn đã sạch lông này và khi đã tới độ sướng và lên đỉnh thì 2 người này cũng cùng nhau bắn những giọt tinh trùng vào lồn của em mà không cần nghĩ ngợi gì nhiều bởi vì em có lẽ đã uống thuốc ngừa thai trước khi tham gia những bộ phim sex như thế này.

Set-Cookie: __cfduid=dcb18a5745f39dfcb5bcd0c2242553a581487563000; expires=Tue, 20-Feb-18 03:56:40 GMT; path=/; domain=.phimsexporn.com; HttpOnly

X-Powered-By: VPSSIM

Pragma: public

Cache-Control: max-age=86400, public


text:
Thanhxa77 - Phim Thái Lan
Các bạn có thể xem phim Thái Lan - update hàng ngày tại địa chỉ: http://thanhxa77.blogspot.com
Thứ Tư, 7 tháng 9, 2011
Tình Nồng - ( Người tình Chocolate)
DOWNLOAD LINK folder:
http://www.megaupload.com/?d=5R10JHAE
http://vietsn.com/forum/showthread.php?t=70655
Được đăng bởi
thanhxa
vào lúc
17:52
Gửi email bài đăng này
BlogThis!
Chia sẻ lên Twitter
Chia sẻ lên Facebook
Chia sẻ lên Pinterest
Nhãn:
Phim bộ TQ
Không có nhận xét nào:
Đăng nhận xét
Bài đăng Mới hơn
Bài đăng Cũ hơn
Trang chủ
Đăng ký:
Đăng Nhận xét (Atom)
Không có nhận xét nào:
Đăng nhận xét

markdown:
Thanhxa77 - Phim Thái Lan
Các bạn có thể xem phim Thái Lan - update hàng ngày tại địa chỉ: http://thanhxa77.blogspot.com
Thứ Tư, 7 tháng 9, 2011
Tình Nồng - ( Người tình Chocolate)
DOWNLOAD LINK folder:
http://www.megaupload.com/?d=5R10JHAE
http://vietsn.com/forum/showthread.php?t=70655
Được đăng bởi
thanhxa
vào lúc
17:52
Gửi email bài đăng này
BlogThis!
Chia sẻ lên Twitter
Chia sẻ lên Facebook
Chia sẻ lên Pinterest
Nhãn:
Phim bộ TQ
Không có nhận xét nào:
Đăng nhận xét
Bài đăng Mới hơn
Bài đăng Cũ hơn
Trang chủ
Đăng ký:
Đăng Nhận xét (Atom)
## Không có nhận xét nào:
## Đăng nhận xét

Server: GSE

Cache-Control: private, max-age=0


text:
Xem Phim Sex XNXX Mới Nhất Tại HaPhimSex.Com
Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp
Em gái xinh đẹp Akari Hoshino đang đi dạo ngoài phố thì bỗng nhiên một nhóm thanh niên lại gần bắt cóc em ấy và lôi vào một nơi hoang vu để hiếp dâm tập thể luôn. Thấy mệt mệt chắc do lâu mình không vận động thì phải chắc cần phải ra ngoài hít thở không khí một chút lấy lại tinh thần, và đương nhiên là khi viết song câu chuyện này mình sẽ chuẩn bị dày dép khăn tập và đi ra phòng tập để xả hơi , trước thì có thằng em hay đi tập cùng hai anh em vừa đi đường vừa nói chuyện vui lắm nhưng giờ chuyển đến nơi ở mới người mới bạn mới cái gì nó cũng mới thế lên đành tự thích nghi thôi
Phim sex hay Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp. cả ngày ngồi trong nhà không giao tiếp với bên ngoài chắc mình cũng xắp điên mất chính vì thế cần phải kiếm cái gì đó để xả mới được , càng lớn áp lực về kình tế khiến mình càng mỏi mệt không biết phải làm sao bây giờ , người thì cứ lả ra không khí thì ngột ngạt cơ thế thì đau yếu , phải chăng mình đã già đó chính là suy nghĩ của bản thân nhưng làm gì có chuyện đó , mình không cho phép mình được gục ngã , phải cố gắng và cố gắng hơn nữa , thời gian này tuy vất vả và thời gian sau cũng thế nhưng cần phải có lòng tin vào một ngày mai tươi sáng chứ đúng không các bạn thân yêu ……… giờ thì xem phim sex Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp
(22938)
Comments are closed.

markdown:
## Xem Phim Sex
Mới Nhất Tại HaPhimSex.Com XNXX [XNXX](http://phimxemsex.com/category/xnxx) ![]( http://i.imgur.com/R0OhYuz.jpg)
![]( http://i.imgur.com/R0OhYuz.jpg)
![]( http://i.imgur.com/GN9sIsL.jpg)
![]( http://i.imgur.com/GN9sIsL.jpg)
## Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp
Em gái xinh đẹp
**Akari Hoshino** đang đi dạo ngoài phố thì bỗng nhiên một nhóm thanh niên lại gần bắt cóc em ấy và lôi vào một nơi hoang vu để [hiếp dâm](http://phimxemsex.com/category/hiep-dam) tập thể luôn. Thấy mệt mệt chắc do lâu mình không vận động thì phải chắc cần phải ra ngoài hít thở không khí một chút lấy lại tinh thần, và đương nhiên là khi viết song câu chuyện này mình sẽ chuẩn bị dày dép khăn tập và đi ra phòng tập để xả hơi , trước thì có thằng em hay đi tập cùng hai anh em vừa đi đường vừa nói chuyện vui lắm nhưng giờ chuyển đến nơi ở mới người mới bạn mới cái gì nó cũng mới thế lên đành tự thích nghi thôi ![ Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp](http://phimxemsex.com/wp-content/uploads/2016/11/hiepdamtapthe.jpg)
Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp
**Phim sex hay Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp**. cả ngày ngồi trong nhà không giao tiếp với bên ngoài chắc mình cũng xắp điên mất chính vì thế cần phải kiếm cái gì đó để xả mới được , càng lớn áp lực về kình tế khiến mình càng mỏi mệt không biết phải làm sao bây giờ , người thì cứ lả ra không khí thì ngột ngạt cơ thế thì đau yếu , phải chăng mình đã già đó chính là suy nghĩ của bản thân nhưng làm gì có chuyện đó , mình không cho phép mình được gục ngã , phải cố gắng và cố gắng hơn nữa , thời gian này tuy vất vả và thời gian sau cũng thế nhưng cần phải có lòng tin vào một ngày mai tươi sáng chứ đúng không các bạn thân yêu ……… giờ thì xem phim sex *Bắt cóc rồi hiếp dâm em Akari Hoshino xinh đẹp*
(22938)
Comments are closed.

Set-Cookie: __cfduid=ddc024c51fd88612909cefe2fc35fd7711487564181; expires=Tue, 20-Feb-18 04:16:21 GMT; path=/; domain=.phimxemsex.com; HttpOnly

X-Cache-Hit: HIT

X-Cache: cached

Vary: Accept-Encoding, User-Agent


text:
Ảnh girl xinh - Bikini Châu Á
Hình Bikini, ảnh girl xinh, nội y Châu Á, Bikini Nhật Bản, Hàn Quốc, Trung Quốc, Sexy girl Châu Á 18+
Trang 1 của 45 trang
Tùy chọn hiển thị chủ đề
Đang tải...
Trang 1 của 45 trang
Hình Bikini, ảnh girl xinh, nội y Châu Á, Bikini Nhật Bản, Hàn Quốc, Trung Quốc, Sexy girl Châu Á 18+

markdown:
# Ảnh girl xinh - Bikini Châu Á
Hình Bikini, ảnh girl xinh, nội y Châu Á, Bikini Nhật Bản, Hàn Quốc, Trung Quốc, Sexy girl Châu Á 18+
Trang 1 của 45 trang
[Tùy chọn hiển thị chủ đề](#)
Đang tải...
Trang 1 của 45 trang
Hình Bikini, ảnh girl xinh, nội y Châu Á, Bikini Nhật Bản, Hàn Quốc, Trung Quốc, Sexy girl Châu Á 18+

Server: Apache


text:
- Hoạt động cuối:
- 24 Tháng sáu 2014
- Tham gia ngày:
- 24 Tháng sáu 2014
- Bài viết:
- 1
- Đã được thích:
- 0
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 1 Tháng hai 1996 (Age: 21)
Chia sẻ trang này
emtraihaimuoi
Thành viên mới, Nam, 21
- emtraihaimuoi được nhìn thấy lần cuối:
- 24 Tháng sáu 2014
-
- Đang tải...
-
Giới thiệu
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 1 Tháng hai 1996 (Age: 21)
- Hôn nhân:
- Bí mật
Tương tác

markdown:
![ emtraihaimuoi](http://phunuvn.net/data/avatars/l/59/59512.jpg?1403593158)
- Hoạt động cuối:
- 24 Tháng sáu 2014
- Tham gia ngày:
- 24 Tháng sáu 2014
- Bài viết:
- 1
- Đã được thích:
- 0
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 1 Tháng hai 1996 (Age: 21)
### Chia sẻ trang này
# emtraihaimuoi
Thành viên mới, Nam, 21
- emtraihaimuoi được nhìn thấy lần cuối:
- 24 Tháng sáu 2014
-
- Đang tải...
-
### Giới thiệu
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 1 Tháng hai 1996 (Age: 21)
- Hôn nhân:
- Bí mật
### Tương tác


text:
BẾN TRE Bến Tre Xưởng May Áo Gió Đồng Phục,áo Thun Đồng Phục Cực Rẻ
Thảo luận trong 'Rao vặt tổng hợp' bắt đầu bởi dongphuckhangthinh, 17 Tháng bảy 2014. 0 Trả lời, 366 Đọc
Bài viết tương tự
Thảo luận trong 'Rao vặt tổng hợp' bắt đầu bởi dongphuckhangthinh, 17 Tháng bảy 2014. 0 Trả lời, 366 Đọc

markdown:
# BẾN TRE Bến Tre Xưởng May Áo Gió Đồng Phục,áo Thun Đồng Phục Cực Rẻ
Thảo luận trong '
[Rao vặt tổng hợp](forums/rao-vat/)' bắt đầu bởi [dongphuckhangthinh](members/dongphuckhangthinh.61784/), [17 Tháng bảy 2014](threads/ben-tre-xuong-may-ao-gio-dong-phuc-ao-thun-dong-phuc-cuc-re.53582/).
0 Trả lời, 366 Đọc
Bài viết tương tự
|Tiêu đề||Date|
|
|
Thảo luận trong '
[Rao vặt tổng hợp](forums/rao-vat/)' bắt đầu bởi [dongphuckhangthinh](members/dongphuckhangthinh.61784/), [17 Tháng bảy 2014](threads/ben-tre-xuong-may-ao-gio-dong-phuc-ao-thun-dong-phuc-cuc-re.53582/).
0 Trả lời, 366 Đọc
|Tiêu đề||Date|
|
|


text: [TABLE="width: 100%, align: center"] [TABLE="width: 100%"] [TD="width: 36%, align: right"] Loại sản phẩm [TD="width: 1%, align: center"] : [TD="width: 54%"] Hải sâm [TD="width: 36%, align: right"] Tên sản phẩm [TD="width: 1%, align: center"] : [TD="width: 54%"] Hải sâm [TD="width: 36%, align: right"] Giá bán [TD="width: 1%, align: center"] : [TD="width: 54%"] 280,000 VNĐ [TD="colspan: 3"] Thông tin mô tả [TABLE="width: 98%"] Hải sâm Hai bên bao trùm cả hình dạng ngoài và cấu tạo của nhiều cơ quan bên trong. Cơ thể Hải sâm giống như quả dưa chuột, trung bình dài 20cm, da sần sùi, hơi nhám và mềm nhũn. Hải sâm di chuyển trên một mặt bên nên trục cơ thể nằm ngang khi vận chuyển. Theo chiều dọc trên cơ thể có thể phân biệt Ở Việt Nam, Nhật Bản, Trung Quốc và nhiều nước khác, Hải sâm từ lâu đã là món ăn quí. Vì thế mà nó được liệt vào ngang hàng với Sâm, thuộc (sơn hào hải vị) bổ, dùng cho giai cấp quí tộc thời phong kiến. Trên thị trường Hải sâm được bán dưới dạng khô và đã bỏ hết ruột. Ngày nay là loài xuất khẩu đắt tiền. CÔNG TY CP XNK HẢI SẢN NHA TRANG Văn phòng chính : 122 Bạch Đằng, Quận Tân Bình, TPHCM ĐT : (+ 84 8) 62 767 248 Liên hệ : Định Mobile : 0988 888 722


text:
Tại Villa Park Quận 9 , ban công là nơi bạn có thể tận hưởng khí trời trong sạch , hòa nhập với tự nhiên . Nhưng ít ai biết rằng đây còn là nơi đón nhận vượng khí. Việc sắp xếp ban công hợp phong thủy không chỉ mang đến một sức khỏe dồi dào mà còn mang đến nhiều tài lộc.
Điểm thêm màu sắc cho ban công tại Villa Park Quận 9
Mỗi căn hộ tại du an Villa Park Quận 9 đều được Xếp đặt một ban công để gia chủ có thể tận hưởng tự nhiên , hít thở khí trời trong sạch và đón nhận ánh sáng. Để phát huy rỏ rành hiệu lực của ban công , bạn nên đặt vài chậu cây cảnh hoặc hoa thơm có mùi hương dễ chịu , hay một chậu cá nhỏ cũng làm gia tăng sự hưng vượng cho căn nhà. Rất nhiều loại cây cảnh bạn có thể trồng như: Phát tài , xương rồng , tử quy , phong lan hay hoa hồng. Đó là những loại cây ưa ánh sáng và có sinh khí mãnh liệt.
Xếp đặt đồ đạc có lí tại ban công Villa Park Quận 9
Tận dụng ban công tại dự án Park Riverside Quận 9 làm nơi uống trà hoặc Đánh đàn vào mỗi buổi chiều là một ý tưởng tót vời. Bạn nên chú ý giữ cho ban công luôn khô thoáng , sạch sẽ. Việc giữ ban công thoáng mát được xem là cách mang lại sự thư thái trong tâm hồn. Bàn trà nên đặt vào hướng Đông sẽ hanh thông , giúp tình cảm gia đình tốt đẹp.
có thể Xếp đặt nơi uống trà tại ban công
Buổi tối đầm ấm trên ban công Villa Park Quận 9
trang trí thêm đèn tại ban công giúp tăng vượng khí
Buổi tối trên ban công Villa Park Quận 9 cùng tách cà phê nóng chuyện trò bên cạnh người nhà sẽ giúp bạn nghỉ ngơi triệt để. Sự góp mặt của ánh sáng trên ban công sẽ là Người phụ giúp đắc lực cho một buổi tối văn hoa đầy cảm xúc. Ví như bạn quan hoài đến cảnh trí trên ban công , có thể tr a n g trí thêm đèn treo tường , đèn chụp ở một góc ban công làm tăng tính nghệ thuật. Một không gian đầy đủ ánh sáng sẽ nhận được nhiều vận khí tốt hơn. Bạn nên quan hoài đến việc Xếp đặt nguồn sáng phù hợp cho ban công thêm sáng sủa.
Ngoài ra ở cùng phân khúc căn hộ cao cấp, dự án Tháp Mười Merita Khang Điền quận 9 đang mở bán mạnh. Bạn có thể tham khảo thêm thông tin về dự án Tháp Mười Merita Khang Điền quận 9 tại : http://bit.ly/2ddKy2F
Leave a Comment

markdown:
*Tại Villa Park Quận 9 , ban công là nơi bạn có thể tận hưởng khí trời trong sạch , hòa nhập với tự nhiên * *. Nhưng ít ai biết rằng đây còn là nơi đón nhận vượng khí. Việc sắp xếp ban công hợp phong thủy không chỉ mang đến một sức khỏe dồi dào mà còn mang đến nhiều tài lộc. * **Điểm thêm màu sắc cho ban công tại Villa Park Quận 9 **
Mỗi căn hộ tại
** Quận 9 đều được Xếp đặt một ban công để gia chủ có thể tận hưởng tự nhiên , hít thở khí trời trong sạch và đón nhận ánh sáng. Để phát huy rỏ rành hiệu lực của ban công , bạn nên đặt vài chậu cây cảnh hoặc hoa thơm có mùi hương dễ chịu , hay một chậu cá nhỏ cũng làm gia tăng sự hưng vượng cho căn nhà. Rất nhiều loại cây cảnh bạn có thể trồng như: Phát tài , xương rồng , tử quy , phong lan hay hoa hồng. Đó là những loại cây ưa ánh sáng và có sinh khí mãnh liệt. du an Villa Park**
**Xếp đặt đồ đạc có lí tại ban công Villa Park Quận 9 **
Tận dụng ban công tại
[dự án Park Riverside Quận 9](http://parkriversides.vn/du-an-park-riverside-quan-9) làm nơi uống trà hoặc Đánh đàn vào mỗi buổi chiều là một ý tưởng tót vời. Bạn nên chú ý giữ cho ban công luôn khô thoáng , sạch sẽ. Việc giữ ban công thoáng mát được xem là cách mang lại sự thư thái trong tâm hồn. Bàn trà nên đặt vào hướng Đông sẽ hanh thông , giúp tình cảm gia đình tốt đẹp. *có thể Xếp đặt nơi uống trà tại ban công * **Buổi tối đầm ấm trên ban công Villa Park Quận 9 ** *trang trí thêm đèn tại ban công giúp tăng vượng khí *
Buổi tối trên ban công Villa Park Quận 9 cùng tách cà phê nóng chuyện trò bên cạnh người nhà sẽ giúp bạn nghỉ ngơi triệt để. Sự góp mặt của ánh sáng trên ban công sẽ là Người phụ giúp đắc lực cho một buổi tối văn hoa đầy cảm xúc. Ví như bạn quan hoài đến cảnh trí trên ban công , có thể tr a n g trí thêm đèn treo tường , đèn chụp ở một góc ban công làm tăng tính nghệ thuật. Một không gian đầy đủ ánh sáng sẽ nhận được nhiều vận khí tốt hơn. Bạn nên quan hoài đến việc Xếp đặt nguồn sáng phù hợp cho ban công thêm sáng sủa.
Ngoài ra ở cùng phân khúc căn hộ cao cấp, dự án Tháp Mười Merita Khang Điền quận 9 đang mở bán mạnh. Bạn có thể tham khảo thêm thông tin về
**dự án Tháp Mười Merita Khang Điền** quận 9 tại : [http://bit.ly/2ddKy2F](http://bit.ly/2ddKy2F)
## Leave a Comment
## Cancel reply

Link: <http://river-park.vn/wp-json/>; rel="https://api.w.org/", <http://river-park.vn/?p=1742>; rel=shortlink

Vary: Accept-Encoding,Cookie


text:
-
Màu sắc nhà ở theo phong thủy
10:30 | 31/12/2014Với nhiều người Á Đông, trong đó có Việt Nam, màu sắc ngôi nhà còn được sử dụng và tính toán dựa trên các quy luật ngũ hành tương sinh - tương khắc theo quan niệm...
-
Trang trí, sắp đặt tiền sảnh hợp phong thủy
09:00 | 30/12/2014Phòng tiếp tân bao giờ cũng được xem là nơi quan trọng nhất của một cơ quan, là nơi thu nạp vượng khí, có thể ảnh hưởng tới toàn bộ bố cục của tòa nhà hay...
-
3 vị trí cấm kỵ khi đặt cầu thang trong nhà
08:56 | 29/12/2014Trong phong thủy, cầu thang được ví như xương sống của ngôi nhà, là nơi khí vận động mạnh, liên tục để đưa dòng khí lan tỏa khắp các tầng. Vì thế việc đặt cầu thang...
-
Lựa chọn vật dụng nhà bếp theo nguyên tắc ngũ hành
09:20 | 27/12/2014Không chỉ đơn giản là không gian nấu nướng, phòng bếp là nơi ảnh hưởng rất lớn đến chất lượng cuộc sống của các thành viên trong gia đình. Một số nguyên tắc lựa chọn, bài...
-
Bí quyết phong thủy đơn giản để cải tạo vận mệnh
09:20 | 26/12/2014Những bí quyết phong thủy đơn giản để cải thiện chất lượng cuộc sống (hay nói cách khác là cải tạo vận mệnh) của bạn mà không tốn nhiều thời gian và công sức.
-
6 lưu ý quan trọng khi bố trí bàn thờ theo phong thủy
10:52 | 25/12/2014Theo quan niệm của văn hóa Phương Đông nói chung và văn hóa Việt Nam nói riêng, bàn thờ là nơi linh thiêng và có ý nghĩa cực kỳ quan trọng. Vì vậy, việc bài trí...
-
Đặt két sắt trong phòng ngủ có hợp phong thủy?
09:23 | 24/12/2014Két sắt là nơi lưu trữ tiền bạc của gia đình do đó việc lựa chọn vị trí đặt két sắt có thể ảnh hưởng đến đường tài lộc của gia chủ. Nhiều gia đình thường...
Các tin khác
- Mua đồ nội thất hợp phong thủy cần lưu ý điều gì? (08:23 | 19/12/2014)
- Bày Rồng - Hổ trong nhà sai cách, thế hệ sau ảnh hưởng nặng nề (08:39 | 16/12/2014)
- Tìm hiểu giá trị phong thủy của đồ gỗ (10:17 | 15/12/2014)
- Những đồ kiêng kỵ để trong phòng tân hôn theo phong thủy (08:36 | 12/12/2014)
- Bố trí đèn chiếu sáng hợp phong thủy (10:26 | 10/12/2014)
- Những điều tối kỵ trong phong thuỷ phòng khách (09:29 | 9/12/2014)
- Giường ngủ nên kê giữa hay sát góc phòng (13:14 | 8/12/2014)
- Kiểu giường sát mặt đất không tốt cho sức khỏe (09:01 | 5/12/2014)
Dự án
Thống kê truy cập
Tổng số lượt truy cập: 51.332.864
Số thành viên: 25.056
Số người online: 1.115
Số thành viên: 25.056
Số người online: 1.115
.

markdown:
-
[Màu sắc nhà ở theo phong thủy](/mau-sac-nha-o-theo-phong-thuy-36602-f7e26090.html)10:30 | 31/12/2014Với nhiều người Á Đông, trong đó có Việt Nam, màu sắc ngôi nhà còn được sử dụng và tính toán dựa trên các quy luật ngũ hành tương sinh - tương khắc theo quan niệm...
-
[Trang trí, sắp đặt tiền sảnh hợp phong thủy](/trang-tri-sap-dat-tien-sanh-hop-phong-thuy-36596-f7e26090.html)09:00 | 30/12/2014Phòng tiếp tân bao giờ cũng được xem là nơi quan trọng nhất của một cơ quan, là nơi thu nạp vượng khí, có thể ảnh hưởng tới toàn bộ bố cục của tòa nhà hay...
-
[3 vị trí cấm kỵ khi đặt cầu thang trong nhà](/3-vi-tri-cam-ky-khi-dat-cau-thang-trong-nha-36590-f7e26090.html)08:56 | 29/12/2014Trong phong thủy, cầu thang được ví như xương sống của ngôi nhà, là nơi khí vận động mạnh, liên tục để đưa dòng khí lan tỏa khắp các tầng. Vì thế việc đặt cầu thang...
-
[Lựa chọn vật dụng nhà bếp theo nguyên tắc ngũ hành](/lua-chon-vat-dung-nha-bep-theo-nguyen-tac-ngu-hanh-36582-f7e26090.html)09:20 | 27/12/2014Không chỉ đơn giản là không gian nấu nướng, phòng bếp là nơi ảnh hưởng rất lớn đến chất lượng cuộc sống của các thành viên trong gia đình. Một số nguyên tắc lựa chọn, bài...
-
[Bí quyết phong thủy đơn giản để cải tạo vận mệnh](/bi-quyet-phong-thuy-don-gian-de-cai-tao-van-menh-36577-f7e26090.html)09:20 | 26/12/2014Những bí quyết phong thủy đơn giản để cải thiện chất lượng cuộc sống (hay nói cách khác là cải tạo vận mệnh) của bạn mà không tốn nhiều thời gian và công sức.
-
[6 lưu ý quan trọng khi bố trí bàn thờ theo phong thủy](/6-luu-y-quan-trong-khi-bo-tri-ban-tho-theo-phong-thuy-36572-f7e26090.html)10:52 | 25/12/2014Theo quan niệm của văn hóa Phương Đông nói chung và văn hóa Việt Nam nói riêng, bàn thờ là nơi linh thiêng và có ý nghĩa cực kỳ quan trọng. Vì vậy, việc bài trí...
-
[Đặt két sắt trong phòng ngủ có hợp phong thủy?](/dat-ket-sat-trong-phong-ngu-co-hop-phong-thuy-36569-f7e26090.html)09:23 | 24/12/2014Két sắt là nơi lưu trữ tiền bạc của gia đình do đó việc lựa chọn vị trí đặt két sắt có thể ảnh hưởng đến đường tài lộc của gia chủ. Nhiều gia đình thường...
##### Các tin khác
-
[Mua đồ nội thất hợp phong thủy cần lưu ý điều gì?](/mua-do-noi-that-hop-phong-thuy-can-luu-y-dieu-gi-36557-f7e26090.html)(08:23 | 19/12/2014)
-
[Bày Rồng - Hổ trong nhà sai cách, thế hệ sau ảnh hưởng nặng nề](/bay-rong-ho-trong-nha-sai-cach-the-he-sau-anh-huong-nang-ne-36548-f7e26090.html)(08:39 | 16/12/2014)
-
[Tìm hiểu giá trị phong thủy của đồ gỗ](/tim-hieu-gia-tri-phong-thuy-cua-do-go-36543-f7e26090.html)(10:17 | 15/12/2014)
-
[Những đồ kiêng kỵ để trong phòng tân hôn theo phong thủy](/nhung-do-kieng-ky-de-trong-phong-tan-hon-theo-phong-thuy-36538-f7e26090.html)(08:36 | 12/12/2014)
-
[Bố trí đèn chiếu sáng hợp phong thủy](/bo-tri-den-chieu-sang-hop-phong-thuy-36532-f7e26090.html)(10:26 | 10/12/2014)
-
[Những điều tối kỵ trong phong thuỷ phòng khách](/nhung-dieu-toi-ky-trong-phong-thuy-phong-khach-36528-f7e26090.html)(09:29 | 9/12/2014)
-
[Giường ngủ nên kê giữa hay sát góc phòng](/giuong-ngu-nen-ke-giua-hay-sat-goc-phong-36521-f7e26090.html)(13:14 | 8/12/2014)
-
[Kiểu giường sát mặt đất không tốt cho sức khỏe](/kieu-giuong-sat-mat-dat-khong-tot-cho-suc-khoe-36517-f7e26090.html)(09:01 | 5/12/2014)
|Các tin đã đưa ngày:|
Dự án
Thống kê truy cập
Tổng số lượt truy cập: 51.332.864
Số thành viên: 25.056
Số người online: 1.115
Số thành viên: 25.056
Số người online: 1.115
.

Cache-Control: private

Server: Server


text:
Bộ Tài chính đã ban hành Thông tư số 332/2016/TT-BTC sửa đổi, bổ sung một số điều của Thông tư số 76/2014/TT-BTC ngày 16 tháng 6 năm 2014 của Bộ Tài chính hướng dẫn thực hiện một số điều của...
Thủ tướng Chính phủ vừa ban hành Danh mục Dịch vụ sự nghiệp công sử dụng ngân sách nhà nước (NSNN) thuộc lĩnh vực giáo dục và đào tạo. Dịch vụ sự nghiệp công sử dụng NSNN thuộc lĩnh vực giáo...
Bộ Tài chính vừa ban hành Thông tư số 11/2017/TT-BTC quy định về quản lý và sử dụng nguồn vốn ngân sách địa phương ủy thác qua Ngân hàng Chính sách xã hội (NHCSXH) để cho vay đối với người...
Quyết định xác định giá trị DN của Công ty TNHH MTV lâm nghiệp Lục Ngạn để chuyển thành Công ty TNHH hai thành viên trở lên tải về Quyết định xác định giá trị DN Công tyTNHH MTV lâm...
Ngày 06/01/2017 Thanh tra Sở Tài chính nhận được Công văn số 48/ANĐT ngày 05/01/2017 của Cơ quan An ninh Điều tra Công an tỉnh Bắc Giang về việc đề nghị xử lý vi phạm hành chính đối với 7 trường hợp...
Căn cứ Công văn số 02/MTTQ-BTT ngày 03/01/2017 của Ủy ban Mặt trận Tổ quốc tỉnh về việc đăng ký vận động, thời gian, địa điểm tặng quà “Tết vì người nghèo” năm 2017; Với tinh thần tương thân...
Thực hiện Công văn số 18284/BTC-TCCB ngày 23/12/2016 của Bộ Tài chính về việc tổ chức gặp mặt cán bộ hưu nhân dịp Tết Nguyên đán Đinh Dậu năm 2017. Ngày 13/01/2017, tại trụ sở Công ty Bảo việt Nhân...
Ngày 15/11/2016, Bộ Tài chính ban hành Thông tư 300/2016/TT-BTC về việc quy định sửa đổi, bổ sung hệ thống mục lục ngân sách nhà nước. Theo đó, có những điểm mới đáng chú ý như sau: (i) Bổ...
Bộ Tài chính đã ban hành Thông tư số 332/2016/TT-BTC sửa đổi, bổ sung một số điều của Thông tư số 76/2014/TT-BTC ngày 16 tháng 6 năm 2014 của Bộ Tài chính hướng dẫn thực hiện...
Ngày 09/11 hàng năm được chọn làm Ngày pháp luật nước Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam (hay gọi ngắn gọn là Ngày Pháp luật Việt Nam hoặc Ngày Pháp luật); lần đầu tiên kỷ niệm...
Quyết định xác định giá trị DN của Công ty TNHH MTV lâm nghiệp Lục Ngạn để chuyển thành Công ty TNHH hai thành viên trở lên tải về Quyết định xác định giá trị DN ...
Căn cứ Công văn số 02/MTTQ-BTT ngày 03/01/2017 của Ủy ban Mặt trận Tổ quốc tỉnh về việc đăng ký vận động, thời gian, địa điểm tặng quà “Tết vì người nghèo” năm 2017; Với tinh...

markdown:
Bộ Tài chính đã ban hành Thông tư số 332/2016/TT-BTC sửa đổi, bổ sung một số điều của Thông tư số 76/2014/TT-BTC ngày 16 tháng 6 năm 2014 của Bộ Tài chính hướng dẫn thực hiện một số điều của...
Thủ tướng Chính phủ vừa ban hành Danh mục Dịch vụ sự nghiệp công sử dụng ngân sách nhà nước (NSNN) thuộc lĩnh vực giáo dục và đào tạo. Dịch vụ sự nghiệp công sử dụng NSNN thuộc lĩnh vực giáo...
Bộ Tài chính vừa ban hành Thông tư số 11/2017/TT-BTC quy định về quản lý và sử dụng nguồn vốn ngân sách địa phương ủy thác qua Ngân hàng Chính sách xã hội (NHCSXH) để cho vay đối với người...
Quyết định xác định giá trị DN của Công ty TNHH MTV lâm nghiệp Lục Ngạn để chuyển thành Công ty TNHH hai thành viên trở lên tải về Quyết định xác định giá trị DN Công tyTNHH MTV lâm...
Ngày 06/01/2017 Thanh tra Sở Tài chính nhận được Công văn số 48/ANĐT ngày 05/01/2017 của Cơ quan An ninh Điều tra Công an tỉnh Bắc Giang về việc đề nghị xử lý vi phạm hành chính đối với 7 trường hợp...
Căn cứ Công văn số 02/MTTQ-BTT ngày 03/01/2017 của Ủy ban Mặt trận Tổ quốc tỉnh về việc đăng ký vận động, thời gian, địa điểm tặng quà “Tết vì người nghèo” năm 2017; Với tinh thần tương thân...
Thực hiện Công văn số 18284/BTC-TCCB ngày 23/12/2016 của Bộ Tài chính về việc tổ chức gặp mặt cán bộ hưu nhân dịp Tết Nguyên đán Đinh Dậu năm 2017. Ngày 13/01/2017, tại trụ sở Công ty Bảo việt Nhân...
Ngày 15/11/2016, Bộ Tài chính ban hành Thông tư 300/2016/TT-BTC về việc quy định sửa đổi, bổ sung hệ thống mục lục ngân sách nhà nước. Theo đó, có những điểm mới đáng chú ý như sau: (i) Bổ...
|Số/Ký hiệu||Hình thức văn bản||Ngày ký||Trích yếu||Tập tin|
|
|
Bộ Tài chính đã ban hành Thông tư số 332/2016/TT-BTC sửa đổi, bổ sung một số điều của Thông tư số 76/2014/TT-BTC ngày 16 tháng 6 năm 2014 của Bộ Tài chính hướng dẫn thực hiện...
Ngày 09/11 hàng năm được chọn làm Ngày pháp luật nước Cộng hòa xã hội chủ nghĩa Việt Nam (hay gọi ngắn gọn là Ngày Pháp luật Việt Nam hoặc Ngày Pháp luật); lần đầu tiên kỷ niệm...
Quyết định xác định giá trị DN của Công ty TNHH MTV lâm nghiệp Lục Ngạn để chuyển thành Công ty TNHH hai thành viên trở lên tải về Quyết định xác định giá trị DN ...
Căn cứ Công văn số 02/MTTQ-BTT ngày 03/01/2017 của Ủy ban Mặt trận Tổ quốc tỉnh về việc đăng ký vận động, thời gian, địa điểm tặng quà “Tết vì người nghèo” năm 2017; Với tinh...
|Số / Ký hiệu||Ngày BH/HL||Trích yếu||Tập tin|
|373/2016/QĐ-UBND||28/06/2016 10/07/2016||Quyết định Ban hành quy định chức năng, nhiệm vụ, quyền hạn và cơ cấu tổ chức của SỞ Tài chính tỉnh||
|![]()

Content-Language: vi

X-Generator: Drupal 7 (http://drupal.org)

Server: Apache/2.2.31 (Unix) mod_ssl/2.2.31 OpenSSL/1.0.1e-fips mod_bwlimited/1.4

Cache-Control: public, max-age=86400

X-Drupal-Cache: HIT

Vary: Cookie,Accept-Encoding


text:
- Hoạt động cuối:
- 2/2/15
- Tham gia ngày:
- 2/2/15
- Bài viết:
- 0
- Đã được thích:
- 0
- Điểm thành tích:
- 0
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 28/11/90 (Tuổi: 26)
ban buon quan ao tre em
New Member, Nam, 26
- ban buon quan ao tre em được nhìn thấy lần cuối:
- 2/2/15
-
- Đang tải...
-
Giới thiệu
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 28/11/90 (Tuổi: 26)

markdown:
![ ban buon quan ao tre em](http://svnhforum.com/forum/data/avatars/l/105/105622.jpg?1422893792)
- Hoạt động cuối:
- 2/2/15
- Tham gia ngày:
- 2/2/15
- Bài viết:
- 0
- Đã được thích:
- 0
- Điểm thành tích:
[0](members/ban-buon-quan-ao-tre-em.105622/trophies)
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 28/11/90 (Tuổi: 26)
# ban buon quan ao tre em
New Member, Nam, 26
- ban buon quan ao tre em được nhìn thấy lần cuối:
- 2/2/15
-
- Đang tải...
-
### Giới thiệu
- Giới tính:
- Nam
- Sinh nhật:
- 28/11/90 (Tuổi: 26)

Server: nginx

Vietnix-Cache: HIT from backend


text:
- Hoạt động cuối:
- 16/12/13
- Tham gia ngày:
- 16/12/13
- Bài viết:
- 0
- Đã được thích:
- 0
- Điểm thành tích:
- 0
- Sinh nhật:
- Tháng mười một 30
phale_30
New Member
- phale_30 được nhìn thấy lần cuối:
- 16/12/13
-
- Đang tải...
-
Giới thiệu
- Sinh nhật:
- Tháng mười một 30
Tương tác

markdown:
![ phale_30](http://svnhforum.com/forum/styles/banh/xenforo/avatars/avatar_l.png)
- Hoạt động cuối:
- 16/12/13
- Tham gia ngày:
- 16/12/13
- Bài viết:
- 0
- Đã được thích:
- 0
- Điểm thành tích:
[0](members/phale-30.75217/trophies)
- Sinh nhật:
- Tháng mười một 30
# phale_30
New Member
- phale_30 được nhìn thấy lần cuối:
- 16/12/13
-
- Đang tải...
-
### Giới thiệu
- Sinh nhật:
- Tháng mười một 30
### Tương tác


text:
-
Mọi bài viết vi phạm chính sách, Spam/Không đúng chuyên mục BQT sẽ xóa bài và nick vĩnh viễn.Dismiss Notice
Để báo lỗi hoặc cần hỗ trợ vui lòng liên hệ:
Email: vipkhongtin@gmail.com - FB: Vipkhongtin. Xin cảm ơn!
Eco - Spring : thi công vượt thủ tục nhờ công nghệ xây dựng
Thảo luận trong 'Nhà đất - Bất động sản' bắt đầu bởi hienpq, 2/3/16.

markdown:
-
Mọi bài viết vi phạm chính sách, Spam/Không đúng chuyên mục BQT sẽ xóa bài và nick vĩnh viễn.
Để báo lỗi hoặc cần hỗ trợ vui lòng liên hệ:
Email: vipkhongtin@gmail.com - FB:
[Vipkhongtin](http://fb.com/vipkhongtin). Xin cảm ơn! [Dismiss Notice](account/dismiss-notice?notice_id=1)
# Eco - Spring : thi công vượt thủ tục nhờ công nghệ xây dựng
Thảo luận trong '
[Nhà đất - Bất động sản](forums/nha-dat-bat-dong-san.22/)' bắt đầu bởi [hienpq](members/hienpq.6940/), [2/3/16](threads/eco-spring-thi-cong-vuot-thu-tuc-nho-cong-nghe-xay-dung.33493/).

Server: Nginx


text:
Chương 7: Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene
Chia sẻ: Huynh Phuong Khanh | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:15
lượt xem 66
download
Chương 7: Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene
Không phải tất cả các gene đều có biểu hiện liên tục. Mức độ biểu hiện của gene khác nhau giữa các tế bào hoặc khác nhau theo giai đoạn trong chu trình tế bào. Chẳng hạn gene mã hóa cho hemoglobin được biểu hiện ở mức độ cao chỉ ở trong tế bào tiền thể (precursor) của tế bào máu. Hoạt tính của gene khác nhau theo chức năng tế bào. Ở động vật có xương sống như chuột, chứa khoảng 200 loại tế bào được phân hóa chức năng khác nhau....
Bình luận(0) Đăng nhập để gửi bình luận!
Nội dung Text: Chương 7: Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene
- 208 Chương 7 Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene I. Các nguyên lý điều hòa và mức độ kiểm soát phiên mã Không phải tất cả các gene đều có biểu hiện liên tục. Mức độ biểu hiện của gene khác nhau giữa các tế bào hoặc khác nhau theo giai đoạn trong chu trình tế bào. Chẳng hạn gene mã hóa cho hemoglobin được biểu hiện ở mức độ cao chỉ ở trong tế bào tiền thể (precursor) của tế bào máu. Hoạt tính của gene khác nhau theo chức năng tế bào. Ở động vật có xương sống như chuột, chứa khoảng 200 loại tế bào được phân hóa chức năng khác nhau. Tất cả các tế bào đều chứa cùng thông tin di truyền, những tế bào khác nhau chỉ ở những gene hoạt động. Trong nhiều trường hợp, hoạt tính của gene được điều hòa ở mức độ phiên mã, cả qua những tín hiệu bắt đầu bên trong tế bào và cả phản ứng với những điều kiện bên ngoài. Tuy nhiên thông tin di truyền được điều hòa theo những cách khác nhau. Các bước điều khiển hoạt động gene bao gồm: - Cấu trúc lại DNA, trong đó những thay đổi biểu hiện gene phụ thuộc vào vị trí trình tự DNA trong genome. - Điều hòa phiên mã trong tổng hợp bản phiên mã RNA bằng sự điều khiển sự mở đầu và sự kết thúc - Quá trình chế biến RNA hoặc điều hòa qua quá trình cắt-nối trên RNA (RNA splicing) - Điều hòa dịch mã quá trình tổng hợp chuỗi polypeptid - Sự bền vững của mRNA Có sự khác nhau đáng kể trong sự điều hòa biểu hiện của các gene ở eukaryote và prokaryote. Prokaryote là những cơ thể đơn bào sống tự do, sinh trưởng và phân chia trong điều kiện thích hợp và được cung cấp đầy đủ chất dinh dưỡng. Do đó hoạt động của các gene được điều hòa do nhu cầu của tế bào khi cần thiết. Khác với prokaryote, eukaryote là những cơ thể đa bào. Trong cơ thể đang phát triển, một tế bào không chỉ sinh trưởng và phân chia mà tế bào thế hệ sau trải qua những thay đổi quan trọng về hình thái và hóa sinh và duy trì trạng thái biến đổi của nó. Hơn nữa trong quá trình phát triển phôi, tế bào eukaryote ít chịu ảnh hưởng của môi trường hơn so với vi khuẩn. Cuối cùng, ở cơ thể trưởng thành, sự sinh trưởng và phân chia tế bào của hầu hết các loại tế bào bị ngừng, mỗi tế bào chỉ phải duy trì các tính chất riêng biệt của nó.
- 209 A. Điều hòa âm tính Điểm bám của repressor Phiên mã Không phiên mã Protein repressor bám vào B. Điều hòa dương tính Điếm bám của nhân tố hoạt hóa Không phiên mã Phiên mã Protein hoạt hóa phiên mã bám vào Hình 7.1 Mô hình điều hòa âm tính (negative regulation) và điều hòa dương tính (positive regulation). A. Trong điều hòa âm tính, protein ức chế bám vào phân tử DNA, ngăn cản phiên mã B. Trong điều hòa dương tính, sự bám vào của protein hoạt hóa phiên mã, kích thích phiên mã. II. Điều hòa hoạt động gene ở prokaryote Ở vi khuẩn và phage, hoạt tính đóng mở gene thường được điều khiển qua phiên mã tổng hợp các mRNA xảy ra khi sản phẩm của gene được cần đến. Cơ chế phân tử cho mỗi mô hình điều hòa hoàn toàn khác nhau, nhưng thường theo một trong hai kiểu chính: điều hòa âm tính và điều hòa
- 210 dương tính (Hình 7.1). Trong hệ thống điều hòa âm tính (Hình 7.1A) một protein ức chế có mặt trong tế bào, ngăn cản sự phiên mã. Trong hệ thống cảm ứng được điều hòa âm tính, protein ức chế hoạt động làm ngăn cản phiên mã. Nhân tố cảm ứng kìm hãm chất ức chế, cho phép bắt đầu phiên mã. Trong hệ thống ức chế, protein aporepressor gắn với co-repressor tạo ra chất ức chế có hoạt tính, làm ngăn cản phiên mã. Ngược lại trong hệ thống điều hòa dương tính (Hình 7.1B), sự tổng hợp mRNA xảy ra nều protein điều hòa gắn vào một vùng của gene làm hoạt hóa phiên mã. Những protein này được xem là những nhân tố hoạt hóa phiên mã. Điều hòa âm tính và dương tính không loại trừ lẫn nhau. Một vài hệ thống là cả điều hòa âm tính và dương tính, sử dụng cả 2 hệ thống điều hòa để phản ứng với các điều kiện khác nhau trong tế bào. Điều hòa âm tính là phổ biến cho prokaryote, trong khi điều hòa dương tính lại phổ biến cho eukaryote. 1. Cấu trúc của operon Mô hình operon của điều hòa phiên mã Cơ chế điều hòa di truyền của hệ thống lac (lac system) được giải thích bằng mô hình operon của Francois Jacob và Jacque Monod (1960) (Hình 7.2). Hệ thống sử dụng lactose gồm 2 loại thành phần: gene cấu trúc mã hóa protein cần thiết cho sự vận chuyển và chuyển hóa lactose và các yếu tố điều hòa (gene ức chế lacI, promotor lac P và operator lacO). Sản phẩm gene cấu trúc được mã hóa bởi một phân tử mRNA đa cistron (polycistronic). Gene Z mã hóa cho enzyme β- galactosidase (thủy phân đường lactose thành galactose và glucose), gene Y mã hóa cho enzyme permease (cần cho vận chuyển lactose qua màng), gene A mã hóa cho enzyme transacetylase (vai trò chuyển hóa lactose chưa rõ). Đột biến promotor (lacP-) làm mất khả năng tổng hợp mRNA. Sản phẩm của gene lacI là chất ức chế, nó bám vào trình tự các base của DNA cấu tạo operator. Chất ức chế bám vào operator, ngăn cản sự khởi đầu phiên mã mRNA nhờ RNA polymerase. Chất cảm ứng (lactose) kích thích sự sinh tổng hợp mRNA bằng cách kết hợp và làm bất hoạt chất ức chế. Sự có mặt của chất cảm ứng làm chất ức chế không gắn vào operator, promotor cho phép khởi đầu tổng hợp mRNA. Khi môi trường có lactose, lactose được chuyển vào tế bào nhờ permease. Khi vào trong tế bào một số lactose (liên kết β -1,4) được chuyển thành allolactose (liên kết β-1,6) nhờ β-galactosidase. Allolactose là chất cảm ứng, nó gắn vào protein kìm hãm, gây biến đổi cấu hình tạo
- 211 phức hợp allolactose-repressor. Phức hợp này mất khả năng gắn vào operator. Lúc này operon mở ra, RNA polymerase bắt đầu phiên mã từ gene cấu trúc. Các yếu tố điều hoà Nhóm gene cấu trúc [A] Trực tiếp phiên mã [B] mARN Repressor gắn vào operator, ngăn cản phiên mã Repress or protein [C] Phức hợp chất cảm ứng-chất ức chế không thể gắn vào operator Inducer Khi không lactose, RNA polymerase bắt đầu phiên mã tổng hợp protein z, y và a Lac mARN β- Permeas Transacety galactosidase e lase Hình 7.2 A Bản đồ của operon lac; B. Sơ đồ của operon lac ở trạng thái bị kìm hãm C. Sơ đồ của operon lac ở trạng thái được kích thích Khi môi trường không có lactose, protein ức chế có hoạt tính gắn vào operator, làm sự phiên mã của tất cả các gene cấu trúc của operon lac bị dừng. Sự điều hòa của operon yêu cầu promotor nằm chồng lên một phần hoặc kề sát bên promotor của gene cấu trúc, vì nó gắn với chất ức chế
- 212 ngăn cản phiên mã. 2. Điều hòa dương tính operon lactose Chức năng của β-galactosidase trong chuyển hóa lactose để tạo ra glucose bằng cách cắt lactose (một sản phẩm cắt khác là galactose cũng có thể được chuyển thành glucose nhờ enzyme của operon galactose). Nếu cả glucose và lactose có mặt trong môi trường sinh trưởng, không cần hoạt động của operon lac. Trong môi trường có glucose, enzyme β- galactosidase không được tạo thành cho đến khi glucose trong môi trường được sử sụng hết. Sự có mặt của glucose làm mRNA không được tổng hợp, do đó không có sự tổng hợp β-galactosidase, vì sự thêm vào nhân tố cảm ứng làm bất hoạt chất kìm hãm. Một yếu tố khác cần cho sự bắt đầu tổng hợp mRNA, hoạt tính của yếu tố này được điều hòa bởi nồng độ glucose. Glucose có ảnh hưởng ức chế gián tiếp lên sự biểu hiện của operon lac. Những phân tử nhỏ adenosine monophosphate vòng (cAMP) phân bố rộng rãi trong mô động vật và trong các cơ thể eukaryote đa bào, có vai trò quan trọng làm chất trung gian hoạt động hormone. Chất này cũng có trong tế bào E. coli và nhiều tế bào vi khuẩn khác với chức năng khác nhau. cAMP được tổng hợp bởi enzyme adenyl cyclase, và nồng độ của cAMP được điều hòa gián tiếp qua trao đổi chất glucose. Khi vi khuẩn sinh trưởng ở môi trường chứa glucose, hàm lượng cAMP rất thấp. Trong môi trường chứa glycerol hoặc các nguồn carbon không thể đi vào con đường hóa sinh được sử dụng để trao đổi chất glucose (con đường glycolytic) hoặc khi vi khuẩn bị đói nguồn năng lượng, nồng độ cAMP cao. Hàm lượng glucose giúp điều hòa nồng độ cAMP trong tế bào và cAMP lại điều hòa hoạt tính của operon lac. E. coli chứa protein nhận cAMP hay CRP (cyclic AMP receptor protein) còn được gọi là protein hoạt hóa dị hóa CAP (catabolite activator protein), được mã hóa bởi gene crp. Đột biến ở gene crp và gene adenyl cyclase làm ngăn cản sự tổng hợp của mRNA lac. Điều này cho thấy chức năng của CRP và cAMP cần thiết cho tổng hợp mRNA Hình 7.3 Cấu trúc của cAMP lac. CRP và cAMP gắn vào một vị trí khác tạo phức hợp cAMP-CRP được biểu hiện. Phức hợp này là một yếu tố điều hòa hoạt hóa ở hệ thống lac.
- 213 Tổng hợp của mRNA l không Repressor không Phức hợp cAMP-CRP Có Phiên mã không Hình 7.4 Bốn trạng thái điều hòa của operon lac Nhu cầu về cAMP-CRP phụ thuộc vào hệ thống ức chế lac, vì đột biến crp và adenyl cyclase không thể tạo mRNA lac ngay cả khi có mặt đột biến ở gene điều hòa (lacI-) và gene chỉ huy (lacO-). Sở dĩ như vậy là vì phức hợp cAMP-CRP phải gắn vào trình tự base trên DNA ở vùng promotor để xảy ra phiên mã (Hình 7.4). Khác với chất ức chế trong điều hòa âm tính, phức hợp cAMP-CRP là chất điều hòa dương tính. Các thí nghiệm ở điều kiện in vitro cho thấy: mRNA lac được tổng hợp chỉ khi có cAMP vòng và không có chất ức chế. Khi vắng mặt phức hợp cAMP-CRP, RNA polymerase chỉ bám lỏng lẽo vào promotor. Vì vậy hiếm khi dẫn đến phiên mã vì không có sự tương tác đúng giữa RNA polymerase và promotor. Nhưng RNA polymerase được kích thích gắn vào promotor khi cAMP-CRP được gắn vào DNA. Những kết quả này giải thích chức năng lactose và glucose cùng nhau tham gia điều hòa phiên mã operon lac như thế nào. 3. Điều hòa âm tính operon tryptophan Operon tryptophan (trp) của E.coli chứa các gene cấu trúc mã hóa cho các enzyme tổng hợp amino acid tryptophan. Operon này được điều hòa theo cách sau: khi tryptophan có mặt đầy đủ trong môi trường sinh trưởng, sự phiên mã của operon bị ức chế. Khi sự cung cấp tryptophan bị thiếu, sự phiên mã xảy ra. Sự điều hòa của operon lactose tương tự với
- 214 operon lactose, vì sự tổng hợp mRNA được điều hòa âm tính nhờ chất ức chế. Tuy nhiên, khác với điều hòa ở operon lac, tryptophan hoạt động như chất đồng kìm hãm, kích thích chất ức chế gắn vào operator ngừng sự tổng hợp. Operon tryptophan hoạt động theo kiểu ức chế, điều hòa âm tính. Tryptophan được tổng hợp qua các giai đoạn khá phức tạp, mỗi giai đoạn có sự xúc tác của một enzyme đặc biệt. Các gene mã hóa cho các enzyme này nằm kề nhau trên nhiễm sắc thể của E.coli. Đó là các gene trpE, trpD, trpC, trpB, trpA. Các enzyme được dịch mã từ một phân tử mRNA đa cistron. Vùng mã hóa gene E được dịch mã trước tiên. Phía trước trpE về đầu 5' có promotor, operator và 2 vùng xếp lần lượt là leader (trpL) và đoạn kìm hãm phiên mã attenuator (trpa, không phải là trpA). Gene ức chế trpR nằm xa operon, tổng hợp protein aporepressor, là chất kìm hãm mà riêng nó không có hoạt tính. Khi tryptophan dư thừa, nó kết hợp với aporepressor tạo chất kìm hãm có hoạt tính, gắn vào operator của operon tryptophan làm dừng phiên mã các gene cấu trúc. Khi nồng độ tryptophan thấp, nó tách khỏi phức hợp kìm hãm và aporepressor mất hoạt tính. Lúc này operator mở ra, RNA polymerase dịch mã 5 gene cấu trúc để tổng hợp 5 enzyme tham gia tổng hợp ra tryptophan. (Hình 7.5). Phiên mã xảy ra trp P trp O trp L trp E trp D trp C Phiên mã Aporepressor Aporepressor không bám vào operator Phiên mã bị ức chế trp O trp P trp L trp E trp D trp C Không phiên mã Phức hợp Tryptophan- aporepressor bám vào operator và ức chế phiên mã Tryptophan Hoạt hóa aporepressor Hình 7.5 Điều hòa của trp operon ở E. coli A. Protein aporepressor không bám được vào operator, phiên mã xảy ra.
- 215 B. Khi có đủ tryptophan, phức hợp aporepressor và tryptophan làm chất ức chế hoạt động gắn được vào operator, sự phiên mã bị kìm hãm. 4. Phiên mã dở (Attenuation) Kiểu điều hòa thứ hai được phát hiện ở operon tryptophan được gọi là attenuation. Nó dùng sử dịch mã để điều khiển sự phiên mã. Khi có mặt tryptophan nội bào, ngay cả với nồng độ thấp, sự dịch mã một phần vùng leader của mRNA ngay khi vừa được tổng hợp, kết quả làm dừng sự phiên mã trước khi gene cấu trúc đầu tiên của operon được sao chép. [A [B ] ] Kãút thuïc phiãn maî Hình 7.6 (A) Sơ đồ phiên mã của leader trp; (B) Chi tiết cấu trúc của 2 codon trp ở vòng 1-2 Phiên mã dở (attenuation) là kết quả sự tương tác giữa các trình tự DNA trong vùng leader của bản phiên mã trp. Ở tế bào kiểu dại, sự phiên mã operon trp thường được bắt đầu. Tuy nhiên khi có mắt một lượng nhỏ tryptophan, hầu hết phân tử mRNA kết thúc ở vùng 28 base đặc biệt ở trong trình tự leader. Kết quả của sự kết thúc sớm này tạo phân tử mRNA chứa 140 nucleotide chấm dứt một đoạn ngắn của các gene mã hóa cho các enzyme trp. Vùng 28 base xảy ra sự kết thúc phiên mã sớm như thế được gọi là attenuator. Trình tự base của vùng này thường có các tính chất điểm kết thúc, gồm dạng đoạn và vòng (stem-loop) trên mRNA theo sau là trình tự của 8 uridine. Trình tự leader có các đặc điểm:
- 216 - Một vùng có codon AUG và phía sau là codon kết thúc UGA, mã hóa cho một polypeptide chứa 14 amino acid được gọi là leader polypeptide. - Hai codon tryptophan ở vị trí 10 và 11 trên mRNA của leader polypeptide. Trình tự lặp lại ngắn này có ý nghĩa trọng điều hòa. - Bốn đoạn của RNA leader là vùng 1, 2, 3 và 4 tạo thành do khả năng kết cặp của các base với nhau. Các base ở vùng 1 kết cặp với vùng 2, vùng 3 kết cặp với vùng 4 (Hình 7.6). Khi sự kết cặp xảy ra ở dạng này, sự phiên mã kết thúc ở đoạn đi qua uridine phía trước nucleotide 140. Kiểu kết cặp này xảy ra ở mRNA leader được tinh sạch. - Một kiểu kết cặp biến đổi có thể xảy ra, trong đó các base vùng 2 kết cặp với vùng 3 nhờ các cặp base ở 2 vùng này gần như bổ sung nhau (Hình 7.6B). Qua mô hình kết cặp base biến đổi này (3-4 hoặc 2-3), sự tổ chức trình tự mRNA có thể điều hòa phiên mã qua dịch mã của leader polypeptide (Hình 7.7). Khi vùng leader được phiên mã, sự dịch mã leader polypeptid cũng bắt đầu. Vì có 2 codon của tryptophan trong trình tự mã hóa, nên sự dịch mã nhạy cảm với số lượng tRNAtrp đưa vào. Nếu môi trường cung cấp đầy đủ tryptophan, ribosome trượt qua codon tryptophan và đi vào vùng 2 (Hình 7.7B). Sự có mặt của ribosome loại bỏ khả năng kết cặp của vùng khoảng 10 base ở mỗi phía của codon đang dịch mã. Sự có mặt của ribosome ở vùng 2 ngăn cản nó kết cặp với vùng 3. Trong trường hợp này vùng 3 kết cặp với vùng 4, tạo ra điểm kết thúc phiên mã. Sự phiên mã kết thúc khi qua các uridine nằm phía sau vùng 4. Khi số lượng tRNAtrp không đủ, sự dịch mã leader polypeptide bị dừng lại đột ngột ở các codon tryptophan. Sự dùng lại này ngăn cản ribosome tiến vào vùng 2, vì vậy vùng 2 được tự do sẽ kết cặp với vùng 3 làm cản trở sự hình thành cấu trúc kết thúc. Vì vậy phân tử trp mRNA hoàn chỉnh được tạo thành, chứa cả trình tự mã hóa cho gene cấu trúc. Tóm lại, attenuation là cơ chế điều hòa tinh tế trên cơ sở điều hòa âm tính: Khi tRNAtrp đến đủ cung cấp cho sự dịch mã leader polypeptide, sự phiên mã bị dừng, các trp enzyme không được tổng hợp. Khi nồng độ tRNAtrp quá thấp, sự phiên mã xảy ra cho đến hết, các trp enzyme được tạo nên. Nhiều operon chịu trách nhiệm tổng hợp các amino acid khác (như các operon của leucine, isoleucine, phenylalanine, histidine) cũng được điều hòa nhờ attenuator với chức năng tạo ra vùng kết cặp biến đổi ở bản
- 217 phiên mã. Ở operon histidine vùng mã hóa của leader polypeptide chứa 7 codon histidine kế nhau. Ở operon phenylalanine vùng mã hóa cho leader polypeptide chứa 7 codon phenylalanin chia 3 nhóm. Sự kết cặp trong trp RNA ở nồng độ codons thấp của Kết thúc phiên mã tryptophan RNA polymerase Phiên mã tiếp tục Sự kết cặp trong Sự kết cặp RNA ở nồng độ cao trong mRNA của tryptophan A B C Hình 7.7 Phiên mã dở (attenuation) của operon trp ở E. coli A. Ở mRNA tự do có sự kết cặp base giữa 1-2 và 3-4 B. Ở nồng độ cao của tryptophan, ribosome tiến đến vùng 2 và sự kết cặp 3-4 làm kết thúc phiên mã C. Ở nồng độ tryptophan thấp, ribosome ở vùng codon trp cho phép kết cặp 2-3 và phiên mã không bị kết thúc sau khi qua vùng 4 Điều hòa kiểu attenuation không thể xảy ra ở eukaryote vì ở eukaryote sự phiên mã và dịch mã không xảy ra đồng thời. Sự phiên mã xảy ra trong nhân, còn sự dịch mã xảy ra ở tế bào chất. Điều hòa ở operon lac và operon trp là ví dụ về một trong số các cơ chế quan trọng điều hòa hoạt động gene ở mức phiên mã của prokaryote. III. Điều hòa biểu hiện gene ở eukaryote Điều hòa hoạt động gene ở eukaryote phức tạp hơn nhiều so với prokaryote. Liên quan đến điều hòa, giữa prokaryote và eukaryote có một số điểm khác biệt: - Ở eukaryote thường chỉ có một chuỗi polypeptide đơn được dịch mã từ một phân tử mRNA hoàn chỉnh. mRNA đa cistron (polycistronic) chỉ có ở prokaryote, không có ở eukaryote. - DNA của eukaryote gắn với protein histone tạo sợi chromatin, và gắn với protein phi histone. Chỉ có một đoạn nhỏ DNA để trần. Ở
- 218 prokaryote, một vài protein có mặt trên nhiễm sắc thể bị gấp nếp, còn lại hầu hết DNA trần. - Một đoạn DNA quan trọng của eukaryote chứa trình tự nucleotide lặp lại trung bình hoặc lặp lại cao. Một vài trình tự lặp lại được xếp nối tiếp thành các bản sao tiếp nối nhau, một vài trình tự khác lại không xếp nối tiếp. Vi khuẩn chứa đoạn DNA lặp lại nhỏ khác các gene của rRNA và tRNA nhân đoạn và một vài yếu tố di động. Một đoạn lớn DNA của eukaryote không được dịch mã. Hầu hết trình tự nucleotide không được mã hóa thành protein. Các eukaryote đơn bào, chẳng hạn nấm men là trường hợp ngoại lệ đối với tính chất này. Một vài gene eukaryote được biểu hiện và điều hòa nhờ cơ chế cấu trúc lại những đoạn DNA nhất định theo một phương thức được điều khiển và để tăng số lượng các gene đặc biệt này khi cần thiết. Các gene eukaryote là gián đoạn được phân thành các exon và intron. Các intron được cắt bỏ trong quá trình chế biến bản phiên mã RNA trước khi bắt đầu dịch mã. Ở eukaryote, mRNA được tổng hợp trong nhân và được chuyển qua màng nhân, vào tế bào chất mới được sử dụng. Tế bào vi khuẩn không có nhân được tách biệt với tế bào chất. 1. Sự biến đổi DNA Một số gene của eukaryote được điều hòa bằng sự biến đổi DNA. Chẳng hạn, những trình tự nhất định có thể được khuyếch đại hoặc cấu trúc lại trong genome hoặc các base có thể bị biến đổi về mặt hóa học. Một vài biến đổi được phục hồi, những biến đổi khác lại bền vững. Tuy nhiên những thay đổi bền vững này thường xảy ra ở tế bào sinh dưỡng, vì vậy chúng không được truyền lại cho thế hệ sau qua dòng giao tử. 2. Các promoter Tương tự vi khuẩn, các promoter của eukaryote cũng nằm phía trước điểm xuất phát trên mRNA và có những trình tự được bảo tồn trong tiến hóa. Hộp TATA định hướng cho mRNA bắt đầu phiên mã nằm ở phía trước điểm bắt đầu phiên mã khoảng 30 bp ở động vật có vú và 60 đến 120 bp ở nấm men. Hộp TATA hoạt động có hiệu quả cùng với 2 trình tự tương ứng ở phía trước khoảng 40 bp là CCAAT và 110 bp là trình tự giàu GC. Sự thay đổi hộp TATA làm giảm tốc độ phiên mã. Hiệu quả của tốc độ phiên mã được đo bằng sự thay đổi của từng base trong promoter. * Sự cấu trúc lại DNA theo chương trình (programmed DNA rearrangement) Sự cấu trúc lại trình tự DNA trong genome là cơ chế bất thường
- 219 nhưng quan trọng, nhờ đó một số gene được điều hòa. 3. Những trình tự tăng cường phiên mã (Enhancer) Các thụ thể của hormone và những protein hoạt hóa phiên mã khắc gắn với trình tự DNA đặc biệt được biết là enhancer. Trình tự enhancer khá ngắn (thường chỉ 20 cặp base) được tìm thấy ở các vị trí khác nhau quanh gene được điều hòa. Hầu hết các enhancer nằm ở phía dưới điểm bắt đầu phiên mã (đôi khi cách xa nhiều kb). Những enhancer khác là các intron nằm trong vùng mã hóa và một vài enhancer thậm chí nằm ở đầu 3' của gene. Enhancer là thành phần nhạy cảm của tổ chức gene ở eukaryote vì chúng cho phép gene phiên mã chỉ khi nào có nhân tố hoạt hóa phiên mã đúng. Một vài enhancer phản ứng với các phân tử bên ngoài tế bào, chẳng hạn hormone steroid tạo phức hợp receptor-hormone. Những enhancer khác phản ứng với các phân tử được tạo thành ở bên trong tế bào (chẳng hạn trong suốt quá trình phát triển). Những enhancer này cho phép các gene dưới sự điều khiển của nó tham gia vào biệt hóa tế bào (differentiation) hoặc được biểu hiện theo cách đặc biệt ở trong mô. Nhiều gene ở dưới sự kiểm soát của các enhancer khác nhau, vì vậy chúng có thể phản ứng với nhiều tín hiệu phân tử khác nhau cả bên trong và bên ngoài. Untranslated leader Introns Exons Vùng 5’ Vùng 3’ Enhancers Promotor Enhancers Hình 7.8 Sơ đồ tổ chức các gene điển hình ở eukaryote bậc cao Qua sơ đồ ở (Hình 7.8) cho thấy nhiều yếu tố di truyền được tìm thấy ở trong gene của eukaryote điển hình. Phức hợp phiên mã bám vào promotor bắt đầu tổng hợp mRNA. Vùng mã hóa của gene (exon) bị gián đoạn bởi một hoặc nhiều trình tự gián đoạn (intron), các trình tự này sẽ bị loại bỏ trong quá trình chế biến RNA. Sự phiên mã được điều hòa bởi các yếu tố enhancer, các yếu tố này phản ứng với các phân tử khác nhau có vai trò là tín hiệu cảm ứng. Enhancer có mặt ở cả phía trên và phía dưới promoter. Một vài enhancer có nhiều bản sao. Nhiều enhancer kích thích phiên mã bằng cách hình thành vòng DNA (DNA looping), liên quan đến sự tương tác giữa các vùng cách xa nhau có liên quan dọc sợi DNA. Các nhân tố cần thiết cho phiên mã bao gồm
- 220 protein hoạt hóa phiên mã, nó tương tác với ít nhất một yếu tố protein có trong một hoặc nhiều phức hợp protein lớn, nhiều yếu tố. Yếu tố protein trong phức hợp này được biết như là yếu tố phiên mã chung (general transcription factors), vì chúng gắn liền với sự phiên mã của nhiều gene khác nhau. Nhân tố phiên mã chung ở eukaryote có tính bảo tồn cao trong tiến hóa. Một trong số các phức hợp này là TFIID, gồm protein gắn với hộp TATA (TATA-box-binding protein) TBP gắn với promotor trong vùng TATA box. Ngoài TBP, phức hợp TFIID cũng gồm một số protein khác được gọi là những nhân tố gắn liền với TBP (TBP-associated factors) = TAFs. Chúng hoạt động như các chất trung gian qua đó ảnh hưởng của nhân tố hoạt hóa phiên mã được truyền đi. Sự phiên mã cũng yêu cầu một holoenzyme là RNA polymerase, chứa pol III tổ hợp ít nhất với 9 yếu tố protein khác. Ở nấm men, nhứng yếu tố này chứa nhân tố phiên mã TFIIB, TFIIF và TFIIH cũng như những protein khác. 4. Trình tự bất hoạt gene (gene silencing) Trình tự bất hoạt gene có thể nằm trước hoặc sau gene được điều hòa khoảng vài trăm cặp base. Chúng làm ngừng quá trình phiên mã bằng cách biến đổi histone và DNA. 5. Promoter chọn lọc (alternative promoter) Một vài gene eukaryote có hai hoặc nhiều promoter hoạt động trong những tế bào khác nhau. Những promoter khác nhau này dẫn đến những bản phiên mã khác nhau chứa cùng vùng mã hóa protein. Ví dụ ở Drosophila, gene mã hóa cho alcohol dehydrogenase, cấu tạo của nó trong genome có ba vùng mã hóa protein bị gián đoạn bởi hai intron. Sự phiên mã ở ấu trùng sử dụng một promoter khác với sự phiên mã ở ruồi trưởng thành. Bản phiên mã ở ruồi giấm trưởng thành có trình tự dẫn đầu 5' dài hơn. Nhưng hầu hết trình tự này bị loại bỏ trong splicing. Promoter biến đổi làm sự điều hòa phiên mã có thể không phụ thuộc vào ấu trùng hay ruồi giấm trưởng thành. 6. Splicing chọn lọc Cùng promoter được sử dụng để phiên mã một gene, ở các loại tế bào khác nhau có thể tạo sản phẩm có số lượng khác nhau hoặc tạo ra những protein khác nhau. Điều này là do cùng một bản phiên mã có thể có quá trình chế biến ở các loại tế bào là khác nhau. Sự tổng hợp α-amylase ở chuột, những phân tử mRNA khác nhau được tạo ra từ cùng một gene vì những phần intron khác nhau bị loại bỏ trong quá trình chế biến RNA. Tuyến nước bọt của chuột tạo nhiều enzyme hơn gan mặc dù cùng một trình tự mã hóa được phiên mã. Ở mỗi
- 221 loại tế bào, cùng một bản phiên mã sơ cấp (primary transcript) được tổng hợp, nhưng có hai quá trình chế biến khác nhau (Hình 7.9). Trình tự mã hóa bắt đầu 50 bp bên trong exon 2 được tạo thành nhờ nối với exon 3 và những exon tiếp theo. Ở tuyến nước bọt bản phiên mã sơ cấp được chế biến để exon S nối với exon 2 (exon L bị loại đi như là intron 1 và 2). Ở gan exon L nối với exon 2, exon S bị loại đi cùng với intron 1. Exon S và exon L trở thành những trình tự 5' biến đổi của amylase mRNA và mRNA này được dịch mã ở những tỷ lệ khác nhau. A. Bản phiên mã sơ cấp Phiên mã amylase của gan Quá trình chế biến ở tế bào gan mRNA amylase của gan B. Bản phiên mã sơ cấp Phiên mã amylase của tuyến nước bọt Quá trình chế biến ở tế bào mRNA amylase của tuyến nước bọt tuyến nước bọt Hình 7.9 Sản phẩm các phân tử mRNA amylase khác nhau do quá trình splicing khác nhau xảy ra ở tế bào tuyến nước bọt và tế bào gan của chuột. Câu hỏi và Bài tập 1. Sự biểu hiện gene ở prokaryote và eukaryote có đặc điểm gì? 2. Hãy nêu các kiểu điều hòa chủ yếu. 3. Trình bày cơ chế hoạt động của operon lactose. 4. Operon là gì? Nêu ý nghĩa của operon đối với sự biểu hiện của gene. 5. Gene mã hóa cho chất ức chế (repressor) của operon vi khuẩn có cần thiết phải ở gần gene cấu trúc không? Tại sao? 6. So sánh điều hòa âm tính và điều hòa dương tính của phiên mã. Cho ví dụ. 7. Khi có mặt glucose trong tế bào E. coli, nồng độ cAMP-CRP như
- 222 thế nào? Sự gắn của cAMP-CRP vào DNA có ảnh hưởng đến sự gắn của repressor không? 8. Nêu ý nghĩa của hiện tượng phiên mã dở (attenuation). 9. Phân biệt giữa repressor và aporepressor và cho ví dụ. 10. Thế nào là splicing chọn lọc? Cho ví dụ minh họa. Tài liệu Tham khảo Tiếng Việt Phạm Thành Hổ (2000). Di truyền học. NXB Giáo Dục. Lê Đình Lương, Phan Cự Nhân (1998). Cơ sở Di truyền học. NXB Giáo Dục. Hoàng Trọng Phán (1995). Di truyền học Phân tử. Trung tâm Đào tạo Từ xa, Đại học Huế. Tiếng Anh Anthony J. F. Griffiths, Susan R. Wessler, Richard C. Lewontin, William M. Gelbart, David T. Suzuki, Jeffrey H. Miller. 2004. An introduction to genetics analysis. W.H. Freeman Publishers. Harlt D.L., Jones E.W. (1998). Genetics - Principle and analysis. Jone and Bartlett Publshers. Toronto, Canada. Stansfield W.D. 1991. Schaum’s outline of theory and problems of genetics. McGraw-Hill, Inc., New York.
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD
-
Giáo trình Di truyền học: Vi sinh vật và ứng dụng - Hoàng Trọng Phán (chủ biên)
221 p | 363 | 184
-
Điều hòa biểu hiện gen sửa
37 p | 153 | 65
-
Bài giảng Di truyền học: Phần 2 - GV. Trương Thị Bích Phượng
95 p | 96 | 45
-
Điều hòa biểu hiện gene
21 p | 145 | 42
-
Điều hòa sự biểu hiện của gen
12 p | 151 | 40
-
Các nguyên lý điều hòa và mức độ kiểm soát phiên mã
5 p | 101 | 32
-
Giáo trình Di truyền học: Phần 2 - ĐH Đà Nẵng
163 p | 60 | 31
-
Tài liệu: Điều hòa biểu hiện gene ở eukaryote
8 p | 115 | 29
-
Di truyền học: Phần 2 - Trần Trung
136 p | 64 | 29
-
Gen điều hòa(p-1)
12 p | 117 | 28
-
Công nghệ gene : Điều hòa biểu hiện gene part 1
5 p | 53 | 17
-
Bài giảng: Sự điều hòa chu trình calvin
17 p | 81 | 14
-
Bài giảng Điều hòa biểu hiện gene ở eukaryote
7 p | 40 | 9
-
Mô tả đặc điểm hóa và khảo sát sự biểu hiện của họ gen Dehydrin ở cây quýt đường (Citrus clementina)
6 p | 21 | 5
-
Kiểm soát sự biểu hiện của gen
3 p | 10 | 2
-
Bài giảng Chương 2: Những vấn đề cơ bản
3 p | 11 | 1
-
Bài giảng Sinh học phân tử: Chương 6 - Nguyễn Hữu Trí
24 p | 1 | 1

markdown:
# Chương 7: Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene
Chia sẻ: Huynh Phuong Khanh | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:15
lượt xem 66
download
![](http://image.tlvnimg.com/document/thumbnail/2010/20100410/huynhphuongkhanh/80x100/c7_9888.jpg)
##
Chương 7: Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene
[Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ](javascript:void(0);)
Download
![](http://static.tlvnimg.com/b2013az/templates/version1/default/images/down16x21.png)
Không phải tất cả các gene đều có biểu hiện liên tục. Mức độ biểu hiện của gene khác nhau giữa các tế bào hoặc khác nhau theo giai đoạn trong chu trình tế bào. Chẳng hạn gene mã hóa cho hemoglobin được biểu hiện ở mức độ cao chỉ ở trong tế bào tiền thể (precursor) của tế bào máu. Hoạt tính của gene khác nhau theo chức năng tế bào. Ở động vật có xương sống như chuột, chứa khoảng 200 loại tế bào được phân hóa chức năng khác nhau....
Bình luận(0)
[Đăng nhập để gửi bình luận!](javascript:void(0);)
##
Nội dung Text: Chương 7: Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene
- 208 Chương 7 Sự Điều hòa Biểu hiện của Gene I. Các nguyên lý điều hòa và mức độ kiểm soát phiên mã Không phải tất cả các gene đều có biểu hiện liên tục. Mức độ biểu hiện của gene khác nhau giữa các tế bào hoặc khác nhau theo giai đoạn trong chu trình tế bào. Chẳng hạn gene mã hóa cho hemoglobin được biểu hiện ở mức độ cao chỉ ở trong tế bào tiền thể (precursor) của tế bào máu. Hoạt tính của gene khác nhau theo chức năng tế bào. Ở động vật có xương sống như chuột, chứa khoảng 200 loại tế bào được phân hóa chức năng khác nhau. Tất cả các tế bào đều chứa cùng thông tin di truyền, những tế bào khác nhau chỉ ở những gene hoạt động. Trong nhiều trường hợp, hoạt tính của gene được điều hòa ở mức độ phiên mã, cả qua những tín hiệu bắt đầu bên trong tế bào và cả phản ứng với những điều kiện bên ngoài. Tuy nhiên thông tin di truyền được điều hòa theo những cách khác nhau. Các bước điều khiển hoạt động gene bao gồm: - Cấu trúc lại DNA, trong đó những thay đổi biểu hiện gene phụ thuộc vào vị trí trình tự DNA trong genome. - Điều hòa phiên mã trong tổng hợp bản phiên mã RNA bằng sự điều khiển sự mở đầu và sự kết thúc - Quá trình chế biến RNA hoặc điều hòa qua quá trình cắt-nối trên RNA (RNA splicing) - Điều hòa dịch mã quá trình tổng hợp chuỗi polypeptid - Sự bền vững của mRNA Có sự khác nhau đáng kể trong sự điều hòa biểu hiện của các gene ở eukaryote và prokaryote. Prokaryote là những cơ thể đơn bào sống tự do, sinh trưởng và phân chia trong điều kiện thích hợp và được cung cấp đầy đủ chất dinh dưỡng. Do đó hoạt động của các gene được điều hòa do nhu cầu của tế bào khi cần thiết. Khác với prokaryote, eukaryote là những cơ thể đa bào. Trong cơ thể đang phát triển, một tế bào không chỉ sinh trưởng và phân chia mà tế bào thế hệ sau trải qua những thay đổi quan trọng về hình thái và hóa sinh và duy trì trạng thái biến đổi của nó. Hơn nữa trong quá trình phát triển phôi, tế bào eukaryote ít chịu ảnh hưởng của môi trường hơn so với vi khuẩn. Cuối cùng, ở cơ thể trưởng thành, sự sinh trưởng và phân chia tế bào của hầu hết các loại tế bào bị ngừng, mỗi tế bào chỉ phải duy trì các tính chất riêng biệt của nó.
- 209 A. Điều hòa âm tính Điểm bám của repressor Phiên mã Không phiên mã Protein repressor bám vào B. Điều hòa dương tính Điếm bám của nhân tố hoạt hóa Không phiên mã Phiên mã Protein hoạt hóa phiên mã bám vào Hình 7.1 Mô hình điều hòa âm tính (negative regulation) và điều hòa dương tính (positive regulation). A. Trong điều hòa âm tính, protein ức chế bám vào phân tử DNA, ngăn cản phiên mã B. Trong điều hòa dương tính, sự bám vào của protein hoạt hóa phiên mã, kích thích phiên mã. II. Điều hòa hoạt động gene ở prokaryote Ở vi khuẩn và phage, hoạt tính đóng mở gene thường được điều khiển qua phiên mã tổng hợp các mRNA xảy ra khi sản phẩm của gene được cần đến. Cơ chế phân tử cho mỗi mô hình điều hòa hoàn toàn khác nhau, nhưng thường theo một trong hai kiểu chính: điều hòa âm tính và điều hòa
- 210 dương tính (Hình 7.1). Trong hệ thống điều hòa âm tính (Hình 7.1A) một protein ức chế có mặt trong tế bào, ngăn cản sự phiên mã. Trong hệ thống cảm ứng được điều hòa âm tính, protein ức chế hoạt động làm ngăn cản phiên mã. Nhân tố cảm ứng kìm hãm chất ức chế, cho phép bắt đầu phiên mã. Trong hệ thống ức chế, protein aporepressor gắn với co-repressor tạo ra chất ức chế có hoạt tính, làm ngăn cản phiên mã. Ngược lại trong hệ thống điều hòa dương tính (Hình 7.1B), sự tổng hợp mRNA xảy ra nều protein điều hòa gắn vào một vùng của gene làm hoạt hóa phiên mã. Những protein này được xem là những nhân tố hoạt hóa phiên mã. Điều hòa âm tính và dương tính không loại trừ lẫn nhau. Một vài hệ thống là cả điều hòa âm tính và dương tính, sử dụng cả 2 hệ thống điều hòa để phản ứng với các điều kiện khác nhau trong tế bào. Điều hòa âm tính là phổ biến cho prokaryote, trong khi điều hòa dương tính lại phổ biến cho eukaryote. 1. Cấu trúc của operon Mô hình operon của điều hòa phiên mã Cơ chế điều hòa di truyền của hệ thống lac (lac system) được giải thích bằng mô hình operon của Francois Jacob và Jacque Monod (1960) (Hình 7.2). Hệ thống sử dụng lactose gồm 2 loại thành phần: gene cấu trúc mã hóa protein cần thiết cho sự vận chuyển và chuyển hóa lactose và các yếu tố điều hòa (gene ức chế lacI, promotor lac P và operator lacO). Sản phẩm gene cấu trúc được mã hóa bởi một phân tử mRNA đa cistron (polycistronic). Gene Z mã hóa cho enzyme β- galactosidase (thủy phân đường lactose thành galactose và glucose), gene Y mã hóa cho enzyme permease (cần cho vận chuyển lactose qua màng), gene A mã hóa cho enzyme transacetylase (vai trò chuyển hóa lactose chưa rõ). Đột biến promotor (lacP-) làm mất khả năng tổng hợp mRNA. Sản phẩm của gene lacI là chất ức chế, nó bám vào trình tự các base của DNA cấu tạo operator. Chất ức chế bám vào operator, ngăn cản sự khởi đầu phiên mã mRNA nhờ RNA polymerase. Chất cảm ứng (lactose) kích thích sự sinh tổng hợp mRNA bằng cách kết hợp và làm bất hoạt chất ức chế. Sự có mặt của chất cảm ứng làm chất ức chế không gắn vào operator, promotor cho phép khởi đầu tổng hợp mRNA. Khi môi trường có lactose, lactose được chuyển vào tế bào nhờ permease. Khi vào trong tế bào một số lactose (liên kết β -1,4) được chuyển thành allolactose (liên kết β-1,6) nhờ β-galactosidase. Allolactose là chất cảm ứng, nó gắn vào protein kìm hãm, gây biến đổi cấu hình tạo
- 211 phức hợp allolactose-repressor. Phức hợp này mất khả năng gắn vào operator. Lúc này operon mở ra, RNA polymerase bắt đầu phiên mã từ gene cấu trúc. Các yếu tố điều hoà Nhóm gene cấu trúc [A] Trực tiếp phiên mã [B] mARN Repressor gắn vào operator, ngăn cản phiên mã Repress or protein [C] Phức hợp chất cảm ứng-chất ức chế không thể gắn vào operator Inducer Khi không lactose, RNA polymerase bắt đầu phiên mã tổng hợp protein z, y và a Lac mARN β- Permeas Transacety galactosidase e lase Hình 7.2 A Bản đồ của operon lac; B. Sơ đồ của operon lac ở trạng thái bị kìm hãm C. Sơ đồ của operon lac ở trạng thái được kích thích Khi môi trường không có lactose, protein ức chế có hoạt tính gắn vào operator, làm sự phiên mã của tất cả các gene cấu trúc của operon lac bị dừng. Sự điều hòa của operon yêu cầu promotor nằm chồng lên một phần hoặc kề sát bên promotor của gene cấu trúc, vì nó gắn với chất ức chế
- 212 ngăn cản phiên mã. 2. Điều hòa dương tính operon lactose Chức năng của β-galactosidase trong chuyển hóa lactose để tạo ra glucose bằng cách cắt lactose (một sản phẩm cắt khác là galactose cũng có thể được chuyển thành glucose nhờ enzyme của operon galactose). Nếu cả glucose và lactose có mặt trong môi trường sinh trưởng, không cần hoạt động của operon lac. Trong môi trường có glucose, enzyme β- galactosidase không được tạo thành cho đến khi glucose trong môi trường được sử sụng hết. Sự có mặt của glucose làm mRNA không được tổng hợp, do đó không có sự tổng hợp β-galactosidase, vì sự thêm vào nhân tố cảm ứng làm bất hoạt chất kìm hãm. Một yếu tố khác cần cho sự bắt đầu tổng hợp mRNA, hoạt tính của yếu tố này được điều hòa bởi nồng độ glucose. Glucose có ảnh hưởng ức chế gián tiếp lên sự biểu hiện của operon lac. Những phân tử nhỏ adenosine monophosphate vòng (cAMP) phân bố rộng rãi trong mô động vật và trong các cơ thể eukaryote đa bào, có vai trò quan trọng làm chất trung gian hoạt động hormone. Chất này cũng có trong tế bào E. coli và nhiều tế bào vi khuẩn khác với chức năng khác nhau. cAMP được tổng hợp bởi enzyme adenyl cyclase, và nồng độ của cAMP được điều hòa gián tiếp qua trao đổi chất glucose. Khi vi khuẩn sinh trưởng ở môi trường chứa glucose, hàm lượng cAMP rất thấp. Trong môi trường chứa glycerol hoặc các nguồn carbon không thể đi vào con đường hóa sinh được sử dụng để trao đổi chất glucose (con đường glycolytic) hoặc khi vi khuẩn bị đói nguồn năng lượng, nồng độ cAMP cao. Hàm lượng glucose giúp điều hòa nồng độ cAMP trong tế bào và cAMP lại điều hòa hoạt tính của operon lac. E. coli chứa protein nhận cAMP hay CRP (cyclic AMP receptor protein) còn được gọi là protein hoạt hóa dị hóa CAP (catabolite activator protein), được mã hóa bởi gene crp. Đột biến ở gene crp và gene adenyl cyclase làm ngăn cản sự tổng hợp của mRNA lac. Điều này cho thấy chức năng của CRP và cAMP cần thiết cho tổng hợp mRNA Hình 7.3 Cấu trúc của cAMP lac. CRP và cAMP gắn vào một vị trí khác tạo phức hợp cAMP-CRP được biểu hiện. Phức hợp này là một yếu tố điều hòa hoạt hóa ở hệ thống lac.
- 213 Tổng hợp của mRNA l không Repressor không Phức hợp cAMP-CRP Có Phiên mã không Hình 7.4 Bốn trạng thái điều hòa của operon lac Nhu cầu về cAMP-CRP phụ thuộc vào hệ thống ức chế lac, vì đột biến crp và adenyl cyclase không thể tạo mRNA lac ngay cả khi có mặt đột biến ở gene điều hòa (lacI-) và gene chỉ huy (lacO-). Sở dĩ như vậy là vì phức hợp cAMP-CRP phải gắn vào trình tự base trên DNA ở vùng promotor để xảy ra phiên mã (Hình 7.4). Khác với chất ức chế trong điều hòa âm tính, phức hợp cAMP-CRP là chất điều hòa dương tính. Các thí nghiệm ở điều kiện in vitro cho thấy: mRNA lac được tổng hợp chỉ khi có cAMP vòng và không có chất ức chế. Khi vắng mặt phức hợp cAMP-CRP, RNA polymerase chỉ bám lỏng lẽo vào promotor. Vì vậy hiếm khi dẫn đến phiên mã vì không có sự tương tác đúng giữa RNA polymerase và promotor. Nhưng RNA polymerase được kích thích gắn vào promotor khi cAMP-CRP được gắn vào DNA. Những kết quả này giải thích chức năng lactose và glucose cùng nhau tham gia điều hòa phiên mã operon lac như thế nào. 3. Điều hòa âm tính operon tryptophan Operon tryptophan (trp) của E.coli chứa các gene cấu trúc mã hóa cho các enzyme tổng hợp amino acid tryptophan. Operon này được điều hòa theo cách sau: khi tryptophan có mặt đầy đủ trong môi trường sinh trưởng, sự phiên mã của operon bị ức chế. Khi sự cung cấp tryptophan bị thiếu, sự phiên mã xảy ra. Sự điều hòa của operon lactose tương tự với
- 214 operon lactose, vì sự tổng hợp mRNA được điều hòa âm tính nhờ chất ức chế. Tuy nhiên, khác với điều hòa ở operon lac, tryptophan hoạt động như chất đồng kìm hãm, kích thích chất ức chế gắn vào operator ngừng sự tổng hợp. Operon tryptophan hoạt động theo kiểu ức chế, điều hòa âm tính. Tryptophan được tổng hợp qua các giai đoạn khá phức tạp, mỗi giai đoạn có sự xúc tác của một enzyme đặc biệt. Các gene mã hóa cho các enzyme này nằm kề nhau trên nhiễm sắc thể của E.coli. Đó là các gene trpE, trpD, trpC, trpB, trpA. Các enzyme được dịch mã từ một phân tử mRNA đa cistron. Vùng mã hóa gene E được dịch mã trước tiên. Phía trước trpE về đầu 5' có promotor, operator và 2 vùng xếp lần lượt là leader (trpL) và đoạn kìm hãm phiên mã attenuator (trpa, không phải là trpA). Gene ức chế trpR nằm xa operon, tổng hợp protein aporepressor, là chất kìm hãm mà riêng nó không có hoạt tính. Khi tryptophan dư thừa, nó kết hợp với aporepressor tạo chất kìm hãm có hoạt tính, gắn vào operator của operon tryptophan làm dừng phiên mã các gene cấu trúc. Khi nồng độ tryptophan thấp, nó tách khỏi phức hợp kìm hãm và aporepressor mất hoạt tính. Lúc này operator mở ra, RNA polymerase dịch mã 5 gene cấu trúc để tổng hợp 5 enzyme tham gia tổng hợp ra tryptophan. (Hình 7.5). Phiên mã xảy ra trp P trp O trp L trp E trp D trp C Phiên mã Aporepressor Aporepressor không bám vào operator Phiên mã bị ức chế trp O trp P trp L trp E trp D trp C Không phiên mã Phức hợp Tryptophan- aporepressor bám vào operator và ức chế phiên mã Tryptophan Hoạt hóa aporepressor Hình 7.5 Điều hòa của trp operon ở E. coli A. Protein aporepressor không bám được vào operator, phiên mã xảy ra.
- 215 B. Khi có đủ tryptophan, phức hợp aporepressor và tryptophan làm chất ức chế hoạt động gắn được vào operator, sự phiên mã bị kìm hãm. 4. Phiên mã dở (Attenuation) Kiểu điều hòa thứ hai được phát hiện ở operon tryptophan được gọi là attenuation. Nó dùng sử dịch mã để điều khiển sự phiên mã. Khi có mặt tryptophan nội bào, ngay cả với nồng độ thấp, sự dịch mã một phần vùng leader của mRNA ngay khi vừa được tổng hợp, kết quả làm dừng sự phiên mã trước khi gene cấu trúc đầu tiên của operon được sao chép. [A [B ] ] Kãút thuïc phiãn maî Hình 7.6 (A) Sơ đồ phiên mã của leader trp; (B) Chi tiết cấu trúc của 2 codon trp ở vòng 1-2 Phiên mã dở (attenuation) là kết quả sự tương tác giữa các trình tự DNA trong vùng leader của bản phiên mã trp. Ở tế bào kiểu dại, sự phiên mã operon trp thường được bắt đầu. Tuy nhiên khi có mắt một lượng nhỏ tryptophan, hầu hết phân tử mRNA kết thúc ở vùng 28 base đặc biệt ở trong trình tự leader. Kết quả của sự kết thúc sớm này tạo phân tử mRNA chứa 140 nucleotide chấm dứt một đoạn ngắn của các gene mã hóa cho các enzyme trp. Vùng 28 base xảy ra sự kết thúc phiên mã sớm như thế được gọi là attenuator. Trình tự base của vùng này thường có các tính chất điểm kết thúc, gồm dạng đoạn và vòng (stem-loop) trên mRNA theo sau là trình tự của 8 uridine. Trình tự leader có các đặc điểm:
- 216 - Một vùng có codon AUG và phía sau là codon kết thúc UGA, mã hóa cho một polypeptide chứa 14 amino acid được gọi là leader polypeptide. - Hai codon tryptophan ở vị trí 10 và 11 trên mRNA của leader polypeptide. Trình tự lặp lại ngắn này có ý nghĩa trọng điều hòa. - Bốn đoạn của RNA leader là vùng 1, 2, 3 và 4 tạo thành do khả năng kết cặp của các base với nhau. Các base ở vùng 1 kết cặp với vùng 2, vùng 3 kết cặp với vùng 4 (Hình 7.6). Khi sự kết cặp xảy ra ở dạng này, sự phiên mã kết thúc ở đoạn đi qua uridine phía trước nucleotide 140. Kiểu kết cặp này xảy ra ở mRNA leader được tinh sạch. - Một kiểu kết cặp biến đổi có thể xảy ra, trong đó các base vùng 2 kết cặp với vùng 3 nhờ các cặp base ở 2 vùng này gần như bổ sung nhau (Hình 7.6B). Qua mô hình kết cặp base biến đổi này (3-4 hoặc 2-3), sự tổ chức trình tự mRNA có thể điều hòa phiên mã qua dịch mã của leader polypeptide (Hình 7.7). Khi vùng leader được phiên mã, sự dịch mã leader polypeptid cũng bắt đầu. Vì có 2 codon của tryptophan trong trình tự mã hóa, nên sự dịch mã nhạy cảm với số lượng tRNAtrp đưa vào. Nếu môi trường cung cấp đầy đủ tryptophan, ribosome trượt qua codon tryptophan và đi vào vùng 2 (Hình 7.7B). Sự có mặt của ribosome loại bỏ khả năng kết cặp của vùng khoảng 10 base ở mỗi phía của codon đang dịch mã. Sự có mặt của ribosome ở vùng 2 ngăn cản nó kết cặp với vùng 3. Trong trường hợp này vùng 3 kết cặp với vùng 4, tạo ra điểm kết thúc phiên mã. Sự phiên mã kết thúc khi qua các uridine nằm phía sau vùng 4. Khi số lượng tRNAtrp không đủ, sự dịch mã leader polypeptide bị dừng lại đột ngột ở các codon tryptophan. Sự dùng lại này ngăn cản ribosome tiến vào vùng 2, vì vậy vùng 2 được tự do sẽ kết cặp với vùng 3 làm cản trở sự hình thành cấu trúc kết thúc. Vì vậy phân tử trp mRNA hoàn chỉnh được tạo thành, chứa cả trình tự mã hóa cho gene cấu trúc. Tóm lại, attenuation là cơ chế điều hòa tinh tế trên cơ sở điều hòa âm tính: Khi tRNAtrp đến đủ cung cấp cho sự dịch mã leader polypeptide, sự phiên mã bị dừng, các trp enzyme không được tổng hợp. Khi nồng độ tRNAtrp quá thấp, sự phiên mã xảy ra cho đến hết, các trp enzyme được tạo nên. Nhiều operon chịu trách nhiệm tổng hợp các amino acid khác (như các operon của leucine, isoleucine, phenylalanine, histidine) cũng được điều hòa nhờ attenuator với chức năng tạo ra vùng kết cặp biến đổi ở bản
- 217 phiên mã. Ở operon histidine vùng mã hóa của leader polypeptide chứa 7 codon histidine kế nhau. Ở operon phenylalanine vùng mã hóa cho leader polypeptide chứa 7 codon phenylalanin chia 3 nhóm. Sự kết cặp trong trp RNA ở nồng độ codons thấp của Kết thúc phiên mã tryptophan RNA polymerase Phiên mã tiếp tục Sự kết cặp trong Sự kết cặp RNA ở nồng độ cao trong mRNA của tryptophan A B C Hình 7.7 Phiên mã dở (attenuation) của operon trp ở E. coli A. Ở mRNA tự do có sự kết cặp base giữa 1-2 và 3-4 B. Ở nồng độ cao của tryptophan, ribosome tiến đến vùng 2 và sự kết cặp 3-4 làm kết thúc phiên mã C. Ở nồng độ tryptophan thấp, ribosome ở vùng codon trp cho phép kết cặp 2-3 và phiên mã không bị kết thúc sau khi qua vùng 4 Điều hòa kiểu attenuation không thể xảy ra ở eukaryote vì ở eukaryote sự phiên mã và dịch mã không xảy ra đồng thời. Sự phiên mã xảy ra trong nhân, còn sự dịch mã xảy ra ở tế bào chất. Điều hòa ở operon lac và operon trp là ví dụ về một trong số các cơ chế quan trọng điều hòa hoạt động gene ở mức phiên mã của prokaryote. III. Điều hòa biểu hiện gene ở eukaryote Điều hòa hoạt động gene ở eukaryote phức tạp hơn nhiều so với prokaryote. Liên quan đến điều hòa, giữa prokaryote và eukaryote có một số điểm khác biệt: - Ở eukaryote thường chỉ có một chuỗi polypeptide đơn được dịch mã từ một phân tử mRNA hoàn chỉnh. mRNA đa cistron (polycistronic) chỉ có ở prokaryote, không có ở eukaryote. - DNA của eukaryote gắn với protein histone tạo sợi chromatin, và gắn với protein phi histone. Chỉ có một đoạn nhỏ DNA để trần. Ở
- 218 prokaryote, một vài protein có mặt trên nhiễm sắc thể bị gấp nếp, còn lại hầu hết DNA trần. - Một đoạn DNA quan trọng của eukaryote chứa trình tự nucleotide lặp lại trung bình hoặc lặp lại cao. Một vài trình tự lặp lại được xếp nối tiếp thành các bản sao tiếp nối nhau, một vài trình tự khác lại không xếp nối tiếp. Vi khuẩn chứa đoạn DNA lặp lại nhỏ khác các gene của rRNA và tRNA nhân đoạn và một vài yếu tố di động. Một đoạn lớn DNA của eukaryote không được dịch mã. Hầu hết trình tự nucleotide không được mã hóa thành protein. Các eukaryote đơn bào, chẳng hạn nấm men là trường hợp ngoại lệ đối với tính chất này. Một vài gene eukaryote được biểu hiện và điều hòa nhờ cơ chế cấu trúc lại những đoạn DNA nhất định theo một phương thức được điều khiển và để tăng số lượng các gene đặc biệt này khi cần thiết. Các gene eukaryote là gián đoạn được phân thành các exon và intron. Các intron được cắt bỏ trong quá trình chế biến bản phiên mã RNA trước khi bắt đầu dịch mã. Ở eukaryote, mRNA được tổng hợp trong nhân và được chuyển qua màng nhân, vào tế bào chất mới được sử dụng. Tế bào vi khuẩn không có nhân được tách biệt với tế bào chất. 1. Sự biến đổi DNA Một số gene của eukaryote được điều hòa bằng sự biến đổi DNA. Chẳng hạn, những trình tự nhất định có thể được khuyếch đại hoặc cấu trúc lại trong genome hoặc các base có thể bị biến đổi về mặt hóa học. Một vài biến đổi được phục hồi, những biến đổi khác lại bền vững. Tuy nhiên những thay đổi bền vững này thường xảy ra ở tế bào sinh dưỡng, vì vậy chúng không được truyền lại cho thế hệ sau qua dòng giao tử. 2. Các promoter Tương tự vi khuẩn, các promoter của eukaryote cũng nằm phía trước điểm xuất phát trên mRNA và có những trình tự được bảo tồn trong tiến hóa. Hộp TATA định hướng cho mRNA bắt đầu phiên mã nằm ở phía trước điểm bắt đầu phiên mã khoảng 30 bp ở động vật có vú và 60 đến 120 bp ở nấm men. Hộp TATA hoạt động có hiệu quả cùng với 2 trình tự tương ứng ở phía trước khoảng 40 bp là CCAAT và 110 bp là trình tự giàu GC. Sự thay đổi hộp TATA làm giảm tốc độ phiên mã. Hiệu quả của tốc độ phiên mã được đo bằng sự thay đổi của từng base trong promoter. * Sự cấu trúc lại DNA theo chương trình (programmed DNA rearrangement) Sự cấu trúc lại trình tự DNA trong genome là cơ chế bất thường
- 219 nhưng quan trọng, nhờ đó một số gene được điều hòa. 3. Những trình tự tăng cường phiên mã (Enhancer) Các thụ thể của hormone và những protein hoạt hóa phiên mã khắc gắn với trình tự DNA đặc biệt được biết là enhancer. Trình tự enhancer khá ngắn (thường chỉ 20 cặp base) được tìm thấy ở các vị trí khác nhau quanh gene được điều hòa. Hầu hết các enhancer nằm ở phía dưới điểm bắt đầu phiên mã (đôi khi cách xa nhiều kb). Những enhancer khác là các intron nằm trong vùng mã hóa và một vài enhancer thậm chí nằm ở đầu 3' của gene. Enhancer là thành phần nhạy cảm của tổ chức gene ở eukaryote vì chúng cho phép gene phiên mã chỉ khi nào có nhân tố hoạt hóa phiên mã đúng. Một vài enhancer phản ứng với các phân tử bên ngoài tế bào, chẳng hạn hormone steroid tạo phức hợp receptor-hormone. Những enhancer khác phản ứng với các phân tử được tạo thành ở bên trong tế bào (chẳng hạn trong suốt quá trình phát triển). Những enhancer này cho phép các gene dưới sự điều khiển của nó tham gia vào biệt hóa tế bào (differentiation) hoặc được biểu hiện theo cách đặc biệt ở trong mô. Nhiều gene ở dưới sự kiểm soát của các enhancer khác nhau, vì vậy chúng có thể phản ứng với nhiều tín hiệu phân tử khác nhau cả bên trong và bên ngoài. Untranslated leader Introns Exons Vùng 5’ Vùng 3’ Enhancers Promotor Enhancers Hình 7.8 Sơ đồ tổ chức các gene điển hình ở eukaryote bậc cao Qua sơ đồ ở (Hình 7.8) cho thấy nhiều yếu tố di truyền được tìm thấy ở trong gene của eukaryote điển hình. Phức hợp phiên mã bám vào promotor bắt đầu tổng hợp mRNA. Vùng mã hóa của gene (exon) bị gián đoạn bởi một hoặc nhiều trình tự gián đoạn (intron), các trình tự này sẽ bị loại bỏ trong quá trình chế biến RNA. Sự phiên mã được điều hòa bởi các yếu tố enhancer, các yếu tố này phản ứng với các phân tử khác nhau có vai trò là tín hiệu cảm ứng. Enhancer có mặt ở cả phía trên và phía dưới promoter. Một vài enhancer có nhiều bản sao. Nhiều enhancer kích thích phiên mã bằng cách hình thành vòng DNA (DNA looping), liên quan đến sự tương tác giữa các vùng cách xa nhau có liên quan dọc sợi DNA. Các nhân tố cần thiết cho phiên mã bao gồm
- 220 protein hoạt hóa phiên mã, nó tương tác với ít nhất một yếu tố protein có trong một hoặc nhiều phức hợp protein lớn, nhiều yếu tố. Yếu tố protein trong phức hợp này được biết như là yếu tố phiên mã chung (general transcription factors), vì chúng gắn liền với sự phiên mã của nhiều gene khác nhau. Nhân tố phiên mã chung ở eukaryote có tính bảo tồn cao trong tiến hóa. Một trong số các phức hợp này là TFIID, gồm protein gắn với hộp TATA (TATA-box-binding protein) TBP gắn với promotor trong vùng TATA box. Ngoài TBP, phức hợp TFIID cũng gồm một số protein khác được gọi là những nhân tố gắn liền với TBP (TBP-associated factors) = TAFs. Chúng hoạt động như các chất trung gian qua đó ảnh hưởng của nhân tố hoạt hóa phiên mã được truyền đi. Sự phiên mã cũng yêu cầu một holoenzyme là RNA polymerase, chứa pol III tổ hợp ít nhất với 9 yếu tố protein khác. Ở nấm men, nhứng yếu tố này chứa nhân tố phiên mã TFIIB, TFIIF và TFIIH cũng như những protein khác. 4. Trình tự bất hoạt gene (gene silencing) Trình tự bất hoạt gene có thể nằm trước hoặc sau gene được điều hòa khoảng vài trăm cặp base. Chúng làm ngừng quá trình phiên mã bằng cách biến đổi histone và DNA. 5. Promoter chọn lọc (alternative promoter) Một vài gene eukaryote có hai hoặc nhiều promoter hoạt động trong những tế bào khác nhau. Những promoter khác nhau này dẫn đến những bản phiên mã khác nhau chứa cùng vùng mã hóa protein. Ví dụ ở Drosophila, gene mã hóa cho alcohol dehydrogenase, cấu tạo của nó trong genome có ba vùng mã hóa protein bị gián đoạn bởi hai intron. Sự phiên mã ở ấu trùng sử dụng một promoter khác với sự phiên mã ở ruồi trưởng thành. Bản phiên mã ở ruồi giấm trưởng thành có trình tự dẫn đầu 5' dài hơn. Nhưng hầu hết trình tự này bị loại bỏ trong splicing. Promoter biến đổi làm sự điều hòa phiên mã có thể không phụ thuộc vào ấu trùng hay ruồi giấm trưởng thành. 6. Splicing chọn lọc Cùng promoter được sử dụng để phiên mã một gene, ở các loại tế bào khác nhau có thể tạo sản phẩm có số lượng khác nhau hoặc tạo ra những protein khác nhau. Điều này là do cùng một bản phiên mã có thể có quá trình chế biến ở các loại tế bào là khác nhau. Sự tổng hợp α-amylase ở chuột, những phân tử mRNA khác nhau được tạo ra từ cùng một gene vì những phần intron khác nhau bị loại bỏ trong quá trình chế biến RNA. Tuyến nước bọt của chuột tạo nhiều enzyme hơn gan mặc dù cùng một trình tự mã hóa được phiên mã. Ở mỗi
- 221 loại tế bào, cùng một bản phiên mã sơ cấp (primary transcript) được tổng hợp, nhưng có hai quá trình chế biến khác nhau (Hình 7.9). Trình tự mã hóa bắt đầu 50 bp bên trong exon 2 được tạo thành nhờ nối với exon 3 và những exon tiếp theo. Ở tuyến nước bọt bản phiên mã sơ cấp được chế biến để exon S nối với exon 2 (exon L bị loại đi như là intron 1 và 2). Ở gan exon L nối với exon 2, exon S bị loại đi cùng với intron 1. Exon S và exon L trở thành những trình tự 5' biến đổi của amylase mRNA và mRNA này được dịch mã ở những tỷ lệ khác nhau. A. Bản phiên mã sơ cấp Phiên mã amylase của gan Quá trình chế biến ở tế bào gan mRNA amylase của gan B. Bản phiên mã sơ cấp Phiên mã amylase của tuyến nước bọt Quá trình chế biến ở tế bào mRNA amylase của tuyến nước bọt tuyến nước bọt Hình 7.9 Sản phẩm các phân tử mRNA amylase khác nhau do quá trình splicing khác nhau xảy ra ở tế bào tuyến nước bọt và tế bào gan của chuột. Câu hỏi và Bài tập 1. Sự biểu hiện gene ở prokaryote và eukaryote có đặc điểm gì? 2. Hãy nêu các kiểu điều hòa chủ yếu. 3. Trình bày cơ chế hoạt động của operon lactose. 4. Operon là gì? Nêu ý nghĩa của operon đối với sự biểu hiện của gene. 5. Gene mã hóa cho chất ức chế (repressor) của operon vi khuẩn có cần thiết phải ở gần gene cấu trúc không? Tại sao? 6. So sánh điều hòa âm tính và điều hòa dương tính của phiên mã. Cho ví dụ. 7. Khi có mặt glucose trong tế bào E. coli, nồng độ cAMP-CRP như
- 222 thế nào? Sự gắn của cAMP-CRP vào DNA có ảnh hưởng đến sự gắn của repressor không? 8. Nêu ý nghĩa của hiện tượng phiên mã dở (attenuation). 9. Phân biệt giữa repressor và aporepressor và cho ví dụ. 10. Thế nào là splicing chọn lọc? Cho ví dụ minh họa. Tài liệu Tham khảo Tiếng Việt Phạm Thành Hổ (2000). Di truyền học. NXB Giáo Dục. Lê Đình Lương, Phan Cự Nhân (1998). Cơ sở Di truyền học. NXB Giáo Dục. Hoàng Trọng Phán (1995). Di truyền học Phân tử. Trung tâm Đào tạo Từ xa, Đại học Huế. Tiếng Anh Anthony J. F. Griffiths, Susan R. Wessler, Richard C. Lewontin, William M. Gelbart, David T. Suzuki, Jeffrey H. Miller. 2004. An introduction to genetics analysis. W.H. Freeman Publishers. Harlt D.L., Jones E.W. (1998). Genetics - Principle and analysis. Jone and Bartlett Publshers. Toronto, Canada. Stansfield W.D. 1991. Schaum’s outline of theory and problems of genetics. McGraw-Hill, Inc., New York.
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD
-
Giáo trình Di truyền học: Vi sinh vật và ứng dụng - Hoàng Trọng Phán (chủ biên)
221 p |
363 |
184
-
Điều hòa biểu hiện gen sửa
37 p |
153 |
65
-
Bài giảng Di truyền học: Phần 2 - GV. Trương Thị Bích Phượng
95 p |
96 |
45
-
Điều hòa biểu hiện gene
21 p |
145 |
42
-
Điều hòa sự biểu hiện của gen
12 p |
151 |
40
-
Các nguyên lý điều hòa và mức độ kiểm soát phiên mã
5 p |
101 |
32
-
Giáo trình Di truyền học: Phần 2 - ĐH Đà Nẵng
163 p |
60 |
31
-
Tài liệu: Điều hòa biểu hiện gene ở eukaryote
8 p |
115 |
29
-
Di truyền học: Phần 2 - Trần Trung
136 p |
64 |
29
-
Gen điều hòa(p-1)
12 p |
117 |
28
-
Công nghệ gene : Điều hòa biểu hiện gene part 1
5 p |
53 |
17
-
Bài giảng: Sự điều hòa chu trình calvin
17 p |
81 |
14
-
Bài giảng Điều hòa biểu hiện gene ở eukaryote
7 p |
40 |
9
-
Mô tả đặc điểm hóa và khảo sát sự biểu hiện của họ gen Dehydrin ở cây quýt đường (Citrus clementina)
6 p |
21 |
5
-
Kiểm soát sự biểu hiện của gen
3 p |
10 |
2
-
Bài giảng Chương 2: Những vấn đề cơ bản
3 p |
11 |
1
-
Bài giảng Sinh học phân tử: Chương 6 - Nguyễn Hữu Trí
24 p |
1 |
1

Set-Cookie: TLDEVNamespace=82fs9drodh342svshc9uanmf10; path=/; domain=.tailieu.vn; HttpOnly

Server: Apache/2.2.31 (CentOS)


text:
Chiều ngày 4/2/2015, Hội đồng nhân dân tỉnh Bến Tre khoá VIII đã tổ chức kỳ họp thứ 12 (kỳ họp bất thường) để bầu bổ sung chức danh Phó Chủ tịch UBND tỉnh, thay thế ông Trần Anh Tuấn, Phó Chủ tịch UBND tỉnh vừa nghỉ hưu theo chế độ.
®Tạp chí điện tử Tổ chức nhà nước là cơ quan báo chí của Bộ Nội vụ, có chức năng thông tin, tuyên truyền các chủ trương của Đảng, chính sách, pháp luật của Nhà nước.


text:
๑۩۞۩๑ TUỔI TRẺ 10A2 ๑۩۞۩๑
::
(¯`•¸·´¯) GIẢI TRÍ - THƯ GIÃN (¯`·¸•´¯)
::
Game - game thủ
Tên thành viên
Mật khẩu
Ghi nhớ
:: Quên mật khẩu ::
Đăng Kí
Đăng nhập
Diễn Đàn
Thành Viên
Lịch
Bài Trong Ngày
Tìm Kiếm
News & Announcements
๑۩۞۩๑ TUỔI TRẺ 10A2 ๑۩۞۩๑
::
(¯`•¸·´¯) GIẢI TRÍ - THƯ GIÃN (¯`·¸•´¯)
::
Game - game thủ
Hướng Dẫn Các Bước Chế Tạo ( Vũ Khí Kim Ô Maxx Op ) Phiên Bản 8.0.10 ...
Sun Dec 04, 2011 8:11 am
dearmama
Thành viên
Tuổi
:
Tổng số bài gửi
:
381
Đến từ
:
Tiêu đề: Hướng Dẫn Các Bước Chế Tạo ( Vũ Khí Kim Ô Maxx Op ) Phiên Bản 8.0.10 ...
Hướng Dẫn Các Bước Chế Tạo ( Vũ Khí Kim Ô Maxx Op ) Phiên Bản 8.0.10 ...
Chỉ có thành viên đã đăng kí có thể xem đoạn bài ẩn ỏ đây!
bạn có thể Đăng Kí thành viên hoặc Đang Nhập vào diễn đàn!
Theo Các Bạn VLTK Sẻ Ra Chức Nâng Năng Cấp Trang Bị Mới : Kim Ô Và Tử Mãng game_Y.
.Chúng Tôi VNGame Sẻ Cập Nhật Các Cách Ép Đồ Kim Ô Của Game_Y Chính Thức
Ra Mắt Các Bạn Nhân Sỉ Võ Lâm Các Bộ Tử Mãng.
Dưới Đây Là Các Cách Hướng Dẫn Và Cách Ép Đồ Kim Ô :
1- Nón Kim Ô :
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
2- Áo Kim Ô :
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
3- Dai Kim Ô :
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
4- Bao Tay Kim Ô :
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
5- Dây Chuyền Kim Ô :
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
6- Ngọc Bội Kim Ô
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
7- Giầy Kim Ô :
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
8- Nhẫn Thượng Giới Kim Ô
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
9- Nhẫn Hạ Giới Kim Ô
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
10- Kim Ô Vũ Khí Víp
Thảm Khảo Ở Phần Hướng Dẫn
"HướngDẫn""CáchÉp"
-Các Muốn Có Kim ÔKim Bài Thì Các Bạn Sẻ Dùng Hành Hiệp Lệnh Để Đổi Ra.
Đổi từ 200 Hành Hiệp Lệnh = Tử Mãng Kim Bài
Nhận Hành Hiệp Lệnh Hàng Ngày XemTạiĐây Để Có Hành Hiệp Lệnh Và Làm Gì Để Có
Hành Hiệp Lệnh.
!!! Đó Là Các Cách Ép Nhanh Nhất Của VL
Hướng Dẫn Các Bước Chế Tạo ( Vũ Khí Kim Ô Maxx Op ) Phiên Bản 8.0.10 ...
Trang
1
trong tổng số
1
trang
Permissions in this forum:
Bạn
không có quyền
trả lời bài viết
๑۩۞۩๑ TUỔI TRẺ 10A2 ๑۩۞۩๑
::
(¯`•¸·´¯) GIẢI TRÍ - THƯ GIÃN (¯`·¸•´¯)
::
Game - game thủ
๑۩۞۩๑ TUỔI TRẺ 10A2 ๑۩۞۩๑
::
(¯`•¸·´¯) GIẢI TRÍ - THƯ GIÃN (¯`·¸•´¯)
::
Game - game thủ
Copyright © 2007 - 2010, wWw.A2Bmt.cOm
Founded
by Mr.FR
Developed by
A2's Members
.
Powered by phpBB2 - GNU General Public License
Copyright © phpBB Group. Host in France. Support by Forumotion
Xem tốt nhất ở độ phần giải lớn hơn 1280x1024 và trình duyệt Firefox

Cache-Control: post-check=0, pre-check=0

Vary: User-Agent

P3P: CP="IDC DSP COR ADM DEVi TAIi PSA PSD IVAi IVDi CONi HIS OUR IND CNT"