markdown:
PhimVuiHD.net -
[ miễn phí, chất lượng hình ảnh rõ nét, tốc độ tải phim nhanh. PhimVuiHD.Net luôn cập nhật phim mới nhất liên tục để mang đến cho các bạn những bộ phim hành động, võ thuật, phim chiếu rạp bom tấn hay các thể loại phim tâm lý, tình cảm cực lôi cuốn và hấp dẫn nhất. Đặc biệt website rất thân thiện với người dùng hỗ trợ xem trên di động và không có quảng cáo gây khó chịu. Xem phim online](http://phimvuihd.net)


markdown:
# HCM Thực Phẩm Chức Năng Làm Đẹp - Linh Lan Shop
Thảo luận trong '
[Mỹ phẩm](forums/my-pham.154/)' bắt đầu bởi [linhlanshop](members/linhlanshop.49947/), [24 Tháng tư 2014](threads/thuc-pham-chuc-nang-lam-dep-linh-lan-shop.43321/).
3 Trả lời, 600 Đọc
Bài viết tương tự
|Tiêu đề||Date|
|
|
Thảo luận trong '
[Mỹ phẩm](forums/my-pham.154/)' bắt đầu bởi [linhlanshop](members/linhlanshop.49947/), [24 Tháng tư 2014](threads/thuc-pham-chuc-nang-lam-dep-linh-lan-shop.43321/).
3 Trả lời, 600 Đọc
|Tiêu đề||Date|
|
|

WARC-Type: response

Content-Type: application/http; msgtype=response

Cache-control: private, max-age=0

Connection: close

Server: Apache

X-Frame-Options: SAMEORIGIN

Vary: Accept-Encoding

Content-Type: text/html; charset=UTF-8


markdown:
Sở Tài nguyên Môi trường TP.HCM vừa tổ chức Hội nghị tổng kết năm 2016 và triển khai nhiệm vụ năm 2017. Trong năm qua, Sở đã rà soát, kiểm tra xử lý 1.151 dự án chậm triển khai với diện tích hơn 6.5000ha.
Trong năm 2016, Sở Tài nguyên Môi trường cũng cấp 7.476 giấy chứng nhận quyền sử dụng đất cho tổ chức, 34.174 giấy chứng nhận cho cá nhân, giải quyết cấp đổi, cấp lại, tặng cho… cho gần gần 268.000 hồ sơ.
*Dự án Kenton Residences do Công ty Tài Nguyên làm chủ đầu tư đã ngưng thi công từ 6 năm nay*
Đến nay 100% hộ gia đình ở TP.HCM được cấp nước sạch. Tuy nhiên, có đến 30% hộ dân được cấp nước sạch nhưng vẫn dùng nước giếng khoan do thói quen.
Phó Chủ tịch UBND TP.HCM, ông Lê Văn Khoa cho rằng, nguồn lực đất đai của TP.HCM quý giá và hữu hạn. Thời gian qua có tình trạng nhiều đơn vị sử dụng sai mục đích, không hiệu quả. Trong khi đó lại có nhiều đơn vị có nhu cầu thực sự, có năng lực khai thác tốt nhưng lại không có đất để triển khai phát triển kinh tế xã hội.
Do đó, Sở Tài nguyên Môi trường phải mạnh dạn tham mưu thu hồi những dự án sử dụng không hiệu quả, sai mục đích để giao cho những đơn vị khác cần và có năng lực triển khai.
Ngoài ra, thủ tục giao đất cho doanh nghiệp cũng phải nhanh, đúng pháp luật để cải thiện môi trường đầu tư của TP.HCM, nâng cao năng lực cạnh tranh của doanh nghiệp.
“Trong tháng 2, Sở phải tham mưu cho UBND TP.HCM ban hành quy chế quản lý nước ngầm theo hướng hạn chế sử dụng nước ngầm để bảo vệ môi trường và tìm giải pháp khắc phục tình trạng ô nhiễm môi trường như hiện nay”, ông Khoa nói.
**NGUYỄN DUY**

Cache-Control: private

Content-Type: text/html; charset=utf-8

Set-Cookie: .ASPXANONYMOUS=lugJN5cPqSYw0HkruHT1lKULougnO8bOK53oU4Jo6P86MSbcLbKA7TZXvlP201mbwDJYIBosR-PQMZbFDVy7Vf1eyBPqOdgbfeDxTkWmbVZuGdcxQ_iKqihCkv1R8_PC9C-kiZRODHF3qEis52-xfg2; domain=plo.vn; expires=Sun, 30-Apr-2017 08:28:43 GMT; path=/; HttpOnly

X-Cache: MISS from xCache11-01


markdown:
# Ng∆∞·ªùi bu√¥n ƒë·ªìng n√°t nh·∫≠n gi·∫£i qu·ªëc t·∫ø
######
14:27 07/10/2013 in
[C√¢u chuy·ªán th√Ýnh c√¥ng](/post/category/11-cau-chuyen-thanh-cong)
Xu·∫•t thân là m·ªôt ng∆∞·ªùi buôn ƒë·ªìng nát (ve chai), ch·ªã ƒëã v∆∞·ª£t khó ƒëi lên, làm ch·ªß m·ªôt c∆° s·ªü ƒëúc ƒë·ªìng. Ch·ªã là ng∆∞·ªùi ph·ª• n·ªØ Vi·ªát Nam ƒë·∫ßu tiên ƒë∆∞·ª£c Qu·ªπ Tài chính vi mô toàn c·∫ßu trao gi·∫£i th∆∞·ªüng. Ch·ªã là D∆∞∆°ng Th·ªã Tuy·∫øt...
Không quá khó tìm nhà c·ªßa ch·ªã D∆∞∆°ng Th·ªã Tuy·∫øt (sinh nƒÉm 1975) ·ªü th·ªã tr·∫•n Lâm, huy·ªán Ý Yên, Nam ƒê·ªãnh. Không ch·ªâ b·ªüi th·ªã tr·∫•n nh·ªè mà vì ch·ªã Tuy·∫øt quá quen m·∫∑t v·ªõi nh·ªØng ng∆∞·ªùi dân n∆°i ƒëây. B·ªüi tr∆∞·ªõc khi tr·ªü thành doanh nhân, ch·ªã là m·ªôt ng∆∞·ªùi buôn ƒë·ªìng nát.
·ªû thành ph·ªë, các ông b·ªë bà m·∫π mu·ªën d·ªça khi con không ch·ªãu h·ªçc hành ƒë·ªÅu nói: l·ªõn lên cho ƒëi ƒë·ªìng nát. Nói th·∫ø nghƒ©a là ng∆∞·ªùi làm ngh·ªÅ ƒë·ªìng nát b·∫ßn cùng l·∫Øm r·ªìi, là kh·ªï l·∫Øm ch·ª© ch·∫≥ng sung s∆∞·ªõng gì. Ho·∫∑c nhìn ai ƒÉn m·∫∑c lôi thôi, rách r∆∞·ªõi thì ng∆∞·ªùi ta ví: trông nh∆∞ m·∫•y bà ƒë·ªìng nát! Th·∫ø nên khi k·ªÉ v·ªÅ công vi·ªác c·ªßa mình hi·ªán t·∫°i, ch·ªã Tuy·∫øt không bao gi·ªù quên nh·∫Øc: “Tr∆∞·ªõc ƒëây mình có ngh·ªÅ ƒë·ªìng nát!”.
Ng∆∞·ªùi ƒë·ªìng nát ƒëi mua s·∫Øt gi·∫•y v·ª•n ·ªü ƒëâu thì quen ·ªü ƒë·∫•y, quen ƒë·∫øn n·ªói b·∫•t k·ªÉ nhà có ƒë·ªì ƒë·ªìng nát gì bán h·ªç ƒë·ªÅu nh·∫Øn ch·ªã ƒë·∫øn l·∫•y. Còn bây gi·ªù thì ng∆∞·ªùi ta quen v·ªõi ch·ªã h∆°n n·ªØa b·ªüi ch·ªã là ng∆∞·ªùi Vi·ªát Nam ƒë·∫ßu tiên nh·∫≠n gi·∫£i th∆∞·ªüng Tài chính vi mô toàn c·∫ßu, ƒë∆∞·ª£c trao t·∫°i Paris (Pháp) vào tháng 12-2011.
Nh·ªØng ngày ƒë·∫ßu xuân, c·∫£ khu x∆∞·ªüng r·ªông m·∫•y trƒÉm mét vuông c·ªßa nhà ch·ªã Tuy·∫øt v·∫´n còn ng·ªïn ngang khuôn ƒëúc và các lo·∫°i ƒë·∫•t sét, tro tr·∫•u. Ngh·ªÅ ƒëúc ƒë·ªìng ·ªü Ý Yên là ngh·ªÅ gia truy·ªÅn nhi·ªÅu ƒë·ªùi, anh Ngô H·ªØu Quy·∫øt (ch·ªìng ch·ªã Tuy·∫øt) c≈©ng ƒë∆∞·ª£c sinh ra trong m·ªôt gia ƒëình có truy·ªÅn th·ªëng làm ngh·ªÅ, tr·∫ª con trong gia ƒëình bi·∫øt làm ngh·ªÅ, bi·∫øt vi·ªác r·∫•t s·ªõm, t·ª´ vi·ªác chu·∫©n b·ªã khuôn cho ƒë·∫øn vi·ªác ƒëun n·∫•u rót ƒë·ªìng. Nh·ªè thì ph·ª• vi·ªác c·ªßi l·ª≠a tro tr·∫•u, l·ªõn thì ƒëánh bóng, gò ƒë·ªì cho tr∆°n tru m·ªãn màng: “Nh·ªØng nƒÉm 1980, 1990 làng ngh·ªÅ ch·ªß y·∫øu ƒëúc xoong, n·ªìi, ch·∫£o. Sau không ƒëúc ƒë·ªìng thì ƒëúc n·ªìi nhôm, n·ªìi gang. Không ch·ªâ ƒëúc t·∫°i làng mà còn rong ru·ªïi kh·∫Øp n∆°i ƒë·ªÉ ƒëúc n·ªìi d·∫°o. Tôi ƒëã theo b·ªë lên t·∫≠n Yên Bái, Phú Th·ªç, Tuyên Quang ƒë·ªÉ ƒëúc n·ªìi thuê cho ng∆∞·ªùi ta”, anh Quy·∫øt k·ªÉ v·ªÅ ngh·ªÅ c·ªßa cha ông nh∆∞ th·∫ø.
V·ª£ ƒëi buôn ƒë·ªìng nát v·ªõi thu nh·∫≠p 20.000 ƒë·ªìng/ngày, ch·ªìng ƒëi ƒëúc ƒë·ªìng thuê v·ªõi ti·ªÅn l∆∞∆°ng ch·ªâ ƒë·ªß mua g·∫°o ƒÉn. “Khi có cán b·ªô H·ªôi ph·ª• n·ªØ c·ªßa huy·ªán ƒë·∫øn nhà v·∫≠n ƒë·ªông tôi vào h·ªôi, nhà tôi ƒëang ƒÉn c∆°m, trong chi·∫øc mâm ƒë·ªìng c≈© ch·ªâ có bát canh và qu·∫£ cà. Lúc ·∫•y mình r·∫•t x·∫•u h·ªï vì quá nghèo. Nh∆∞ng c≈©ng chính b·ªüi nghèo nên tham gia h·ªôi ƒë·ªÉ ƒë∆∞·ª£c chia s·∫ª kinh nghi·ªám làm ƒÉn và nuôi d·∫°y con cái”, ch·ªã Tuy·∫øt không kh·ªèi bùi ngùi khi nh·ªõ l·∫°i nh·ªØng ngày tháng c∆° c·ª±c ƒë·∫°p xe hàng trƒÉm cây s·ªë rong ru·ªïi kh·∫Øp làng quê thu mua ƒë·ªìng nát.
Ch·ªã ƒë∆∞·ª£c H·ªôi ph·ª• n·ªØ cho vay 500.000 ƒë·ªìng ban ƒë·∫ßu và g·ª£i ý nên t·ªï ch·ª©c l·∫°i ngh·ªÅ ƒëúc ƒë·ªìng b·ªüi ch·ªìng ch·ªã là th·ª£ gi·ªèi. Nh∆∞ng v·ªõi 500.000 ƒë·ªìng v·ªën ·∫•y không ƒë·ªß ƒë·ªÉ m·ªü x∆∞·ªüng nên ch·ªã v·ªÅ thuy·∫øt ph·ª•c b·ªë m·∫π ƒë·∫ª mang s·ªï ƒë·ªè nhà ƒë·∫•t ƒë·∫øn ngân hàng vay 3 tri·ªáu ƒë·ªìng m·ªü x∆∞·ªüng. Nh∆∞ng ƒëúng lúc v·ª£ ch·ªìng anh Quy·∫øt b·∫Øt tay vào d·ª±ng x∆∞·ªüng (1998) thì th·ªã tr∆∞·ªùng ƒëã xu·∫•t hi·ªán n·ªìi c∆°m ƒëi·ªán, ngh·ªÅ ƒëúc xoong, n·ªìi ch·∫≥ng ƒÉn thua n·ªØa.
V·ªõi 3 tri·ªáu ƒë·ªìng, v·ª´a mua nguyên li·ªáu v·ª´a ƒë·∫Øp lò, v·ª£ ch·ªìng b·∫Øc b·∫øp ƒë·ªï m·ªôt qu·∫£ c·∫ßu ƒë·ªìng có ƒë∆∞·ªùng kính 1,1m, n·∫∑ng 150kg. D·ª° khuôn, ƒëánh bóng xong hai v·ª£ ch·ªìng nhìn nhau: c·∫£ v·ªën li·∫øng, c·∫£ s·ªï ƒë·ªè nhà ông bà ngo·∫°i ƒë·ªÅu ƒë·ªï vào qu·∫£ c·∫ßu này r·ªìi, không bán ƒë∆∞·ª£c thì ch·ªâ có ch·∫øt!
Lúc ·∫•y, ch·ªã Tuy·∫øt nh·ªõ ƒë·∫øn m·ªôt ng∆∞·ªùi h·ªç hàng làm vi·ªác trên Hà N·ªôi. Hai v·ª£ ch·ªìng vay m∆∞·ª£n ƒë∆∞·ª£c ít ti·ªÅn ƒë·ªß mua 30 qu·∫£ tr·ª©ng gà r·ªìi g·ª≠i con cho bà ngo·∫°i, khƒÉn gói lên th·ªß ƒëô. ·ªû ch∆°i Hà N·ªôi m·ªôt ngày, tr∆∞·ªõc khi v·ªÅ m·ªõi ng·ªè ý v·ªõi ng∆∞·ªùi h·ªç hàng: “Em có qu·∫£ c·∫ßu b·∫±ng ƒë·ªìng nh∆∞ th·∫ø, toàn b·ªô v·ªën li·∫øng c·ªßa em ƒë·ªÅu ƒë·ªï vào ƒë·∫•y. Bác quan h·ªá r·ªông, có ai mua bác bán giúp em!”.
Hai ngày sau khi tr·ªü v·ªÅ Nam ƒê·ªãnh, ng∆∞·ªùi h·ªç hàng b·∫£o mang qu·∫£ c·∫ßu lên. Chuy·∫øn ƒë·∫ßu tiên qu·∫£ c·∫ßu ƒë∆∞·ª£c bán v·ªõi giá 9 tri·ªáu ƒë·ªìng, lãi g·∫•p ƒëôi s·ªë g·ªëc b·ªè ra. “Hai v·ª£ ch·ªìng c·ª© nh·∫£y lên trong cƒÉn nhà c·∫•p 4 ch·ªâ r·ªông ch·ª•c mét vuông. Th·∫ø là s·ªëng r·ªìi!”, ch·ªã nh·ªõ l·∫°i.
V·ªën ít nên ch∆∞a dám thuê ng∆∞·ªùi làm mà hai v·ª£ ch·ªìng hì h·ª•c tr·∫£i qua t·∫•t c·∫£ các công ƒëo·∫°n: t·ª´ làm khuôn, ƒë·ªët tr·∫•u l·∫•y tro ƒë·∫øn c·ªßi l·ª≠a. “Nh·ªØng ngày x∆∞·ªüng không ƒë·ªè l·ª≠a thì trông g·ªçn gàng s·∫°ch s·∫Ω th·∫ø này ch·ª© khi làm vi·ªác thì ƒëen thui t·ª´ ƒë·∫ßu t·ªõi chân. Có khách ƒë·∫øn thì r·∫•t x·∫•u h·ªï vì nh·ªØng v·∫øt tro bám vào các k·∫Ω tay mu·ªën r·ª≠a s·∫°ch ngay c≈©ng ch·∫≥ng ƒë∆∞·ª£c” - ch·ªã Tuy·∫øt nói.
Ch·∫∑ng ƒë∆∞·ªùng dài t·ª´ lúc b·∫Øt ƒë·∫ßu kh·ªüi nghi·ªáp ƒë·∫øn nay ƒëã h∆°n ch·ª•c nƒÉm. T·ª´ chi·∫øc lò n·∫•u ƒë·ªìng nh·ªè xíu trong chi·∫øc sân ƒë·∫•t ng·∫≠p c·ªè ƒë·∫øn cƒÉn nhà khang trang c·ªßa gia ƒëình là ch·∫∑ng ƒë∆∞·ªùng không ch·ªâ dài v·ªÅ th·ªùi gian mà dài c·∫£ v·ªÅ n·ªói v·∫•t v·∫£ lo toan c·ªßa c·∫∑p v·ª£ ch·ªìng luôn l·∫•m lem tro b·ª•i.
Ch·ªã Tuy·∫øt v·ªën không ph·∫£i ng∆∞·ªùi c·ªßa th·ªã tr·∫•n Lâm mà là ng∆∞·ªùi d∆∞·ªõi Tr·∫°i 1, cách th·ªã tr·∫•n Lâm vài cây s·ªë. Tr∆∞·ªõc khi tr·ªü thành công dân c·ªßa th·ªã tr·∫•n thì: “Làng tôi có ngh·ªÅ buôn ƒë·ªìng nát. V·ª´a ngh·ªâ h·ªçc là tôi b·∫Øt tay vào ngh·ªÅ này ki·∫øm ti·ªÅn. L·∫•y ch·ªìng nƒÉm 17 tu·ªïi, nhà ch·ªìng ƒëông nên v·∫´n ti·∫øp t·ª•c theo ngh·ªÅ c≈©. M·ªói ngày ki·∫øm ƒë∆∞·ª£c 20.000 ƒë·ªìng, ch·ªâ v·ª´a ƒë·ªß rau d∆∞a m·∫Øm mu·ªëi”.
Ch·ªãu c·ª±c kh·ªï ƒëã quen, nên khi kh·ªüi nghi·ªáp b·∫±ng ngh·ªÅ c≈© c·ªßa ông bà, hai anh ch·ªã t·∫≠p trung toàn b·ªô s·ª©c l·ª±c và v·ªën li·∫øng, t·ª± lên Hà N·ªôi giao hàng, t·ª± thi·∫øt k·∫ø m·∫´u, t·ª± ƒëi tìm các ƒë·∫ßu m·ªëi công vi·ªác ƒë·ªÉ ký k·∫øt h·ª£p ƒë·ªìng... B·∫Øt ƒë·∫ßu t·ª´ s·∫£n ph·∫©m nh·ªè l·∫ª ƒë·∫øn nh·ªØng tác ph·∫©m t∆∞·ª£ng l·ªõn. ƒê·∫øn nay, m·ªói tháng nhà anh ch·ªã xu·∫•t x∆∞·ªüng hàng t·∫•n s·∫£n ph·∫©m m·ªπ ngh·ªá t·ª´ ƒëúc ƒë·ªìng. H∆°n m∆∞·ªùi nƒÉm, t·ª´ cƒÉn nhà r·ªông h∆°n 10m2 ƒë·∫øn nay anh ch·ªã ƒëã có x∆∞·ªüng ƒëúc r·ªông h∆°n 200m2 cùng v·ªõi ch·ª•c ng∆∞·ªùi th·ª£ làm liên t·ª•c và cƒÉn nhà khang trang hai t·∫ßng có ch·ªó ƒÉn ng·ªß cho th·ª£.
ƒê·∫øn th·ªã tr·∫•n Lâm, h·ªèi m·ªôt c·ª• già ch·ª´ng 70 tu·ªïi vào nhà ch·ªã Tuy·∫øt doanh nhân ƒëúc ƒë·ªìng, c·ª• già h·ªèi l·∫°i: “Có ph·∫£i con Tuy·∫øt m·ªõi sang Pháp nh·∫≠n gi·∫£i không? M∆∞∆°i nƒÉm tr∆∞·ªõc nó ƒëen ƒëúa, nh·∫øch nhác ƒë·∫°p xe ƒëi thu mua v·ªè chai, túi nilông, s·∫Øt v·ª•n. Không sao tin ƒë∆∞·ª£c gi·ªù nó sang Pháp. Vinh d·ª± nh·∫•t huy·ªán này ƒë·∫•y”.
Vi·ªác ch·ªã Tuy·∫øt sang Pháp nh·∫≠n gi·∫£i không ch·ªâ là ni·ªÅm vui ƒë·ªëi v·ªõi ch·ªã mà còn ƒë∆∞·ª£c nhi·ªÅu ng∆∞·ªùi ƒë·∫øn thƒÉm h·ªèi và chia s·∫ª trong nhi·ªÅu ngày qua, dù chuy·∫øn ƒëi Pháp nƒÉm ngày c·ªßa ch·ªã ƒëã ch·∫•m d·ª©t cách ƒëây h∆°n m·ªôt tháng. “Ôi, lúc nghe các ch·ªã trên H·ªôi ph·ª• n·ªØ huy·ªán thông báo tôi còn t∆∞·ªüng ng∆∞·ªùi ta trêu tôi. Nói ƒëi nói l·∫°i mãi r·ªìi m·ªõi tin ƒë∆∞·ª£c” - ch·ªã Tuy·∫øt v·∫´n ch∆∞a h·∫øt ni·ªÅm vui khi k·ªÉ v·ªÅ chuy·∫øn sang Pháp nh·∫≠n gi·∫£i th∆∞·ªüng doanh nhân tài chính vi mô toàn c·∫ßu.
S·ªë ti·ªÅn gi·∫£i th∆∞·ªüng không l·ªõn, ch·ªâ 1.000 euro (kho·∫£ng 27,5 tri·ªáu ƒë·ªìng), nh∆∞ng ch·ªã l·∫°i ƒë∆∞·ª£c tài tr·ª£ ƒëi l·∫°i, ƒÉn ·ªü kèm m·ªôt phiên d·ªãch n·ªØa. B·ªüi chính ngh·ªÅ ƒëúc ƒë·ªìng ƒëã thay ƒë·ªïi ƒë·ªùi s·ªëng c·ªßa ch·ªã và gia ƒëình, nên khi xách hành lý ra máy bay ch·ªã c≈©ng mang thêm m·ªôt chi·∫øc ƒëƒ©a b·∫±ng ƒë·ªìng, s·∫£n ph·∫©m ƒë∆∞·ª£c làm h·∫øt s·ª©c tinh x·∫£o ƒë·ªÉ làm quà và gi·ªõi thi·ªáu s·∫£n ph·∫©m.
Tr∆∞·ªõc ƒëó m·ªôt tháng, khi bi·∫øt tin ch·ªã ƒë∆∞·ª£c gi·∫£i Qu·ªπ Tài chính vi mô toàn c·∫ßu ƒëã có ƒëoàn làm phim v·ªÅ t·∫≠n nhà ch·ªã ba ngày ƒë·ªÉ làm phim t∆∞ li·ªáu phát trong bu·ªïi l·ªÖ trao gi·∫£i. “Có ƒë·∫øn sáu ng∆∞·ªùi ƒë·∫øn t·ª´ b·ªën qu·ªëc gia khác nhau cùng nh·∫≠n gi·∫£i v·ªõi tôi trong ƒë·ª£t này. H·ªç ƒë·ªÅu b·∫Øt ƒë·∫ßu là nh·ªØng ng∆∞·ªùi r·∫•t nghèo. Nh∆∞ có ng∆∞·ªùi t·ª± làm xà phòng ƒë·ªÉ dùng r·ªìi bán, có ng∆∞·ªùi làm ƒë·ªì trang s·ª©c b·∫±ng v·ªè trai... và có m·ªôt ƒëi·ªÉm chung là h·ªç n·ªó l·ª±c ƒë·ªÉ thoát nghèo”.
NƒÉm ngày ·ªü Pháp, ch·ªã Tuy·∫øt ƒëã có c∆° h·ªôi ƒëi thƒÉm sông Seine, tháp Eiffel và m·ªôt s·ªë danh lam th·∫Øng c·∫£nh c·ªßa ƒë·∫•t n∆∞·ªõc xinh ƒë·∫πp này. Có c∆° h·ªôi ƒëi thƒÉm nhi·ªÅu n∆°i nh∆∞ng ƒëi·ªÅu ch·ªã Tuy·∫øt ti·∫øc nh·∫•t l·∫°i là không có nhi·ªÅu th·ªùi gian nói chuy·ªán v·ªõi nh·ªØng ng∆∞·ªùi ƒëo·∫°t gi·∫£i khác ƒë·ªÉ trao ƒë·ªïi v·ªÅ công vi·ªác c≈©ng nh∆∞ tìm hi·ªÉu v·ªÅ ƒë·∫•t n∆∞·ªõc và con ng∆∞·ªùi h·ªç.
**Ng∆∞·ªùi buôn ƒë·ªìng nát nghèo**
·ªû thành ph·ªë, các ông b·ªë bà m·∫π mu·ªën d·ªça khi con không ch·ªãu h·ªçc hành ƒë·ªÅu nói: l·ªõn lên cho ƒëi ƒë·ªìng nát. Nói th·∫ø nghƒ©a là ng∆∞·ªùi làm ngh·ªÅ ƒë·ªìng nát b·∫ßn cùng l·∫Øm r·ªìi, là kh·ªï l·∫Øm ch·ª© ch·∫≥ng sung s∆∞·ªõng gì. Ho·∫∑c nhìn ai ƒÉn m·∫∑c lôi thôi, rách r∆∞·ªõi thì ng∆∞·ªùi ta ví: trông nh∆∞ m·∫•y bà ƒë·ªìng nát! Th·∫ø nên khi k·ªÉ v·ªÅ công vi·ªác c·ªßa mình hi·ªán t·∫°i, ch·ªã Tuy·∫øt không bao gi·ªù quên nh·∫Øc: “Tr∆∞·ªõc ƒëây mình có ngh·ªÅ ƒë·ªìng nát!”.
Ng∆∞·ªùi ƒë·ªìng nát ƒëi mua s·∫Øt gi·∫•y v·ª•n ·ªü ƒëâu thì quen ·ªü ƒë·∫•y, quen ƒë·∫øn n·ªói b·∫•t k·ªÉ nhà có ƒë·ªì ƒë·ªìng nát gì bán h·ªç ƒë·ªÅu nh·∫Øn ch·ªã ƒë·∫øn l·∫•y. Còn bây gi·ªù thì ng∆∞·ªùi ta quen v·ªõi ch·ªã h∆°n n·ªØa b·ªüi ch·ªã là ng∆∞·ªùi Vi·ªát Nam ƒë·∫ßu tiên nh·∫≠n gi·∫£i th∆∞·ªüng Tài chính vi mô toàn c·∫ßu, ƒë∆∞·ª£c trao t·∫°i Paris (Pháp) vào tháng 12-2011.
Nh·ªØng ngày ƒë·∫ßu xuân, c·∫£ khu x∆∞·ªüng r·ªông m·∫•y trƒÉm mét vuông c·ªßa nhà ch·ªã Tuy·∫øt v·∫´n còn ng·ªïn ngang khuôn ƒëúc và các lo·∫°i ƒë·∫•t sét, tro tr·∫•u. Ngh·ªÅ ƒëúc ƒë·ªìng ·ªü Ý Yên là ngh·ªÅ gia truy·ªÅn nhi·ªÅu ƒë·ªùi, anh Ngô H·ªØu Quy·∫øt (ch·ªìng ch·ªã Tuy·∫øt) c≈©ng ƒë∆∞·ª£c sinh ra trong m·ªôt gia ƒëình có truy·ªÅn th·ªëng làm ngh·ªÅ, tr·∫ª con trong gia ƒëình bi·∫øt làm ngh·ªÅ, bi·∫øt vi·ªác r·∫•t s·ªõm, t·ª´ vi·ªác chu·∫©n b·ªã khuôn cho ƒë·∫øn vi·ªác ƒëun n·∫•u rót ƒë·ªìng. Nh·ªè thì ph·ª• vi·ªác c·ªßi l·ª≠a tro tr·∫•u, l·ªõn thì ƒëánh bóng, gò ƒë·ªì cho tr∆°n tru m·ªãn màng: “Nh·ªØng nƒÉm 1980, 1990 làng ngh·ªÅ ch·ªß y·∫øu ƒëúc xoong, n·ªìi, ch·∫£o. Sau không ƒëúc ƒë·ªìng thì ƒëúc n·ªìi nhôm, n·ªìi gang. Không ch·ªâ ƒëúc t·∫°i làng mà còn rong ru·ªïi kh·∫Øp n∆°i ƒë·ªÉ ƒëúc n·ªìi d·∫°o. Tôi ƒëã theo b·ªë lên t·∫≠n Yên Bái, Phú Th·ªç, Tuyên Quang ƒë·ªÉ ƒëúc n·ªìi thuê cho ng∆∞·ªùi ta”, anh Quy·∫øt k·ªÉ v·ªÅ ngh·ªÅ c·ªßa cha ông nh∆∞ th·∫ø.
V·ª£ ƒëi buôn ƒë·ªìng nát v·ªõi thu nh·∫≠p 20.000 ƒë·ªìng/ngày, ch·ªìng ƒëi ƒëúc ƒë·ªìng thuê v·ªõi ti·ªÅn l∆∞∆°ng ch·ªâ ƒë·ªß mua g·∫°o ƒÉn. “Khi có cán b·ªô H·ªôi ph·ª• n·ªØ c·ªßa huy·ªán ƒë·∫øn nhà v·∫≠n ƒë·ªông tôi vào h·ªôi, nhà tôi ƒëang ƒÉn c∆°m, trong chi·∫øc mâm ƒë·ªìng c≈© ch·ªâ có bát canh và qu·∫£ cà. Lúc ·∫•y mình r·∫•t x·∫•u h·ªï vì quá nghèo. Nh∆∞ng c≈©ng chính b·ªüi nghèo nên tham gia h·ªôi ƒë·ªÉ ƒë∆∞·ª£c chia s·∫ª kinh nghi·ªám làm ƒÉn và nuôi d·∫°y con cái”, ch·ªã Tuy·∫øt không kh·ªèi bùi ngùi khi nh·ªõ l·∫°i nh·ªØng ngày tháng c∆° c·ª±c ƒë·∫°p xe hàng trƒÉm cây s·ªë rong ru·ªïi kh·∫Øp làng quê thu mua ƒë·ªìng nát.
Ch·ªã ƒë∆∞·ª£c H·ªôi ph·ª• n·ªØ cho vay 500.000 ƒë·ªìng ban ƒë·∫ßu và g·ª£i ý nên t·ªï ch·ª©c l·∫°i ngh·ªÅ ƒëúc ƒë·ªìng b·ªüi ch·ªìng ch·ªã là th·ª£ gi·ªèi. Nh∆∞ng v·ªõi 500.000 ƒë·ªìng v·ªën ·∫•y không ƒë·ªß ƒë·ªÉ m·ªü x∆∞·ªüng nên ch·ªã v·ªÅ thuy·∫øt ph·ª•c b·ªë m·∫π ƒë·∫ª mang s·ªï ƒë·ªè nhà ƒë·∫•t ƒë·∫øn ngân hàng vay 3 tri·ªáu ƒë·ªìng m·ªü x∆∞·ªüng. Nh∆∞ng ƒëúng lúc v·ª£ ch·ªìng anh Quy·∫øt b·∫Øt tay vào d·ª±ng x∆∞·ªüng (1998) thì th·ªã tr∆∞·ªùng ƒëã xu·∫•t hi·ªán n·ªìi c∆°m ƒëi·ªán, ngh·ªÅ ƒëúc xoong, n·ªìi ch·∫≥ng ƒÉn thua n·ªØa.
V·ªõi 3 tri·ªáu ƒë·ªìng, v·ª´a mua nguyên li·ªáu v·ª´a ƒë·∫Øp lò, v·ª£ ch·ªìng b·∫Øc b·∫øp ƒë·ªï m·ªôt qu·∫£ c·∫ßu ƒë·ªìng có ƒë∆∞·ªùng kính 1,1m, n·∫∑ng 150kg. D·ª° khuôn, ƒëánh bóng xong hai v·ª£ ch·ªìng nhìn nhau: c·∫£ v·ªën li·∫øng, c·∫£ s·ªï ƒë·ªè nhà ông bà ngo·∫°i ƒë·ªÅu ƒë·ªï vào qu·∫£ c·∫ßu này r·ªìi, không bán ƒë∆∞·ª£c thì ch·ªâ có ch·∫øt!
**Qu·∫£ c·∫ßu m·ªü ƒë∆∞·ªùng...**
Lúc ·∫•y, ch·ªã Tuy·∫øt nh·ªõ ƒë·∫øn m·ªôt ng∆∞·ªùi h·ªç hàng làm vi·ªác trên Hà N·ªôi. Hai v·ª£ ch·ªìng vay m∆∞·ª£n ƒë∆∞·ª£c ít ti·ªÅn ƒë·ªß mua 30 qu·∫£ tr·ª©ng gà r·ªìi g·ª≠i con cho bà ngo·∫°i, khƒÉn gói lên th·ªß ƒëô. ·ªû ch∆°i Hà N·ªôi m·ªôt ngày, tr∆∞·ªõc khi v·ªÅ m·ªõi ng·ªè ý v·ªõi ng∆∞·ªùi h·ªç hàng: “Em có qu·∫£ c·∫ßu b·∫±ng ƒë·ªìng nh∆∞ th·∫ø, toàn b·ªô v·ªën li·∫øng c·ªßa em ƒë·ªÅu ƒë·ªï vào ƒë·∫•y. Bác quan h·ªá r·ªông, có ai mua bác bán giúp em!”.
Hai ngày sau khi tr·ªü v·ªÅ Nam ƒê·ªãnh, ng∆∞·ªùi h·ªç hàng b·∫£o mang qu·∫£ c·∫ßu lên. Chuy·∫øn ƒë·∫ßu tiên qu·∫£ c·∫ßu ƒë∆∞·ª£c bán v·ªõi giá 9 tri·ªáu ƒë·ªìng, lãi g·∫•p ƒëôi s·ªë g·ªëc b·ªè ra. “Hai v·ª£ ch·ªìng c·ª© nh·∫£y lên trong cƒÉn nhà c·∫•p 4 ch·ªâ r·ªông ch·ª•c mét vuông. Th·∫ø là s·ªëng r·ªìi!”, ch·ªã nh·ªõ l·∫°i.
V·ªën ít nên ch∆∞a dám thuê ng∆∞·ªùi làm mà hai v·ª£ ch·ªìng hì h·ª•c tr·∫£i qua t·∫•t c·∫£ các công ƒëo·∫°n: t·ª´ làm khuôn, ƒë·ªët tr·∫•u l·∫•y tro ƒë·∫øn c·ªßi l·ª≠a. “Nh·ªØng ngày x∆∞·ªüng không ƒë·ªè l·ª≠a thì trông g·ªçn gàng s·∫°ch s·∫Ω th·∫ø này ch·ª© khi làm vi·ªác thì ƒëen thui t·ª´ ƒë·∫ßu t·ªõi chân. Có khách ƒë·∫øn thì r·∫•t x·∫•u h·ªï vì nh·ªØng v·∫øt tro bám vào các k·∫Ω tay mu·ªën r·ª≠a s·∫°ch ngay c≈©ng ch·∫≥ng ƒë∆∞·ª£c” - ch·ªã Tuy·∫øt nói.
Ch·∫∑ng ƒë∆∞·ªùng dài t·ª´ lúc b·∫Øt ƒë·∫ßu kh·ªüi nghi·ªáp ƒë·∫øn nay ƒëã h∆°n ch·ª•c nƒÉm. T·ª´ chi·∫øc lò n·∫•u ƒë·ªìng nh·ªè xíu trong chi·∫øc sân ƒë·∫•t ng·∫≠p c·ªè ƒë·∫øn cƒÉn nhà khang trang c·ªßa gia ƒëình là ch·∫∑ng ƒë∆∞·ªùng không ch·ªâ dài v·ªÅ th·ªùi gian mà dài c·∫£ v·ªÅ n·ªói v·∫•t v·∫£ lo toan c·ªßa c·∫∑p v·ª£ ch·ªìng luôn l·∫•m lem tro b·ª•i.
Ch·ªã Tuy·∫øt v·ªën không ph·∫£i ng∆∞·ªùi c·ªßa th·ªã tr·∫•n Lâm mà là ng∆∞·ªùi d∆∞·ªõi Tr·∫°i 1, cách th·ªã tr·∫•n Lâm vài cây s·ªë. Tr∆∞·ªõc khi tr·ªü thành công dân c·ªßa th·ªã tr·∫•n thì: “Làng tôi có ngh·ªÅ buôn ƒë·ªìng nát. V·ª´a ngh·ªâ h·ªçc là tôi b·∫Øt tay vào ngh·ªÅ này ki·∫øm ti·ªÅn. L·∫•y ch·ªìng nƒÉm 17 tu·ªïi, nhà ch·ªìng ƒëông nên v·∫´n ti·∫øp t·ª•c theo ngh·ªÅ c≈©. M·ªói ngày ki·∫øm ƒë∆∞·ª£c 20.000 ƒë·ªìng, ch·ªâ v·ª´a ƒë·ªß rau d∆∞a m·∫Øm mu·ªëi”.
Ch·ªãu c·ª±c kh·ªï ƒëã quen, nên khi kh·ªüi nghi·ªáp b·∫±ng ngh·ªÅ c≈© c·ªßa ông bà, hai anh ch·ªã t·∫≠p trung toàn b·ªô s·ª©c l·ª±c và v·ªën li·∫øng, t·ª± lên Hà N·ªôi giao hàng, t·ª± thi·∫øt k·∫ø m·∫´u, t·ª± ƒëi tìm các ƒë·∫ßu m·ªëi công vi·ªác ƒë·ªÉ ký k·∫øt h·ª£p ƒë·ªìng... B·∫Øt ƒë·∫ßu t·ª´ s·∫£n ph·∫©m nh·ªè l·∫ª ƒë·∫øn nh·ªØng tác ph·∫©m t∆∞·ª£ng l·ªõn. ƒê·∫øn nay, m·ªói tháng nhà anh ch·ªã xu·∫•t x∆∞·ªüng hàng t·∫•n s·∫£n ph·∫©m m·ªπ ngh·ªá t·ª´ ƒëúc ƒë·ªìng. H∆°n m∆∞·ªùi nƒÉm, t·ª´ cƒÉn nhà r·ªông h∆°n 10m2 ƒë·∫øn nay anh ch·ªã ƒëã có x∆∞·ªüng ƒëúc r·ªông h∆°n 200m2 cùng v·ªõi ch·ª•c ng∆∞·ªùi th·ª£ làm liên t·ª•c và cƒÉn nhà khang trang hai t·∫ßng có ch·ªó ƒÉn ng·ªß cho th·ª£.
**Gi·∫£i th∆∞·ªüng Doanh nhân tài chính vi mô toàn c·∫ßu**
ƒê·∫øn th·ªã tr·∫•n Lâm, h·ªèi m·ªôt c·ª• già ch·ª´ng 70 tu·ªïi vào nhà ch·ªã Tuy·∫øt doanh nhân ƒëúc ƒë·ªìng, c·ª• già h·ªèi l·∫°i: “Có ph·∫£i con Tuy·∫øt m·ªõi sang Pháp nh·∫≠n gi·∫£i không? M∆∞∆°i nƒÉm tr∆∞·ªõc nó ƒëen ƒëúa, nh·∫øch nhác ƒë·∫°p xe ƒëi thu mua v·ªè chai, túi nilông, s·∫Øt v·ª•n. Không sao tin ƒë∆∞·ª£c gi·ªù nó sang Pháp. Vinh d·ª± nh·∫•t huy·ªán này ƒë·∫•y”.
Vi·ªác ch·ªã Tuy·∫øt sang Pháp nh·∫≠n gi·∫£i không ch·ªâ là ni·ªÅm vui ƒë·ªëi v·ªõi ch·ªã mà còn ƒë∆∞·ª£c nhi·ªÅu ng∆∞·ªùi ƒë·∫øn thƒÉm h·ªèi và chia s·∫ª trong nhi·ªÅu ngày qua, dù chuy·∫øn ƒëi Pháp nƒÉm ngày c·ªßa ch·ªã ƒëã ch·∫•m d·ª©t cách ƒëây h∆°n m·ªôt tháng. “Ôi, lúc nghe các ch·ªã trên H·ªôi ph·ª• n·ªØ huy·ªán thông báo tôi còn t∆∞·ªüng ng∆∞·ªùi ta trêu tôi. Nói ƒëi nói l·∫°i mãi r·ªìi m·ªõi tin ƒë∆∞·ª£c” - ch·ªã Tuy·∫øt v·∫´n ch∆∞a h·∫øt ni·ªÅm vui khi k·ªÉ v·ªÅ chuy·∫øn sang Pháp nh·∫≠n gi·∫£i th∆∞·ªüng doanh nhân tài chính vi mô toàn c·∫ßu.
S·ªë ti·ªÅn gi·∫£i th∆∞·ªüng không l·ªõn, ch·ªâ 1.000 euro (kho·∫£ng 27,5 tri·ªáu ƒë·ªìng), nh∆∞ng ch·ªã l·∫°i ƒë∆∞·ª£c tài tr·ª£ ƒëi l·∫°i, ƒÉn ·ªü kèm m·ªôt phiên d·ªãch n·ªØa. B·ªüi chính ngh·ªÅ ƒëúc ƒë·ªìng ƒëã thay ƒë·ªïi ƒë·ªùi s·ªëng c·ªßa ch·ªã và gia ƒëình, nên khi xách hành lý ra máy bay ch·ªã c≈©ng mang thêm m·ªôt chi·∫øc ƒëƒ©a b·∫±ng ƒë·ªìng, s·∫£n ph·∫©m ƒë∆∞·ª£c làm h·∫øt s·ª©c tinh x·∫£o ƒë·ªÉ làm quà và gi·ªõi thi·ªáu s·∫£n ph·∫©m.
Tr∆∞·ªõc ƒëó m·ªôt tháng, khi bi·∫øt tin ch·ªã ƒë∆∞·ª£c gi·∫£i Qu·ªπ Tài chính vi mô toàn c·∫ßu ƒëã có ƒëoàn làm phim v·ªÅ t·∫≠n nhà ch·ªã ba ngày ƒë·ªÉ làm phim t∆∞ li·ªáu phát trong bu·ªïi l·ªÖ trao gi·∫£i. “Có ƒë·∫øn sáu ng∆∞·ªùi ƒë·∫øn t·ª´ b·ªën qu·ªëc gia khác nhau cùng nh·∫≠n gi·∫£i v·ªõi tôi trong ƒë·ª£t này. H·ªç ƒë·ªÅu b·∫Øt ƒë·∫ßu là nh·ªØng ng∆∞·ªùi r·∫•t nghèo. Nh∆∞ có ng∆∞·ªùi t·ª± làm xà phòng ƒë·ªÉ dùng r·ªìi bán, có ng∆∞·ªùi làm ƒë·ªì trang s·ª©c b·∫±ng v·ªè trai... và có m·ªôt ƒëi·ªÉm chung là h·ªç n·ªó l·ª±c ƒë·ªÉ thoát nghèo”.
NƒÉm ngày ·ªü Pháp, ch·ªã Tuy·∫øt ƒëã có c∆° h·ªôi ƒëi thƒÉm sông Seine, tháp Eiffel và m·ªôt s·ªë danh lam th·∫Øng c·∫£nh c·ªßa ƒë·∫•t n∆∞·ªõc xinh ƒë·∫πp này. Có c∆° h·ªôi ƒëi thƒÉm nhi·ªÅu n∆°i nh∆∞ng ƒëi·ªÅu ch·ªã Tuy·∫øt ti·∫øc nh·∫•t l·∫°i là không có nhi·ªÅu th·ªùi gian nói chuy·ªán v·ªõi nh·ªØng ng∆∞·ªùi ƒëo·∫°t gi·∫£i khác ƒë·ªÉ trao ƒë·ªïi v·ªÅ công vi·ªác c≈©ng nh∆∞ tìm hi·ªÉu v·ªÅ ƒë·∫•t n∆∞·ªõc và con ng∆∞·ªùi h·ªç.
Gi·∫£i th∆∞·ªüng Doanh nhân tài chính vi mô toàn c·∫ßu do Qu·ªπ Tài chính vi mô toàn c·∫ßu (Planet Finance Group) t·ªï ch·ª©c trao th∆∞·ªüng h·∫±ng nƒÉm dành cho nh·ªØng cá nhân xu·∫•t s·∫Øc v∆∞·ª£t qua khó khƒÉn, bi·∫øt s·ª≠ d·ª•ng ƒë·ªìng v·ªën nh·ªè ban ƒë·∫ßu ƒë·ªÉ t·∫°o d·ª±ng s·ª± nghi·ªáp. T·ªï ch·ª©c này ƒë∆∞·ª£c thành l·∫≠p nƒÉm 1997 t·∫°i Paris (Pháp) hi·ªán có m·∫∑t ·ªü 80 qu·ªëc gia trên th·∫ø gi·ªõi trong ƒëó có Vi·ªát Nam.
Ch·ªã D∆∞∆°ng Th·ªã Tuy·∫øt là cá nhân ƒë·∫ßu tiên c·ªßa Vi·ªát Nam do Qu·ªπ tình th∆∞∆°ng (TYM), tr·ª±c thu·ªôc H·ªôi Ph·ª• n·ªØ Vi·ªát Nam gi·ªõi thi·ªáu ƒë·∫øn Qu·ªπ Tài chính vi mô toàn c·∫ßu và ƒëo·∫°t gi·∫£i th∆∞·ªüng này cùng nƒÉm cá nhân khác trong k·ª≥ trao gi·∫£i tháng 12-2011.
**Ng∆∞·ªùi VN ƒë·∫ßu tiên ƒë∆∞·ª£c trao gi·∫£i**
Gi·∫£i th∆∞·ªüng Doanh nhân tài chính vi mô toàn c·∫ßu do Qu·ªπ Tài chính vi mô toàn c·∫ßu (Planet Finance Group) t·ªï ch·ª©c trao th∆∞·ªüng h·∫±ng nƒÉm dành cho nh·ªØng cá nhân xu·∫•t s·∫Øc v∆∞·ª£t qua khó khƒÉn, bi·∫øt s·ª≠ d·ª•ng ƒë·ªìng v·ªën nh·ªè ban ƒë·∫ßu ƒë·ªÉ t·∫°o d·ª±ng s·ª± nghi·ªáp. T·ªï ch·ª©c này ƒë∆∞·ª£c thành l·∫≠p nƒÉm 1997 t·∫°i Paris (Pháp) hi·ªán có m·∫∑t ·ªü 80 qu·ªëc gia trên th·∫ø gi·ªõi trong ƒëó có Vi·ªát Nam.
Ch·ªã D∆∞∆°ng Th·ªã Tuy·∫øt là cá nhân ƒë·∫ßu tiên c·ªßa Vi·ªát Nam do Qu·ªπ tình th∆∞∆°ng (TYM), tr·ª±c thu·ªôc H·ªôi Ph·ª• n·ªØ Vi·ªát Nam gi·ªõi thi·ªáu ƒë·∫øn Qu·ªπ Tài chính vi mô toàn c·∫ßu và ƒëo·∫°t gi·∫£i th∆∞·ªüng này cùng nƒÉm cá nhân khác trong k·ª≥ trao gi·∫£i tháng 12-2011.
Ngu·ªìn tin: Tu·ªïi tr·∫ª
### Tin kh√°c
[T·ª∑ ph√∫ r·∫Øn ri voi](/post/details/7486-ty-phu-ran-ri-voi) [T·ª´ b√°n x√¥i tr·ªü th√Ýnh gi√°m ƒë·ªëc](/post/details/7485-tu-ban-xoi-tro-thanh-giam-doc) [Nh·ªõt ‚Äúmade in Vietnam‚Äù](/post/details/7484-nhot-made-in-vietnam) [Nh√Ý khoa h·ªçc nguy√™n t·ª≠ M·ªπ t·ª´ng ƒë·∫°p x√≠ch l√¥ ·ªü Vi·ªát Nam](/post/details/7483-nha-khoa-hoc-nguyen-tu-my-tung-dap-xich-lo-o-viet-nam) [ƒêi l√™n t·ª´ l·ªÖ t√¢n kh√°ch s·∫°n](/post/details/7482-di-len-tu-le-tan-khach-san) [G·∫∑p ng∆∞·ªùi ƒë·∫ßu ti√™n nu√¥i y·∫øn theo m√¥ h√¨nh c√¥ng nghi·ªáp](/post/details/7481-gap-nguoi-dau-tien-nuoi-yen-theo-mo-hinh-cong-nghiep) [Hotboy Vi·ªát \'ki·∫øm ng√Ýn USD\' ·ªü x·ª© s·ªü Kim chi](/post/details/7480-hotboy-viet-kiem-ngan-usd-o-xu-so-kim-chi) [Ki·∫øm b·ªôn ti·ªÅn nh·ªù gi·ªõi tr·∫ª b·ªóng d∆∞ng th√≠ch... nh√≠m ki·ªÉng!](/post/details/7479-kiem-bon-tien-nho-gioi-tre-bong-dung-thich...-nhim-kieng) [13 tu·ªïi ki·∫øm 280.000 USD/tu·∫ßn](/post/details/7477-13-tuoi-kiem-280.000-usdtuan)
### ƒêƒÉng nh·∫≠p
### H·ªèi
[Chuy√™n gia](/user/expert-list) Quantri.vn
Trong tr∆∞·ªùng h·ª£p ƒë√£ l√Ý th√Ýnh vi√™n: ƒê·∫∑t c√¢u h·ªèi mi·ªÖn ph√≠ v·ªõi chuy√™n gia Quantri.vn. C√¢u h·ªèi c·ªßa th√Ýnh vi√™n s·∫Ω ƒë∆∞·ª£c tr·∫£ l·ªùi trong v√≤ng 7 ng√Ýy. Trong tr∆∞·ªùng h·ª£p kh·∫©n c·∫•p, vui l√≤ng li√™n h·ªá (08).22.49.49.49
[ƒê·∫∑t c√¢u h·ªèi](/ask/question)
T√¨m ki·∫øm c√¢u tr·∫£ l·ªùi tr∆∞·ªõc khi ƒë·∫∑t c√¢u h·ªèi
0 Comments

Cache-Control: no-store, no-cache, must-revalidate, post-check=0, pre-check=0

Pragma: no-cache

Vary: Accept-Encoding,User-Agent


markdown:
Đăng ký thành viên
Đăng ký
|
Đăng nhập
Đăng nhập
Đăng ký
Họ và tên:
*
Email:
*
(4-30 ký tự )
Mật khẩu:
*
(6-30 ký tự )
Nhập lại mật khẩu:
*
Số điện thoại:
*
Địa chỉ :
*
(Số nhà, đường, khu phố)
Tỉnh / Thành :
*
Tỉnh / Thành
Đà Nẵng
Hà Nội
TP Hồ Chí Minh
An Giang
BR - Vũng Tàu
Bắc Giang
Bắc Kạn
Bạc Liêu
Bắc Ninh
Bến Tre
Bình Dương
Bình Định
Bình Phước
Bình Thuận
Cà Mau
Cần Thơ
Cao Bằng
Đăk Lăk
Đăk Nông
Điện Biên
Đồng Nai
Đồng Tháp
Gia Lai
Hà Giang
Hà Nam
Hà Tĩnh
Hải Dương
Hải Phòng
Hậu Giang
Hòa Bình
Hưng Yên
Khánh Hòa
Kiên Giang
Kon Tom
Lai Châu
Lâm Đồng
Lạng Sơn
Lào Cai
Long An
Nam Định
Nghệ An
Ninh Bình
Ninh Thuận
Phú Yên
Phú Thọ
Quảng Bình
Quảng Nam
Quảng Ngãi
Quảng Ninh
Quảng Trị
Sóc Trăng
Sơn La
Tây Ninh
Thái Nguyên
Thái Bình
Thanh Hóa
Thừa Thiên - Huế
Tiền Giang
Trà Vinh
Tuyên Quang
Vĩnh Long
Vĩnh Phúc
Yên Bái
Quận / Huyện :
*
Quận / Huyện
Đồng ý với các điều khoản của RAOBANNHADAT.VN
Đã có tài khoản?
Đăng nhập
Đăng nhập
Email:
Mật khẩu:
Ghi nhớ
Quên mật khẩu
Lấy lại mật khẩu
Email:
(Nhập mail đã đăng ký để lấy lại mật khẩu)
Trang chủ
Cho thuê nhà đất
Cho thuê căn hộ chung cư
Cho thuê nhà riêng
Cho thuê nhà mặt phố
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ
Cho thuê văn phòng
Cho thuê cửa hàng - ki ốt
Cho thuê kho, nhà xưởng, đất
Cho thuê loại bất động sản khác
Bán nhà đất
Bán căn hộ chung cư
Bán nhà riêng
Bán nhà biệt thự, liền kề
Bán nhà mặt phố
Bán đất nền dự án
Bán đất
Bán trang trại, khu nghỉ dưỡng
Bán kho, nhà xưởng
Bán loại bất động sản khác
Bản đồ nhà đất
Hướng dẫn sử dụng
Tạo tài khoản
Đăng tin siêu VIP
Đăng tin VIP
Liên hệ
Cho thuê nhà đất
Bán nhà đất
Loại địa ốc
Cho thuê căn hộ chung cư
Cho thuê nhà riêng
Cho thuê nhà mặt phố
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ
Cho thuê văn phòng
Cho thuê cửa hàng - ki ốt
Cho thuê kho, nhà xưởng, đất
Cho thuê loại bất động sản khác
Tỉnh / Thành phố
TP Hồ Chí Minh
Hà Nội
Đà Nẵng
Bình Dương
Đồng Nai
Hải Phòng
Long An
Thừa Thiên - Huế
Cần Thơ
Quảng Nam
Quảng Ngãi
Vĩnh Long
Thái Bình
An Giang
Bắc Giang
Bắc Kạn
Bạc Liêu
Bắc Ninh
Bến Tre
Bình Định
Bình Phước
Bình Thuận
BR - Vũng Tàu
Cà Mau
Cao Bằng
Đăk Lăk
Đăk Nông
Điện Biên
Đồng Tháp
Gia Lai
Hà Giang
Hà Nam
Hà Tĩnh
Hải Dương
Hậu Giang
Hòa Bình
Hưng Yên
Khánh Hòa
Kiên Giang
Kon Tom
Lai Châu
Lâm Đồng
Lạng Sơn
Lào Cai
Nam Định
Nghệ An
Ninh Bình
Ninh Thuận
Phú Thọ
Phú Yên
Quảng Bình
Quảng Ninh
Quảng Trị
Sóc Trăng
Sơn La
Tây Ninh
Thái Nguyên
Thanh Hóa
Tiền Giang
Trà Vinh
Tuyên Quang
Vĩnh Phúc
Yên Bái
Quận / Huyện
Quận 1
Quận 2
Quận 3
Quận 4
Quận 5
Quận 6
Quận 7
Quận 8
Quận 9
Quận 10
Quận 11
Quận 12
Bình Chánh
Bình Tân
Bình Thạnh
Cần Giờ
Củ Chi
Gò Vấp
Hóc Môn
Nhà Bè
Phú Nhuận
Tân Bình
Tân Phú
Thủ Đức
Trang chủ
Cho thuê nhà đất
Cho thuê nhà mặt phố
TP Hồ Chí Minh
Quận 1
Thông tin bất động sản
Cho thuê mặt bằng phố Trần Quang Khải, Tân Định Quận 1, DT 80m2 sàn, giá 22triệu, Lh 0982526562
0019086
Địa chỉ:
68/9 Trần Quang Khai -Tân Định- Quận 1 - Tp HCM, Quận 1, TP Hồ Chí Minh
Loại tin:
Cho thuê nhà đất
Loại BĐS:
Cho thuê nhà mặt phố
Diện tích:
80 m
2
Ngày đăng:
01-05-2014
Giá: 22 triệu / Tháng
THÔNG TIN LIÊN HỆ
Người liên hệ:
Cao Hoai Thang
Điện thoại:
0982526562
Địa chỉ liện hệ:
Trần Quang Khải
- Mặt bằng ngay đường Trần Quang Khải (cầu Hoàng Hoa Thám), gần Phở Hiền - Khu vực xung quanh có nhiều trung tâm anh ngữ, trung tâm tin học, ngân hàng,
văn phòng cho thuê
, mật độ giao thông qua lại tấp nập. - Diện Tích: 4 x 20m, 1 lầu, 1 lửng, (160m2), 03 Toilet - Giá Cho thuê 22tr/tháng. Đặt Cọc 03 tháng. - Thanh toán hằng tháng, có thể thương lượng tùy vào hình thức kinh doanh - Thích hợp kinh doanh quán ăn, café, shop quần áo hoặc văn phòng. - Liên Hệ: A. Thắng 0982. 526. 562. Tìm kiếm theo từ khóa: Cho thuê
nhà mặt phố
phường Tân Định , Cho thuê
nhà mặt phố
phường Tân Định Quận 1 , Cho thuê
nhà mặt phố
đường Trần Quang Khải , Cho thuê
nhà mặt phố
đường Trần Quang Khải Quận 1
Từ khóa:
Cho thuê nhà đất TP Hồ Chí Minh
,
Cho thuê nhà đất Quận 1
,
Cho thuê nhà mặt phố TP Hồ Chí Minh
,
Cho thuê nhà mặt phố Quận 1
Các tin rao tương tự
6 giờ trước
115 triệu
Cho thuê nhà mặt tiền đường 3 Tháng 2, phường 12, quận 10, DT 7X29m, trệt, 4 lầu
mặt tiền đường 3 Tháng 2, phường 12, quận 10, Quận 10, TP Hồ Chí Minh
6 giờ trước
16 triệu / Tháng
CHO THUÊ NHÀ MỚI ĐẸP 4 Phòng Ngủ, 16Tr/th▬►►Hxh, LÊ ĐẠI HÀNH, Quận 11
HXH LÊ ĐẠI HÀNH,Q11, Quận 11, TP Hồ Chí Minh
6 giờ trước
12 triệu / Tháng
NHÀ CHO THUÊ ĐẸP 3PN, 12Tr ▬►Hẻm XH, Thành Thái, QUẬN10
Hẻm XH, Thành Thái, QUẬN10, Quận 10, TP Hồ Chí Minh
6 giờ trước
15 triệu / Tháng
HOUSE FOR RENT 2Bedroom, Furnitures 750USD _ Nguyen Thị Minh Khai, District 1
Ng Thị Minh Khai, District 1, Quận 1, TP Hồ Chí Minh
6 giờ trước
20 triệu / Tháng
NHÀ CHO THUÊ ĐẸP, VỊ TRÍ SẦM UẤT ▬►►1200, 1600, 2000, 3000USD_ Quận 1,3,5,10, Phú Nhuận......
Quan 1,3,5,10..., Quận 1, TP Hồ Chí Minh
6 giờ trước
26 triệu / Tháng
HOUSE FOR RENT 4 Bedroom, Full Furnitures ▬►►1200USD/month _Lý Tự Trọng, District 1, HCM
Ly Tu Trong, District 1, HCM, Quận 1, TP Hồ Chí Minh
6 giờ trước
30 triệu / Tháng
NHÀ CHO THUÊ ĐẸP, VỊ TRÍ SẦM UẤT_ 4.000USD, 5.000USD, 6.000USD _ QUẬN 1,3,5,10...
QUẬN 1,3,5,10..., Quận 1, TP Hồ Chí Minh
6 giờ trước
26 triệu
CHO THUÊ NHÀ ĐẸP, MỚI XÂY DỰNG, VỊ TRÍ SẦM UẤT Giá 26Tr/th ▬►► Mặt tiền 871 Đường 3/2, Quận 11
871 Đường 3/2, Quận 11, Quận 11, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
50 triệu
Cho Thuê Nhà MT Trần Khánh Dư P.Tân Định Q1 8,5m x 17m 2 lầu 50 tr/tháng
Trần Khánh Dư P.Tân Định Q1, Quận 1, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
50 triệu
Cho Thuê 2 Nhà MT Tú Sương Q3 Dt: 5,5m x34m 1 lầu & 10mx20m 2500$/tháng
Tú Sương Q3, Quận 3, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
84 triệu
Cho Thuê Nhà MT Thành Thái P14 Q10 Dt: 11m x 30m 1 lầu 4000$/tháng
Thành Thái P14 Q10, Quận 10, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
40 triệu
Cho Thuê nhà gấp MT Nguyễn Đình Chiểu P6 Q3 4m x 21m 1 lầu 40 tr/tháng !!!!!!!!!!!!!!!!!
180A Nguyễn Đình Chiểu P6 Q3, Quận 3, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
155 triệu
Cho Thuê /Bán nhà 2MT 84 Trần Huy Liệu Q.PN Dt: 25m x 20m 2 lầu
84 Trần Huy Liệu Q.PN, Phú Nhuận, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
75 triệu
Cho Thuê/ bán nhà MT Lạc Long Quân QTB 8,2m nở hậu 8,5m x 39m 1 lầu 75 triệu
Lạc Long Quân QTB, Tân Bình, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
75 triệu
Cho Thuê nhà MT 3/2 P.11 Q.10 6m x 16m 4 lầu 75 tr/tháng
3/2 P.11 Q.10, Quận 10, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
80 triệu
Cho thuê 2 nhà MT CMT8 Q3 9m nở hậu 18m x 24m & 6,5m x 32m nở hậu 8m 3 lầu
CMT8 Q3, Quận 3, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
100 triệu
Cho thuê/Bán Tòa Nhà Văn Phòng Võ Thị Sáu Q3 14m x 32m 1 Hầm 4 lầu
Võ Thị Sáu Q3 1, Quận 3, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
84 triệu
Cho thuê 2 nhà MT Hồ Xuân Hương Q3 7m x 20m 2 lầu & 15m x 16m 4000$
Hồ Xuân Hương Q3, Quận 3, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
40 triệu
Cho thuê nhà hẻm 6m Hai Bà Trưng Q3 5,5m x 21m 3 lầu 40tr/tháng
Hai Bà Trưng Q3, Quận 3, TP Hồ Chí Minh
9 giờ trước
40 triệu
Cho Thuê Nhà 7A Ký Con P. NTB Q1 4m x19m 4 lầu 40tr/tháng
Ký Con P. NTB Q1, Quận 1, TP Hồ Chí Minh
Quận huyện
Cho thuê nhà mặt phố Quận 1
Cho thuê nhà mặt phố Quận 2
Cho thuê nhà mặt phố Quận 3
Cho thuê nhà mặt phố Quận 4
Cho thuê nhà mặt phố Quận 5
Cho thuê nhà mặt phố Quận 6
Cho thuê nhà mặt phố Quận 7
Cho thuê nhà mặt phố Quận 8
Cho thuê nhà mặt phố Quận 9
Cho thuê nhà mặt phố Quận 10
Cho thuê nhà mặt phố Quận 11
Cho thuê nhà mặt phố Quận 12
Cho thuê nhà mặt phố Bình Chánh
Cho thuê nhà mặt phố Bình Tân
Cho thuê nhà mặt phố Bình Thạnh
Cho thuê nhà mặt phố Cần Giờ
Cho thuê nhà mặt phố Củ Chi
Cho thuê nhà mặt phố Gò Vấp
Cho thuê nhà mặt phố Hóc Môn
Cho thuê nhà mặt phố Nhà Bè
Cho thuê nhà mặt phố Phú Nhuận
Cho thuê nhà mặt phố Tân Bình
Cho thuê nhà mặt phố Tân Phú
Cho thuê nhà mặt phố Thủ Đức
Tỉnh thành
Cho thuê nhà mặt phố TP Hồ Chí Minh
Cho thuê nhà mặt phố Hà Nội
Cho thuê nhà mặt phố Đà Nẵng
Cho thuê nhà mặt phố Bình Dương
Cho thuê nhà mặt phố Đồng Nai
Cho thuê nhà mặt phố Hải Phòng
Cho thuê nhà mặt phố Thừa Thiên - Huế
Cho thuê nhà mặt phố Long An
Cho thuê nhà mặt phố Cần Thơ
Cho thuê nhà mặt phố Quảng Nam
Cho thuê nhà mặt phố Quảng Ngãi
Cho thuê nhà mặt phố Vĩnh Long
Cho thuê nhà mặt phố Thái Bình
Cho thuê nhà mặt phố Ninh Bình
Cho thuê nhà mặt phố Lào Cai
Danh mục
Phòng trọ Hà Nội
Đất Đồng Nai giá rẻ
Bán nhà Bình Dương
Đất Long An giá rẻ
Bán nhà Sài Gòn
Bán căn hộ chung cư TP Hồ Chí Minh
Bán căn hộ chung cư Hà Nội
Bán căn hộ chung cư Đà Nẵng
Bán căn hộ chung cư Bình Dương
Bán căn hộ chung cư Đồng Nai
Bán căn hộ chung cư Hải Phòng
Bán căn hộ chung cư Thừa Thiên - Huế
Bán căn hộ chung cư Long An
Bán nhà riêng TP Hồ Chí Minh
Bán nhà riêng Hà Nội
Bán nhà riêng Đà Nẵng
Bán nhà riêng Bình Dương
Bán nhà riêng Đồng Nai
Bán nhà riêng Hải Phòng
Bán nhà riêng Thừa Thiên - Huế
Bán nhà riêng Long An
Bán đất TP Hồ Chí Minh
Bán đất Hà Nội
Bán đất Đà Nẵng
Bán đất Bình Dương
Bán đất Đồng Nai
Bán đất Hải Phòng
Bán đất Thừa Thiên - Huế
Bán đất Long An
Cho thuê căn hộ chung cư TP Hồ Chí Minh
Cho thuê căn hộ chung cư Hà Nội
Cho thuê căn hộ chung cư Đà Nẵng
Cho thuê căn hộ chung cư Bình Dương
Cho thuê căn hộ chung cư Đồng Nai
Cho thuê căn hộ chung cư Hải Phòng
Cho thuê căn hộ chung cư Thừa Thiên - Huế
Cho thuê căn hộ chung cư Long An
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ TP Hồ Chí Minh
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ Hà Nội
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ Đà Nẵng
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ Bình Dương
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ Đồng Nai
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ Hải Phòng
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ Thừa Thiên - Huế
Cho thuê nhà trọ, phòng trọ Long An
Đã đăng ký với bộ Công Thương. Mã số đăng ký là 2015-0186/ĐK/TMĐT
Quy chế hoạt động
-
Bảo mật thông tin
Công ty TNHH Tư Vấn Giải Pháp và Công Nghệ Quốc Tế
MST: 0310368322 - Email: info@raobannhadat.vn - Điện thoại: 0989 722 522
Địa chỉ:41/1, Phường Trung Mỹ Tây Quận 12, TP Hồ Chí Minh
Hỗ trợ kỹ thuật: Yahoo: nth678 - Skype: nth678 - Email:
thanhhung678@gmail.com
- 0989 722 522 (Thanh Hưng mr)

WARC-Truncated: length


markdown:
- Đăng tin ưu tiên
-
__Các dịch vụ ưu tiên trên Rồng Bay__
-
__Ưu đãi cho khách hàng thường xuyên__ [Sử dụng tài khoản chuyên nghiệp](http://rongbay.com/su-dung-tai-khoan-chuyen-nghiep.html)
-
__Ðăng tin thu hút khách hàng__ [Cách viết tiêu đề thân thiện, lôi cuốn khách hàng](http://rongbay.com/Cach-viet-tieu-de-than-thien-loi-cuon-khach-hang-fp39.html)
-
Rồng bay ra mắt ứng dụng mới cho Người đăng tin
[Từ App store](https://itunes.apple.com/us/app/rong-bay-cong-cu-quan-ly-tin/id1099691034?ls=1&mt=8) [Từ Google play](https://play.google.com/store/apps/details?id=vn.vccorp.rongbay)
-
[Hỏi & đáp](http://rongbay.com/faqs.html)
- Hỗ trợ
- Nếu bạn cần hỗ trợ, vui lòng liên hệ
-
Điện thoại : **(04) 73095555**(ext: 497 / 496 / 495) Hotline : **0936 194 226**(Dành cho cá nhân) **0926 863 922**(Dành cho doanh nghiệp) : [lienhe@rongbay.com](mailto:lienhe@rongbay.com) Skype : [cskh.rongbay](skype:cskh.rongbay?chat)
-
[Mua quảng cáo](http://rongbay.com/mua-quang-cao.html) [Đăng ký](javascript:void(0);) [Đăng nhập](javascript:void(0);)

Server: nginx


markdown:
[dam69 com](/search/dam69-com/) [japantini](/search/japantini/) [tai phim sex mp3](/search/tai-phim-sex-mp3/) [loan luan hiep dam 3gp](/search/loan-luan-hiep-dam-3gp/) [phim sex han quoc gia dinh han quoc](/search/phim-sex-han-quoc-gia-dinh-han-quoc/) [xem sex 3gq bu vu gai co sua](/search/xem-sex-3gq-bu-vu-gai-co-sua/) [xem phim sex du 2 chi em 3gp](/search/xem-phim-sex-du-2-chi-em-3gp/) [phimheo com](/search/phimheo-com/) [xem phim xef](/search/xem-phim-xef/) [phim sex hiep dam gai ngon di massage](/search/phim-sex-hiep-dam-gai-ngon-di-massage/) [xnxxdrp](/search/xnxxdrp/) [phim sexhoc sinh nhat ban](/search/phim-sexhoc-sinh-nhat-ban/) [phim sex tuoi teen cuc hay](/search/phim-sex-tuoi-teen-cuc-hay/) [xvideos co noi dung](/search/xvideos-co-noi-dung/) [phim sex hay khong che](/search/phim-sex-hay-khong-che/) [setnhe net](/search/setnhe-net/) [phimsexti com](/search/phimsexti-com/) [xvideoses vlxx com](/search/xvideoses-vlxx-com/) [sex20016](/search/sex20016/) [tuoiti viet sub com](/search/tuoiti-viet-sub-com/)
### Phim Sex Mới Nhất
[Clip sex côn đồ cưỡng dâm gái 89](http://sexvai.com/clip-sex-con-do-cuong-dam-gai-89/) [Cách bú cu cho bạn trai sướng](http://sexvai.com/cach-bu-cu-cho-ban-trai-suong/) [fim sex đụ cô giáo dạy kèm 9x xinh đẹp](http://sexvai.com/fim-sex-du-co-giao-day-kem-9x-xinh-dep/) [Phim sex massage rồi địt em gái ngoài trời](http://sexvai.com/phim-sex-massage-roi-dit-em-gai-ngoai-troi/) [Phim sex 69.com HD Địt Em Gái Dâm Cực Hay](http://sexvai.com/phim-sex-69-com-hd-dit-em-gai-dam-cuc-hay/) [Phim sex bố chồng và nàng dâu cực hay](http://sexvai.com/phim-sex-bo-chong-va-nang-dau-cuc-hay/) [Phim sex lauxanh.eu địt em gái mặc đồ dâm đãng](http://sexvai.com/phim-sex-lauxanh-eu-dit-em-gai-mac-do-dam-dang/) [Phim sex viet trinh cực hay hấp dẫn](http://sexvai.com/phim-sex-viet-trinh-cuc-hay-hap-dan/) [Hiếp dâm cô giáo cực xinh tại trường học](http://sexvai.com/hiep-dam-co-giao-cuc-xinh-tai-truong-hoc/) [Phim sex đè gaigoisinhvien ra bú phê](http://sexvai.com/phim-sex-de-gaigoisinhvien-ra-bu-phe/)
### Categories
Truy cập
**SEX Vãi.com** hằng ngày để xem những bộ phim sex mới và hay nhất - Tuyển chọn những bộ phim dvd JAV HD, [phim sex loạn luân](http://sexvai.com/phim-sex-loan-luan/), không che chất lượng cao.
© 2017 Phim Sex Hay Chất Lượng Cao. All Rights Reserved.

X-XSS-Protection: 1; mode=block

Set-Cookie: __cfduid=dca7cd8c0e9e41c65177f4fde1f4effb41487537895; expires=Mon, 19-Feb-18 20:58:15 GMT; path=/; domain=.sexvai.com; HttpOnly

Server: cloudflare-nginx

X-Content-Type-Options: nosniff

Vary: Cookie


markdown:
|SHINeeShow|
|Chào mừng các bạn đến với Forum S2 and SHINee!|
Một chốn nhỏ để tình cảm của bạn bay xa cùng SHINee.
Nơi không bao giờ cho rằng tình cảm ấy là ảo,
nơi để bạn cùng giải bày bao cảm xúc chất chứa trong lòng,
và là nơi bạn được là chính bạn.
Với SHINeeShow và SHINee bạn là tuyệt vời nhất.Bởi chúng ta cùng là Shawol.
|Forum S2|
![]()
![]()
|Tác giả|
![]()
![]()
![]()

Cache-Control: post-check=0, pre-check=0

Vary: User-Agent

P3P: CP="IDC DSP COR ADM DEVi TAIi PSA PSD IVAi IVDi CONi HIS OUR IND CNT"


markdown:
**I. Các bước đ** **ặt mua sim Online**
Bước 1: Quý khách hàng tìm sim số đẹp theo các mạng di động, phân loại hoặc qua tìm kiếm trực tiếp.
Bước 2: Click trực tiếp vào số sim để được chuyển đến trang đặt mua sim.
Bước 3: Điền đầy đủ thông tin vào đơn hàng và nhấn "Đặt Mua".
Bước 4: Sau khi quá trình đặt mua sim số đẹp thành công, chúng tôi sẽ liên lạc với quý khách để giao dịch trong thời gian sớm nhất.
**LƯU Ý: Giá bán trên Simsodep.com.vn là giá bán chính xác, Công ty cập nhật mỗi ngày.**
•
** Với những k** **hách hàng tại Hà Nội - TPHCM**
1. Sim có sẵn
- Công ty sẽ giao sim miễn phí cho quý khách hàng trong nội thành Hà Nội - TPHCM.
- Quý khách hàng cần cung cấp đầy đủ các thông tin cần thiết như tên, địa chỉ, số điện thoại liên hệ....Nhân viên của công ty sẽ giao sim và thu tiền tận nơi.
2. Sim không có sẵn
+ Thanh toán trực tiếp tại Công ty
- Quý khách vui lòng đến Công ty để đăng ký đặt cọc trước và lấy giấy biên nhận.
- Công ty sẽ cho chuyển sim về và Quý khách quay lại nhận sim sau 24h đến 36h.
- Quý khách có thể thanh toán toàn bộ tiền và nhận sim trực tiếp tại nhà qua dịch vụ chuyển phát nhanh.
+ Thanh toán bằng hình thức chuyển khoản (Internet Banking)
- Quý khách có thể chuyển khoản tiền đặt cọc vào các tài khoản tại hệ thống website. (Xem các tài khoản
[TẠI ĐÂY](http://simsodep.com.vn/p/hinh-thuc-thanh-toan))
- Công ty sẽ cho chuyển sim về và Quý khách quay lại nhận sim sau 24h đến 36h.
- Quý khách có thể chuyển khoản toàn bộ tiền và nhận sim trực tiếp tại nhà qua dịch vụ chuyển phát nhanh.
•
** Đối với những k** **hách hàng tại các tỉnh thành khác** * 1. Quý khách nhờ người thân (bạn bè, người thân) tiến hành giao dịch hộ tại Hà Nội hoặc TPHCM*
- Trong trường hợp nếu sim đang có sẵn tại Công ty, chúng tôi sẽ giao sim miễn phí cho người thân của Quý khách và thu tiền trực tiếp.
- Nếu sim không có sẵn tại Công ty, người thân Quý khách có thể đến Công ty để đặt cọc và quay lại nhận sim sau
**24h đến 36h**.
* 2. Thanh toán bằng phương thức chuyển khoản ngân hàng*
- Đối với những sim
__ hơn thấp__
Lý do của việc đặt cọc để đảm bảo việc liệu quý khách có nhu cầu mua sim thật sự hay không. Ngoài ra đây cũng là khoản chi phí trong trường hợp khách hàng huỷ bỏ giao dịch sau khi sim đã được chuyển đi như chi phí chuyển phát nhanh, phí hoàn trả.....
Dưới đây là những mức giá để Quý khách chuyển đặt cọc trước (số tiền đặt cọc trên sẽ được khấu trừ vào tổng giá trị tiền sim mà Quý khách phải thanh toán):
• Sim có giá trị từ 1.000.000 - 2.000.000 VNĐ số tiền đặt cọc là
**300.000 VNĐ**
• Sim có giá trị từ 2.000.000 - 5.000.000 VNĐ số tiền đặt cọc là
**400.000 VNĐ**
• Sim có giá trị từ 5.000.000 - 10.000.000 VNĐ số tiền đặt cọc là
**500.000 VNĐ**
• Sim có giá trị trên 10.000.000 VNĐ số tiền đặt cọc là
**1.000.000 VNĐ** đến **5.000.000 VNĐ** * 3. Thanh toán qua nhà xe*
- Quý khách sẽ chuyển tiền về nhà xe, nhân viên của Công ty sẽ ra tận nhà xe để nhận tiền và giao sim.
- Quý khách chuyển tiền qua xe ô tô liên tỉnh, nhân viên của Công ty sẽ ra bến xe nhận tiền và giao sim.
**II. Cách thức mua sim** **III. Hướng dẫn đ** **ăng ký thông tin kích hoạt sim**
Quý khách chỉ cần điền đầy đủ những thông tin cần thiết theo hướng dẫn dưới đây hoặc gửi đầy đủ thông tin ảnh CMND 2 mặt + số sim và seri sim vào Email :
**hieusodep.vn@gmail.com** *Sim Economy của Viettel (ảnh minh hoạ)*
*Sim trả trước mạng Mobifone (Ảnh minh hoạ)*
__1. Áp dụng với sim mới chưa kích hoạt hoặc sim trả sau bao gồm:__
- Sim di động trả trước: thuê bao trả trước hoặc sim trả sau dùng cho điện thoại di động.
- Sim dữ liệu D-com 3G trả trước ( sim D-com dùng để truy cập Internet bằng USB 3G ).
**2. Hướng dẫn kích hoạt sim sau khi đăng ký:**
- Sau khi nhận được mail thông báo đăng ký thành công Quý khách hàng vui lòng lắp sim vào điện thoại gọi 900 bấm phím 1 để kích hoạt thuê bao ( thuê bao trả trước ).
__3. Thông tin thuê bao cần đăng ký:__
- Thông tin số thuê bao và seri : 0944888888 seri 89840 20002 12760 88888
- Họ và tên chủ thuê bao theo CMND : Đỗ Trọng Hiếu
- Ngày tháng năm sinh : 18/06/1981
- Số chứng minh nhân dân : 011946688
- Ngày cấp CMND : 20/06/2009 - Nơi cấp : Hà Nội
- Địa chỉ thường trú : 129 Nguyễn Trãi - P. Thượng Đình - Q. Thanh Xuân - Hà Nội
- Ảnh CMND có 2 mặt: ảnh chụp ngay ngắn, rõ ràng, không bị khuyết thông tin.
* Chú ý: Nếu không có đầy đủ ảnh CMND 2 mặt sẽ không được đăng ký. Công ty sẽ tiếp nhận và đăng ký miễn phí cho Quý khách nếu thông tin đầy đủ.
* Quý khách có thể gọi trực tiếp để được tư vấn :
**0944.66.8888** - **0944.66.9999**.


markdown:
Mã sản phẩm: SHD6800
Mã sản phẩm: SHD6149
Mã sản phẩm: SHD6871
Mã sản phẩm: SHD6870
Mã sản phẩm: SHD6866
Mã sản phẩm: SHD6865
Mã sản phẩm: SHD6864
Mã sản phẩm: SHD6863
Mã sản phẩm: SHD6146

Content-Type: text/html


markdown:
![Bài gửi Bài gửi](https://illiweb.com/fa/empty.gif)
![ ](https://illiweb.com/fa/empty.gif)
**1**
Đây là clip M37 Stakeout Hellfire cận cảnh;clip được thực hiện bởi flashrman vào ngày 4/7/2:
Giới thiệu M37 Stakeout-Hellfire:
+Damages: (Đây là damages tui tính 1-5meter thôi)
-Đầu (gần):100HP -Đầu (xa):75-80HP
-Thân (gần):100HP -Thân (xa):80-85HP
-Chân (gần):100HP -Chân (xa):25-28HP
-Wallbang (gần):100HP (Tất cả đầu đến sọ)
-Wallbang (xa):Đầu là 60HP ;Thân là 67HP ;Chân là 45HP
-Reload time (nạp đạn):8 viên tổng là 1,68s nhanh nhất tất cả các ShotGun Boss!
Đây là video:
[You must be
[registered](/register?redirect=%2Ft418-topic)and [logged in](/login?redirect=%2Ft418-topic)to see this link.]
Thanks hay không thì tùy nha!
cho thêm cái Clip nữa
![ Evil or Very Mad](https://imgfast.net/users/1217/11/50/70/smiles/4006036031.gif)
[You must be
[registered](/register?redirect=%2Ft418-topic)and [logged in](/login?redirect=%2Ft418-topic)to see this link.] ![](/users/2211/12/43/96/album/box-sh10.gif)
_________________
๖ۣۜHãy ๖ۣۜCho ๖ۣۜAnh ๖ۣۜNhững ๖ۣۜNụ ๖ۣۜCười ๖ۣۜĐể ๖ۣۜNhìn ๖ۣۜEm ๖ۣۜAnh ๖ۣۜThêm ๖ۣۜYêu ๖ۣۜĐời
[You must be
[registered](/register?redirect=%2Ft418-topic)and [logged in](/login?redirect=%2Ft418-topic)to see this image.][/url][You must be [registered](/register?redirect=%2Ft418-topic)and [logged in](/login?redirect=%2Ft418-topic)to see this image.]


markdown: Cách trang điểm mắt đẹp, to tròn, dễ thương hút hồn chàng Trang điểm được coi là một trong những bước khó nhất khi make up. Không phải bạn gái cũng biết cách trang điểm mắt đẹp và cuốn hút. Khi make up, khâu trang điểm mắt luôn rất được chú trọng đó . Bởi đôi mắt là cửa sổ tâm hồn. Đôi mắt đẹp sẽ cuốn hút người đối diện ngay từ cái nhìn đầu tiên nhé . Cách trang điểm mắt dù không khó, nhưng nếu không nắm được bước cơ bản và tuần tự thì bạn rất dễ biến mình thành một bà gài đấy. Tương tự như trang điểm cho khuôn mặt, với đôi mắt bạn cũng cần làm từng bước và chăm chút tỉ mỉ đến cả hàng lông mi. Nghe có vẻ phức tạp, nhưng nếu bắt tay vào thử cách trang điểm mắt đẹp bạn sẽ thấy không hề khó và mất nhiều thời gian đâu nhé. Nào hãy cùng Lamsao học ngay cách trang điểm mắt đẹp để luôn tự tin và nổi bật nhất nhé. Cách trang điểm mắt đẹp, dễ thương hút hồn chàng1 Cách trang điểm mắt đẹp không quá khó đâu nhé Cách trang điểm mắt đẹp: Nguyên liệu Bạn cần chuẩn bị những dụng cụ sau: - Phấn mắt màu be, hồng nhũ - Phấn mắt màu đồng - Bút kẻ mắt nước/dạ - Bút kẻ mắt màu trắng nhũ - Chì kẻ mày nâu, hoặc màu phù hợp với tóc của bạn - Mi giả và keo gắn mi - Mascara Với những bạn gái mới tập make up hoặc theo đuổi phong cách trang điểm tự nhiên, thì không nên chọn những màu phấn mắt quá rực rỡ hay khó đánh như tím, xanh, khói, xám… mà nên chọn những màu mắt tươi sáng, giúp đôi mắt rực rỡ và to tròn hơn như màu nude, be, hồng phớt… Với cách trang điểm mắt đẹp mà Lamsao giới thiệu ở đây, bạn sẽ sử dụng 3 màu phấn mắt là màu be, hồng nhũ và màu đồng nhé. Trước hết, bạn dùng phấn mắt màu be phủ lên toàn bộ bầu mắt, theo đường chấm phía dưới hình vẽ nhé. Bạn có thể dùng cọ, hoặc ngón tay út để tán phấn mắt cũng được. Tiếp đó, dùng phấn màu hồng nhũ tán lên phần mí mắt trên và sát chân mi để được màu đậm hơn. Cách trang điểm mắt đẹp, dễ thương hút hồn chàng3 Tán phấn hồng nhũ lên mí mắt trên Dùng phấn mắt màu đồng nhấn nhá để tạo chiều sâu cho đôi mắt. Dùng cọ tán phấn màu đồng trên mí mắt trên từ khoảng giữa con ngươi kéo xuống cuối đuôi mắt (theo đường kẻ phía dưới hình vẽ). Bạn nên đánh kéo ra ngoài mí mắt một chút để tạo vẻ quyến rũ và giúp mắt trông to hơn nhé. Xong công đoạn tán phấn mắt, bạn chuyển sang kẻ mí mắt để giúp đôi mắt trông to tròn và sắc nét hơn. Tùy theo sở thích mà bạn có thể dùng kẻ dạ hoặc dùng bút kẻ mắt nước nhé. Cả 2 loại này đều dễ sử dụng và tạo được các đường kẻ sắc nét và rất đẹp. Bạn dùng bút kẻ một đường từ đầu khóe mắt đến tận hết đuôi mắt. Đường kẻ mảnh ở phần đầu và cuối đuôi mắt, rộng nhất ở vùng con ngươi. Bạn lưu ý rằng, đường kẻ cuối đuôi mắt càng mảnh thì trông mắt sẽ càng to và tròn nhé. Kẻ mắt xong, bạn dùng phấn mắt màu đồng tán một chút ở mí mắt dưới, khoảng 1/3 mí mắt kéo về phía đuôi mắt. Cách làm này sẽ tạo thêm điểm nhấn cuốn hút cho đôi mắt của bạn. Để đôi mắt thêm long lanh, bạn dùng bút kẻ mắt màu trắng tô nhẹ ở nửa đầu mí mắt dưới nhé. Như vậy mắt trông sẽ rất sâu và bắt sáng đấy. Để hoàn tất khâu trang điểm mắt, bạn gắn mi giả vào mí mắt trên nhé. Nếu sở hữu hàng lông mi dài và dày tự nhiên thì bạn có thể bỏ qua bước này. Đừng quên kẹp mi và chuốt mascara để giữ cho hàng mi cong vút suốt cả ngày nhé. Phần mắt đã xong, bạn chỉ cần kẻ thêm hàng lông mày đúng chuẩn nữa là hoàn thiện nhé. Sử dụng bút chì kẻ mày hay bột tán lông mày màu nâu hoặc phù hợp với màu tóc. Định hình dáng lông mày sao cho phù hợp với khuôn mặt, rồi tán đều chì để có đôi lông mày đều màu và thật đẹp. Bạn có thể tham khảo nhiều cách kẻ lông mày và tập luyện nhiều lần cho quen tay nhé. Gắn mí giả và kẻ lông mày Thành phẩm Giờ thì nhìn vào gương và bạn sẽ thấy mình trông thật khác lạ phải không nào. Đôi mắt đã trở nên to tròn, long lanh và cuốn hút hơn rất nhiều rồi đấy. Không mất quá nhiều thời gian, chỉ cần thao tác đúng từng bước là bạn đã “lột xác” rồi đấy. Chắc chắn với cách trang điểm mắt đẹp này, khó có chàng trai nào rời mắt khỏi bạn được. Cách làm trắng da tự nhiên tại nhà

Vietnix-Cache: HIT from backend


markdown:
Thảo luận trong 'Tài liệu học tiếng anh 3' bắt đầu bởi dangthetai91, 15/5/11.
bài có giải thích về các loại séc và thẻ nhựa giúp mọi người hỉu rõ hơn
kaka vừa học hum nay xong, bài viết hay quá
tài hâm cũng la liếm ở đây à, ;))
Hnay vừa kiểm tra cái phần plastic card:-<
la liếm cho bằng bạn bằng bè, thanks đi cho t vui
ui minh quen hok thank
ai tóm tắt được đặc điểm của các loại cheque, credit slip, plastic card k
share đi mọi người! :D
các bạn ơi cho mình hỏi gấp
credit card thì có pải là khi thanh toán thì có các bước là
Ngân hàng ghi có vào tài khoản của người bán hàng khoản tiền như trong hoá đơn, ghi nợ khoản tiền đó vào tài khoản của công ty phát hành thẻ tín dụng và chuyển những hoá đơn tới công ty phát hành thẻ tín dụng.
Khi công ty phát hành thẻ tín dụng cung cấp hoá đơn họ chuyển nó cho ngân hàng thông qua hệ thống thanh toán bù trừ, giá trị của từng khoản doanh thu bán hàng sẽ trừ đi một khoản phí. Cùng lúc đó, ngân hàng ghi nợ vào tài khoản chủ thẻ và gửi tới chủ thẻ một bản sao kê tháng đó.
nói chung là nh cuối cùng ghi nợ vào tk của chủ thẻ
vậy thì sao ở trong sách E4B I lại có câu là
A fourth use for plastic cards is to give customers credit when they purchse goods or services. (chỗ này theo như bài thì nói về credit card
(trang 46)
vậy có mâu thuẫn gì không ạ
theo mình hiểu thì credit card không phải là công cụ thanh toán, chỉ là công cụ trao đổi thôi, bản chất là nó cấp tín dụng cho khách hàng để mua hàng mà không cần trả ngay (buy on credit), cuối tháng công ti phát hành thẻ gửi bản sao kê cho khách hàng, lúc này mới diễn ra thanh toán. khách hàng trả cho công ti phát hành bằng cách viết séc hoặc ghi nợ vào tài khoản.
chúc bạn thi tốt


markdown:
-
Mọi bài viết vi phạm chính sách, Spam/Không đúng chuyên mục BQT sẽ xóa bài và nick vĩnh viễn.
Để báo lỗi hoặc cần hỗ trợ vui lòng liên hệ:
Email: vipkhongtin@gmail.com - FB:
[Vipkhongtin](http://fb.com/vipkhongtin). Xin cảm ơn! [Dismiss Notice](account/dismiss-notice?notice_id=1)
# Sim số - Thẻ cào
**sim 10 so dep** Nơi mua bán SIM số đẹp, Thẻ cào giá rẻ. Mua bán trao đổi sim số, thẻ cào điện thoại, **sim số đẹp**, thẻ cào Vinaphone, Viettel, Mobifone uy tín với nhiều ưu đãi, khuyến mãi lớn. Diễn đàn đăng tin mua bán trao đổi sim số đẹp, sim vip, thẻ cào điện thoại, thẻ game.
Trang 19 của 165 trang
[Tùy chọn hiển thị chủ đề](#)
Đang tải...
Trang 19 của 165 trang

Server: Nginx

X-Powered-By: VPSSIM


markdown:
-
Mọi bài viết vi phạm chính sách, Spam/Không đúng chuyên mục BQT sẽ xóa bài và nick vĩnh viễn.
Để báo lỗi hoặc cần hỗ trợ vui lòng liên hệ:
Email: vipkhongtin@gmail.com - FB:
[Vipkhongtin](http://fb.com/vipkhongtin). Xin cảm ơn! [Dismiss Notice](account/dismiss-notice?notice_id=1)
# Máy cắt bê tông TCC2 thương hiệu Mikasa
Thảo luận trong '
[Máy móc công nghiệp](forums/may-moc-cong-nghiep.25/)' bắt đầu bởi [mayxaydung](members/mayxaydung.6763/), [21/12/15](threads/may-cat-be-tong-tcc2-thuong-hieu-mikasa.22794/).


markdown:
# 7 mẹo nhỏ trong Word 2007
Chia sẻ: Vu Trung | Ngày: | Loại File: DOC | Số trang:3
674
lượt xem 334
download
lượt xem 334
download
![](http://image.tlvnimg.com/document/thumbnail/2009/20090909/vutrung/80x100/7_meo_nho_trong_word_2007_0824.jpg)
##
7 mẹo nhỏ trong Word 2007
Mô tả tài liệu
[Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ](javascript:void(0);)
Download
![](http://static.tlvnimg.com/b2013az/templates/version1/default/images/down16x21.png)
Với nhiều người dùng, Word 2007 là một phần mềm “khó dùng” vì giao diện rất khác so với các phiên bản trước. Một số mẹo nhỏ sau sẽ giúp bạn làm việc dễ dàng hơn.
Chủ đề:
Bình luận(1)
[Đăng nhập để gửi bình luận!](javascript:void(0);)
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD

Set-Cookie: TLDEVNamespace=ndm97b5v6pug81f0vq9l5kqk96; path=/; domain=.tailieu.vn; HttpOnly

Server: Apache/2.2.31 (CentOS)


markdown:
# Chương 2: Điện di gel
Chia sẻ: Phuong Nha | Ngày: | Loại File: PDF | Số trang:16
lượt xem 524
download
![](http://image.tlvnimg.com/document/thumbnail/2009/20091205/aries-smile/80x100/c2_2719.jpg)
##
Chương 2: Điện di gel
[Vui lòng tải xuống để xem tài liệu đầy đủ](javascript:void(0);)
Download
![](http://static.tlvnimg.com/b2013az/templates/version1/default/images/down16x21.png)
Điện di là kỹ thuật được dùng để phân tách và một đôi khi để tinh sạch các đại phân tử-đặc biệt là các protein và các nucleic acid-trên cơ sở kích thước/khối lượng, điện tích và cấu hình của chúng. Khi các phân tử tích điện được đặt trong một điện trường, chúng sẽ dịch chuyển hướng đến cực dương (+) hoặc cực âm (-) tùy theo điện tích của chúng.
Bình luận(0)
[Đăng nhập để gửi bình luận!](javascript:void(0);)
##
Nội dung Text: Chương 2: Điện di gel
- Chương 2 Điện di gel I. Nguyên lý chung Điện di là kỹ thuật được dùng để phân tách và một đôi khi để tinh sạch các đại phân tử-đặc biệt là các protein và các nucleic acid-trên cơ sở kích thước/khối lượng, điện tích và cấu hình của chúng. Khi các phân tử tích điện được đặt trong một điện trường, chúng sẽ dịch chuyển hướng đến cực dương (+) hoặc cực âm (-) tùy theo điện tích của chúng. Ngược với protein, loại phân tử có điện tích thực hoặc dương hoặc âm, các nucleic acid có một điện tích âm không đổi nhờ khung phosphate của mình, và vì thế chỉ dịch chuyển hướng đến cực dương. Các phân tử protein và nucleic acid có thể được chạy điện di trên một khuôn đỡ (support matrix) như giấy, cellulose acetate, gel tinh bột, agarose hoặc polyacrylamide gel. Trong đó gel của agarose và polyacrylamide được sử dụng phổ biến nhất. Thông thường, gel là một khuôn đúc dạng phiến mỏng có các giếng để nạp (loading) mẫu. Gel được ngâm trong đệm điện di cung cấp các ion để dẫn truyền dòng điện và một vài loại đệm để duy trì pH ở một giá trị không đổi tương đối. II. Điện di agarose gel Agarose (polysaccharide) có khối lượng phân tử xấp xỉ 120.000 Da (Hình 2.1) là một trong hai thành phần chính của agar1 chiếm khoảng 70%, phần kia là agaropectin chiếm khoảng 30%. Agarose là một polymer mạch thẳng không bị sulphate hóa chứa hai gốc xen kẽ nhau là D-galactose và 3,6-anhydro- L-galactose. Agarose gel là một chất trong suốt (transparent) hoặc trong mờ (transluent) giống như agar, được tạo thành khi hỗn hợp agarose và nước (hoặc đệm điện di) được đun nóng tới >100oC và sau đó được làm lạnh; dạng gel xuất hiện ở khoảng 40-45oC. Agarose gel được ứng dụng rộng rãi để làm giá thể cho các nucleic acid trong kỹ thuật điện di ngang (horizontal electrophoresis) hoặc làm giá thể cho môi trường nuôi cấy bacteriophage (top agarose). Hình 2.1. Cấu trúc phân tử của agarose. Đơn vị agarobiose (ví dụ: hai phân tử đường) là một monomer trong agarose polymer. Có khoảng 400 monomer trên một chuỗi polymer. Các phân tử nucleic acid có khối lượng và điện tích khác nhau được tách ra khi di chuyển từ cực âm sang cực dương của hệ điện di trong một điện trường có điện thế và cường độ thích hợp. Kỹ thuật này đơn giản và thực hiện nhanh. Hơn nữa, vị trí của DNA trong gel được xác định trực tiếp: các băng DNA trong gel được nhuộm ở nồng độ thấp của thuốc nhuộm huỳnh quang ethidium bromide (EtBr) và có thể phát hiện dưới ánh sáng tử ngoại (ultraviolet-UV). Điện di agarose gel được sử dụng trong các trường hợp sau: - Ước lượng kích thước của các phân tử DNA sau khi thực hiện phản ứng cắt hạn chế (ví dụ: lập
- bản đồ hạn chế của DNA được tạo dòng…). - Phân tích các sản phẩm PCR (ví dụ: trong chẩn đoán di truyền phân tử hoặc in dấu di truyền…). - Phân tách DNA hệ gen đã được cắt hạn chế trước khi thẩm tích Southern, hoặc RNA trước khi thẩm tích Northern. Ưu điểm của phương pháp này là gel được rót dễ dàng, không gây biến tính mẫu, và bền vững vật lý hơn polyacrylamide. Mẫu cũng dễ thu hồi. Nhược điểm là agarose gel có thể bị nóng chảy trong quá trình điện di, đệm có thể bị tiêu hao, và các dạng khác nhau của nucleic acid có thể chạy không ổn định. 1. Các yếu tố ảnh hưởng đến tốc độ dịch chuyển điện di trong agarose gel 1.1. Kích thước của phân tử Các phân tử DNA mạch thẳng sợi đôi đi qua bản gel ở các tốc độ tỷ lệ nghịch với hàm log10 của khối lượng phân tử của chúng (Hình 2.2). Do đó, các phân tử DNA có kích thước càng lớn (khối lượng phân tử lớn) thì tốc độ dịch chuyển càng chậm. Hình 2.2. Mối quan hệ giữa kích thước DNA và độ linh động điện di của nó 1.2. Nồng độ agarose Đoạn DNA mang kích thước nhất định sẽ dịch chuyển ở các tốc độ khác nhau qua các bản gel chứa các nồng độ agarose khác nhau. Mối quan hệ tuyến tính giữa hàm logarithm của độ linh động điện di của DNA (m) và nồng độ gel (t) được biểu diễn bằng biểu thức: Trong đó mo: độ linh động điện di tự do. Kr: hệ số trì hoãn điện di (retardation), được thiết lập thông qua mối liên quan giữa các tính chất của gel với hình dạng và kích thước của các phân tử dịch chuyển. Như vậy, dùng gel ở các nồng độ khác nhau có thể phân tách được các đoạn DNA có kích thước
- khác nhau (Bảng 2.1). Nồng độ agarose cao có khả năng phân tách các đoạn DNA nhỏ, trong khi đó nồng độ agarose thấp lại cho phép phân tách các đoạn DNA lớn hơn. Bảng 2.1. Các thông số điện di DNA bằng agarose gel Hình 2.3 minh họa sự dịch chuyển của tập hợp các đoạn DNA trong hai mẫu ở ba nồng độ khác nhau của agarose, tất cả chúng ở trong một khay gel và được điện di ở cùng một điện áp (voltage) trong một thời gian xác định. Kết quả cho thấy, các đoạn lớn được phân tách tốt hơn ở gel 1%, trong khi các đoạn nhỏ thích hợp với gel 2%. Hình 2.3. Điện di các mẫu DNA giống nhau ở các nồng độ agarose khác nhau. A: 1%, B: 1,5% và C: 2%. 1.3. Cấu hình của DNA Các DNA dạng vòng đóng (form-I), vòng đứt (form-II) và mạch thẳng (form-III) có cùng một khối lượng phân tử sẽ dịch chuyển trên agarose gel ở các tốc độ khác nhau. Nhìn chung, DNA của các plasmid mạch vòng dịch chuyển nhanh hơn DNA của plasmid cùng loại nhưng có dạng mạch thẳng. Hầu hết plasmid mạch vòng chứa ít nhất hai dạng DNA có cấu trúc không gian khác nhau là dạng vòng đóng (siêu xoắn) và vòng đứt. Hình 2.4 minh họa kết quả điện di với plasmid mạch vòng bên trái và plasmid cùng loại mạch thẳng ở bên phải.
- Hình 2.4. Điện di các plasmid có cấu hình khác nhau 1.4. Thành phần base và nhiệt độ Tập tính điện di của DNA trong agarose gel không bị ảnh hưởng rõ rệt bởi thành phần base của DNA hoặc nhiệt độ mà ở đó gel được chạy. Trong agarose gel, tính linh động điện di tương đối của các đoạn DNA có kích thước khác nhau không thay đổi trong khoảng từ 4oC đến 30oC. Nói chung, agarose gel thường được chạy ở nhiệt độ phòng. 2. Phương pháp điện di agarose gel 2.1. Đệm pH Một số đệm điện di thích hợp cho DNA sợi đôi thường được dùng là Tris-acetate-EDTA (TAE), Tris-borate-EDTA (TBE) và Tris-phosphate-EDTA (TPE) ở nồng độ khoảng 50 mM và pH 7,5-7,8 (Bảng 2.2). Thường do thói quen, TAE được sử dụng nhiều nhất, nhưng khả năng đệm của nó lại thấp. Đệm TBE và TPE đều có khả năng hòa tan tốt các đoạn DNA và có khả năng đệm cao hơn một cách rõ rệt. Các đoạn DNA sẽ dịch chuyển với các tốc độ hơi khác nhau một chút trong ba loại đệm trên do sự khác nhau về cường lực ion của đệm. Đệm không những thiết lập một giá trị pH, mà còn cung cấp các ion để hỗ trợ cho độ dẫn (conductivity). Nếu chúng ta dùng nước thay vì là đệm trong quá trình điện di, thì sẽ không có sự dịch chuyển cần thiết của DNA trong gel. Ngược lại, nếu sử dụng đệm nồng độ đậm đặc (ví dụ: dung dịch stock ×10), thì nhiệt độ trong gel có thể tăng cao và làm nóng chảy nó. 2.2. Chuẩn bị agarose gel Có nhiều loại agarose khác nhau thích hợp để chạy điện di, loại agarose dùng tốt nhất trong thí nghiệm là type-II-agarose có nội thẩm thấu thấp (low-endo-osmotic). Nó dễ dàng chảy ra và tạo thành một dung dịch trong suốt, kết quả là gel đàn hồi thậm chí ở các nồng độ thấp. Tuy nhiên, type-II-agarose dễ bị bẩn bởi sulphate polysaccharides (SP), hơn nữa SP còn ức chế các enzyme như ligase, polymerase và RE. Vì thế, các đoạn DNA dung ly từ những gel như thế phải được làm sạch cẩn thận trước khi chúng được dùng như là các khuôn mẫu hoặc cơ chất cho các enzyme này. Bảng 2.2. Các đệm sử dụng phổ biến trong điện di
- 2.3. Nhuộm DNA trong agarose gel Phương pháp quan sát DNA trong agarose gel thuận lợi nhất là dùng thuốc nhuộm huỳnh quang EtBr. EtBr được dùng để phát hiện DNA sợi đôi và RNA sợi đơn. Tuy nhiên, ái lực (affinity) của thuốc nhuộm đối với nucleic acid sợi đơn là tương đối thấp và có hiệu suất huỳnh quang không cao. Sau khi nhuộm, EtBr sẽ xen vào giữa các base của nucleic acid và cho phép phát hiện dễ dàng chúng ở trong gel. Thường EtBr (0,5 mg/mL) được đưa vào trong agarose gel để phản ứng nhuộm xảy ra trong suốt quá trình điện di. Mặc dù tính linh động điện di của DNA sợi đôi mạch thẳng giảm khi có mặt thuốc nhuộm (khoảng 15%), nhưng khả năng xác định gel trực tiếp dưới ánh sáng UV trong suốt quá trình điện di hoặc ở giai đoạn cuối có ưu thế rõ rệt. Tuy nhiên, nếu cần có thể chạy điện di gel không có EtBr và chỉ nhuộm DNA hoặc RNA sau khi điện di xong. Gel được ngâm trong đệm điện di hoặc H2O chứa EtBr (0,5 mg/mL)/45 phút ở nhiệt độ phòng. Chú ý Ethidium bromide là một tác nhân gây đột biến mạnh. Vì thế, luôn luôn đeo găng tay khi cầm gel hoặc dung dịch chứa thuốc nhuộm. 2.4. Thu hồi DNA từ agarose gel Nhiều phương pháp đã được xây dựng để thu hồi DNA từ agarose gel, nhưng không có phương pháp nào là hoàn toàn tối ưu. Có hai vấn đề chính: thứ nhất đa số các loại agarose đều bị nhiễm bẩn bởi sulphate polysaccharides, các sản phẩm sau đó được chiết từ gel cùng với DNA, chúng là nhân tố ức chế có hoạt tính của nhiều loại enzyme (RE, ligase, kinase, polymerase) dùng trong các bước tạo dòng tiếp theo sau; thứ hai hiệu suất chiết DNA từ agarose gel phụ thuộc vào khối lượng phân tử của nó, các đoạn DNA có chiều dài 20 kb được thu hồi kém (khoảng hơn 20% sản lượng). Có nhiều phương pháp thu hồi và tinh sạch DNA từ agarose gel, dưới đây là một vài phương pháp chính: 2.4.1. Dùng agarose có nhiệt độ nóng chảy thấp (low melting temperature)
- Mẫu agarose gel có nhiệt độ nóng chảy thấp chứa đoạn DNA quan tâm được cắt ra khỏi bản gel và cho vào trong đệm với tỷ lệ 1:1, bổ sung muối đến nồng độ 0,5 M, sau đó được nóng chảy ở 70oC để hòa tan hoàn toàn trong đệm. Dung dịch gel có DNA được chiết bằng phenol/chloroform và kết tủa. Lưu ý DNA được tách chiết bằng phương pháp này không thích hợp cho mọi phương thức thao tác tiếp theo, do sự hiện diện của các nhân tố ức chế trong agarose. 2.4.2. Ly tâm Mẫu agarose gel có chứa băng DNA quan tâm được cắt ra và cho vào đệm chiết, làm nóng để hòa tan hoàn toàn, sau đó cho dung dịch gel lên trên một lớp (màng) bông thủy tinh đã silicon hóa đặt trong một cột lọc nhỏ loại 0,5 mL (còn gọi là spin column). Cột này được cho vào một tube vi ly tâm loại 1,5 mL và được ly tâm ở tốc độ cao 10.000-15.000 rpm trong 10-15 phút. DNA sẽ liên kết với màng còn dung dịch đệm sẽ đi qua lớp bông thủy tinh vào tube vi ly tâm. Cho đệm rửa vào cột và rửa cột vài lần bằng cách ly tâm nhanh. Thay tube vi ly tâm mới, cho đệm hòa tan DNA vào cột và ly tâm để dung ly (elution) DNA ra khỏi màng vào tube. Dung dịch DNA thu được có thể được tinh sạch thêm nếu cần. Cũng có thể đông lạnh mẫu gel trước khi dùng phương pháp ly tâm để cải thiện hiệu suất thu hồi DNA. 2.4.3. Điện di vào bẫy Một cái rãnh nhỏ được cắt trong agarose gel ngay phía trước của băng DNA quan tâm. Rãnh này được làm đầy bằng glycerol và gel được điện di nhanh trở lại để chuyển DNA từ gel vào trong dung dịch glycerol (quá trình điện di có thể được kiểm soát bằng UV). Dung dịch glycerol-DNA sau đó được chiết bằng pipette. Hoặc sau khi điện di, một khe nhỏ được cắt trong gel ngay phía trước băng DNA quan tâm và đặt trong khe một mẫu giấy loại NA-45. Gel sau đó được điện di trở lại và băng DNA quan tâm sẽ dịch chuyển vào trong mẫu giấy. Mẫu giấy sau đó được rửa và DNA được dung ly trong đệm bằng cách đun nóng mẫu giấy tới 70oC. DNA sau đó có thể được tách chiết bằng phenol và kết tủa. 2.4.4. Dùng hạt thủy tinh Mẫu gel quan tâm được hòa tan trong dung dịch muối NaI (một loại chaotropic salt) ở nồng độ khoảng 4 M. Các hạt thủy tinh sau đó được bổ sung vào dung dịch để liên kết hiệu quả với các đoạn DNA được phóng thích ở nồng độ đã cho của NaI. RNA, protein và các tạp chất khác không liên kết với các hạt thủy tinh. Tiếp theo là các chu kỳ rửa và kết tủa tiểu thể, DNA tinh sạch được dung ly khỏi hạt thủy tinh trong đệm muối thấp. Tuy nhiên, phương pháp này mặc dù nhanh và hiệu quả nhưng lại có phạm vi tối ưu hẹp. Thu hồi các đoạn DNA nhỏ (500-800 bp) là không hiệu quả lắm và các đoạn lớn (>15 kb) có thể liên kết với các hạt thủy tinh khác nhau và các sợi DNA có thể bị phá vỡ trong suốt các chu kỳ rửa. 3. Quy trình điện di 3.1. Chuẩn bị agarose gel Cho 1% type-II-agarose vào 100 mL đệm 0,5× TAE (nếu khuôn đổ gel lớn thì tăng theo tỷ lệ trên). Đun trong nồi khử trùng hoặc lò vi sóng cho đến khi agarose tan hoàn toàn. Nếu quá trình đun mất nước quá nhiều thì phải thêm nước cho đủ 100 mL. Để nguội khoảng 60oC và đổ vào buồng điện di có cài sẵn lược. Chiều dày gel khoảng 5 mm là thích hợp. Sau 30-40 phút, khi gel đã đông cứng, có thể gỡ lược ra. 3.2. Đặt mẫu DNA vào giếng Tùy thuộc vào từng mục đích điện di khác nhau có thể sử dụng nồng độ DNA cao hoặc thấp. Chẳng
- hạn theo tỷ lệ sau: DNA (1 mg/1 mL) 1 mL Đệm màu bromophenol (×10 loading dye) 1 mL Nước cất 2 lần 9 mL Tổng số 11 mL Dùng micropipette hút 11 mL dung dịch trên cho vào giếng. Lưu ý mẫu chạy điện di phải có dung tích £ thể tích của giếng. Thường đặt mẫu sau khi đã đổ dịch đệm 0,5× TAE vào buồng điện di cho ngập gel, ít khi đặt mẫu trước rồi đổ đệm sau (nạp khô). Để dễ làm việc nên dùng micropipette loại 20-200 mL và đặt buồng điện di trên bàn có nền đen. Khi tăng điện áp của quá trình điện di, các đoạn DNA lớn thường dịch chuyển nhanh hơn so với các đoạn nhỏ. Tuy nhiên, để có độ phân giải (resolution) tốt nhất đối với các đoạn DNA có kích thước lớn hơn 2 kb thì điện áp được sử dụng phải nhỏ hơn 5 V/cm (giá trị cm được tính theo khoảng cách giữa hai điện cực chứ không phải là chiều dài của gel). DNA dịch chuyển từ cực âm đến cực dương. Quan sát sự dịch chuyển bằng màu bromophenol để biết lúc nào cần ngừng điện di (Hình 2.5). 3.3. Nhuộm DNA bằng EtBr Sau khi chạy điện di xong lấy nhẹ bản gel ra khỏi khuôn và ngâm vào dung dịch EtBr nồng độ 0,5 mg/mL, trong thời gian 30-45 phút, tốt nhất trên một máy lắc nhẹ (độ 10 vòng/phút ). Đổ dịch nhuộm EtBr vào một bình riêng để xử lý và rửa bản gel bằng cách ngâm trong nước cất hai lần, mỗi lần 15-20 phút. EtBr thường pha sẵn ở dạng đậm đặc 5 mg/mL và giữ ở 4oC trong tối. Hình 2.5. Sơ đồ minh họa các bước trong quá trình điện di agarose gel
- 3.4. Quan sát và chụp ảnh Bản gel sau khi nhuộm EtBr được quan sát dưới ánh sáng tử ngoại (l = 302 nm) (Hình 2.6). Dùng thiết bị chuyên dụng để phân tích và lưu trữ hình ảnh DNA (Gel Documentation System). Chú ý Không nhìn vào ánh sáng tử ngoại nếu không có kính lọc thích hợp. Hình 2.6. Hình ảnh điện di DNA chạy trên agarose gel 1%, 3 Volts/cm và nhuộm bằng EtBr. Các băng DNA có màu sáng. SM: Chuẩn kích thước của DNA (1 kb ladder). Các đường 1, 2 và 3: mẫu plasmid DNA được cắt bằng 3 enzyme hạn chế khác nhau. III. Điện di polyacrylamide gel Acrylamide là một monomer có cấu trúc như sau: Khi có mặt các gốc tự do, được cung cấp bởi ammonium persulphate và ổn định bởi TEMED (N,N,N’,N’-tetramethylethylene-diamine), phản ứng chuỗi được bắt đầu trong đó các acrylamide monomer được polymer hóa (trùng hợp) thành một chuỗi dài. Khi bisacrylamide (N,N’- methylenebisacrylamide) được bổ sung trong phản ứng polymer hóa, các chuỗi sẽ liên kết chéo (cross-linking) để tạo thành dạng gel. Độ xốp của gel được xác định bởi chiều dài của chuỗi và mức độ liên kết chéo. Chiều dài của chuỗi polyacrylamide được xác định bằng nồng độ acrylamide trong phản ứng polymer hóa (giữa 3,5% và 20%). Ngoài protein, polyacrylamide gel cũng được dùng để điện di DNA (kể cả RNA và DNA/RNA). Gel phải được rót vào giữa hai tấm kính (gel plates) được ngăn cách bởi các miếng đệm (gel spacers) (Hình 2.7). Hầu hết các dung dịch acrylamide được ngăn không tiếp xúc với không khí để hạn chế sự ức chế trùng hợp gây ra bởi oxygen. Gel có thể dài từ 10-100 cm tùy thuộc vào yêu cầu phân tích và chúng thường được chạy trong phương thẳng đứng.
- Hình 2.7. Sơ đồ và hình ảnh của buồng điện di polyacrylamide gel Phạm vi kích thước phân tử và độ phân giải của quá trình phân tách tùy thuộc vào nồng độ của acrylamide và bis-acrylamide (và tỷ lệ của chúng) do chúng tạo ra khuôn gel với các phần trăm khác nhau của acrylamide và bậc của liên kết chéo. Nồng độ thấp tạo ra các lỗ có kích thước lớn hơn và vì thế có thể phân tách các phân tử lớn hơn. Liên kết chéo của các monomer và các tác nhân liên kết có thể được điều chỉnh để kiểm soát mức độ xốp của khuôn gel. Điều này cho phép tối ưu hóa một khuôn gel để phân tách một phạm vi kích thước đặc biệt của các phân tử protein. 1. Điện di nucleic acid Điện di polyacrylamide gel được dùng để phân tách và thu hồi các đoạn DNA có chiều dài từ 5-2.000 bp. Nồng độ polyacrylamide gel được sử dụng trong khoảng từ 3,5-20% tùy thuộc vào kích thước của đoạn DNA quan tâm. Hai loại polyacrylamide gel thường được sử dụng là: - Polyacrylamide gel không biến tính dùng để phân tách và tinh sạch các đoạn DNA sợi đôi. - Polyacrylamide gel biến tính bằng urea và formamide (sequencing gel) dùng để phân tách và tinh sạch các đoạn DNA sợi đơn. Phần này chỉ giới thiệu polyacrylamide gel không biến tính là loại gel hay được sử dụng nhất. Hiệu quả của sự phân tách DNA trong loại gel này phụ thuộc vào nồng độ của acrylamide (Bảng 2.3), kích thước và điện tích của DNA. Bảng 2.3. Hiệu quả của sự phân tách DNA trong polyacrylamide gel không biến tính
- 1.1. Chuẩn bị polyacrylamide gel không biến tính Kích thước phổ biến của tấm kính đổ gel thường là 20 cm´40 cm. Miếng đệm dày khoảng 0,5 mm-2,0 mm. Các gel dày hơn thường nóng lên trong quá trình điện di nên sẽ làm nhòe các băng DNA, vì thế người ta thường sử dụng các gel mỏng. Tuy nhiên, khi khi chạy một lượng lớn DNA (>1 mg/băng) thì cần chuẩn bị gel dày. Dưới đây mô tả các bước chuẩn bị và sử dụng polyacrylamide gel không biến tính: 1.1.1. Chuẩn bị các dung dịch sau: - 30% acrylamide (bao gồm bis-acrylamide) - 1× TBE - 10% ammonium persulphate 1.1.2. Lau sạch hai tấm kính dùng làm khuôn gel và miếng đệm bằng KOH/methanol hoặc ethanol. Xử lý bề mặt của hai tấm kính bằng dung dịch silicon để ngăn gel dính chặt vào hai tấm kính gây rách gel lúc lấy nó ra khỏi khuôn sau khi điện di xong. 1.1.3. Tính toán thể tích của các dung dịch dùng để tạo polyacrylamide gel trên cơ sở kích thước tấm kính, độ dày của miếng đệm (xem bảng 2.4). 1.1.4. Bổ sung 35 mL TEMED vào mỗi 100 mL dung dịch tạo polyacrylamide gel, trộn hỗn hợp bằng cách vortex. Rót dung dịch tạo gel vào giữa hai tấm kính. Gắn nhanh lược vào, tránh bọt khí ở răng lược (giếng). Đỉnh của răng lược phải hơi cao hơn mép gel. Nếu cần, bổ sung thêm một ít dung dịch tạo gel để làm đầy mép gel. Bảng 2.4. Dung tích của các chất dùng cho polyacrylamide gel 1.1.5. Cho phép acrylamide polymer hóa trong khoảng 60 phút ở nhiệt độ phòng, bổ sung thêm dung dịch tạo gel nếu thấy gel co vào nhiều. 1.1.6. Sau khi polymer hóa hoàn toàn, rút lược cẩn thận, tháo băng dính ra khỏi đáy khuôn gel. Gắn khuôn gel vào buồng điện di và làm đầy buồng điện di bằng đệm 1× TBE, dùng Pasteur pipette để phá các bọt khí ra khỏi đáy gel và các giếng bằng đệm 1× TBE.
- 1.1.7. Trộn các mẫu DNA với một lượng thích hợp của đệm 6× gel-loading dye. Đặt mẫu vào trong giếng bằng micropipette hoặc Hamilton syringe. 1.8. Nối buồng điện di với bộ nguồn. Polyacrylamide gel không biến tính thường chạy điện di trong khoảng 1 V/cm đến 8 V/cm. Chạy gel cho đến khi thuốc nhuộm chỉ thị dịch chuyển đến vị trí mong muốn. Tắt nguồn, lấy khuôn gel ra và đặt lên bàn. Tháo tấm kính nhỏ ở mặt trước ra, tấm kính lớn ở phía sau được dùng làm giá đỡ, và chuẩn bị nhuộm gel. 1.2. Phát hiện DNA trong polyacrylamide gel 1.2.1. Nhuộm bằng ethidium bromide Polyacrylamide có thể làm mất huỳnh quang của EtBr, do đó không thể phát hiện các băng DNA bằng phương pháp này nếu hàm lượng của nó thấp hơn 10 ng. Ngâm nhẹ gel cùng với tấm kính đỡ vào trong dung dịch nhuộm (0,5 mg/mL EtBr trong 1× TBE). Cho vừa đủ dung dịch nhuộm phủ hoàn toàn lên bề mặt gel. Sau khi nhuộm 30-45 phút ở nhiệt độ phòng, lấy gel và tấm kính đỡ ra, cẩn thận thấm khô bề mặt gel bằng giấy thấm Kimwipe. Phủ lên bề mặt gel bằng giấy nylon (Saran wrap), tránh tạo ra bọt khí hoặc nếp gấp của Saran wrap. Sau đó lật ngược gel và đặt nó trên máy soi tử ngoại ultraviolet transilluminator (Gel Documentation System), lấy tấm kính đỡ ra để tiến hành chụp ảnh. 1.2.2. Nhuộm bằng thuốc nhuộm bạc Thuốc nhuộm bạc được sử dụng từ những năm 1980, cho phép phát hiện một lượng protein rất nhỏ ở dạng vết trong polyacrylamide gel. Sau đó, loại thuốc nhuộm này được hoàn thiện và mở rộng phạm vi ứng dụng cho các phân tử nucleic acid. Hai phương pháp nhuộm bạc thường được sử dụng là: 1) Dùng các dung dịch diamine silver hoặc ammonical silver cho thấm vào gel và pha loãng các dung dịch acid của formaldehyde để phát triển hình ảnh. 2) Thấm dung dịch silver nitrate vào gel trong môi trường acid yếu và dùng formaldehyde khử có chọn lọc các ion bạc thành bạc kim loại dưới điều kiện kiềm. Nhìn chung, phương pháp diamine kiềm kém nhạy hơn nhưng thích hợp đối với các gel dày, trong khi phương pháp acid nhanh và bắt màu tốt hơn đối với các gel mỏng. Thuốc nhuộm bạc được sử dụng hiệu quả để phát hiện một lượng nhỏ (picogram, pg) nucleic acid. Giới hạn phát hiện DNA sợi đôi khi quan sát bằng mắt thường là vào khoảng 1 pg/mm2 mặt cắt ngang của băng DNA, nhạy gấp 1.000-10.000 lần phương pháp nhuộm bằng EtBr. Mức độ phát hiện này có thể so sánh với phương pháp đánh dấu đồng vị phóng xạ hoặc huỳnh quang. Quá trình nhuộm bao gồm các bước sau: - Cố định nucleic acid trong acetic acid 7,5% tối thiểu 5 phút để ngăn cản sự khuếch tán của các phân tử nucleic acid đã được phân tách trong gel, loại bỏ và trung hòa các hóa chất không mong muốn (urea và đệm). - Rửa gel trong nước khử ion tối thiểu 2 phút để loại bỏ acetic acid, các chất bẩn dạng vết và phần thừa của các thành phần gel hòa tan sau khi cố định. - Nhuộm gel trong dung dịch bạc với sự có mặt của formaldehyde để cải thiện độ nhạy và độ tương phản. Thời gian nhuộm tối ưu khoảng 20 phút. Tuy nhiên, đối với loại gel có tấm đỡ polyester (8×10 cm) thì chỉ cần 10 phút là đủ để có chất lượng hình ảnh cao mà không làm giảm độ nhạy. - Rửa gel sau khi nhuộm bạc để loại bỏ thuốc nhuộm thừa có thể gây ra kết tủa màu nâu trong quá trình phát triển màu. Thông thường, có thể dùng dung dịch phát triển màu để rửa gel. - Phát triển màu của gel bằng hỗn hợp dung dịch sodium carbonate (4 g/L), sodium thiosulfate (4 mM) và formaldehyde (khoảng 0,028-0,111%) để giảm các background không đặc hiệu một cách hiệu
- quả. Nhiệt độ rửa thích hợp từ 8-10oC, thời gian rửa thay đổi tùy thuộc vào thành phần của dung dịch phát triển màu trong khoảng từ vài giây đến vài phút. - Dừng phản ứng phát triển màu khi thu được hình ảnh tối ưu càng nhanh càng tốt bằng cách dùng acetic acid lạnh (4oC) 7,5%. 1.2.3. Phóng xạ tự ghi + Không cố định, làm ẩm gel Nếu muốn thu hồi băng DNA có hoạt tính phóng xạ từ gel thì gel phải được cố định hoặc làm khô. Nếu chỉ muốn quan sát kết quả điện di thì có thể tiến hành nhanh như sau: - Gói bản gel cùng với tấm kính đỡ trong giấy nylon Saran wrap. Tránh tạo bọt khí hoặc nếp gấp của Saran wrap. Đánh dấu bằng mực phóng xạ lên bề mặt Saran wrap. - Lật ngược gel và ủ với phim X-quang (tiến hành trong phòng tối) ở -70oC trong khoảng thời gian thích hợp. + Cố định, làm khô gel Các polyacrylamide gel chứa DNA có hoạt tính phóng xạ có thể được cố định và làm khô trước khi phóng xạ tự ghi. - Ngâm gel cùng với tấm kính đỡ trong acetic acid 7% trong 5 phút. Lấy gel khỏi thuốc hãm màu một cách cẩn thận bằng cách cầm nhẹ tấm kính ra khỏi chất lỏng. - Rửa nhanh gel trong nước khử ion. Dùng giấy thấm Kimwipe để thấm khô bề mặt gel (không dùng giấy thấm thường). Bọc gel và tấm kính đỡ trong Saran wrap, thiết kế phóng xạ tự ghi như trên. Một cách khác là làm khô gel trên giấy Whatman 3MM bằng cách dùng máy làm khô gel (sấy ở 80oC trong điều kiện chân không từ 1-2 giờ). Làm khô gel cần thiết chỉ khi gel chứa DNA được đánh dấu đồng vị phát xạ b yếu như 35S hoặc một lượng nhỏ 32P (cần phải ủ phim 24 giờ hoặc lâu hơn) (Hình 2.8). 1.3. Phân lập các đoạn DNA từ polyacrylamide gel Phương pháp tốt nhất để phân lập DNA từ polyacrylamide gel là kỹ thuật “ép và ngâm” (crush and soak) của Maxam và Gilbert (1977). DNA thu được có độ tinh sạch cao và không chứa các chất nhiễm bẩn ức chế enzyme. Mặc dù phương pháp này phải tiến hành qua nhiều bước và không hiệu quả (ít hơn 30% sản lượng các đoạn DNA >3 kb), nhưng nó có thể được dùng để phân lập cả hai loại DNA sợi đôi và sợi đơn từ các polyacrylamide gel không biến tính và biến tính, tương ứng. Phương thức sau đây được cải tiến từ kỹ thuật của Maxam và Gilbert (1977): - Chạy điện di polyacrylamide gel. Xác định vị trí của DNA quan tâm bằng phóng xạ tự ghi hoặc bằng EtBr quan sát dưới ánh sáng UV. - Dùng dao cắt mảnh gel chứa băng DNA quan tâm. Không loại bỏ Saran wrap khỏi gel trước khi cắt, cắt cả gel lẫn Saran wrap, sau đó bóc mảnh gel nhỏ có chứa DNA quan tâm ra khỏi Saran wrap. - Chuyển mảnh gel vào trong E-tube (eppendorf tube), dùng tip của micropipette để ép mảnh gel theo thành của tube. - Tính toán thể tích thích hợp của mảnh gel và bổ sung 1-2 thể tích của đệm chiết (0,5 M ammonium acetate, 10 mM magnesium acetate, 1 mM EDTA pH 8 và 0,1% SDS) vào E-tube. - Đóng tube và ủ ở 37oC kèm theo lắc vòng nhẹ. Đoạn DNA nhỏ (
- - Ly tâm 12.000 g trong 1 phút ở 4oC. Chuyển thể nổi vào E-tube sạch. - Bổ sung thêm 0,5 thể tích đệm chiết vào E-tube cũ có mảnh polyacrylamide gel, vortex nhanh và ly tâm. Trộn hai thể nổi lại với nhau. - Bổ sung hai thể tích ethanol ở 4oC, bảo quản dung dịch trên đá tuyết 30 phút. Thu hồi DNA bằng cách ly tâm 12.000 g trong 10 phút ở 4oC. - Hòa tan trở lại DNA trong 200 mL đệm TE (pH 7,6) và bổ sung 25 mL của 3 M sodium acetate (pH 5,2) và kết tủa DNA với hai thể tích ethanol như bước trên. - Rửa cẩn thận tiểu thể với ethanol 70% và hòa tan trở lại DNA trong đệm TE (pH 7,6) tới thể tích cuối cùng là 10 mL. - Kiểm tra số lượng và chất lượng của đoạn DNA bằng điện di polyacrylamide gel. Lấy một thể tích nhỏ tối thiểu (được ước lượng khoảng 50 ng DNA) trộn với 10 mL TE (pH 7,6), bổ sung thêm 2 mL gel-loading dye. Nạp mẫu và chạy điện di polyacrylamide gel ở nồng độ thích hợp bằng cách dùng các DNA marker chuẩn đã biết số lượng. Các đoạn DNA phân lập sẽ cùng dịch chuyển với DNA marker trong quá trình điện di. 2. Điện di protein 2.1. Điện di SDS-PAGE 2.1.1. Phương thức Điện di trên polyacrylamide gel với sự có mặt của SDS (sodium dodecyl sulfate) là kỹ thuật dùng trong hóa sinh, di truyền và sinh học phân tử để phân tách các protein theo tính linh động điện di của chúng (phụ thuộc vào chiều dài của chuỗi polypeptide hoặc khối lượng phân tử, cấu hình (xoắn) của protein, các biến đổi hậu dịch mã và các nhân tố khác). Điện SDS cho phép phân ly các phân tử protein có khối lượng khác nhau. SDS có điện tích âm rất lớn và có khả năng liên kết với mạch peptide để biến tính các cấu trúc bậc hai và bậc ba (không liên kết bằng cầu disulfide) của protein bằng cách bọc xung quanh khung polypeptide. Như vậy, số lượng SDS tương tác với protein tỷ lệ với khối lượng/kích thước phân tử protein và điện tích của SDS bám vào có thể làm bất cứ phân tử protein nào cũng chuyển động trong điện trường từ cực âm (-) sang cực dương (+). Do
- đó, bằng phương pháp điện di, có thể phân tách riêng biệt các phân tử protein có khối lượng phân tử khác nhau. Không có SDS, các protein khác nhau có khối lượng phân tử tương tự sẽ dịch chuyển khác nhau do sự khác nhau về cuộn xoắn, bởi vì những khác nhau trong các kiểu cuộn xoắn sẽ làm cho một vài phân tử protein thích hợp tốt hơn với khuôn gel so với những phân tử protein khác. Bổ sung SDS giúp giải quyết vấn đề này, vì nó làm cho các phân tử protein trở thành mạch thẳng sao cho chúng có thể phân tách hoàn toàn theo khối lượng phân tử (cấu trúc sơ cấp, hoặc số lượng (và kích thước) của các amino acid). SDS liên kết với protein theo tỷ lệ khoảng 1,4 g SDS trên 1,0 g protein (mặc dù tỷ lệ liên kết có thể thay đổi từ 1,1-2,2 g/SDS/g protein) tạo ra một tỷ lệ khối lượng/điện tích thống nhất cho mọi phân tử protein để sự dịch chuyển qua gel chỉ liên quan đến kích thước của protein. Một loại thuốc nhuộm vết có thể được bổ sung vào dung dịch protein cho phép theo dõi tiến độ của dịch chuyển protein qua gel trong suốt quá trình điện di. Hình 2.9. Điện di protein bằng kỹ thuật SDS-PAGE và nhuộm bằng Coomassie blue. WM: Chuẩn khối lượng phân tử của protein. Các đường 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 và 8: Mẫu protein. 2.1.2. Khử SDS-PAGE Bên cạnh việc bổ sung SDS, protein có thể được đun nóng nhanh gần đến sôi với sự có mặt của một tác nhân khử, ví dụ như dithiothreitol (DTT) hoặc 2-mercaptoethanol (BME), để biến tính thêm protein bằng cách khử các liên kết disulfide, vì thế khắc phục được một vài dạng cuộn xoắn bậc ba của protein, và bẻ gãy cấu trúc bậc bốn của protein (các tiểu đơn vị oligomer). Phương thức này được xem như là khử SDS-PAGE, và được sử dụng phổ biến nhất. Trường hợp không khử SDS-PAGE (không đun sôi và không có tác nhân khử) có thể được dùng khi cấu trúc nguyên thể là quan trọng trong phân tích về sau (chẳng hạn như hoạt tính enzyme, được trình bày bằng việc sử dụng zymogram). Điện di polyacrylamide gel liên tục nguyên thể pha chế định lượng (quantitative preparative native continuous polyacrylamide gel electrophoresis, QPNC-PAGE) là một phương pháp mới để phân tách các metalloprotein nguyên thể trong các khuôn sinh học phức tạp. 2.1.3. Điện di và nhuộm Các protein biến tính sau đó được nạp vào một đầu của khuôn polyacrylamide gel đặt trong đệm thích hợp. Dòng điện được sử dụng từ đầu này đến đầu kia của gel, sẽ làm cho các protein tích điện âm dịch chuyển qua gel. Tùy thuộc vào kích thước của chúng, mỗi protein sẽ dịch chuyển với các tốc độ khác nhau qua khuôn gel: protein ngắn dễ dàng đi qua các lỗ của gel, trong khi protein lớn hơn sẽ gặp khó khăn hơn. Sau một vài giờ (tùy thuộc điện áp sử dụng trên gel, nếu điện áp cao protein chạy nhanh hơn nhưng sẽ cho độ phân giải kém hơn), các protein sẽ có sự dịch chuyển khác nhau dựa trên kích thước của chúng, các protein nhỏ hơn sẽ đi nhanh hơn xuống phía dưới của gel, trong khi các phân tử lớn vẫn còn ở vị trí
- gần với điểm xuất phát. Vì thế, protein có thể được phân tách theo kích thước (và vì thế, theo khối lượng phân tử). Sau điện di, gel được nhuộm (phổ biến nhất là Coomassie Brilliant Blue hoặc thuốc nhuộm bạc), cho phép quan sát các protein được phân tách, hoặc những tiến trình xa hơn (ví dụ: Western blot, xem chương 7). Sau khi nhuộm, các protein khác nhau sẽ xuất hiện ở các băng phân biệt trong gel. Quá trình điện di thường được chạy kèm với protein marker của các khối lượng phân tử đã biết ở một đường riêng biệt trong gel, để canh chỉnh gel và xác định khối lượng của protein chưa biết bằng cách so sánh với khoảng cách dịch chuyển liên quan với marker. Điện di polyacrylamide gel thường là chọn lựa đầu tiên khi thử nghiệm sự tinh sạch protein do tính đáng tin cậy và dễ dàng của nó. Sự có mặt của SDS và bước gây biến tính làm cho các protein được phân tách đơn độc dựa trên kích thước. Các tác nhân bẩn cũng có thể cùng dịch chuyển và xuất hiện một băng không mong muốn tương tự protein. Sự đồng dịch chuyển này cũng có thể làm cho một protein sẽ chạy ở một vị trí khác hoặc không thể xâm nhập vào gel. Đây là điều quan trọng để nhuộm gel hoàn toàn bao gồm phần stacking. Coomassie blue có ái lực liên kết yếu với glycoprotein và các protein dạng sợi, đã làm cản trở chất lượng điện di. 2.1.4. Hệ thống đệm Hầu hết điện di phân tách protein được thực hiện với một hệ thống đệm không liên tục tăng cường một cách ý nghĩa hình dạng của băng trong gel. Trong suốt quá trình điện di ở hệ thống gel không liên tục, một gradient ion được tạo thành trong giai đoạn sớm của điện di làm cho tất cả protein tập trung trong một băng dạng đơn. Nhiều người sử dụng liên tục đệm Tris-glycine hoặc Laemmli tập trung và phân giải ở pH 8,3-9,0. Các pH này khởi động sự tạo thành cầu nối disulfide giữa các gốc cysteine trong protein, đặc biệt khi chúng hiện diện ở nồng độ cao do pKa của cysteine nằm trong phạm vi từ 8-9 và bởi vì tác nhân khử hiện diện trong đệm nạp (loading buffer) không đồng dịch chuyển với các protein. Những tiến bộ gần đây trong công nghệ đệm đã làm nhẹ bớt vấn đề này bằng cách hòa tan protein ở pH tốt dưới pKa của cysteine (ví dụ: bis-Tris, pH 6,5) và bao gồm các tác nhân khử (ví dụ: sodium bisulfite) là yếu tố di chuyển vào gel phía trước các protein để duy trì một môi trường khử. Một lợi ích nữa của đệm được sử dụng với các pH thấp là acrylamide gel ổn định hơn vì thế gel có thể được bảo quản trong một thời gian dài trước khi sử dụng. 2.2. Điện di 2D-PAGE Ngoài điện di SDS, có thể điện di các protein tùy theo điểm đẳng điện (isoelectric point, IEP) của chúng. Phương pháp này được gọi là điện di tập trung đẳng điện (isoelectric focusing, IEF). Trong dung dịch đệm có pH biến thiên liên tục (gradient pH), các protein sẽ phân ly đến vị trí tương thích với điểm đẳng điện của mình. Một hỗn hợp protein phức tạp được nạp vào ở giữa của mặt trái, ở đó pH là trung tính và một điện áp được sử dụng trên khuôn gel. Các protein sau đó dịch chuyển thông qua gel cho đến khi chúng hướng tới điểm đẳng điện của mình, là điểm mà ở đó điện tích của chúng tương tự như pH ở vùng chung quanh. Gel sau đó được ngâm trong dung dịch biến tính (để làm cho các protein không cuộn xoắn) chứa chất tẩy là SDS. Phân tử này tích điện âm rất mạnh và liên kết với tất cả protein, làm cho tất cả chúng đều mang điện âm. Một điện áp sau đó được sử dụng trên khuôn gel từ đầu này đến đầu kia để tất cả protein sẽ chuyển động hướng tới anode, nhưng những protein nhỏ hơn sẽ chuyển động qua gel nhanh hơn, vì thế các protein được phân tách theo kích thước của chúng. Kỹ thuật điện di 2 chiều (2D-PAGE, 2 dimension polyacryamide gel electrophoesis) được dùng để phân tách hỗn hợp protein, và đặc biệt hữu ích cho việc so sánh các mẫu liên quan như mẫu mô bình thường và mẫu mô đột biến. Comparative 2D-PAGE cũng có thể được dùng để tìm kiếm các protein mà sự biểu hiện của chúng rất tương đồng dưới cùng một tập hợp các điều kiện (những yếu tố này có các
- chức năng liên quan) và nhận dạng các protein được sản xuất trong phản ứng với liệu pháp thuốc. Hình 2.10. Điện di protein hai chiều Có khoảng 10.000 protein khác nhau trong tế bào, tập trung trong hơn sáu loại quan trọng. Kỹ thuật 2D-PAGE không đủ nhạy để phát hiện các protein hiếm và nhiều protein sẽ không được phân giải. Vì thế, cần phải phân cắt mẫu trong các phần khác nhau để làm giảm sự phức tạp của hỗn hợp protein trước khi thực hiện 2D-PAGE. Hai phương pháp điện di theo khối lượng phân tử và điểm đẳng điện có thể kết hợp với nhau tạo nên kỹ thuật điện di 2 chiều. Điện di protein trên polyacrylamide gel cho phép phân đoạn, xác định khối lượng phân tử và phân lập protein. Ngoài ra, khối lượng protein còn được xác định chính xác bằng phương pháp sắc ký khối phổ. Tài liệu tham khảo/đọc thêm 1. Ausubel FM, Brent R, Kingston RE, Moore DD, Seidman JG, Smith JA and Struhl K. 2002. Short Protocol in Molecular Biology. Vol 1 and 2. 5th ed. John Wiley & Sons, Inc. USA. 2. Maniatis T, Fritsch EF and Sambrook J. 2000. Molecular Cloning-A Laboratory Manual. Cold Spring Habor Laboratory Press, USA. 3. Rapley R and Walker JM. 1998. Molecular Biomethods Handbook. Humana Press Inc. New Jersey, USA. 4. Rickwood D and Hames BD. 1984. Gel Electrophoresis of Nucleic Acids. IRL Press Ltd. Oxford, UK. 5. Surzycki S. 2000. Basic Techniques in Molecular Biology. Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, Germany. 6. Westermeier R. 2005. Electrophoresis in Practice. 4th ed. Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KgaA. Weinheim, Germany. 1 Agar: một galactan phức hợp tách chiết từ một số loài tảo đỏ như Gelidium và Gracilaria spp., được sử dụng rộng rãi ở dạng gel làm giá thể rắn hoặc bán rắn cho môi trường nuôi cấy vi sinh vật và thực vật.
CÓ THỂ BẠN MUỐN DOWNLOAD
-
Đề tài: Kĩ thuật điện di
8 p |
352 |
154
-
Điện di phân tích ADN và ARN
7 p |
263 |
118
-
Phương pháp điện di DNA
6 p |
349 |
71
-
Bài giảng Tin sinh học: Chương 2 - ThS. Nguyễn Thành Luân
30 p |
137 |
59
-
Bài giảng Vi sinh vật học: Chương 2 - ThS. Nguyễn Thành Luân
24 p |
143 |
59
-
Cách thức phân tích hình ảnh điện di 2 chiều
5 p |
185 |
58
-
Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2
25 p |
89 |
45
-
Bài giảng Công nghệ sinh học môi trường - Chương 2: Xử lý nước thải sinh học bằng công nghệ sinh học
68 p |
71 |
27
-
Bài giảng Công nghệ Sinh học: Chương 2
99 p |
64 |
23
-
Bài giảng Công nghệ protein – enzyme: Chương 2
44 p |
46 |
17
-
Bài giảng Chương 2: Máu và bạch huyết - Dr Võ Văn Toàn
22 p |
81 |
13
-
Bài giảng lý sinh: Chương 2
66 p |
43 |
11
-
Bài giảng Các phương pháp điện di và chuyển lên màng lai trong phân tích - Trần Nhật Phương
62 p |
36 |
10
-
Xây dựng câu hỏi trắc nghiệm khách quan nhiều lựa chọn (MCQ) để dạy chương cơ chế di truyền và biến dị sinh học 12 (Cơ bản) theo hướng đổi mới - Phan Thị Thu Hiền
10 p |
31 |
9
-
Bài giảng Chương 2 - Công nghệ sinh học trong tạo nguồn nguyên liệu cho công nghệ thực phẩm
73 p |
19 |
6
-
Bài giảng sinh học đại cương Công nghệ hóa dầu và công nghệ hóa hữu cơ: Chương 2
44 p |
34 |
6
-
Bài giảng Di truyền và chọn giống thủy sản - Chương 2: Di truyền các tính trạng chất lượng
30 p |
18 |
2

Set-Cookie: TLDEVNamespace=l6s217t517st20ri1hk7jfe9f7; path=/; domain=.tailieu.vn; HttpOnly


markdown:
### Bài hát
[Karik](http://tainhac.us/tim-kiem?q=karik&b=singer), [Thái Trinh](http://tainhac.us/tim-kiem?q=thai+trinh&b=singer)2,700,047 [Thái Trinh](http://tainhac.us/tim-kiem?q=thai+trinh&b=singer)548,888 [Thái Trinh](http://tainhac.us/tim-kiem?q=thai+trinh&b=singer)110,241 [Thái Trinh](http://tainhac.us/tim-kiem?q=thai+trinh&b=singer)179,290
### Album
170,790 lượt nghe 3 lượt thích
2,056 lượt nghe 0 lượt thích
402,736 lượt nghe 106 lượt thích
69,052 lượt nghe 34 lượt thích
7,527 lượt nghe 1 lượt thích
### Video
[Tia Hải Châu](http://tainhac.us/tim-kiem?q=tia+hai+chau&b=singer), [Thảo My](http://tainhac.us/tim-kiem?q=thao+my&b=singer), [Bảo Quân](http://tainhac.us/tim-kiem?q=bao+quan&b=singer), [Thái Trinh](http://tainhac.us/tim-kiem?q=thai+trinh&b=singer), [Đức Phúc](http://tainhac.us/tim-kiem?q=duc+phuc&b=singer)8,087 [Thái Trinh](http://tainhac.us/tim-kiem?q=thai+trinh&b=singer)54,740

X-Turbo-Charged-By: LiteSpeed

Set-Cookie: __cfduid=df548da23f93326c3e46dc8bc0b770de41487538104; expires=Mon, 19-Feb-18 21:01:44 GMT; path=/; domain=.tainhac.us; HttpOnly

Cache-Control: no-cache

Accept-Ranges: bytes


markdown:
![ Ảnh minh họa. Nguồn: internet.](http://static.tapchitaichinh.vn/660x450/Uploaded/vuminh/2017_02_03/economy-performs_XIZV.jpg)
**Chú trọng năng suất lao động** **Phóng viên: Thưa ông, trong vài năm gần đây, chúng ta thực hiện mục tiêu chuyển đổi mô hình tăng trưởng kinh tế từ bề rộng sang chiều sâu. Theo ông, chiều sâu đó đã đạt được ở mức độ nào?**
**Ông Vũ Đình Ánh:**Để phát triển kinh tế theo chiều sâu, trong những năm gần đây, chúng ta đã tăng hiệu quả sử dụng vốn đầu tư, đồng thời tìm ra yếu tố mới thay việc tăng trưởng kinh tế chủ yếu nhờ vào vốn đầu tư. Đơn cử như tổng vốn đầu tư toàn xã hội năm 2016 vừa qua là 33% GDP trong khi chúng ta vẫn đạt được tốc độ tăng trưởng kinh tế trên 6%.
*Thứ hai* là, việc chúng ta tăng năng suất lao động toàn xã hội. Quy mô GDP tăng cộng với việc sử dụng nhiều hơn các yếu tố về máy móc thiết bị, công nghệ và khoa học, thu nhập bình quân đầu người của Việt Nam tăng. Thông qua đó năng suất lao động toàn xã hội của mọi người Việt Nam cũng tăng. Mặc dù so với các nước trong khu vực vẫn ở mức thấp, tuy nhiên đã có sự tăng trưởng đáng kể trong thời gian vừa qua. *Thứ ba,* ba trụ cột về tái cơ cấu nền kinh tế, liên quan đến tái cơ cấu đầu tư công, tái cơ cấu doanh nghiệp nhà nước và tái cơ cấu các tổ chức tín dụng, ngân hàng thương mại. Đây chính là 3 hướng hay 3 công cụ, biện pháp mà để có thể thực hiện tăng trưởng theo chiều sâu. *Năng suất thấp luôn là nỗi ám ảnh, rào cản phát triển đối với rất nhiều ngành, lĩnh vực, các doanh nghiệp… Trong đó, điểm đáng chú ý là quy mô nền kinh tế còn nhỏ đồng nghĩa với năng suất thấp. Ông có suy nghĩ gì về vấn đề này?*
Ở đây chúng ta nói khá nhiều đến vấn đề năng suất lao động toàn xã hội. Tại sao năng suất lao động và năng suất lao động toàn xã hội vẫn đang ở mức thấp? Theo tôi, do quy mô nền kinh tế chúng ta mới chỉ hơn 200 tỷ USD, với lực lượng lao động trên 50 triệu người. Rõ ràng nếu tính năng suất lao động toàn xã hội thì chúng ta còn ở mức thấp so với các nước. Đây cũng là lý do mà rất nhiều người cảnh báo về bẫy thu nhập trung bình, nếu không tìm cách nâng cao năng suất lao động thông qua mở rộng quy mô nền kinh tế.
Tuy nhiên, đây là quy mô năng suất lao động toàn xã hội, còn về năng suất lao động của mỗi người, cụ thể trong nền kinh tế Việt Nam thì lại liên quan đến các yếu tố của bản thân họ.
*Thứ nhất* là trình độ đào tạo, trong thời gian khá dài chúng ta vẫn chủ yếu dựa trên lao động giá rẻ với mức độ, trình độ đào tạo còn khá hạn chế. *Thứ hai,* mặc dù đã có nhiều tiến bộ nhưng kỷ luật của một bộ phận người lao động vẫn còn hạn chế. Điều này sẽ khiến cho năng suất lao động chúng ta khó thể tăng cao. *Trong những năm gần đây, trong khi chúng ta đã và đang nỗ lực để có bước chuyển về chất lượng tăng trưởng, thì có ý kiến cho rằng sức cạnh tranh của nền kinh tế đang bị bào mòn. Ý kiến của ông về nhận định này như thế nào?*
Nhận định, đánh giá về sức cạnh tranh hay năng lực cạnh tranh thì cần có cái nhìn toàn diện cũng như nhiều yếu tố minh chứng thuyết phục. Riêng cá nhân tôi cho rằng, năng lực hay sức cạnh tranh của Việt Nam hiện đang tăng lên và có khá nhiều điều kiện, tiền đề để có thể tiếp tục nâng cao sức cạnh tranh đó. Bắt đầu từ năm 2016, chúng ta nhấn mạnh vai trò của Chính phủ kiến tạo, hành động, liêm chính, đó là những nội dung trụ cột để nâng cao năng lực cạnh tranh quốc gia.
Gắn với năng lực cạnh tranh quốc gia ấy, có khá nhiều tiêu chí để đánh giá, trong đó có các tiêu chí về cơ sở hạ tầng, các tiêu chí về mặt thể chế để giúp thúc đẩy sản xuất kinh doanh cũng như tăng trưởng kinh tế trong nước, kèm theo đó là sự ổn định về chính trị, kinh tế vĩ mô về xã hội, đó là những ưu thế không thể phủ nhận của kinh tế Việt Nam. Và nhờ những ổn định đó, trong thời gian vừa qua, chúng ta đã có những điều kiện tốt để ổn định kinh tế vĩ mô, thông qua đó nâng cao năng lực cạnh tranh quốc gia của cả nền kinh tế.
**Chú trọng nâng cao năng suất các yếu tố tổng hợp** *Năng suất các yếu tố tổng hợp (TFP) là khái niệm được nhắc tới khá nhiều trong thời gian vừa qua. Ông đánh giá như thế nào về khía cạnh này trong nền kinh tế của nước ta? và đâu là giải pháp để cải thiện trong thời gian tới?*
Hiện nay, năng suất được đơn giản hóa thành ba yếu tố: Thứ nhất là vốn, thứ hai là lao động, thứ ba là năng suất yếu tố tổng hợp bao gồm tất cả những yếu tố tác động đến năng suất mà không phải yếu tố vốn và yếu tố lao động. Đây là vấn đề then chốt liên quan đến tăng trưởng theo chiều sâu như chúng ta đã bàn từ đầu đến giờ.
Đối với yếu tố về TFP hiện nay có rất nhiều cách tính toán khác nhau, nên kết quả mang lại cũng khác nhau. Do đó, mặc dù là chỉ số rất quan trọng, nhưng đến nay chưa có cách tính toán chính xác để có thể xác định được TFP của nền kinh tế, đặc biệt là nền kinh tế đang phát triển như Việt Nam, TFP hiện chỉ là chỉ số để tham khảo và để chuyển dịch vấn đề tăng trưởng theo chiều sâu.
*Trước những khó khăn của năm 2017, theo ông, các nhà điều hành kinh tế, doanh nghiệp cần lưu tâm vấn đề gì để thực sự phát huy được nội lực, trụ vững và phát triển?*
Dự báo năm 2017 còn rất nhiều thách thức đối với nền kinh tế Việt Nam kể cả tầm kinh tế vĩ mô và vi mô của các doanh nghiệp. Thách thức lớn nhất trong năm 2017 là tính bất định của các yếu tố trên thị trường quốc tế. Khi mà năm 2016 với sự kiện như Brexit hay bầu cử Tổng thống Mỹ, tình hình chính trị diễn ra tại rất nhiều nước trên thế giới trong năm 2016 sẽ gây ra tính bất định lớn về kinh tế tài chính năm 2017, qua đó tác động đến kinh tế Việt Nam, kể cả toàn bộ nền kinh tế và đối với mỗi doanh nghiệp Việt Nam.
Chúng ta phải chú tâm theo dõi sát yếu tố bất định, diễn biến trên tình hình kinh tế thế giới trong năm 2017, cần chuẩn bị sẵn sàng các kế hoạch, cũng như đối sách phù hợp để không bị bất ngờ trước biến động, đồng thời tranh thủ được điều kiện thuận lợi và vượt qua thách thức.
*Xin cảm ơn ông!*
## Bình luậnÝ kiến của bạn sẽ được biên tập trước khi đăng. Xin vui lòng gõ tiếng Việt có dấu

Cache-Control: public, max-age=300

Set-Cookie: .ASPXANONYMOUS=ZlJ74orB0gEkAAAAYTE0ZWJlY2YtZWY0ZS00ZjkxLWFhOGQtOTZmNzRkNGZhZDRm0; domain=tapchitaichinh.vn; expires=Sun, 30-Apr-2017 08:22:19 GMT; path=/; HttpOnly


markdown:
# Giày - Dép - Balo - Phụ Kiện Giầy ECCO chính hãng
Xem trong '
[Làng Thời Trang, Mỹ Phẩm](forum/lang-thoi-trang-my-pham.154/)' đăng bởi [biulee525](members/biulee525.2427/), [23/1/16](threads/giay-ecco-chinh-hang.35831/), [ Mã Tin: 35831 ]
**[180 lượt xem - 0 bình luận]**
Xem trong '
[Làng Thời Trang, Mỹ Phẩm](forum/lang-thoi-trang-my-pham.154/)' đăng bởi [biulee525](members/biulee525.2427/), [23/1/16](threads/giay-ecco-chinh-hang.35831/), [ Mã Tin: 35831 ]
**[180 lượt xem - 0 bình luận]**


markdown:
Có
**6** truyện của tác giả **"Sài Kê Đản"**
|Tên Truyện||Tác Giả||Số Chương|
|
|![]()
|
|
Nghịch Tập
Ngôn Tình
288 Chương
5650 lượt đọc
Thế Bất Khả Đáng
Ngôn Tình
223 Chương
5360 lượt đọc
Yêu Phải Tình Địch
Ngôn Tình
289 Chương
9188 lượt đọc
Phong Mang
Ngôn Tình
240 Chương
4358 lượt đọc
Thượng Ẩn
Ngôn Tình
208 Chương
71658 lượt đọc
Thượng Ẩn 2
Ngôn Tình
134 Chương
60958 lượt đọc
Hot Tuần Hot Tháng Siêu Hot
|
|![]()
|
|
Người Tình Nhỏ Bên Cạnh Tổng Giám Đốc
1340 Chương
11838186 lượt đọc
Tổng giám Đốc Hàng Tỷ: Cướp Lại Vợ Trước Đã Sinh Con
732 Chương
4112976 lượt đọc
MẸ 17 TUỔI : CON TRAI THIÊN TÀI CHA PHÚC HẮC
1727 Chương
3526128 lượt đọc
Sa vào trêu ghẹo vợ yêu : tổng giám đốc vô cùng cưng chiều
667 Chương
3502222 lượt đọc
Ông xã thần bí không thấy mặt full
375 Chương
3404970 lượt đọc
|
|![]()
|
|
Người Tình Nhỏ Bên Cạnh Tổng Giám Đốc
1340 Chương
11838186 lượt đọc
Bảo Bối Của Tổng Giám Đốc
643 Chương
8745705 lượt đọc
Tổng giám Đốc Hàng Tỷ: Cướp Lại Vợ Trước Đã Sinh Con
732 Chương
4112976 lượt đọc
NÓI YÊU EM 99 LẦN full
1044 Chương
4087998 lượt đọc
MẸ 17 TUỔI : CON TRAI THIÊN TÀI CHA PHÚC HẮC
1727 Chương
3526128 lượt đọc
|
|![]()
|
|
Hôn Trộm 55 Lần
983 Chương
20056580 lượt đọc
Người Tình Nhỏ Bên Cạnh Tổng Giám Đốc
1340 Chương
11838186 lượt đọc
Bảo Bối Của Tổng Giám Đốc
643 Chương
8745705 lượt đọc
Bà Xã Anh Chỉ Thương Em
533 Chương
6137902 lượt đọc
Tổng giám Đốc Hàng Tỷ: Cướp Lại Vợ Trước Đã Sinh Con
732 Chương
4112976 lượt đọc
Truyện Đề Cử
|
|![]()
|
|
ĐOẠT HÔN 101 LẦN full
517 Chương
2044265 lượt đọc
Tổng giám đốc đoạt tình - giành lại vợ yêu full
206 Chương
394458 lượt đọc
Thiếu phu nhân vô lại full
153 Chương
138041 lượt đọc
Tình nhân bí mật của thiếu tướng: Bảo bối, đừng chạy Full
391 Chương
1161877 lượt đọc
Hôn sai 55 lần Full
423 Chương
1103023 lượt đọc