markdown:
**ĐẶT VẤN ĐỀ**
Toàn bộ ADN của tế bào, bao gồm tất cả gen và những vùng liên gen được gọi là bộ gen. Bộ gen người chứa khoảng 80.000 gen, nhưng những vùng mã hóa của gen này chiếm khoảng 3% của toàn bộ gen. Bộ gen của nấm chứa khoảng 6.000 gen. Bộ gen của một vài thực vật có nhiều trình tự lặp lại. Bộ gen của prokaryote rất nhỏ được chứa trong nhiễm sắc thể có dạng vòng, prokaryote cũng có thể có những gen nằm trong plasmid. Bộ gen của prokaryote không có intron và những trình tự lặp lại.
Hiểu được những thông tin chứa trong trình tự bộ gen là những thách thức lớn trong giai đoạn đầu của thế kỷ 21. Muốn nghiên cứu về bộ gen, kỹ thuật tinh chiết DNA là một trong những kĩ thuật sinh học phân tử đầu tiên vô cùng quan trọng góp phần cho sự thành công trong những bước tiếp theo.
Hiện nay có rất nhiều phương pháp đơn giản hơn, thời gian làm việc rút ngắn hơn tùy theo mục đích sử dụng DNA để làm gì, hoặc chiết xuất DNA từ loại mô nào, trên đối tượng gì.
Ở đây ta nghiên cứu việc ly trích DNA trên 3 nhóm đối tượng chính là thực vật, động vật và vi khuẩn với các đại điện của chúng là lá bưởi, tôm,
*E.Coli* *.*
## NỘI DUNG
## 1.KIẾN THỨC CƠ SỞ
## 1.1/Chiết xuất và tinh sạch DNA
**1.2.1/Nguyên tắc chung chiết xuất DNA**
|Chuẩn bị mẫu|
|Phá vở tế bào|
|Hòa tan DNA|
|Loại bỏ tạp chất ( protein, polysaccharide…)|
|Tủa DNA|
|Rửa DNA|
|Làm khô|
|Kiểm tra chất lượng DNA|**1. Chuẩn bị mẫu:** **- **Đối với thực vật thường thu lấy mẫu lá, động vật thu lấy mô trên cơ thể, vi khuẩn: nuôi vi khuẩn trong môi trường nuôi cấy từ 15-16 giờ để tăng sinh., thường nuôi trong 16 giờ cho kết quả tốt nhất. **2. Phá vỡ tế bào:** **- **Dùng phương pháp ly tâm để phá vỡ màng tế bào và phóng thích ADN trong nhân. Riêng mẫu lá thực vật, do còn có lớp vỏ cellulose bên ngoài, nên phải được nghiền trong nitơ lỏng, giúp làm cho vách cellulose trở nên giòn hơn, dễ vỡ hơn, đồng thời bảo vệ ADN phóng thích từ nhân không bị tiêu hủy bởi các protease trong tế bào. Ngoài ra, màng tế bào và màng nhân còn được phá vở bằng hỗn hợp chất tẩy (SDS – sodium dodecyl sulfate, sarcosyl) và proteinase. Các DNA sẽ được giải phóng ra môi trường. Các protein liên kết với DNA cũng tự bị phân hủy. **3. Hòa tan ADN: **
- Hòa tan DNA trong dung dịch đệm buffer TE (pH 8) giúp ADN không bị biến tính.
**4. Loại bỏ các thành phần không phải là ADN:**
- Proteinase K: loại bỏ thành phần protein.
- CTAB: loại bỏ polysaccharide và lipid.
- Chloroform: phân tách và kéo các thành phần không phải là DNA xuống mặt dưới dung dịch.
**5. Tủa ADN:**
- Sử dụng ethanol 96% hoặc isoproanol ủ ở – 20
0C để tủa DNA trong dung dịch. Mục đích là thu nhận nucleic acid dưới dạng cô đặc và bảo vệ chúng khỏi sự phân hủy của các enzyme. **6. Rửa DNA:**
- DNA được rửa lại bằng ethanol 70% để loại bỏ các muối và các dấu vết isopropanol.
**7. Làm khô:**
- DNA sau khi rửa được làm khô bằng cách phơi ở nhiệt độ phòng qua đêm hay sấy khô. Mục đích tránh mẫu DNA còn chứa ethanol sẽ ảnh hưởng đến DNA tổng số.
**8. ** **Kiểm tra chất lượng DNA:**
Đo quang phổ
Chạy điện di
### 1.2.2/Kiểm tra chất lượng DNA
Kiểm tra chất lượng DNA là bước cần thiết trong quy trình chiết xuất DNA.
Thí dụ:Số lượng và chất lượng DNA có thể ảnh hưởng đến kết quả của PCR vì một lượng DNA dư thừa có thể ức chế sự khuếch đại những đoạn DNA mong muốn.
Biết được nồng độ DNA sẽ dễ dàng tính toán được số lượng cần dùng của các loại enzyme cắt giới hạn để cắt DNA. Thông thường 1 unit enzyme cắt được 1 µg của DNA tinh khiết.
**1.2.2.** **1** **/Đo quang phổ** **Nguyên tắc**:
Nguyên tắc của phương pháp này là dựa vào sự hấp thụ mạnh ánh sáng của một chất ở một bước sóng xác định. Nucleic acid hấp thụ mạnh ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 260 nm do sự có mặt của base purine và pyrimidine. Giá trị mật độ quang ở bước sóng 260nm (OD
260nm) của các mẫu cho phép xác định nồng độ nucleic acid trong mẫu.
Đơn vị OD
260nm tương ứng nồng độ 50ng/ml cho một dung dịch ADN sợi đôi.
Do đó nồng độ ADN trong mẫu được tính theo công thức sau:
**C ADN (ng/** **ml) = OD** 260nm* 50 * Độ pha loãng
Để kiểm tra độ sạch của dung dịch, người ta đo thêm giá trị OD ở 280 nm (OD
280nm). Ở bước sóng này, các protein có mức hấp thụ cao nhất. Ngoài ra, các protein cũng hấp thụ ánh sáng ở bước sóng 260 nm như các nucleic acid và do đó làm sai lệch giá trị thật của nồng độ nucleic acid. Một dung dịch nucleic acid được xem là sạch (không tạp nhiễm protein) khi tỷ số: **OD 260nm/OD280nm nằm trong khoảng 1.8 – 2** ** Các bước đo OD:**
Chuẩn bị mẫu DNA đo OD: Hoà 10ml dịch ADN cần đo vào 90ml nước khử ion vô trùng
Đo đối chứng: Lấy 100ml nước khử ion vô trùng vào cuvet, đo ở bước sóng 260nm, 280nm.
Đo mẫu: Lấy 100ml mẫu DNA đã chuẩn bị ở trên vào cuvet, đo ở bước sóng 260nm, 280nm.
Đọc độ hấp thụ trên máy đo quang phổ ở bước sóng 260 nm, 280 nm. Xử lý số liệu theo công thức:
|Nồng độ DNA sẽ là: OD 260 * 50 ng/µl * độ pha loãng|**1.2.2.3/Điện di Gel Agarose** **Nguyên tắc**
Điện di gel agarose là phương pháp thông dụng, thích hợp dùng để tách rời các đoạn acide nucleic có kích thước từ 200bp đến 50kp.
Agarose là chất chiết xuất từ 1 loài rong biển, agarose có cấu trúc polymer thẳng, hiện nay người ta đã chế tạo được nhiều loại agarose đặc biệt để phân tích DNA, RNA như agarose tan ở nhiệt độ thấp như: low meeting agarose, metaphore agarose
Gel agarose được đổ bằng cách đun agarose trong dung dịch đệm thích hợp cho đến khi có màu trắng trong và cho đặc lại bằng cách đổ vào khuôn và để nguội. Khi đặc lại agarose tạo nên mạng lưới mà kích thước của nó phụ thuộc nồng độ agarose và dung dịch đệm.
Khi nằm trong gel có pH >7 DNA sẽ tích điện âm, dưới tác dụng của điện trường thì DNA sẽ chạy về phía anode. Vận tốc di chuyển của DNA phụ thuộc vào các thông số sau:
- Kích thước DNA: kích thước càng lớn thì DNA di chuyển càng chậm và ngược lại.
- Nồng độ agarose: tùy kích thước DNA muốn phân tích mà ta chọn nồng độ agarose thích hợp. Kích thước DNA càng nhỏ thì nồng độ agarose phải càng lớn.
- Kiến trúc DNA: với cùng kích thước, tùy kiến trúc: siêu xoắn, vòng hay thẳng mà tốc độ di chuyển của DNA khác nhau. Tốc dộ di chuyển cũng phụ thuộc vào dung dich đệm và lượng ethidium bromide. Ở đây chúng ta không nghiên cứu kỹ về vấn đề này.
- Cường độ dòng điện: Độ phân ly của gel agarose giảm khi cường độ dòng điện tăng cao. Cường độ điện trường không được lớn hơn 5V/cm (tính từ khoảng cách 2 điện cực)
- Thành phần base và nhiệt độ: trong trường hợp nồng độ agarose thấp hơn 0.5% thì phải điện di ở 4
0C nếu không thành phần các base sẽ ảnh hưởng đến sự chuyển động của các DNA
- Ethidium bromide: ethidium bromide ảnh hưởng đến 15% tốc độ di chuyển của các của các đoạn DNA thẳng
- Dung dịch đệm điện di: dung dịch đệm ảnh hưởng đến DNA trong gel. Trường hợp nồng độ dung dịch đệm quá cao gel sẽ bị chảy và DNA bị biến tính.
**Các bước thực hiện** **Bước 1**: Đổ gel:
Dùng băng keo dán chặt hai đầu của khay điện di, đặt lược sẳn ở 1 đầu khay. Đặt khay ở nơi bằng phẳng, dùng miếng bọt khí để kiểm tra.
Cân 0.4g agarose cho vào bình tam giác 250ml, thêm 50 ml nước cất. Lắc nhẹ cho agarose hòa lẫn trong nước.
Đặt bình tam giác vào lò vi song đun khoảng 3-5 phút. Dung dich trong bình tam giác trở thành màu trắng trong.
Lấy bình tam giác ra, đợi 15 phút rờ thấy vừa nóng (60
oC) thì đổ nhẹ dung dịch vào khay điện di. Khoảng 45 phút thì agarose đặc lại, gel đổi thành màu trắng đục. **Bước 2**: Chạy gel.
Đặt khay vào bể điện di, lấy nhẹ lược ra, không làm động đến gel.
Thêm dung dich đệm điện di phủ mặt gel khoảng 1mm.
Dùng pipette P100 hút 10ul loading buffer chia thành 4 giọt trên paraffin
Dùng pipette P100 hút 10ul mẫu, trộn với 1 giọt loading buffer sau đó load vào giếng. Giếng đầu tiên có thể chạy DNA chuẩn.
Khởi động nguồn điện, chọn voltage thích hợp. Nhấn nút Run.
DNA sẽ chạy từ cực âm sang cực dương. Do DNA mang điện tích âm (các gốc phosphate mang điện tích âm đưa ra ngoài)
Sau khi DNA chạy được hơn 2/3 mẫu gel thì nhấn nút stop. Lấy khay điện di ra.
Nhuộm gel với Ethidium Bromide.
Xem gel dưới đèn UV.
In kết quả.
## 1.2.3/Chuẩn bị các dung dịch , môi trường và dụng cụ
### 1.2.3.1/Các bước chuẩn bị dung dịch,môi trường
- Chuẩn bị dung dịch stock.
- Pha chế môi trường.
- Khử trùng
- Khử trùng nhiệt khô.
- Khử trùng nhiệt ướt.
- Khử trùng môi trường.
- Khử trùng vật dụng.
Chú ý khi khử trùng
- Ø Không bao giờ khử trùng micropipette.
- Không bao giờ khử trùng giấy thấm bằng nhiệt khô.
- Những chất kháng sinh không được khử trùng bằng autoclave.
- Những vật dụng bằng thủy tinh, nhựa phải được rửa sạch.
### Vật thủy tinh, nhựa
Vật dụng thủy tinh, nhựa rất thường được sử dụng trong phòng thì nghiệm sinh học phân tử. Các vật dụng này trước khi sử dụng phải được rửa cẩn thận. Những vật dụng không được rửa sạch, còn dính vi khuẩn có thể ức chế các phản ứng hoặc phân giải của DNA
Vật dụng thủy tinh phải được rửa sạch bằng xà phòng, tráng lại bằng nước cất và được khử trùng bằng nồi khử trùng nhiệt ướt hoặc nhiệt khô.
Đối với những thí nghiệm với RNA, vật dụng thủy tinh và các dung dịch phải được xử lý với diethylpyrocarbonate để ức chế RNase enzymes.
Đa số các vật dụng bằng nhựa như ống hút (pipette), Ống nuôi cấy (falcon), đĩa petri được cung cấp dưới dạng đã khử trùng rồi.
Các vật dụng khác như đầu cone, ống tube dùng cho máy ly tâm phải được khử trùng trước khi sử dụng.
## 1.2.4/Các hóa chất trong quá trình chiết xuất DNA
### 1.2.4.1/Ethidium Bromide (EtBr)
Ethidium Bromide là chất có khả năng gây đột biến, nếu chạm phải hoặc tẩy rửa không đúng cách sẽ có nguy cơ bị nhiễm Ethidium Bromide.
**Ethidium Bromide & the process of interlacation, illustrating the lengthening and untwisting of the DNA helix** ( [http://www.madsci.org](http://www.madsci.org))
**Ethidium Bromide** ( [http://en.wikipedia.org/wiki/Ethidium_bromide](http://en.wikipedia.org/wiki/Ethidium_bromide))
Đây là chất dùng trong phòng thí nghiệm Sinh học Phân tử, chủ yếu dùng để nhuộm, (đánh dấu) DNA/RNA khi chạy điện di. Hiện nay có các cách dùng như sau:
Bổ sung trực tiếp Ethidium Bromide vào dung dịch đệm chạy điện di (buffer chạy gel). Với cách này, lượng Ethidium Bromide cần phải thu hồi khi loại thải buffer chạy gel là rất lớn. Đây là cách ít được dùng nhất.
Ethidium Bromide được bổ sung vào dung dịch đệm load mẫu, vì chỉ có một lượng rất nhỏ dung dịch load mẫu được sử dụng mỗi khi chạy điện di nên lượng Ethidium Bromide sử dụng cũng sẽ rất ít. Nhưng sự bất lợi ở đây là lượng Ethidium Bromide cần lấy mỗi lần load mẫu là quá it, khó có thể lấy chính xác bằng micropipette.
Ethidium Bromide được bổ sung vào gel, lúc gel còn chưa đặc sau đó lắc trộn đều, với cách này DNA (load mẫu) vẫn được nhuộm tốt. Trong quá trình chạy điện di, khoảng 10% Ethidium Bromide trong gel sẽ khuếch tán ra ngoài buffer chạy gel. Trong trường hợp này, phần lớn Ethidium Bromide sẽ được loại bỏ dưới dạng rắn (dính trong gel). Nồng độ thích hợp thường là 5µg/ml gel solution.
Một vài quy trình chạy điện di thì thực hiện nhuộm DNA sau khi chạy điện di. Bằng cách này buffer chạy gel không bị nhiễm Ethidium Bromide và có thể loại bỏ trực tiếp không qua xử lý. Gel sau khi chạy điện di xong sẽ được ủ trong dung dich pha sẳn có chứa Ethidium Bromide và có thể tái sử dụng dung dịch này, tuy nhiên sau mỗi lần sử dụng phải bổ sung thêm cho đúng thể tích. Phương pháp này có thể không được ưa thích lắm đối với một số nhà nghiên cứu.
**Các yêu cầu đối với chất thải Ethidium Bromide:** **Gel chạy điện di chứa Ethidium Bromide:**
Tất cả những gel, chất rắn chứa Ethidium Bromide cần phải được thu nhặt và loại bỏ khỏi môi trường làm việc như là các chất thải độc hại.
Phải đóng gói riêng biệt
**Dung dịch chứa Ethidium Bromide:**
Những dung dịch đệm có nồng độ cao hơn 10µg/ml cần phải được lọc, khử, thiêu hủy Ethidium Bromide hoặc lưu trữ lại như là các chất thải hóa học nguy hiểm.
Khi dung dịch có nồng độ thấp hơn 10µg/ml có thể được loại thải qua cống rãnh.
**Dụng cụ thao tác đối với các đối tượng có chứa Ethidium Bromide:**
Những dụng cụ thí nghiệm liên quan đến Ethidium Bromide cần để ở những nơi riêng biệt và làm dấu rõ ràng.
**Các phương pháp xử lý EtBr hiện nay trên thế giới đang sử dụng** **:**
- ·
**Dùng kit lọc có bán sẵn để loại bỏ EtBr trong nước thải**.
Tác nhân lọc chủ yếu là than hoạt tính, nước thải sau khi lọc có thể đổ ra cống rãnh.
Những bộ kit lọc bán sẵn được cung cấp từ BIO 101, trong đó chủ yếu là than hoạt tính đựng dưới dạng túi trà, mỗi túi có thể hấp thụ 10mg EtBr, một bộ kit 50 túi nên có thể hấp thụ 500mg EtBr khỏi dung dịch. Túi than sau khi xử lý cần loại bỏ như là chất thải hóa học độc hại.
- ·
**Loại bỏ dung dịch có nồng độ thấp (chưa đến 100** **m** **g/ml)**. **Cách 1 (Lunn và Sanrone 1987):**
+ Thêm 2,9g Amberlite – XAD – 16 cho mỗi 100ml dung dịch xử lý.
+ Trữ dung dịch trong 12h ở nhiệt độ phòng thỉnh thoảng lắc đều.
+ Lọc dung dịch qua giấy lọc Whatman No.1. Đổ bỏ dịch lọc xuống cống.
+ Bỏ giấy lọc và Amberlite vào túi nhựa, buộc kín, loại bỏ.
**Cách 2 (Bensaude 1988).**
+ Thêm 300mg bột than hoạt tính cho mỗi 100ml dung dịch cần xử lý.
+ Để hỗn hợp ở nhiệt độ phòng, thỉnh thoảng lắc đều.
+ Lọc hỗp hợp qua giấy lọc Whatman No.1. Đổ bỏ dịch lọc xuống cống.
+ Bỏ giấy lọc và Amberlite vào túi nhựa, buộc kín, loại bỏ.
- ·
**Xử lý đối với những dung dịch có nồng độ đậm đặc (>= 0,5** **m** **g/ml) (Lunn và** **Sansone 1987).**
-
**Bước 1:** Thêm đủ nước để hạ nồng độ EtBr xuống đến 0,5mg/ml, hoặc thấp hơn (thực hiện trong tủ hút).
-
**Bước 2:** Bổ sung 20ml hypophosphorous acid 5% và 12ml 0,5mol Sodium nitrite, trộn cẩn thận. ( Hypophosphorous thường được lấy ra ở nồng độ 50% sau đó pha loãng 10 lần để được 5% ngay trước khi sử dụng).
-
**Bước 3:** Chuẩn bị sodium nitrite: Cân 3,45g sodium nitrite, sau đó hòa tan vào nước, đưa về thể tích 100ml (thực hiện trong tủ hút).
-
**Bước 4:** Sau khi ủ 24h ở nhiệt độ phòng, đưa pH về trong khoảng 5-9 bằng sodium bicarbonat. Sau đó đổ bỏ dịch xuống cống. ***** Không sử dụng hypochloride để xử lí EtBr. Vì xử lí với thuốc tẩy có thể tạo sản phẩm gây đột biến mạnh hơn và lượng EtBr còn thừa lại sau khi xử lý là 20%. **Khử nhiễm bề mặt do EtBr.**
- Lau chất lỏng rơi ra bằng giấy thấm. Bỏ rác vào túi nilon, làm dấu buộc kín và để nơi an toàn. Những vật dụng có nhiễm EtBr cần để riêng biệt và đánh dấu để phân biệt.
### 1.2.4.2/Cetyl Trimethylammonium Bromide (CTAB)
CTAB có khả năng liên kết thuận nghịch với ADN và polysaccharide, cụ thể ở nồng độ muối cao (trên 1.4 M NaCl có trong đệm chiết) thì CTAB kết hợp với ADN và polysaccharide nhưng phức hợp CTAB-ADN tồn tại ở trạng thái hòa tan, trong khi đó phức CTAB-polysaccharide lại kết tủa, phức này sẽ được loại đi ở bước ly tâm đầu tiên. Ở nồng độ muối dưới 0.7M thì phức CTAB-ADN lại kết tủa, cho phép thu hồi lại ADN ở bước tủa cồn. Ở nồng độ muối thấp phức CTAB-ADN sẽ tách nhau ra. Phức này sẽ tách ra gần như hoàn toàn trong bước rửa bằng cồn 70
0 **CTAB buffer:**
0.2M Tris-Cl pH7.5
2M NaCl
0.05M EDTA
2% (w/v) CTAB
### 1.2.4.3/TE buffer
Là một loại buffer thường sử dụng trong Sinh Học Phân Tử, TE buffer giúp bất hoạt enzyme nuclease góp phần bảo vệ DNA trong mẫu. Thành phần bao gồm:
10 mM Tris-Cl, pH 8
1 mM EDTA
Những nghiên cứu về enzyme nuclease từ những năm 1980 đã chỉ ra rằng enzyme này ít hoạt động nhất ở vùng pH 7,5 đối với RNA và pH 8 đối với DNA.
EDTA làm bất hoạt enzyme nuclease bằng cách lấy đi những ion kim loại cần thiết cho enzyme này.
### 1.2.4.4/Sodium Dodecyl Sulfate (SDS)
Có tác dụng giúp phá vỡ màng tế bào, giúp cho quá trình ly trích DNA được thuận lợi hơn.
### 1.2.4.5/Extraction Buffer (EB)
Thành phần bao gồm:
0.1M Tris-Cl
0.5M NaCl
0.05M EDTA
0.01M betamercaptho ethanol
Có tác dụng làm biến tính protein (cắt các cầu nối disulfite), đồng thời bảo vệ DNA trong mẫu không bị biến tính.
### 1.2.4.6/Proteinase K (endopeptidase K)
Trong quá trình ly trích DNA sẽ có sự hiện diện của rất nhiều protein, làm cho mẫu DNA không sạch, các protein đó cần phài được loại bỏ proteinase K được sử dụng để loại bỏ các protein này, góp phần làm sạch mẫu DNA. Ngoài ra proteinase K còn góp phần phân giải enzyme nuclease giúp cho DNA ít bị biến tính hơn. Proteinase K thường được duy trì trong sự hiện diện của SDS, EDTA và urea.
Tế bào vi khuẩn được hòa tan trong SDS và Proteinase K.
**1.2.4.7/Isopropanol**
Dùng để tủa DNA với tỷ lệ 1:1 với dung dịch cần tủa
**1.2.4.8/Hỗn hợp Chloroform:Isoamylalcohol (24:1)**
Dùng để loại bỏ protein, những polycaccharide và phức hợp. Sau khi li tâm với vận tốc 13000rpm trong 5 phút dung dịch chia ra thành 3 lớp: lớp thứ nhất là phần dịch trong ở trên cùng có chứa DNA, lớp thứ hai là một lớp protein, lớp kế tiếp có chứa chloroform và tất cả những thành phần cần loại bỏ khác (polysaccharides, protein,…).
**1.2.4.9/Ethanol 96% và 70%**
Ethanol 96% dùng để tủa DNA và bảo vệ chúng khỏi sự phân hủy của các enzyme. Chúng kết hợp với muối để tránh gây hại cho DNA.
Ethanol 70% dùng để rửa tủa, loại muối ra khỏi DNA
**2.PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP** **2.1/Trích DNA từ vi khuẩn gam âm** **2.1.1/Phương tiện**
- Micropipette
- Ống tube 1.5 và 2.2 ml
- Máy lắc ủ
- TE pH8
- Proteinase K
- Isopropanol
- Cloroform/Isoamylalchohol (24:1)
- SDS
- 10% CTAB/0.7M NaCl
**2.1.2/Phương pháp** **Chuẩn bị mẫu:**
Nuôi vi khuẩn
*E.Coli* trong 6ml môi trường LB (Luria Broth) nuôi qua đêm, ủ ở 37 0C **Trích DNA:** **Bước 1: Ly tâm thu sinh khối vi khuẩn:** Cho vào 3 túp (2,2ml) mỗi túp 2ml dung dịch vi khuẩn *E.coli* đã được nuôi cấy qua đêm. Sau đó, li tâm ở 13000rpm trong 10 phút. Li tâm xong loại bỏ phần trong lấy phần tủa phía dưới. **Bước 2: hòa tan DNA:** Bơm 250ml TE pH 8 vào túp thứ nhất để hòa tan kết tủa ở túp thứ nhất, sau đó chuyển phần dung dịch ở túp thứ nhất sang túp thứ hai, túp thứ hai sang túp thứ ba, hòa tan DNA ở túp thứ ba. **Bước 3: chiết xuất DNA:** Sau đó, cho thêm vào túp 50ml dung dịch 10% SDS cộng 5ml proteinase K lắc đều, ủ 20 phút ở nhiệt độ 65 oC, mỗi 5 phút đảo ngược túp một lần để trộn đều dung dịch, có tác dụng phá vỡ màng tế bào và màng nhân, chiết xuất và tinh sạch DNA. **Bước 4: tạo phức với CTAB**: Sau khi hòa tan hết tủa ta cho thêm vào túp 400ml CTAB và ủ ở 65 oC trong 20 phút, khoảng 5 phút đảo ngược ống túp để trộn đều. **Bước 5: loại bỏ protein và các phức hợp:** Tiếp tục thêm 600ml chloroform:isoamylalcohol (24/1), lắc đều và li tâm ở 13000 vòng trong 10 phút để loại bỏ protein, những polysaccharide và các phức hợp trên. **Bước 6: tủa DNA**: Li tâm xong, chuyển 500ml phần trong ở phía trên vào túp mới và thêm 1ml isopropanol lắc đều, giữ ở – 20 oC trong 30 phút nhằm mục đích tủa DNA, không cho DNA biến tính, thu được DNA nhiều hơn và bảo vệ chúng khỏi sự phân hủy của các enzyme. Tiến hành li tâm ở 13000 vòng trong 10 phút để tập trung lượng DNA kết tủa xuống đáy túp. **Bước 7: loại bỏ phần dịch trong**: Sau khi li tâm, ta loại bỏ phần dịch trong ở phía trên và thu phần kết tủa ở phía dưới. **Bước 8: rửa tủa**: Rửa tủa với 1ml ethanol 70% ly tâm ở 13000rpm trong 5 phút, làm 2 lần để loại bỏ muối bám trong DNA và loại bỏ lượng isopropanol còn lại trong DNA (mỗi lần đổ bỏ ethanol). **Bước 9: phơi khô DNA:** Rửa DNA xong, ta tiến hành phơi DNA qua đêm ở nhiệt độ phòng cho sạch hết ethanol tránh ảnh hưởng đến DNA tổng số.
Sau đó, hòa tan DNA bằng 30ml nước cất, lắc đều cho DNA tan ra và tiến hành đo OD
**2.2/Trích DNA từ tôm** **2.2.1/Phương tiện**
- Cơ tôm hay biểu bì dưới da đầu tôm
- Dung dịch trích Lysis buffer
- TE buffer 0.1X
- Máy ly tâm
- Micropipette
- Ống tube 1.5 và 2.2 ml
- Kéo, kẹp, đủa thủy tinh
**2.2.2/Phương pháp** **Chuẩn bị mẫu:**
Tôm đem bốc bỏ vỏ ở phần lưng tôm, dùng kéo cắt khoảng 100mg thịt tôm cho vào túp 2,2ml. Sau đó, dùng đũa thủy tinh nghiền mẫu thành bột mịn.
**Trích DNA:** **Bước 1: phá vở màng tế bào:** Mẫu sau khi nghiền mịn cho thêm vào túp 400ml dung dịch trích buffer D giúp phá vở màng tế bào, lắc đều và ủ qua đêm ở nhiệt độ 50 oC **Bước 2: tách protein và các thành phần hữu cơ ra khỏi DNA:** Sau khi ủ xong, ta cho thêm vào túp 400ml dung dịch chloroform:isoamylalcohol (24:1) để tách protein và các thành phần hữu cơ khác (polysaccharides, polyphenols, lipids,…), lắc nhẹ rồi đem ly tâm với vận tốc 13000 vòng/phút trong thời gian 10 phút. **Bước 3: tủa DNA**: Ta tiến hành hút 300ml phần dịch trong ở phía trên cho qua một túp 2,2ml mới, sau đó thêm vào túp này 150ml 7,5M ammonium acetate và 600ml ethanol 96% có tác dụng giúp DNA kết tủa. Lắc nhẹ và tiến hành li tâm với vận tốc 13000 vòng/phút trong 5 phút. **Bước 4: rửa DNA:** Sau khi li tâm xong, ta loại bỏ phần dịch trong ở trên lấy phần cặn ở phía dưới. Rửa phần cặn với 600ml ethanol 70% 2 lần để loại bỏ muối ra khỏi DNA. Ly tâm 13000 vòng/phút trong 5 phút sau mỗi lần rửa. Đổ bỏ ethanol sau mỗi lần rửa. **Bước 5: sấy khô DNA**: Sấy khô bằng máy ly tâm chân không ở nhiệt độ 45 oC trong 15 phút, tránh trường hợp mẫu DNA còn chứa ethanol sẽ ảnh hưởng đến DNA tổng số. **Bước 6: hòa tan DNA**: Sau khi sấy mẫu xong, hút 30ml nước cất cho vào túp chứa DNA để hòa tan DNA.
Sau đó hút 10ml dung dịch này cho vào túp 1,5ml mới đã hút sẳn 90ml nước cất, lắc đều. Sau đó đem mẫu đo OD.
**2.3/Trích DNA từ thực vật** **2.3.1/Phương tiện**
- Lá bưởi Diễn
- Bộ điện di minisub gel.
- Kéo cắt mẫu, chày và cối nghiền mẫu
- Micropipette
- Ống tube 1.5 và 2.2 ml
- Extraction buffer (EB)
- CTAB buffer
- Agarose
- Isopropanol
- Cloroform/Isoamylalchohol (24:1)
- SDS
- Nitơ lỏng
**2.3.2/Phương pháp** **Chuẩn bị mẫu:**
Mẫu lá bưởi được khử trùng bằng cồn 70
o (dùng bông gòn thấm cồn và lau đều trên cả hai bề mặt lá), dùng kéo cắt lấy phần thịt lá ở hai bên và bỏ phần gân lá ở giữa. Phần thịt lá được gói trong giấy nhôm và ngâm nitơ lỏng trong thời gian 15 phút. Sau đó, nghiền kỉ mẫu bằng cối và chày đã được khử trùng bằng cách ngâm nitơ lỏng. Trong quá trình nghiền ta thêm nitơ lỏng vào nhằm mục đích ức chế các enzym gây biến tính DNA của lá, mẫu được nghiền cho đến khi thành bột mịn. **Trích DNA** **:** **Bước 1: phá vở màng tế bào và màng nhân:** Chuyển phần bột mịn vào túp 2,2ml. Tiếp tục cho 50ml dung dịch SDS 10% vào túp có tác dụng giúp DNA dễ hòa tan hơn, sau đó lắc nhẹ túp (tránh DNA bị gãy). **Bước 2: ủ mẫu**: Mẫu sau khi thêm các dung dịch đem ủ ở nhiệt độ 65 oC trong 30 phút, trong quá trình ủ khoảng 5 phút đảo nhẹ túp để trộn mẫu. **Bước 3: li tâm:** Sau thời gian ủ, mẫu được đem li tâm với vận tốc 13000rpm trong 10 phút, để tách các thành phần khác nhau của tế bào. **Bước 4: tủa DNA**: Li tâm xong ta hút 800ml phần dung dịch trong ở phía trên cho vào túp mới, sau đó cho 800ml dung dịch isopropanol vào túp và tiến hành ủ trong thời gian khoảng 30 phút ở -20 oC để kết tủa DNA, không cho DNA biến tính, giúp tăng khả năng thu DNA. Ở điều kiện này nhiều protein và các chất khác cũng bị kết tủa cùng ADN nên trong mẫu sẽ bị lẫn tạp. Sau đó, tiến hành li tâm với vận tốc 13000rpm trong 10 phút. **Bước 5: hòa tan tủa**: Li tâm xong, phần dịch trong được bỏ vào một cái hộp mũ có chứa nước và thu phần kết tủa. Hòa tan tủa DNA trong 400ml TE, TE giữ DNA ổn định, không bị biến tính. **Bước 6: tạo phức với CTAB**: Sau khi tủa hòa tan hết ta cho thêm vào túp 400ml CTAB và ủ ở 65 oC trong 15 phút, khoảng 5 phút đảo ngược ống túp để trộn đều **Bước 7: loại bỏ protein và các phức hợp:** Sau đó cho thêm vào túp 800ml Chloroform/Isoamylalcohol lắc đều và li tâm với vận tốc 13000rpm trong 5 phút để loại bỏ protein, những polycaccharide và phức hợp trên **Bước 8: tủa DNA:** Sau khi ly tâm ta tiến hành hút 650ml phần dịch trong ở phía trên cho qua một túp 2,2ml mới, thêm vào túp này 1.4ml Ethanol 96% ủ ở nhiệt độ phòng trong vòng 15 phút để tủa DNA và bảo vệ chúng khỏi sự phân hủy của các enzyme. Sau đó, li tâm ở 13000rpm trong 10 phút. **Bước 9: rửa DNA**: Li tâm xong đổ bỏ phần dịch trong ở phía trên vào hộp mũ có chứa nước, thu lấy phần kết tủa ở phía dưới. Sau đó, tiến hành rửa kết tủa với ethanol 70% để loại bỏ muối ra khỏi DNA. Phần kết tủa được rửa 2 lần với ethanol 70% (không gây hại cho DNA do ở nồng độ thấp). Mỗi lần rửa cho 400ml ethanol 70% vào túp, lắc nhẹ và đem li tâm trong 5 phút với vận tốc 13000rpm, sau đó loại bỏ ethanol. **Bước 10: sấy khô DNA**: Sấy khô bằng máy ly tâm chân không ở nhiệt độ 45 oC trong 15 phút, tránh trường hợp mẫu DNA còn chứa ethanol sẽ ảnh hưởng đến DNA tổng số. **Bước 11: hòa tan DNA:** DNA sau khi sấy khô được hòa tan với 100ml TE 0.1. Dung dịch DNA được dùng để chạy điện di. **3.KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG MẪU** **3.1/Đo OD đối với mẫu vi khuẩn và tôm**
Lấy 100ml nước khử ion vô trùng vào cuvet 100ml, đo đối chứng.
Hoà 10ml dịch ADN cần đo vào 90ml nớc khử ion vô trùng, bơm vào cuvet, đo ở bước sóng 260nm, 280nm
Đọc độ hấp thụ trên máy đo quang phổ ở bước sóng 260 nm, 280 nm. Xử lý số liệu
**3.2Điện di đối với mẫu lá**
Khay điện di được đặt lược sẳn ở một đầu khay. Sử dụng lược có số răng là 17. Khay được đặt ở nơi bằng phẳng.
Gel sử dụng chạy điện di lá: 40ml với nồng độ 1% agrarose.
Trước tiên cân 0,4g agrarose cho vào chai thủy tinh, sau đó cho vào chai 50ml Bufer TE, trừ hao trong quá trình nấu bốc hơi hết 10ml. Lắc chai cho agrarose hòa tan vào Buffer TE, sau đó đem nấu trong microwave trong 2 phút ở 450W (nấu cho agrarose hòa tan hoàn toàn và trong như nuớc), agrarose sau khi nấu xong để nguội khoảng 60
oC rồi đổ nhẹ dung dịch vào một đầu khay dung dịch sẽ tự trải đều khay. Khoảng 45 phút sau gel đặc lại, ta dùng tay lấy lược ra nhưng phải cẩn thận tránh bị bể gel.
Đặt khay vào bể điện di, thêm dung dịch điện di phủ mặt gel khoảng 2mm.
Sau khi gel chuẩn bị xong, ta tiến hành load mẫu vào các giếng của gel
**+ Load mẫu:**
Đầu tiên hút dung dịch loading buffer (một dung dịch tải DNA chứa 30% glycerol, 0,25% bromophenol blue (BPB) và 0,25% xylencyanol (XC), trong thành phần có chứa glycerol có tỷ trọng cao sẽ kéo DNA nằm trong giếng không bị trôi ra ngoài trong khi load mẫu) và nhỏ thành từng giọt nhỏ khoảng 2ml ra giấy paraflim, sau đó hút 10ml dung dịch mẫu trộn điều với dung dịch loading buffer và tiến hành load mẫu vào giếng của gel. Bắt đầu load từ giếng thứ 2, giếng thứ nhất dùng để load thang chuẩn.
Sau khi load xong ta đậy nấp bể điện di lại và tiến hành chạy điện di. Thời gian điện di thay đổi phụ thuộc vào độ lớn của DNA, nồng độ agarose của gel và cường độ dòng điện. Sau khi chạy điện di xong bản gel được lấy nhẹ ra khỏi khuôn gel và ngâm vào dung dịch EtBr trong thời gian 30 phút có tác dụng đánh dấu phân tử DNA, hóa chất này có khả năng gắn xen vào giữa các base của nucleic acid và sẽ phát huỳnh quang dưới tác dụng của tia tử ngoại. Sau đó rửa sạch bản gel bằng nước cất.
Quan sát và chụp hình: Bản gel được quan sát dưới ánh sáng tử ngoại λ = 260-360 nm trên bộ đọc gel bio-rad. Quan sát thấy ADN hiện lên dưới dạng các vạch sáng.
** 4** **.KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN** **4.1/Kết quả**
Kết quả đo OD các mẫu DNA.
|
|
|
|OD260 |
|OD260/OD280 |
|Nồng độ DNA (ng/µl)
|
|Tôm |2.5825||1.9888||1291.25|
|
|E.Coli |1.4437||2.0032||721.85|
### Kết quả chụp gel điện di mẫu lá
##
Vạch số 5 là vạch được đề cập trong báo cáo này ![Biorad_2010-07-14_14hr_52min ](http://duybiotech.files.wordpress.com/2010/07/biorad_2010-07-14_14hr_52min.jpg?w=440)
![Biorad_2010-07-14_14hr_52min ](http://duybiotech.files.wordpress.com/2010/07/biorad_2010-07-14_14hr_52min.jpg?w=440)
## 4.2/Thảo luận
**4.2.1/Mẫu tôm**
Kết quả OD260/OD280 là 1.9888 cho thấy DNA của mẫu tôm là khá tinh sạch,không bị nhiễm Protein cũng như Chlorofrom,đồng thời nồng độ DNA thu được cũng khá cao (1291.25 ng/µl)
**4.2.2/Mẫu vi khuẩn**
Kết quả đo OD260/OD280 (2.0032) cho ta biết độ tinh sạch của mẫu là khá tốt, tuy nhiên mẫu có thể bị nhiễm một ít Chloroform do sai sót trong quá trình thực hiện, có thể là sai sót trong quá trình rút mẫu sau khi ly tâm với cloroform/isoamylalchohol. đồng thời nồng độ DNA thu được cũng khá cao (721.85 ng/µl)
**4.2.3/Mẫu lá bưởi**
Mẫu ở giếng số 5, cho ta thấy DNA ít bị nhiễm muối(ít sáng ở vị trí giếng) và không có trường hợp bị gãy(chỉ có vạch sáng lớn, không có các vạch sáng ở dưới vạch sáng lớn) , tuy nhiên vạch sáng hơi mờ chứng tỏ nồng độ DNA thu được là không cao.
**TRẢ LỜI CÂU HỎI** **Câu 1:** **Công dụng của các chất:** **Sodium Dodecyl Sulfate (SDS**): Có tác dụng phá vỡ màng tế bào, DNA thoát ra môi trường ngoài.
### Cetyl Trimethylammonium Bromide (CTAB): CTAB có khả năng liên kết thuận nghịch với ADN và polysaccharide, cụ thể ở nồng độ muối cao (trên 1.4 M NaCl có trong đệm chiết) thì CTAB kết hợp với ADN và polysaccharide nhưng phức hợp CTAB-ADN tồn tại ở trạng thái hòa tan, trong khi đó phức CTAB-polysaccharide lại kết tủa, phức này sẽ được loại đi ở bước ly tâm đầu tiên. Ở nồng độ muối dưới 0.7M thì phức CTAB-ADN lại kết tủa, cho phép thu hồi lại ADN ở bước tủa cồn. Ở nồng độ muối thấp phức CTAB-ADN sẽ tách nhau ra. Phức này sẽ tách ra gần như hoàn toàn trong bước rửa bằng cồn 70
0.
### Proteinase K (endopeptidase K): Trong quá trình ly trích DNA sẽ có sự hiện diện của rất nhiều protein, làm cho mẫu DNA không sạch, các protein đó cần phài được loại bỏ proteinase K được sử dụng để loại bỏ các protein này, góp phần làm sạch mẫu DNA. Ngoài ra proteinase K còn góp phần phân giải enzyme nuclease giúp cho DNA ít bị biến tính hơn. Proteinase K thường được duy trì trong sự hiện diện của SDS, EDTA và urea.
**Isopropanol: **Dùng để tủa DNA (thể tích isopropanaol tỷ lệ 1:1 với dung dịch cần tủa) **Hỗn hợp Chloroform:Isoamylalcohol (24:1): **Dùng để loại bỏ protein, polycaccharide và các phức hợp không phải DNA. Sau khi li tâm với vận tốc 13000rpm trong 5 phút dung dịch chia ra thành 3 lớp: lớp thứ nhất là phần dịch trong ở trên cùng có chứa DNA, lớp thứ hai là một lớp protein, lớp kế tiếp có chứa chloroform và tất cả những thành phần cần loại bỏ khác. **Ethanol 96% và 70%: **Ethanol 96% dùng để tủa DNA và bảo vệ chúng khỏi sự phân hủy của các enzyme. Chúng kết hợp với muối để tránh gây hại cho DNA.
Ethanol 70% dùng để rửa tủa, loại bỏ isopropanol, muối CTAB ra khỏi DNA
**Câu 2: ** **Sự khác nhau khi dùng TE 0.1X và nước để hòa tan DNA** **Câu 3** **:** ** DNA cần phải được làm khô trước khi hòa tan** **Câu 4:** ** Nồng độ và số lượng DNA ở mẫu tôm:**
Ta có: OD
260nm = 1 Þ DNA = 50ng/ml
Qua kết quả đo OD của Tôm ta có: OD
260nm = 2.5825
Trước khi tiến hành đo OD, mẫu đã được pha loãng 10 lần. Vậy nồng độ DNA trong mẫu Tôm thu được:
**C DNA= OD260nm * 50ng/** **m** **l*10 = 2.5825*50ng/** **m** **l*10 =** **1291.25** **ng/** **m** **l.**
Dung dịch DNA trước khi pha loãng là 30 ml nên số lượng DNA thu được là: 30*1291.25 = 38,737.5ng
Kết quả OD260/OD280 là 1.9888 cho thấy DNA của mẫu tôm là khá tinh sạch,không bị nhiễm Protein cũng như Chlorofrom,đồng thời nồng độ DNA thu được cũng khá cao (1291.25 ng/µl)
**Tương tự:** **Nồng độ và số lượng DNA ở mẫu vi khuẩn:** **C DNA= OD260nm * 50ng/** **m** **l*10 = 1.4437*50ng/** **m** **l*10 = 721.85ng/** **m** **l.**
Dung dịch DNA trước khi pha loãng là 30 ml nên số lượng DNA thu được là: 30*721.85= 21,655.5 ng
Kết quả đo OD260/OD280 (2.0032) cho ta biết độ tinh sạch của mẫu là khá tốt, tuy nhiên mẫu có thể bị nhiễm một ít Chloroform do sai sót trong quá trình thực hiện, có thể là sai sót trong quá trình rút mẫu sau khi ly tâm với cloroform/isoamylalchohol. đồng thời nồng độ DNA thu được cũng khá cao (721.85 ng/µl)
**Câu 5** **:** **Chất lượng và số lượng DNA lá dựa trên kết quả điện di**
Mẫu ở giếng số 5, cho ta thấy DNA ít bị nhiễm muối và không có trường hợp bị gãy, tuy nhiên vạch thể hiện hơi mờ chứng tỏ nồng độ DNA thu được là không cao.
**Bài tập**
a.Lượng hóa chất để hòa tan các dung dịch Stock có nồng độ sau:
Đồng nhất thể tích dung dịch pha V= 1lit
* Tris 1M (M= 121.13g/mol)
C
M Tris = n/V=m/(M*V) => m= C M Tris * (M*V) = 1x (121.13 *1) =121.13g
*EDTA 0.5M (M=372.24 g/mol)
C
M EDTA = n/V=m/(M*V) => m= C M EDTA* (M*V) = 0.5 x (372.24 *1) =186.12g
*NaCl 5M( M=58.4 g/mol)
C
M NaCl = n/V=m/(M*V) => m= C M NaCl * (M*V) = 5 x (58.4*1) = 292 g
b
**.**Pha V 2 ml Buffer A (0.1M Tris; 0.5M NaCl, 0.005M EDTA pH 8) từ các dung dịch gốc Tris 1M, NaCl 5M, EDTA 0.5M. Phải mất bao nhiêu dung dịch gốc để pha Buffer A.
Dựa vào công thức C
1V 1=C 2V 2 ta tính được các thể tích các dung dịch gốc cần pha như sau: **V 1 = C2V2 / C1**
* V
Tris.HCl = 0.1* V 2/1 = V 2/10 ml
* V
NaCl = 0.5* V 2/5 = V 2 /10 ml
* V
EDTA = 0.005* V 2/0.5 = V 2 /100 ml
Tổng thể tích của dung dịch gốc = V
2/10 + V 2/10 +V 2/100 =21V 2/100 ml
Þ Thể tích nước cất thêm vào = V
2– 79 V 2/100= 79V 2/100 ml

Link: <http://wp.me/pZ8aA-2S>; rel=shortlink

X-ac: 1.iad _iad


markdown:
**Dành cho khách hàng:** Để mua sản phẩm bạn vui lòng liên hệ theo số điện thoại trong tin đăng của các shop. **Dành cho chủ shop:**
Liên hệ mua hàng tại shop
Chưa có đánh giá
Trung bình:
**0**
Bạn chưa đánh giá
Chưa có đánh giá
Trung bình:
**0**
Bạn chưa đánh giá
Bình luận

WARC-Type: response

Content-Type: application/http; msgtype=response

WARC-Truncated: length

Server: nginx

Content-Type: text/html

Connection: close

Cache-Control: no-store, no-cache, must-revalidate, post-check=0, pre-check=0

Pragma: no-cache


markdown:
### TảI XUốNG
-
[Tổng quan](http://gallery.mobile9.com/o/nokia+7900+prism_1579/)
-
[Ứng dụng](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-softwares_1579/1/)
-
[Chủ đề](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-themes_1579/1/)
-
[Hình nền](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-wallpapers_1579/1/)
-
[Nhạc chuông](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-ringtones_1579/1/)
-
[Chiếu phim](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-videos_1579/1/)
-
[Nhãn Dán](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-stickers_1579/1/)
-
[Tin nhắn](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-messages_1579/1/)
-
[Truyện tranh](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-manga_1579/1/)
-
[Công thức nấu ăn](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-recipes_1579/1/)
-
[Bảo vệ màn hình](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-screensavers_1579/1/)
-
[Flash](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-flash_1579/1/)
-
[Nhà điều hành logo](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-operator-logos_1579/1/)
### NHữNG NGườI KHáC
# Nokia 7900 Prism Chủ đề
[Thêm Thiết Bị](javascript:void(0);) [MớI NHấT](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-themes_1579/1/?st=2) [ĐặC TRưNG](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-themes_1579/1/?st=3) [PHí BảO HIểM](http://gallery.mobile9.com/c/nokia-7900-prism-themes_1579/1/?st=4) [GIA đìNH Bộ LọC TắT](http://gallery.mobile9.com/upload/?pf=ff&ty=3&rd=http%3A%2F%2Fgallery.mobile9.com%2Fc%2Fnokia-7900-prism-themes_1579%2F1%2F%3Flang%3Dvi%26ff%3Doff)

Server: Apache

Set-Cookie: gcat_sort=1; expires=Mon, 23-Nov-2015 06:07:06 GMT; path=/; domain=.mobile9.com

Content-Encoding: gzip

Content-Type: text/html; charset=UTF-8


markdown:
### TảI XUốNG
-
[Tổng quan](http://gallery.mobile9.com/o/nec+n923_2400/)
-
[Ứng dụng](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-softwares_2400/1/)
-
[Hình nền](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-wallpapers_2400/1/)
-
[Nhạc chuông](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-ringtones_2400/1/)
-
[Chiếu phim](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-videos_2400/1/)
-
[Nhãn Dán](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-stickers_2400/1/)
-
[Tin nhắn](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-messages_2400/1/)
-
[Truyện tranh](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-manga_2400/1/)
-
[Công thức nấu ăn](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-recipes_2400/1/)
-
[Bảo vệ màn hình](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-screensavers_2400/1/)
-
[Flash](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-flash_2400/1/)
-
[Nhà điều hành logo](http://gallery.mobile9.com/c/nec-n923-operator-logos_2400/1/)
### NHữNG NGườI KHáC
# sunset
[đăng nhập](http://www.mobile9.com/my/login/?rd=http%3A%2F%2Fgallery.mobile9.com%2Ff%2F704450%2F)hoặc [đăng ký](http://www.mobile9.com/my/register/?rd=http%3A%2F%2Fgallery.mobile9.com%2Ff%2F704450%2F)để gửi bình luận. [Tải về](http://gallery.mobile9.com/f/704450/?ifr=1&ref=2400)

Set-Cookie: lite=3; expires=Mon, 23-Nov-2015 05:56:39 GMT; path=/; domain=.mobile9.com


markdown:
## Chào mừng quý vị đến với Thư viện Giáo án điện tử.
Quý vị chưa đăng nhập hoặc chưa đăng ký làm thành viên, vì vậy chưa thể tải được các tư liệu của Thư viện về máy tính của mình.
Nếu chưa đăng ký, hãy
**hoặc** [đăng ký thành viên tại đây](#) [xem phim hướng dẫn tại đây](http://daotao.violet.vn/Data/Library/1/Index.html)
Nếu đã đăng ký rồi, quý vị có thể đăng nhập ở ngay ô bên phải.
## Các ý kiến mới nhất

Server: Apache/2.2.3 (CentOS)

Vary: Accept-Encoding

Content-Type: text/html; charset=utf-8


markdown:
"/>
Trang chủ
Giới thiệu
Tin tức
Chính sách
Đảm bảo
Vận chuyển hàng
Liên hệ
Thanh toán
Hỗ trợ
Tweet
Đăng ký
|
Đăng nhập
Giỏ hàng:
0
Leather Shop
Slide Top
Shopping online
Da cá sấu
Túi xách hàng hiệu
Túi xách
Ví da nữ
Sắc đầm
Túi xách nam
Ví da nam
Dây lưng da nữ
Dây lưng da nam
Sắc nam
Cặp da cao cấp
Cặp tài liệu
Kính thời trang nữ
Kính thời trang nam
Túi du lịch
Vali du lịch - vali kéo
Cặp số
Balo thời trang
Balo laptop
Cặp laptop
Túi đeo chéo
Túi balo sinh viên
Túi đựng máy ảnh
Bao bụng
Thương hiệu
Bowafne Collection
Khatoco
Moy Nat
Chanel
Hermes
Prada
Marni
Burberry
Givenchy
Gucci
Bally
Cartier
Balageli
Fendi
Cavalli
Tod's
Dior
Furla
Alexsander wang
Loewe
Valentino
D&G
Mulberry
Chloé
Versace
Celine
Tory burch
Miu miu
Bvl gari
Salvatore ferragamo
Marc jacobs
YSL
Jimmy choo
Michael Kors
Techno marine
Sản Xuất-Quà tặng
Sale off
Tìm Kiếm
Theo giá
Chọn khoảng giá tìm kiếm
200.000 -> 500.000 VND
500.000 -> 1.000.000 VND
1.000.000 VDN trở lên
Theo mã sản phẩm
Hotline
Hỗ trợ
HAO ANH Collection
Tư vấn online : Trần Tuyết
01669654817
Tư vấn online : Thanh Nga
(04)66839518
Tư vấn online : Vân Anh
(04)35736372
Tư vấn online : Như Quỳnh
(04)35736372
Expert Seo:Nguyễn Cường
0977436338
PR - Marketing: Công Sơn
0978312342
YouTuBe
Leather Shop on Youtube
Tin tức
4 chiếc túi xách mọi cô gái cần có
phụ kiện thời trang sang trọng và quý phái
Thương hiệu Hermès và 3 thế kỷ huyền thoại
Salvatore Ferragamo – niềm tự hào của thời trang Ý
Xem thêm +
Thống kê
Lượt truy cập: 3214
Đang online: 145
Fendi
17528T10-308T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
17528T10-309T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
13860T10-0299T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
17528T10
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
13860T11
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
001t10
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
13860T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
13860t8-309t8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
17628T8-0299T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
17628T8-0299T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
13860T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
13860T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
17628T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
17628T8
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
3026T6
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
99101t4
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
99101t4
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
99101t4
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
99101t4
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
2604T3
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
2562T3
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
2562T3
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
22724T12
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
31833T11
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
F-300T11
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
Fd002-34t12
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
Fd002-34t12
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
30%
2562t3
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
2579t3
Fendi
Đặt hàng
Chi tiết
1
2
tiếp
Trang chủ
Giới thiệu
Tin tức
Chính sách
Đảm bảo
Vận chuyển hàng
Thanh toán
Hỗ trợ
Liên hệ
110 Hàng Bông
Túi xách, Ví da nữ, Dây lưng nữ, Kính thời trang nam nữ,
Vali du lịch, Túi du lịch
Tel:
04 39381482
201 Hàng Bông
Túi xách nam nữ, Ví da nam nữ, Dây lưng nam nữ,
Vali du lịch, Túi du lịch
Tel:
04 39380548
70 Phạm Ngọc Thạch
Túi xách, Ví da nam nữ, Dây lưng nam nữ, Kính thời trang nam nữ
Tel:
04 35736095
72 Phạm Ngọc Thạch
Túi xách nam nữ, Ví da nam nữ, Dây lưng nam nữ, Cặp da, Cặp số, Cặp laptop, Balo laptop ,Vali du lịch, Túi du lịch, Balo học sinh sinh viên
Tel:
04 35729041
Văn Phòng Tư Vấn - Hỗ Trợ Trực Tuyến :
Tel :
(04) 35736372 - (04) 66839518
FAX :
04 35135168
Email :
company@haoanh.com.vn
-
haoanh.fashion@gmail.com
-
h
aoanh.director@gmail.com
Nội dung trên website là bản quyền của
®
Hao Anh Collection
Designed By CDC


markdown:
**Quyetdk.wap.sh** cực dâm cực hay * Quyetdka.wap.sh*, Tuyển chọn [ truyện](http://hayhaynhat.com/truyen-18-hay/) 18+ cực hay đọc rất phê của chúng tôi tại *Quyetdka.wap.sh* **Phim 18+ cực hay không xem thì phí**
Con Mén không còn kềm hãm được nữa. Cả người nó nóng hổi như lò lửa. Nó vừa rên rỉ, vừa mếu máo kêu gọi như van xin thằng Mẹo:
- Trời ơi! Chơi em đi. . . Em chịu hết nổi rồi. Anh mà bú nữa chắc. . . em chết mất.
Đã nói là con Mén nó có cái máu dâm trong người. Dù cho thằng Mẹo có bú nó ba ngày ba đêm đi nữa, khí đã ra hết rồi mà thằng Mẹo không chịu đút cặc vào lồn nó thì nó cũng chưa đã. Mỗi cái nó sướng mỗi khác. Phải làm đủ bộ nó mới thỏa mãn…..
![ Xem](http://img.kutublog.com/wp-imgpc/top1baivietpc.gif)
![ Xem](http://img.kutublog.com/wp-imgpc/top1baivietpc.gif)
## Quyetdk.wap.sh Truyện 18+ con mén
Bà Chí quáng hết nấm tiền lẻ xuống chiếu bạc. Vừa quay ra sau phun một bãi nước miếng bà vừa lầm bầm chửi thề:
- Mẹ. . . xui gì xui dữ vậy. Bài bạc gì mà cứ. . . Hai thằng Tây đập lên lá lo. Đánh cả ngày hỏng trúng dược một cây…
Nhà Cái vừa chia bài vừa nhìn bà Chí nói:
- Thì bài có bữa hên, bữa xui chớ. Bà hên hoài thì ai dám chơi với bà. . . Bà nội.
Bà Chí cầm ba lá bài lật ngữa. Bài bà lên hai lá 10 một lá 8. Bà hô to:
- Tám nút.
Thằng Mẹo đang làm Cái. Sau khi chia bài xong, hắn cầm hết ba lá bài, úp vào lòng bàn tay rồi dưa mắt quan sát mọi người.
Nghe bà Chí la “8 nút”, hắn chồm tới lấy hai lá 10 úp vào dĩa, chừa lại lá 8 để dễ theo dõi. Thằng Mẹo có thói quen như vậy. Bài ai bù thì hắn úp hết vào dĩa, bài ai bao nhiêu nút thì hắn chừa lại 1, 2 lá gì đó tương dương cho số nút để hắn theo dõi
và cũng để tránh mấy tay chuyên môn đổi bài.
Sau khi kiểm soát hết một vòng, hấn mới đưa hai tay nâng niu ba lá bài, kê sát mặt và bắt dầu “nặn.”
Có thấy nó đánh bài mới biết cái máu mê cờ bạc của nó. Chỉ có ba lá mà nó cứ hết nặn xuôi tới nặn dọc. Nửa chừng ngưng lại, nhìn một vòng các tụ rồi lại đưa lên nặn tiếp đến phát sốt cả ruột.
Sau cùng hắn để úp ba lá bài trong lòng bàn tay trái, dùng tay phải vuốt lấy một lá rỏi đưa lên cao đập xuống một cái thật mạnh. Vừa đập hấn vừa la:
- Lỏng.
Lá bài hiện ra trước mặt mọi người là con 4 bích. thằng Mẹo thản nhiên lật hai lá kia lên cho mọi người thấy. Bài hắn lên con Đầm, là cơ, cơ và 4 bích.
Mẹo vừa chồm tới, quơ hết tiền trên chiếu gom về phía mình vừa nói, giọng thản nhiên:
- Hên thiệt. Nó mà lên đặc là bỏ mẹ.
Bà Chí uể oải đứng dậy, phủi dít mấy cái rồi vội vả bỏ ra về.
Ngày nào cũng vậy, cứ sáng sáng ăn chén cơm nguội dằn bụng xong là bà Chí gom góp tiền bạc đem tới sòng bài nhà thầng Mẹo. Rất ít khi số tiền bà đem về nhiều hơn số tiến bà đem đi. Nhưng bà Chí vẫn không cần biết điều đó. Bà vẫn dến sòng bạc như một con chiên ngoan dạo dến nhà thờ mỗi ngày. Có lẽ bà có máu mê cờ bạc từ thuở nhỏ. Chẳng thế mà ngày xưa Ba bà thường kể rằng Mẹ bà sinh ra bà trong sòng bài đó sao.
Bà Chí về đến nhà, bà di luôn một hơi từ nhà trước ra dến nhà sau. Con Mén lại đi nừa rồi. Bà lầm bầm nguyền rủa:
- Đồ cái thứ gái nứng lồn. Mới nứt mắt ra mà đã rượng tối ngày ngoài đường, bỏ nhà bỏ cửa hỏng ngó ngàng gì tới.
Bà Chí chưởi cho đỡ tức cái vụ thua bài vừa rồi chớ thật ra nhà bà có cái khỉ mốc gì dâu mà phải coi phải ngó.
Từ ngày ông Chí chết, bà cứ lang bang cặp hết ông nầy tới ông khác, tạm bợ sống qua ngày dể cờ bạc chớ không làm ăn gì cả.
Lúc ông Chí còn sống, nhờ chạy xích lô máy dưa đón bọn lính Mỹ ở Tân Sơn Nhất nên gia đình cũng có của ăn của dể. Bà Chí sanh tật cờ bạc, riết sinh ghiền. Đến lúc ông Chí bị xe nhà binh Mỹ ủi chết, bà Chí cứ bán dần mà ăn cho dến lúc bà và con Mén phải dọn ra cái chòi mà ở. Bao nhiêu tiền bạc của cải ông Chí để lại bà dem vô sòng nướng sạch.
Bà Chí bước lại góc nhà, dỡ nắp nồi cơm bới một chén vun rồi quơ chai nước tương bên cạnh xịt dại vào Vừa để chai nước tương xuống đất, bà Chí giật mình vì một giọng nói vang lên sau lưng:
- Nồi thịt kho đó sao hỏng ăn, đi ăn nước tương.
Bà Chí quay lại nhìn con Mén. Bà chửi xối xả:
- Con đĩ. Mầy đi theo trai cho dã rồi về chọc tức tao nữa hả? Con đĩ chó. . . đéo.
Con Mén chẳng nói chẳng rầng. Nó đi một vòng lại góc bếp, đưa tay dở nắp một cái nồi đen đúa rồi dằn cái nắp xuống bên cạnh một cái !’chảng” , xong vừa bỏ ra nhà sau vừa nói:
- Bà thua bài quá nên tối mắt rồi. Có thấy cái gì Bà Chí tò mò lại gần ghé mắt coi bên trong nồi thịt mới kho còn bốc mùi thơm ngát. Lớp nước mỡ vàng óng ánh nổi trên mặt làm bà nuốt nước miếng. Không cần hỏi thêm, bà Chí nhào tới múc đầy một tô, rồi bưng ra góc nhà ngồi ăn.
Con Mén năm nay mới 18 tuổi. Nhưng nhìn cái vóc dáng của nó ít ai nghĩ nó là gái dưới 20. Tướng người cao ráo, đẫy đà, có da có thịt. Chẳng thế mà mấy thằng con trai vòng vòng khu nầy cứ thấy con Mén đi qua là tụi nó xì xầm, hú hí um trời. Thằng thì khen con Mén “sạch nước cản” , đứa thì phê bình là con Mén “nước nôi đầy đủ.”
Con Mén về nhà tắm rửa, thay đồ trước cặp mắt tò mò của bà Chí. Trước khi ra. cửa, nó dúi vào tay bà một nắm bạc.
Bà Chí định hỏi nó vài câu, nhưng vừa cầm nắm tiền trong tay là bà quên hết. Trong đầu bà lại hiện lên hình ảnh sòng bài nhà thàng Mẹo…
Ra tới đầu ngõ, con Mén nhảy lên chiếc Honda của con Đậu đang chờ sẵn. Chiếc xe rú hết ga phóng vế hướng ngã Bảy.
### Dâm cực hay Quyetdka.wap.sh
Ngồi phía sau, con Mén chồm dầu tới nói lớn vào tai con Đậu:
- Chạy chậm chậm một chút. . . má. Sợ tới trể hỏng có thằng nào. . . “đéo” hay sao mà chạy dữ vậy?
Con Đậu quay đầu ra sau trả lời:
- Lẽ dĩ nhiên. Hỏng có khách là hỏng có tiền. Tới sớm, được “dừ’ nào dỡ “dừ’ đó chớ mậy.
Con Mén không dám nói thêm. Dù sao thì cũng chính tay con Đậu dẫn dắt nó vào nghề “nhảy dù” mấy tháng nay. Từ cái áo, cái quần dến cách đi đứng, liếc mắt đưa tình thế nào dể được mọi người biết mình là đĩ, con Đậu đều phải dạy dỗ cho nồ. Thậm chí tới
[ chuyện](http://hayhaynhat.com/chuyen-tinh-yeu-noi-van-phong-truyen-18/) đi làm mỗi ngày nó cũng phải quá giang con Đậu.
Chiếc Honda chạy sâu vào con hẽm nhỏ rồi ngừng lại trước nhà “Má Bảy”. Con Đậu dắt xe vào trong, khóa lại cẩn tìlận rồi quay lại hối con Mén:
- Sửa soạn lẹ lẹ đi má. Mấy cái thầng chó đẻ nó tới bây giờ.
Con Mén phản dối một cách yếu ớt:
- Còn sớm mà. Đâu ai đi chơi giờ nầy.
Má Bảy nảy giờ đang ngồi đong dưa trên võng hút thuốc, quan sát hai đứa nó, bây giờ mới chen vô:
- Con Đậu nó nói phải đó. Bữa nay thứ Bảy, mấy thằng đó vừa làm vừa. . . “nứng cặc.” Chờ lãnh lương xong là tụi nó ào tới liền đó nghe. Hỏng lo sửa soạn cho rồi còn đứng dó cải…
Đậu nhìn con Mén vê trách móc. ý nó muốn nói với con Mén là: “Không nghe lời tao, để bả dũa mới chịu.”
Con Mền không dám trả lời. Nó di te te lại góc nhà, dỡ hộp son phấn rẽ tiền ra, rồi bắt đầu trây trét lên mặt.
Má Bảy năm nay chưa tới 40, nhưng ai cũng gọi bằng Má. Từ mấy thằng già 4, S chục tuổi ham chơi bời đến mấy thằng nhóc 16, 17 tuối trốn học di chơi đĩ. cũng bắt chước gọi bà là “Má Bảy.” Chính má Bảy cũng chẳng nhớ ai “vinh danh” cho mình chức Má. Nhưng nghe dám gắi chơi bời gọi mình một cách kính nể, thì cũng đương nhiên chấp nhận luôn.
Hai đứa vừa sửa soạn xong thì cũng vừa lúc ba thằng thanh niên chở nhau trên một chiếc Honda bước vô Má Bảy đon dã bước ra chào hỏi:
- Chà. Lâu quá hỏng thấy ghé. Bộ. . . bà xã cấm cung rồi sao mà lặn kỹ quá vậy?
Má Bảy hỏi xã giao, chớ thật ra bả có nhớ mặt mũi tên nào đâu. Ngày nào cũng khách khứa nườm nượp, hơi sức đâu mà nhớ.
Gã thanh niên đi đầu mĩm cười. Hắn không trả lời má Bảy mà cứ trố mắt nhìn con Mén. Bà Bảy biết ý giới thiệu luôn:
- Ờ. Em nầy mới vô làm bữa nay dó. Đi thử đi cậu “bót” lắm đó.
Gã dân chơi hỏi móc lại một câu:
- Ủa. . . Mới vô làm bữa nay hả? Vậy. . . mấy năm nay làm ở động nào
Má Bảy có vẻ tự ái, bực dọc nói với con Mén:
- Tao nói vậy mà nó hỏng tin. Chút nữa mầy banh lồn dí vô mặt nó coi tao nói có đúng không. Mấy gã thanh niên cười hô hố có vẻ khoái chí lắm. Con Mén tuy trong bụng hơi mắt cỡ, nhưng nó cũng phải làm ra vẻ tỉnh bơ dể chứng tỏ ta dây sành diệu. Thật ra thì con Mén chl mới thật sự bước vào chốn lầu xanh nầy là lần thứ ba trong dời nó.
Cách dây mấy tháng, tình cờ con Mén nhìn thấy thằng Mẹo đến nhà rủ bà Chí đi dánh bài. Giữa cái xóm nghèo, đa số thanh niên phải đi làm thợ thuyền, dầu tắt mặt tối, áo quần bê bối cẩu thả, thì thằng Mẹo lại diện quần cao bỏi, áo “montngư’ láng cóng, khác hẳn với mọi người.
Nhìn thấy con Mền vóc dáng nở nang, cặp vú tròn xoe căn phỏng, thằng Mẹo nói chuyện với bà Chí mà cứ đưa mắt liếc liếc. Con Mén cũng làm bộ lẩn quẩn ở đó chớ không chịu ra sau nấu cơm.
Đến lúc nghe bà Chí than là hỏng có tiền, thằng Mẹo liền làm ra vê dân bảnh, móc túi lôi ra một xấp tiền đếm tới đếm lui cho hai mẹ con bà Chí trông thấy.
Xong nó ngất một xấp 500 đưa cho bà:
- Hỏng có tiền thì cầm chút đlnh nầy chơi cho vui. Hể ăn thì trả lại vốn cho tui.
Bà Chí ngạc nhiên ra mặt. Cái thằng Mẹo nầy nổi tiếng keo kiệt. Ngối vô sòng đặt một cây 2, 3 trăm là chuyện thường, Nhưng ai thua, xin nó một đồng về xe nó cũng chửi xối xả vào mặt. Tự nhiên hôm nay ra vẻ hào phóng dưa bà cả 500 để dánh bài. Bà Chí phân vân cầm lấy xấp tiền, xong chợt hiểu. Thì ra thằng Mẹo thấy con Mén có vẻ mướt quá nên nổi hứng muốn giợt le với con nhỏ.
Kể từ hôm ấy, mối thâm tình giữa thằng Mẹo cùng hai mẹ con bà Chí tăng dần theo thời g;ian. Bà như người chới với giữa giòng nước, cố bám vào cái phao của thằng Mẹo để thỏa mãn cái máu dỏ den di truyền mà mẹ bà để lại.
Bà Chí càng mượn tiền của th
![ Xem](http://img.kutublog.com/wp-imgpc/duoicungbaivietpc.gif)
![ Xem](http://img.kutublog.com/wp-imgpc/duoicungbaivietpc.gif)

Server: Nginx - Setup and config by HZserver

Vary: Accept-Encoding, Cookie

WP-Super-Cache: Served supercache file from PHP

Cache-Control: max-age=0, no-cache


markdown:
|
|
|
|
|
|
**ADADH <MãKhối> <Mônthi> <Mãđề> gửi 8702**
Ví dụ: Với môn không có mã đề: để xem đáp án đề thi đại học môn Toán khối A, bạn soạn tin: ADADH A TOAN gửi 8702.
Ví dụ: Với môn có mã đề: để xem đáp án đề thi đại học môn Lý khối A mã đề 642, bạn soạn tin: ADADH A VATLY 642 gửi 8702.
Xem thêm đáp án đề thi Khối A năm 2013
|
|
|
|
## Đề thi môn lý khối A mã đề 426 năm 2013
![]()
|
|
[
Những lưu ý khi làm bài thi trắc nghiệm ](http://kenhtuyensinh.vn/nhung-luu-y-khi-lam-bai-thi-trac-nghiem)
Cách làm bài thi trắc nghiệm để đạt điểm tối đa trong kỳ thi đại học cao đẳng năm 2014: nên đọc toàn bộ đề thi qua 1 lần, làm từ câu dễ trước, sử dụng phương pháp loại trừ để tìm đáp án đúng nhất...
Kenhtuyensinh.vn is completely powered by the Kenh Cong Ltd.,
Cơ quan chủ quản: Công ty TNHH Quảng Cáo Trực Tuyến Kênh Cộng
Tel: (08) 22 486 453 - Email: info@kenhtuyensinh.vn
Chịu trách nhiệm xuất bản: Ngô Duy Khánh
Địa chỉ: Mỹ Thịnh Building, Lầu 6, 137 Lê Quang Định, Phường 14, Q. Bình Thạnh, Tp. HCM
Giấy phép TRANG TIN ĐIỆN TỬ số: 72/ GP-STTTT do Sở Thông Tin và Truyền Thông cấp ngày 15/09/2011
Giấy phép MẠNG XÃ HỘI số: 130/GXN-TTĐT do Cục quản lý phát thanh, Truyền hình và Thông tin điện tử cấp ngày 18/10/2012
All content Copyright © 2008-2015 Kenh Cong, Online Advertising


markdown:
|
|
|
|
|
|
08:26 AM 09/05/2012
Tin liên quan:
Càng đến thời điểm cuối năm học, những kỳ thi chứng chỉ tiếng Anh Cambridge cấp độ Starters tại TP.HCM càng nhộn nhịp, rộn ràng hơn với những HS đang học lớp 2.
Cùng với đó là sự căng thẳng và lo lắng đối với phụ huynh và cả thầy cô của các em.
6g15 chủ nhật 6-5. Con đường nhỏ trước cổng Trường tiểu học Dương Minh Châu, Q.10, TP.HCM nhộn nhịp cảnh phụ huynh đưa đón con đi thi chứng chỉ tiếng Anh
*Cambridge cấp độ Starters*.
Với 52 phòng thi, hơn 1.000 thí sinh, hầu hết là HS lớp 2 đến từ 16 trường tiểu học các quận 10, 11 và Bình Tân, lần đầu tham dự kỳ khảo sát tiếng Anh theo chuẩn quốc tế. Đây chỉ là một trong số những kỳ thi Starters được tổ chức hằng tuần từ tháng 3 đến cuối tháng 6.
Lần đầu đi thi, một thí sinh nhí được 2-3 người lớn đưa đến trường. Những HS lớp 2 được mẹ chăm chút đút cho xong bữa ăn sáng cạnh trường thi. Trước khi trẻ một mình bước qua cổng trường thi, ba mẹ níu tay con căn dặn đủ điều.
6g30, đoàn HS Trường Trương Vĩnh Ký được đưa đến cổng trường thi, xếp hàng vào cổng. Một bé trường này không tìm thấy phiếu đăng ký dự thi (có phiếu báo danh và dán ảnh), không được vào trường thi cùng các bạn. Lục tung cặp sách cũng không thấy phiếu báo danh, cô giáo phải gọi điện về nhà đề nghị phụ huynh mang đến trường thi gấp.
Chị Hồng, có con đang học trường này, cho biết sáng sớm phụ huynh đưa con tập trung đến trường để được các cô đưa cả đoàn đi thi bằng ôtô, nhưng mẹ cũng phải chạy xe máy theo đến tận cổng trường cổ động tinh thần cho trẻ.
7g20, khi hầu hết trẻ đã vào phòng thi để điểm danh, một cô bé mặc đồng phục được bố chở đến trường hớt hải bước xuống xe máy. Cô bé khóc, đôi mắt ướt đỏ hoe, gương mặt đầy âu lo, căng thẳng cầm thẻ dự thi chạy ào đến cổng. Trình thẻ dự thi xong, được giám thị giải thích em sẽ thi buổi chiều chứ không phải buổi sáng, cô bé thôi lo âu, quay ra xe ba chở về. Người cha lạnh lùng lái xe đi gấp kèm câu cằn nhằn: “Sao không chịu đọc cho kỹ vậy”.
Một kỳ khảo sát nhẹ nhàng trở nên căng thẳng hơn trong nỗi lo của người lớn. Một phụ huynh trường Trương Vĩnh Ký nói: “Cả trường đều học tiếng Anh. Nếu con mình thi không đạt trình độ sợ sẽ không được học tiếp ở trường...”. Đối với nhiều phụ huynh có con em học lớp 2 đây là kỳ thi để giữ được cơ hội học lớp tăng cường tiếng Anh vốn được hưởng nhiều ưu đãi hơn so với các lớp thường.
Trong khi đó, anh Trần Thanh Hải - phụ huynh có con học ở Trường tiểu học An Lạc 3, quận Bình Tân dự thi ngày 6-5 - nói: “Không phải ai vào lớp tăng cường cũng để học tiếng Anh. Do thiếu phòng học, nhiều trường ưu tiên tổ chức bán trú cho các lớp tăng cường tiếng Anh. Thi rớt kỳ này tức là đứng trước nguy cơ không được học bán trú nữa, sinh hoạt gia đình rối loạn vì cha mẹ đi làm cả ngày không có ai đưa trẻ, con mình đi đâu. Bởi vậy phụ huynh căng thẳng cũng là chuyện dễ hiểu”.
Nỗi âu lo càng tăng dần khi ở thời điểm này, năm học sắp kết thúc. Kỳ thi cuối cùng dành cho HS lớp 2 (đăng ký theo trường) sẽ được tổ chức vào ngày 23-6, trước khi các trường gút danh sách HS nào sẽ được tiếp tục học tăng cường tiếng Anh lớp 3. Đây là cơ hội cuối dành cho những HS lớp 2 chưa thi hoặc đã thi nhưng chưa đạt điểm theo yêu cầu.
Dù các kỳ thi Starters tổ chức liên tục hằng tuần từ tháng 3 đến cuối tháng 6 nhưng do lượng thí sinh quá đông, nếu đăng ký vào cuối tháng 4, phải chờ đến cuối tháng 6 mới được dự thi. Đến thời điểm này, HS nhiều trường vẫn chưa thi đợt 1.
Do vậy, như anh Hải cho biết, dự thi ngày 7-5 nhưng vì quá lo nên từ tháng 4 nhiều phụ huynh đã đăng ký đóng tiền cho con thi lại lần hai vào kỳ thi trong tháng 6. Chi phí dự thi tốn kém nhân lên gấp đôi nhưng nếu không đăng ký, lỡ con mình thiếu điểm thì không còn cơ hội dự thi nữa, coi như phải ra khỏi lớp tăng cường...
Không chỉ có phụ huynh HS học tăng cường tiếng Anh âu lo với
*Starters*. Đầu tháng 5, chị Anh Đào, phụ huynh lớp 2 Trường tiểu học Hoàng Văn Thụ, Tân Bình, đến ** Sở GD-ĐT TP.HCM đăng ký cho con thi Trung tâm ngoại ngữ**
Chị cho biết: “Do muốn con tập trung học tốt các môn toán, tiếng Việt nên tôi không đăng ký cho con tăng cường tiếng Anh từ lớp 1. Từ đầu năm lớp 2, gia đình cho bé đi học tiếng Anh ở bên ngoài để đuổi kịp trình độ các bạn học tăng cường tiếng Anh ở trường”.
TS Lê Ngọc Điệp, trưởng phòng giáo dục tiểu học Sở GD-ĐT TP.HCM, nói: “Việc tổ chức kỳ thi Starters nhằm chuẩn hóa trình độ tiếng Anh của HS tiểu học. Năm học 2010-2011, TP.HCM đã không còn khảo sát đầu vào lớp 1 tăng cường tiếng Anh. Thay vào đó, cuối lớp 2 các em sẽ dự thi chứng chỉ Starters, nếu đạt yêu cầu mới được học tiếp lớp 3”.
Chẳng những vậy, kết quả kỳ thi này còn là cơ sở đánh giá việc dạy tiếng Anh từng trường, từng giáo viên. Nói như chuyên viên tiếng Anh, vì “màu cờ sắc áo”, vì danh dự bản thân nên giáo viên ra sức ôn luyện cho HS rất kỹ. Ngoài việc dạy giáo trình theo quy định, GV phải ôn luyện theo sách Vui cùng Starters, bộ 7 quyển sách và đĩa
**. Ôn tới ôn lui nhiều lần trước ngày thi. Nhiều GV còn mở lớp rèn kỹ năng dự thi tại nhà.**
Chưa có con số thống kê kết quả Starters nhưng kết quả ở những trường, những quận huyện có đông HS dự thi từ tháng 3, tháng 4 cho thấy sự chênh lệch tỉ lệ đạt yêu cầu khá lớn. Sau kỳ thi tháng 3, tỉ lệ HS đạt yêu cầu được học tiếp tiếng Anh lớp 3 các trường ở quận Bình Thạnh đã đạt mức 80-90%. Nhiều trường ở Q.1, Q.3 tỉ lệ “qua cầu” trên 90%. Trong khi đó không ít trường số HS đủ điểm học tiếp lớp 3 chỉ khoảng 40% sau đợt thi tháng 3, tháng 4.
Con hẻm bên ngoài trường rộn ràng hẳn lên vì phụ huynh ở lại chờ con, không khác mấy so với kỳ thi ĐH. Câu chuyện của phụ huynh xoay quanh chi phí dự thi và những khoản học phí tiếng Anh để yên tâm trước kỳ thi này. Chi phí dự thi theo quy định là 19 USD/thí sinh.
Dù là chứng chỉ quốc tế nhưng lệ phí này vẫn quá cao so với số đông người lao động. Đó là chưa nói đến việc nhiều em phải thi nhiều lần. Còn việc học thêm, tùy danh tiếng trung tâm, mức học phí dao động từ 2-12 triệu đồng/khóa. Rồi chuyện đóng tiền mua giáo trình luyện thi Starters. Không chỉ có phụ huynh, những giáo viên dạy tiếng Anh lớp 2 cũng lo âu không kém. Một cô giáo tiếng Anh Q.10 bộc bạch: ngoài giáo trình chính thức, giáo viên lớp 2 còn phải rèn kỹ năng thi Starters, lo lắng cho đến ngày thi rồi hồi hộp chờ đến khi có kết quả.
Ngày 5-5, ban giám hiệu Trường tiểu học thực hành Phan Đình Phùng (Q.3, TP.HCM) có thông báo gửi đến tất cả phụ huynh có con đang học lớp 1 tại trường về kế hoạch xét chọn HS vào lớp 2 tăng cường tiếng Anh ở trường này. Theo đó, dự kiến năm học tới trường sẽ tuyển 3 lớp tăng cường tiếng Anh lớp 2, cơ sở xét chọn là những HS đang học lớp 1 đã qua kỳ thi Starters. Phụ huynh có nhu cầu cho con học lớp tăng cường tiếng Anh phải đăng ký và đóng tiền dự thi.
Bà Dương Thị Ngọc Thu, hiệu trưởng nhà trường, giải thích năm học 2011-2012, toàn bộ 399 HS khối 1 của trường đều đăng ký học tiếng Anh. Nhu cầu phụ huynh quá lớn trong khi nhà trường không thể tổ chức dạy tăng cường tiếng Anh cho tất cả HS, chỉ tổ chức dạy tiếng Anh tự chọn. Những phụ huynh có nhu cầu cho con học tăng cường tiếng Anh lớp 2 thì đăng ký cho con dự thi. Dựa vào số lượng và trên cơ sở kết quả thi của HS, nhà trường mới xem xét đến việc xét vào lớp 2 tăng cường tiếng Anh theo kết quả từ cao xuống thấp sau khi xin ý kiến phòng và sở.
|
|
Các chương trình đào tạo kỹ năng cho sinh viên sắp ra trường và người mới đi làm: Học trực tuyến 100% cùng giảng viên là các doanh nhân, học là áp dụng được ngay, Tham khảo tại đây:
Các khoá học đang ![]()
Kỹ năng phỏng vấn xin việc
Các trung tâm anh ngữ uy tín:
Đăng ký nhận thông tin Tiếng anh, ngoại ngữ khác qua email tại ô bên dưới
Kênh Tuyển Sinh
(Theo: Tuoitre)
[
Khoá học tiếng anh giao tiếp Online ](http://kenhtuyensinh.vn/khoa-hoc-tieng-anh-giao-tiep-online)
Chương trình học tiếng anh giao tiếp Online tại Academy.vn giúp bạn phát triển tốt 4 kỹ năng: nghe, nói, đọc, viết, tập trung phát triển kỹ năng nghe và nói, hướng dẫn cho bạn cách xử lý các tình huống giao tiếp tiếng anh trong cuộc sống hàng ngày.
Kenhtuyensinh.vn is completely powered by the Kenh Cong Ltd.,
Cơ quan chủ quản: Công ty TNHH Quảng Cáo Trực Tuyến Kênh Cộng
Tel: (08) 22 486 453 - Email: info@kenhtuyensinh.vn
Chịu trách nhiệm xuất bản: Ngô Duy Khánh
Địa chỉ: Mỹ Thịnh Building, Lầu 6, 137 Lê Quang Định, Phường 14, Q. Bình Thạnh, Tp. HCM
Giấy phép TRANG TIN ĐIỆN TỬ số: 72/ GP-STTTT do Sở Thông Tin và Truyền Thông cấp ngày 15/09/2011
Giấy phép MẠNG XÃ HỘI số: 130/GXN-TTĐT do Cục quản lý phát thanh, Truyền hình và Thông tin điện tử cấp ngày 18/10/2012
All content Copyright © 2008-2015 Kenh Cong, Online Advertising
## Bình Luận(Có 4 bình luận)
Ngoài các môn học chính khóa Tiếng Việt và Toán cho hs lớp 1 và lớp 2 đã quá nặng nề cho các bé thì tại sao lại bắt buộc nhồi nhét các bé thêm cái môn Tiếng Anh nữa khi đây là 1 môn ngoại ngữ mà không phải bé nào cũng có khiếu để học trong khi Tiếng Việt đọc còn chưa rành nữa??? Sở GDDT nghĩ gì mà bày ra những quy định vô lý thế?? Việc học ngoại ngữ là 1 môn tự chọn và không cần thiết phải bày ra cái kỳ thi Starter nhảm nhí thế!
Bản thân tôi cũng đã là cử nhân Anh văn và mãi tận đến lớp 6 mới bắt đầu học tiếng Anh thì tôi thấy cũng chẳng có vấn đề gì phải nhồi nhét vào tâm hồn trẻ thơ đủ thứ môn học như thế.
Nhìn mấy đứa trẻ bây giờ đi học mà thấy tội với cái cặp sách cả chục ký trên vai, rồi đủ thứ loại tập vở, sách các môn. Rồi bây giờ đến lượt kỳ thi Starter quái ác này nữa? Mấy ông bà trên Sở nghĩ gì mà cứ tạo áp lực cho tụi trẻ thế???
Đây là lần đầu tiên tôi nêu lên ý kiến cá nhân về vấn đề giáo dục tiểu học do quá bức xúc trước những tồn tại bất cập của giáo dục tiểu học hiện nay. Tôi tin tưởng không chỉ riêng tôi mà các bậc phụ huynh có con em lớp 2 cũng sẽ có cùng quan điểm như tôi.
Rất mong quý vị Sở GDDT TPHCM xem xét và sớm chấn chỉnh lại cho hợp lòng dân.


markdown:
e có cây c3-00 bị rơi đất,mich nói nghe nhỏ e đã kiểm tra đường mich va các con (c ,r )mọi thứ vẫn ok e đang tính đóng lại
con cpu .nhưng lên hỏi ý kiến ae ai đã gặp trường hợp này làm ok
góp ý giùm e . thank ae trườc nhé
Chú ý :
- Tên topic phải có nội dung liên quan đến nội dung bài viết, không ghi chung chung ( Cần giúp, giúp với ... )
- Phải theo dõi pic sau khi post để trả lời ae giúp, bạn 1 số pic post rồi bỏ đấy là không nên.

Cache-Control: private

Pragma: private


markdown:
Bạn vẫn còn độc thân và đi ngủ với bộ áo lụa trong lúc chờ đợi một chàng hoàng tử đến quỳ dưới chân mình? Hãy quên ngay giấc mơ công chúa đó đi và sẵn sàng để học cách quyến rũ trước khi bạn bước ra ngoài cửa vào tối nay.
Thông thường, khi bạn không hẹn hò, bạn thường không diện đồ như thể chàng trai trong mộng sẽ đến đón bạn đi ăn tối. Hãy đối mặt với điều đó. Thật dễ dàng để lười biếng và kết thúc trong mỏi mòn. Bạn không thể nhớ nụ hôn cuối của mình. Bạn tăng cân sau khi chia tay người cũ. Bạn bắt đầu ít để ý đến việc trang điểm. Chiếc váy yêu thích của bạn không bao giờ được ủi khô và vẫn còn vết rượu đỏ tối hôm trước bạn uống. Lần cuối cùng bạn bôi sáp là khi ai đó quan sát xe của bạn cách đây một năm.
Nghe có vẻ quen thuộc phải không? Lời khuyên của tôi rất đơn giản. Hãy bắt đầu tạo nghi thức ở nhà để sẵn sàng làm bạn thấy mình hoàn hảo. Bạn có thể tự biến mình thành cô nàng quyến rũ trước khi gặp một ai đó đặc biệt. Bạn sẽ ngạc nhiên trước sức hấp dẫn nam giới của chính mình. Bỗng nhiên trở thành người có quyền lựa chọn, không phải rất thú vị sao?
Dưới đây là các bước để chuẩn bị tinh thần cho tình ái mà không cần phải ra khỏi nhà mọi lúc. Đừng lo lắng, tình yêu sẽ tìm đến bạn lúc thích hợp.
Bước 1
Vứt bỏ một số đồ lót cũ làm bừa bộn ngăn kéo của bạn. Làm việc này ngay lập tức. Đã đến lúc xóa sạch những kí ức về cuộc tình cũ. Loại bỏ cái cũ, tiếp nhận cái mới.
Bước 2
Đầu tư một số những đồ lót mới. Mua hàng tại cửa hiệu của Victoria’s Secret hoặc mua trực tuyến và chọn những cái phù hợp với túi tiền của bạn. Chọn màu bạn thích. Nghĩ đến đồ mới như chiếc váy đen yêu thích của bạn. Trước khi tưởng tượng bạn mặc nó với chàng trai trong mơ một ngày nào đó thì trước hết hãy mặc nó cho chính mình. Bây giờ, bạn sẽ mặc nó ngủ ít nhất một lần trong tuần. Bạn đang trên đường biến hóa thành cô nàng gợi cảm.
Bước 3
Nhìn lại bộ dụng cụ trang điểm của mình. Lần cuối cùng bạn mua son môi là khi nào? Vứt bỏ những cái cũ và thẳng tiến đến cửa hàng. Đi vòng quanh quầy mỹ phẩm và tìm một chiếc ghế thoải mái để ngồi. Sẵn sàng cho cuộc trang điểm thử nghiệm miễn phí. Tưởng tượng chính bạn sẽ đi dự tiệc vào buổi tối trong lúc trang điểm. Cuộc hẹn tối với người hâm mộ lớn nhất của bạn, chính là bản thân bạn. Chắc chắn rằng bạn có một danh sách càng màu và chọn một cái. Gợi ý của tôi là thay thế màu son lỗi thời của bạn bằng màu son mới hợp với mùa. Một đôi môi đỏ mọng sẽ rất gợi cảm và đã đến lúc để chuẩn bị cho đôi môi của bạn dành cho những nụ hôn.
Bước 4
Quay trở lại vấn đề, đã đến lúc để sắp xếp khung cảnh lãng mạn cho giường ngủ của bạn. Cất hết những bức ảnh gia đình và bạn bè trong phòng ngủ. Chuyển máy tính sang phòng khác. Bạn sẽ tạo ra một không gian lãng mạn và bỏ lại phòng họp phía sau. Thắp một vài ngọn nến, bật những bản nhạc thư thái và dùng một ít dầu mát xa. Không cần thiết phải dùng dầu Kama Sutra nếu bạn không có sẵn, dầu cho trẻ em cũng có tác dụng tốt. Cho phép chính mình có một buổi mát xa chân xứng đàng và cuộn mình với một cuốn tiểu thuyết lãng mạn.
Bước 5
Trong những tuần sau đó, hãy thay đổi nghi thức một cách nhẹ nhàng và nếu bạn có bồn tắm trong nhà thì hãy ngâm mình trong bồn tắm đầy bọt. Thắp nến và để âm nhạc dịu nhẹ làm nền. Mặc đồ lót gợi cảm sau đó và ngủ trong thế giới thần tiên. Bạn sẽ thức dậy mỗi sáng và cảm thấy mình quyến rũ hơn nhờ những điều đó.
Bây giờ, hãy ra ngoài và mỉm cười với mọi người bạn gặp. Đã đến lúc để luyện tập nghệ thuật thu hút. Tôi đã thử hấp dẫn từ năm lên 4 và nó không bao giờ lỗi thời. Bạn sẽ trở nên hạnh phúc hơn, tự tin hơn, dễ gần hơn và không có gì quyến rũ hơn một người phụ nữ tự tin thu hút những người đàn ông hoàn hảo. Bạn sẽ bước vào một căn phòng và mọi người sẽ phải phân vân hỏi bạn là ai.
Về phần cá nhân, tôi đã thực hành các bước này và tôi biết chúng có tác dụng. Chỉ đầu tư rất ít nhưng bạn sẽ nhận thấy một thay đổi lớn trong thái độ. Tôi không thể nói với bạn số lần tôi đã thấy tuyệt hơn khi đi ngủ với những ngọn nến lung linh, đọc một cuốn truyện lãng mạn và chìm vào giấc ngủ trong bộ áo lót ưa thích. Đã đến lúc bạn tự tạo nên một chính mình hấp dẫn hơn rồi.

Server: Apache/2.2.15 (CentOS)


markdown:
# Thiết kế hệ thống bãi giữ xe ô tô tự động
PHẦN I HỆ THỐNG BÃI GIỮ XE ÔTÔ TỰ ĐỘNG I.TÌM HIỂU VỀ BÃI GIỮ XE Ngày nay ở các trung tâm thành phố lớn với sự phát triển mật độ dân cư và xe cộ ngày càng đông đúc. Đặc biệt là sự gia tăng về số lượng xe ôtô ngày càng nhiều và điều này phần nào cũng phản ánh sự phát triển của một quốc gia. Song song với sự phát triển đó, người ta đặt vấn đề là xây dựng những bãi giữ xe để phục vụ cho người dân trong công việc cũng như trong việc đi lại của họ. Vì thế, ngày nay trên các nước tiên tiến trên thế giới như Nhật Bản, Hàn Quốc, ở những thành phố chật hẹp, người ta xây dựng hệ thống bãi giữ xe ôtô tự động được trang bị thiết bị nâng để di chuyển ôtô từ mặt đất lên điểm đỗ trên cao(hệ thống nổi hoặc di chuyển xe xuống điểm đỗ dưới lòng đất (hệ thống ngầm). Đây là những giải pháp giúp tăng hơn 100 lần số lượng xe trên một diện tích truyền thống, cho phép giải quyết trình trạng thiếu mặt bằng xây dựng. Một số mô hình bãi xe thực tế ở một số nước __________________________ __________________________________________________ ______________ __________________________________________________ ______________ __________________________________________________ ______________ (Tài liệu dài 124 trang)
![ pdf](/images/icons/pdf16x16.gif)
[lvcdongnoi](#)| Ngày: 04/06/2013 | Lượt xem: 313 | Lượt tải: 7 ![ download](/images/download.gif)
![ download](/images/download.gif)
**Thiết kế hệ thống bãi giữ xe ô tô tự động**, để xem tài liệu hoàn chỉnh bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
Các file đính kèm theo tài liệu này:
he_thong_bai_giu_xe_oto_tu_dong_4365.pdf


markdown:
TRANG CHỦ
|
PHẦN MỀM TKARAOKE
|
DIỄN ĐÀN
|
VƯỜN THƠ
|
THÊM BÀI HÁT
MENU
TRANG CHỦ
PHẦN MỀM TKARAOKE
DIỄN ĐÀN
VƯỜN THƠ
THÊM BÀI HÁT
WELCOME
Guest
Đăng nhập
Đăng ký
|
ĐĂNG NHẬP
|
ĐĂNG KÝ
ALL
TÊN BÀI
TÊN
LỜI BÀI HÁT
LỜI BÀI
LỜI
CA SỸ
C.SỸ
NHẠC SỸ
N.SỸ
ALBUM
Gõ Tiếng Việt
Hai Vi Sao Lac
Tac gia:
Anh Viet Thu
Lời nhạc
Nghe nhạc
Karaoke
Comment
Sua bai hat
Them vao danh sach yeu thich
Thong tin ve bai hat
In bai hat
Link bai hat vao form hoac blog
Chia se bai hat
×
Close
Bạn đang xem trang tiếng Việt không dấu!
Click vào link sau để xem trang tiếng Việt có dấu:
Hai Vì Sao Lạc
Nguoi ve, mot mua thu gio heo may
Ve dau co nho chang nhung vi sao long lanh
dua tien nguoi mot dem khong trang
Noi sao nen loi
long buon nhu chieu roi
Nhu trong dem khuya nhung buoc chan qua them
Goi niem thuong nho vo van
Nguoi ve, duong di ket gio trang sao
Nguoi di co biet chang trong chieu nay bo vo
Nghe la thu vang roi bang khuang
Buoc chan ai ve chung thoi gian ngung troi
Nhu quen dem khuya
de gio xuoi theo mau tham lam uot ao vai gay
Nguoi ve chieu mua hay nang
Sao de khoi lam chieu nhu se chung mau khong gian
Nguoi ve giong song thuong nho
de ben vang con do buon mong nguoi nguoi hay chang?
Nguoi la vi sao nho be
Ta mai uoc cho long lam bau troi xanh xanh
Nguoi ve long ta thuong nho
Ta khe hoi dua nguoi hay tham nguoi dua ta
Nguoi ve nguoi ve dau nho ta chang
Nguoi oi moi la thu roi lam ta bang khuang
Nhu ang may chieu lam trong suong
Buoc di am tham long buon nhu chieu roi
Nghe chang thu oi de la roi chi hoai
Goi long thuong nho ai nhieu...
Bài hát trong album
• Âm Nhạc Bất Tử
• Nhạc Xưa Và Nay
• mymusic
• Nốt Nhạc Xanh
• Tony - Nhạc vàng
• Hòa Tấu
• Đèn Khuya- Various
• Như Quỳnh Tuyển Chọn
• CS Hoàng Oanh
• Tình Cho không Biếu Không
Nghe nhac
Nghe tat ca 15 bai.
Previous
Next
DL
Link
Che Linh
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Thai Thao
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Ba Cheo
(Xả láng sáng dậy sớm XO dzô ! dzô !)
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Nguoi Hat Rong
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Giao Linh
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Hoang Oanh
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Nhu Quynh
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Thanh Lan
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Hoang Chau
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Kim Anh
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Ba Hieu
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Anh Tuyet
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Tuan Vu
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Vo Thuong
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
DL
Link
Ngoc Son
Update Required
To play the media you will need to either update your browser to a recent version or update your
Flash plugin
.
Chua co ca si ban yeu thich?
Yeu cau
Ban can nhac beat (karaoke)?
Vao forum
Muon dang nhac cua ban?
Dong gop mp3
Hat karaoke
Muon dang video cua ban?
Dong gop video
Ý KIẾN BÌNH LUẬN
Nguoi dang:
Loi Bai Hat (Lyric)
Nguoi sua:
beieu
Bai nay da duoc xem 16963 lan.
Hinh so:
1
|
2
|
3
|
4
MP3 MOI UPLOAD
Kiếm Hiệp Tình Duyên
Xin Làm Người Xa Lạ
Xin Làm Người Tình Cô Đơn
Nước Mắt Mẹ Hiền
Lại Một Lần Nữa
Lời Đắng Cho Cuộc Tình
Cõi Vắng
Tìm Em Trong Giấc Mơ
Tam Sinh Duyên
Bụi Phấn- Thu X32 Với Mic Tàu
BAI HAT XEM NHIEU
Tự Học Vọng Cổ Sáu Câu
Nhật Ký Của Mẹ
Ngỡ
Nơi Tình Yêu Bắt Đầu
Ru Con
Người Thầy
Ngày Xuân Long Phụng Sum Vầy
Điều Ước Giản Đơn
Đến Với Con Người Việt Nam Tôi
Nhớ Ơn Thầy Cô
Xem them
BAI HAT MOI DANG
Kiếm Hiệp Tình Duyên
Chúc Xuân
Tam Sinh Duyên
Tìm Em Trong Giấc Mơ
Nối Lại Tình Xưa
Lời Nói Dối Không Thật
Bụi Phấn- Thu X32 Với Mic Tàu
Em Không Quay Về
Ế....
Forever Alone
Xem them
ALBUM NGHE NHIEU
Nhạc sến Chế Linh tuyển chọn
Nhạc Trữ Tình Bất Tử
dan nguyen
Vọng Cổ Chọn Lọc
Nhạc Sến 1
Tiếng hát Anh Thơ
Vọng cổ hài Văn Hường
Ngọc Lan
The best of Đan Nguyên
Trần Thiện Thanh
Xem them
ALBUM MOI NHAT
Tu Cong Phung
Tình khúc Ngô Thụy Miên-Khánh Hà
Nhac Hoa tuyen chon
Nhớ ơn
Phan huynh Điểu
nhạc xưa
Như Ý Remix
Nhạc Hoàng Thi Thơ tuyển chọn
Nhật Ký Của Hai Đứa Mình
Hát ru con
Xem them
Copyright © 2008-2014 T Software Solutions LLC. All rights reserved
Advertising
|
Privacy Notice
|
Contact Us
Đóng
ĐĂNG NHẬP
Content HTML Load Here

Set-Cookie: RecentSongView=12681; path=/


markdown:
[Phim video clip](/) » [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) » Phim video clip [YAN STAR - Không ai khác ngoài bạn] STAY Crew on YanTV
## Video liên quan
[Yan Around - Season 2 - Tập 4 - Phần 1](/Entertainment/phim-video-clip-yan-around-season-2-tap-4-phan-1-id.dGh44qLvgIY.vgt)Người gửi: [Pháp Sư](/author/Ph%C3%A1p+S%C6%B0.vgt)Thời lượng: **7.50ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [YANTV - Ngoc Trai Funny Clip](/Entertainment/phim-video-clip-yantv-ngoc-trai-funny-clip-id.O_IXDyE0heY.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **2.17ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [[Hài] Hú Em Nếu Được - Call Me Maybe [ Parody ]](/People/phim-video-clip-hai-hu-em-neu-duoc-call-me-maybe-parody-id.I1ZwF1prTWI.vgt)Người gửi: [Bắt Sóng Cảm Xúc](/author/B%E1%BA%AFt+S%C3%B3ng+C%E1%BA%A3m+X%C3%BAc.vgt)Thời lượng: **4.00ph**Thể loại: [Con người](/category/People.vgt) [Xin lỗi anh yêu em - Minh Vương M4U](/People/phim-video-clip-xin-loi-anh-yeu-em-minh-vuong-m4u-id.C46n7rBDbcc.vgt)Người gửi: [phamha164](/author/phamha164.vgt)Thời lượng: **5.60ph**Thể loại: [Con người](/category/People.vgt) [YANTV_YAN STAR_Ngọc Trai và Chung Chí Công](/Entertainment/phim-video-clip-yantvyan-starngoc-trai-va-chung-chi-cong-id.SCfTikayJr0.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **7.48ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [BB&BG : Anh Không Đòi Quà [Bựa Version][Official]](/Comedy/phim-video-clip-bbbg-anh-khong-doi-qua-bua-versionofficial-id.kLr-VGfi6Pw.vgt)Người gửi: [bbtran21211](/author/bbtran21211.vgt)Thời lượng: **4.92ph**Thể loại: [Hài hước](/category/Comedy.vgt) [[YAN Chat] Đông Nhi "gài hàng" Quang Bảo khiến Ông Cao Thắng cười "lăn lộn"](/Entertainment/phim-video-clip-yan-chat-dong-nhi-gai-hang-quang-bao-khien-ong-cao-thang-cuoi-lan-lon-id.q1LgKpUt3eQ.vgt)Người gửi: [YAN News](/author/YAN+News.vgt)Thời lượng: **16.45ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [YANTV - Yan star 30.05](/Entertainment/phim-video-clip-yantv-yan-star-3005-id.s64ah3tah5c.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **9.32ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [What Makes You Beautiful - YAN Star Eps 16](/People/phim-video-clip-what-makes-you-beautiful-yan-star-eps-16-id.bGT_0k7Ahx8.vgt)Người gửi: [YAN Star YANTV](/author/YAN+Star+YANTV.vgt)Thời lượng: **1.12ph**Thể loại: [Con người](/category/People.vgt) [La La La cover (Minh Tiến - Tường Vy)](/Music/phim-video-clip-la-la-la-cover-minh-tien-tuong-vy-id.-RcPvjrS8VU.vgt)Người gửi: [Art Creative Team](/author/Art+Creative+Team.vgt)Thời lượng: **5.35ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [YanStar tập 29 - Clip Bạn Ơi](/Film/phim-video-clip-yanstar-tap-29-clip-ban-oi-id.Nn97byhAhAI.vgt)Người gửi: [Plus18Entertainment](/author/Plus18Entertainment.vgt)Thời lượng: **30.62ph**Thể loại: [Phim ảnh](/category/Film.vgt) [[cái ly hát] suy ngĩ trong anh](/Music/phim-video-clip-cai-ly-hat-suy-ngi-trong-anh-id.aqDS7ieDr-o.vgt)Người gửi: [MizzViie1](/author/MizzViie1.vgt)Thời lượng: **1.28ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [YAN Star - Parody Ngọc Trai nhại Hương Ngọc Lan & BB Trần Kiss Me](/Entertainment/phim-video-clip-yan-star-parody-ngoc-trai-nhai-huong-ngoc-lan-bb-tran-kiss-me-id.LVeGBAOm9A4.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **1.65ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [YAN Star - BB Trần & Ngọc Trai "song kiếm hợp bích"](/Entertainment/phim-video-clip-yan-star-bb-tran-ngoc-trai-song-kiem-hop-bich-id.jrgYGYKyhB0.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **0.62ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [Xin lỗi...anh chỉ là thằng bán bánh giò!!!](/Film/phim-video-clip-xin-loianh-chi-la-thang-ban-banh-gio-id.JHiNWkheC08.vgt)Người gửi: [Loc Pham](/author/Loc+Pham.vgt)Thời lượng: **25.72ph**Thể loại: [Phim ảnh](/category/Film.vgt) [SNSD I Got A Boy Dance mirror](/Music/phim-video-clip-snsd-i-got-a-boy-dance-mirror-id.QiqfV85up5o.vgt)Người gửi: [Diệp Zyn](/author/Di%E1%BB%87p+Zyn.vgt)Thời lượng: **5.18ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [[Vietsub] Sick Enough To Die - MC Mong feat. Mellow](/Music/phim-video-clip-vietsub-sick-enough-to-die-mc-mong-feat-mellow-id.QtLU5T4TQjQ.vgt)Người gửi: [zunglt04](/author/zunglt04.vgt)Thời lượng: **4.75ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [Yan - kiyomi ;))](/Film/phim-video-clip-yan-kiyomi-id.Mu80buURBX0.vgt)Người gửi: [Tôm Luộcc](/author/T%C3%B4m+Lu%E1%BB%99cc.vgt)Thời lượng: **1.92ph**Thể loại: [Phim ảnh](/category/Film.vgt) [YANTV - YANSTAR EPS 10](/Entertainment/phim-video-clip-yantv-yanstar-eps-10-id.A4w7a-56jtY.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **11.67ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [Gangnam Style (강남스타일) - PSY (싸이) Dance Cover by St.319 from Vietnam](/Entertainment/phim-video-clip-gangnam-style-psy-dance-cover-by-st319-from-vietnam-id.g2zb6_B0xZk.vgt)Người gửi: [St.319 Production Team](/author/St.319+Production+Team.vgt)Thời lượng: **9.23ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [Độc đáo MV tổng hợp các phiên bản Gangnam Style](/Entertainment/phim-video-clip-doc-dao-mv-tong-hop-cac-phien-ban-gangnam-style-id.qHnqKjq8U0M.vgt)Người gửi: [tao nguyen van](/author/tao+nguyen+van.vgt)Thời lượng: **4.38ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [9x Việt Nam nhảy nhạc Hàn cực đẹp (Cry Cry - T-Ara_Dance Cover by St.319 from Vietnam)](/Entertainment/phim-video-clip-9x-viet-nam-nhay-nhac-han-cuc-dep-cry-cry-taradance-cover-by-st319-from-vietnam-id.hOlNtd12EzY.vgt)Người gửi: [Nguyễn Hoàng Minh](/author/Nguy%E1%BB%85n+Ho%C3%A0ng+Minh.vgt)Thời lượng: **3.58ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [Bad boy chế cực hay_ ladykillah](/People/phim-video-clip-bad-boy-che-cuc-hay-ladykillah-id.liCHFY5s2mI.vgt)Người gửi: [Vu Aquarius](/author/Vu+Aquarius.vgt)Thời lượng: **3.97ph**Thể loại: [Con người](/category/People.vgt) [NEP lên sóng YAN TV](/Entertainment/phim-video-clip-nep-len-song-yan-tv-id.2QaEeprgre0.vgt)Người gửi: [NEP](/author/NEP.vgt)Thời lượng: **6.27ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [YANTV Special - Cùng Kim Bum khám phá Hàn Quốc (P1)](/Entertainment/phim-video-clip-yantv-special-cung-kim-bum-kham-pha-han-quoc-p1-id.WRS7LamuJeI.vgt)Người gửi: [puratinofred](/author/puratinofred.vgt)Thời lượng: **15.02ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [YANTV - YAN STAR 06.06.2013](/Entertainment/phim-video-clip-yantv-yan-star-06062013-id.cFy-HgAlTKA.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **11.42ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [Mùa thu vàng (Music Video version) - [H2T Hits_DVD_Hidden section]](/Music/phim-video-clip-mua-thu-vang-music-video-version-h2t-hitsdvdhidden-section-id.vkr46sbTub0.vgt)Người gửi: [Anh Trần](/author/Anh+Tr%E1%BA%A7n.vgt)Thời lượng: **6.25ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [Bài hát tiếng Anh buồn nhất và nhiều ý nghĩa.](/People/phim-video-clip-bai-hat-tieng-anh-buon-nhat-va-nhieu-y-nghia-id.DzxhNmMLrrM.vgt)Người gửi: [TuanDang0](/author/TuanDang0.vgt)Thời lượng: **3.23ph**Thể loại: [Con người](/category/People.vgt) [My My - W.H.A.D on YAN STAR 121004](/Music/phim-video-clip-my-my-whad-on-yan-star-121004-id.iMNwPUjXKhQ.vgt)Người gửi: [WHADband](/author/WHADband.vgt)Thời lượng: **4.60ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [Zero Varsity (nhạc nền Yan star - Không ai khác ngoài bạn)](/Music/phim-video-clip-zero-varsity-nhac-nen-yan-star-khong-ai-khac-ngoai-ban-id.tGy5mKvMhuE.vgt)Người gửi: [KiA Phạm](/author/KiA+Ph%E1%BA%A1m.vgt)Thời lượng: **3.20ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [Yan Star - khách mời Đông Nhi (11/6/2014)](/Music/phim-video-clip-yan-star-khach-moi-dong-nhi-1162014-id.WfjHWlMPhlk.vgt)Người gửi: [Tiểu Còi](/author/Ti%E1%BB%83u+C%C3%B2i.vgt)Thời lượng: **18.20ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [ENDO JIDAI (ENDO' GENERATION) / SNSD Dance Cover / 少女時代 PAPARAZZI](/Entertainment/phim-video-clip-endo-jidai-endo-generation-snsd-dance-cover-paparazzi-id.XYRMaGqv8x8.vgt)Người gửi: [Kasorn Waewjaiphet](/author/Kasorn+Waewjaiphet.vgt)Thời lượng: **3.45ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [YANTV - YAN Around Ep 1 - Sài Gòn thật lạ - part 1](/People/phim-video-clip-yantv-yan-around-ep-1-sai-gon-that-la-part-1-id.LCxtBBg8bq8.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **12.03ph**Thể loại: [Con người](/category/People.vgt) [YANTV - YAN Star trailer](/Entertainment/phim-video-clip-yantv-yan-star-trailer-id.0PFhtRxpU9E.vgt)Người gửi: [Yantv Jsc](/author/Yantv+Jsc.vgt)Thời lượng: **0.55ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [Beyoncé - "Run The World (Girls)" Dance Cover by Black Queen](/Entertainment/phim-video-clip-beyonce-run-the-world-girls-dance-cover-by-black-queen-id.d2n6WL0nD34.vgt)Người gửi: [asdfghelimar](/author/asdfghelimar.vgt)Thời lượng: **2.93ph**Thể loại: [Vui chơi](/category/Entertainment.vgt) [(Psy) Gangnam Style - Sungha Jung](/Music/phim-video-clip-psy-gangnam-style-sungha-jung-id.UmplmxwE2WM.vgt)Người gửi: [jwcfree](/author/jwcfree.vgt)Thời lượng: **2.92ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [38c-19 Vietnam Stars @ YAN TV Special - Idol Music Event p 2/5 (28 Aug 2011)](/Travel/phim-video-clip-38c19-vietnam-stars-yan-tv-special-idol-music-event-p-25-28-aug-2011-id.FAwoMvQHL_Q.vgt)Người gửi: [JRforDA2011](/author/JRforDA2011.vgt)Thời lượng: **8.78ph**Thể loại: [Du lịch](/category/Travel.vgt) [Girl's Generation - Mr. Mr. mirrored Dance Practice](/Music/phim-video-clip-girls-generation-mr-mr-mirrored-dance-practice-id.LPmOU7IqQb0.vgt)Người gửi: [Diệp Zyn](/author/Di%E1%BB%87p+Zyn.vgt)Thời lượng: **4.45ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [WYFF's on Yan Star!](/Music/phim-video-clip-wyffs-on-yan-star-id.owJyDfhWy2o.vgt)Người gửi: [Myri Jefin](/author/Myri+Jefin.vgt)Thời lượng: **3.43ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [AFTER SCHOOL RED FANCAM](/Music/phim-video-clip-after-school-red-fancam-id.OB70deZo7VA.vgt)Người gửi: [Diệp Zyn](/author/Di%E1%BB%87p+Zyn.vgt)Thời lượng: **3.13ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [Payphone (Acoustic Cover)](/Music/phim-video-clip-payphone-acoustic-cover-id.PcTxV49ZYCI.vgt)Người gửi: [Chloe Dinh](/author/Chloe+Dinh.vgt)Thời lượng: **3.10ph**Thể loại: [Âm nhạc](/category/Music.vgt) [không ai khác ngoài bạn](/People/phim-video-clip-khong-ai-khac-ngoai-ban-id.R--3FzbATYU.vgt)Người gửi: [hai luong](/author/hai+luong.vgt)Thời lượng: **2.90ph**Thể loại: [Con người](/category/People.vgt)

Full-Cache: Served supercache2 file from PHP FIRST


markdown:
**Di chuyển vị trí ảnh bìa**
sau đó hãy lưu lại thay đổi này
THÔNG TIN CƠ BẢN
Hồ Trâm
Nữ
27/4/1996
BẠN BÈ (527)
Hồ Trâm hâm mộ
Copyright © Zing
Đơn vị chủ quản: CÔNG TY CỔ PHẦN VNG
Địa chỉ: Lầu 10, tòa nhà Flemington, 182 Lê Đại Hành, P.15, Q.11, HCM
Điện thoại: 1900 561 558
Email: zingme@vng.com.vn
Giấy phép MXH số 01-GXN-TTDT


markdown:
## Nội dung phim hinh anh dung ha/ nói về hinh anh dung ha/, Xem phim hinh anh dung ha/ miễn phí chất lượng cao.
[Click để tìm trên Google nếu bạn không tìm thấy](https://www.google.com/search?sitesearch=mecuoi.com&as_q=hinh anh dung ha/)
### Dạy cách quan hệ khiến bạn tình phê liên tục :
### Cảnh Thiếu nữ uống phải thuốc kích dục :
Xem Video khác cho :
## "hinh anh dung ha/’"
Loading
Bạn có thể bấm nút
[để quay lại hoặc tìm trong những mục bên dưới:](javascript:history.back()) **« Back**
aaa

X-Powered-By: W3 Total Cache/0.9.3

X-W3TC-Minify: On

Vary: Accept-Encoding,User-Agent


markdown:
# Chào Xuân mới-
[Nguyễn Ngọc Anh](/tim-kiem/bai-hat.html?q=Nguy%E1%BB%85n+Ng%E1%BB%8Dc+Anh)
Sáng tác: Đang cập nhật
| Thể loại:
[Nhạc Trẻ](/the-loai-bai-hat/Nhac-Tre/IWZ9Z088.html), [Việt Nam](/the-loai-bai-hat/Viet-Nam/IWZ9Z08I.html)| Lượt nghe:
**Lời bài hát Chào Xuân mới**
Đêm nay , bao nhiêu , con tim thương yêu
Bên nhau, xua tan , quên đi những nỗi âu lo , những khó khăn , bao nhiêu ưu phiền
Khi xuân mơn man trên những cành mai
Khi mưa lăn tăn bay trên từng chiếc lá non xanh
Với ánh nắng xuân , với khúc giao mùa
Chào xuân mới . với biết bao những sắc màu
Chào xuân đến để sẻ chia những khát vọng
Đón những con tim , đón những quay về
Đón những giây phút bên gia đình sum họp
Đón những ngây ngô , đón những vội vàng
Đón những khoảnh khắc phút giao thừa yên bình
na na na na
Bài hát
[Chao Xuan moi](/tim-kiem/bai-hat.html?q=Chao+Xuan+moi) do nhạc sĩ [Đang cập nhật](/tim-kiem/bai-hat.html?q=%C4%90ang+c%E1%BA%ADp+nh%E1%BA%ADt&t=composer) sáng tác, trình bày bởi ca sĩ [Nguyen Ngoc Anh](/tim-kiem/bai-hat.html?q=Nguyen+Ngoc+Anh&t=artist) thuộc thể loại [Nhac Tre](/the-loai-bai-hat/Nhac-Tre/IWZ9Z088.html), [Viet Nam](/the-loai-bai-hat/Viet-Nam/IWZ9Z08I.html)
Bạn có thể cài đặt nhạc chờ (mạng mobifone, vinaphone, viettel), tải nhạc chuông, set nhạc nền Zing Me ca khúc
[Chao Xuan moi](/tim-kiem/bai-hat.html?q=Chao+Xuan+moi) - [Nguyen Ngoc Anh](/tim-kiem/bai-hat.html?q=Nguyen+Ngoc+Anh&t=artist) ngay trên Zing Mp3. Nâng cấp tài khoản lên Zing VIP để tải nhạc chất lượng cao, lossless.
[Xem toàn bộ]Đóng góp lời bài hát chính xác hơn [tại đây].
Bình luận
Chỉ chấp nhận bình luận bằng tiếng Việt có dấu, những bình luận sai
[qui định](http://mp3.zing.vn/huong-dan/Cong-dong/25.html) sẽ bị xóa.
Bình luận Nhấn Shift + Enter để xuống dòng. Bình luận phải dài hơn 50 ký tự. 0 ký tự

X-Cache: MISS from Cache-MP3-13