title: Conception, synthèse et études biologiques de nouveaux inhibiteurs saccharidiques du métabolisme bactérien. Chimie organique. Université montpellier II, 2006. Français. &#x27E8;NNT : 2006MON20143&#x27E9;. &#x27E8;tel-04485073&#x27E9;
text: #%+ >-, %+6 */% 5"/ 5 2X 8)"# D-I % */% 5"/ 5 2X 8)"# -I % */% 5"/ 5 *. #% + >-, % * % * -I 67% +-I + % +-I 6+%7 * + + * -I 6% * -I % * + : *A G K-, '> *L K MK% =* / ## 2 #-, ν & %ν +7 & % ν 66 &! $.5 % :
  
  01/ #
  
  285?2 
  
  ;
  
  0
  
  #V?#
  
  5"/ 5 "20
  
  "1 )0 I MeOOC MeOOC CHO * + O 68e 64e + OMe P OMe O - 6 +! "# " 'D,')2 ), = *
  
  . #%+ >-, % +% * % % -I %6 * % /% +-I +% + *+ % % + + -I % + *6 % + 2% % J %+ >% / 8 8" / " D -I % * % % 2% % + + / 8 8"/" D-I % * % % 2% % / 8 8"/" -I 6% * % % + *. # -, %+ */% 5"/ 5 2X 8)"# D-I %
  
  */% 5
  
  "/ 5
  
  2X 8)"# : *A G K-, '> + *L K MK% =* / ## 2 #-, ν & %ν +7 & % ν 7 6&! * 8 ', + # αβ 2 αβ 6" C H 6 +! "#. S :+ + 6! "# +7@ + θ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≈2 % * % /% /" "?# 2 ) -% % * % /% +-% % /" "?# 2 ) -% % + * % /% /" "?# 2 ) -% % 6 * % /% /" "?# 2 ) -% +%7 +% * % % %+ * % % +% % % -% % * % % +-% % *6 >%. # -, % I % * 7% 73-% + % I + %+ * 6% 63-% + %+ I +6%6 I +7% I +7% * /" "?# 2 ) -% +% * -% 67%7 * -% 77% I 7 % I % * +% % -% %7 I %+ * % -! +,* 1 /0!"!"!.7" O O + $! "# &'% () *, - O O O 69. )/ 0) 8 &"# 2 + 0) 230) 8$ 8 ) % % 2 +%
  
  2  "?# 2 ). 1)"/ 2 8 5?#2 5 "&8 # *+ % "#- /") 2 //"0/ 2 )/ 0) 8# ) 2 % 23&8 ") 7% 23 0* +' -! # 0 / "84 @ )2 ) )0 /% 4#3//0 2 /;0 ## / 6%6 2 *+%6 8;!6%6 2 #+ *+% 8;!- /") 9"08/ ) 0) / 0# $"/! # 0 / 8 5 0 / 4 @ % 0/ 5 0 4 @ % )$) 5 0 4 $#0(! / "0 4 8 0 1 ) %# # 0 / $# 8 /0 &8#! $# / #" / 8< " 8 /"0/ // ") 820! 8/ 20 "1 )0 / / <& + 2 # % 0/ # <8 $"/ < & 230) /"#0 ") / 0 8 2 T * 5 / " ) ;0 0 2 //0/<& 6 23 0! 5 / " ) ;0 / /8&58 /0 : % $# 8 8< " 8 /"0/ // ") 820! # "1 )0 / 0 $8 &5 " "$# /5% 4#3 2 230) 8#0 ) &'( ) *, -! ) &0 ## % 7 20 "20 $.6% )20 < & 0) )2 ) 2 6=! *+ >%. # -, % * % /% / " "?# 2 ) -% % 6 * % /% % * % /% / " "?# 2 ) -% % * % /% / " "?# 2 ) -% % % * % > I J* + - 6% >-% %77 * % 2% % J* % * % 2% +% J* + *6 >%. # -, + % I +6%+ I +6%7 I +6% * /" "?# 2 ) -% 66% * -% %+ * +-% % I % * 6% 7-% % * * / ## 2 #-, ν 7+6 &!,! # )*2.! 3 + $ 1 4! αβ 6!" /0!"!" / " "?# 2 ) -% % % % % -% % >+-% 76% I 77%7 * %!.7" 6 %! "# &'O O N ( ) *6, O O :"0/ >" % F 2. /" "?# ) * 8;!- ) /"#0 ") 2 )/ 2 A O /") 22 "))8/ # ) ) 4 @ /0 % 2 G0 * % 2 )/ #3 ( ) 72 O 8;!- ) /"#0 ") 2 )/ 2 A! # 0 8 & ")) # / ") 8 4 8 0 1 ) "0 + )0 / 0/ " 8 4 7 @ "0 #322 ") 230) /"#0 ") 2 6 6 20 5"/ 5")" &8 2 2 E ) 1$*5% * 8;!- 2 )/ 2 A! 8 & ") / &")/ <8 )0 / 4 7 @ 0/ ") 8 4 8 0 1 ) /# ) ) * 4 )0 /-! 6 2 $.6% *+% + "#- ) /"#0 ") 2 )/ 2 A /") #" / 9"08/ 2 )/ # # 0 8 & ")) #! / )0 / 4 8 0 1 ) % + 230) /"#0 ") ;0 0/ / 0 8 ) # /") 9"08/ 4 # 8 & ")! 8# ) / ( $"/ + 2 # # 5 / " ) ;0 + + /8&58 /0 : 8< " 8! % 2 "20 1 0 /") 0 $8/ /0 &"#")) 2 # 2 / # & 8#08 0) 8# ) &'( ) *6, -! ) &0 ## 7 20 8# ) 2 / 2 0("#8$) / *D- $0 % * 7=- * - $0 % * =- < & 0) )2 ) #"1 # 2 =! *D- $0 % *+ >%. # -, % 7 * % /% /" "?# 2 ) -% % * % /% /" "?# 2 ) -% % 7 * % /% %6 * % /% -% % % * % % % 6% 7-% % * * % % +- /" "?# 2 ) -% % * % /% /" "?# 2 ) -% %+ * % /% -% % #% -% 6% 7 * % 22% -% 6% 6% + 6 7 % * *6 -% %+ * >% -%. # -, + % I +6%7 I +6% I +7% * /" "?# 2 ) -% 6 %6 * 7-% 7+% * 6-% % * /" "?# 2 ) -% %+ *2% +-% % * -% +% * - *+ >%. !5 6" αβ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
  
  / ## 2 #-, ν 7+ & % ν 6 &!,)'# EtO O EtO P O αβ EtO H EtO O O O 74 # O O 6" P O O % 6!" H O 75 O O O 7 ++! "#! "#. )/ 0) 8 &"# $ ) / & /"0/ >" % % 8;! *! "# - 2 0 8 # 1# ) /8&58/ /") / ) /0/ )/ ") 2 )/ 2 A )5?2 4 @! % 8;! 2 * %6 2 )/ #38 5 - /") 22 ")8/ 4 # /0/ )/ ") "0 4 "0! % 8;! 2 * 7! "# 2 %! - /") )/0 9"08/ /0</ 2 % 8;! 2. G * % 2 )/ # "#0 ) -! # 0 8 & ")) # / ) )0 4 @ )2 ) )0 / < ) 239"0 % "# 23#285?2 α β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tO P O EtO + $ %6! "# &8 ")'*, - O P OEt O OEt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
  
  -221- PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS DEUXIEME PARTIE Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie -222- Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS I - Synthèse du phosphate d’énol VI I.1. Monophosphorylation de l’hexanediol C10H23O5P MM = 254 g.mol-1 Rf = 0,60 - Acétone / EtOH (9 : 1) O O O P O OH 76
  
  Dans un ballon muni d’une garde à chlorure, on met en réaction 1 g d’hexanediol (8,47 mmol), 1,22 mL de diéthylchlorophosphate (1 éq.) et 500 mg de DMAP (0,5 éq.) dans 25 mL de pyridine pour 24 heures. Le milieu réactionnel est concentré, repris au CH2Cl2 puis lavé par une solution aqueuse d’HCl (1M). La phase organique est séchée sur MgSO4 puis évaporée. Le brut réactionnel est purifié sur colonne de gel de silice éluée avec un mélange Acétone / EtOH (9 : 1). On recueille 555 mg du produit (76) pur avec un rendement de 26%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : 1,34 (6H, t, CH3), 1,36-1,76 (8H, m, CH2-CH2), 3,64 (2H, t, CH2-OH), 4,04 (2H, q, CH2-CH2-O-P), 4,11 (4H, qd, CH3-CH2) RMN 13C (101 MHz, CDC l3) : 16,1 (d, CH3-CH2), 25,0 ; 25,1 ; 30,1 ; 30,2 (CH2), 62,6 (CH2-OH), 63,7 (d, CH3-CH2-O-P), 67,4 (d, CH2-CH2-O-P) RMN 31P (400 MHz, CDCl3) : -0,69 (s). I.2. Oxydation de l’alcool primaire de
  
  (76) C10H21O5P MM = 252 g.mol-1 Rf = 0,60 
  
  - Ac
  
  étone
  
  O O O P O O
  
  77
  
  Dans un ballon sous azote et à -55°C, 320 μL de chlorure d’oxalyle (1,7 éq.) sont mis en solution dans 5 mL de CH2Cl2. On ajoute goutte à goutte 337 μL de DMSO (2,2 éq.) dilués dans 1,0 mL de CH2Cl2 et 5 minutes après, 550 mg de (76) en solution dans 2,5 mL de CH2Cl2. La réaction est conservée 20 minutes à -55°C avant de remonter à -30°C pour ajouter 1,55 mL de Et3N (5 éq.). On remonte à température ambiante pour 2 heures. On ajoute 4 mL d’eau. Les phases sont décantées, séparées et la phase aqueuse est extraite deux fois par du CH2Cl2. Les phases organiques rassemblées sont lavées successivement par des solutions aqueuses de HCl (1N) et NaHCO3 (5%) puis séchées sur Na2SO4, filtrées et concentrées. Le brut réactionnel est purifié par une colonne sur gel de silice éluée à l’acétone. On recueille 325 mg du produit (77) pur attendu avec un rendement de 60%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : 1,35 (6H, t, CH3), 1,38-1,78 (6H, m, CH2-CH2), 2,47 (2H, dt, CH2-CHO), 4,04 (2H, q, CH2-CH2-O-P), 4,11 (4H, qd, CH3-CH2), 9,78 (1H, t, CHO) RMN 31P (400 MHz, CDCl3) : -0,71 (s). -223- PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS I.3. Préparation du phosphate d’énol VI I.3.1. Iodation de l’aldéhyde (77) O O O P O C10H20IO5P MM = 372 g.mol-1 78 O I
  
  Dans un ballon muni d’une garde à chlorure et à l’abri de la lumière sont mis en réaction 300 mg d’aldéhyde (77) (1,19 mmol), 485 mg de chlorure de mercure (1,5 éq.) ainsi que 286 mg de diiode (1 éq.) dans 4 mL de CH2Cl2. La suspension est agitée 4 heures à température ambiante puis filtrée. Le filtrat est lavé par une solution aqueuse de Na2S2O3 (0,1N) fraîchement préparée puis de KI (sat.). La phase organique est séchée sur Na2SO4 puis évaporée. On recueille 355 mg de produit (78) brut avec 80% de rendement. Il est utilisé brut pour la réaction de Perkow.
  
  I.3.2. Réaction de Perkow sur l’aldéhyde α-iodé (78) C12H26O8P2 MM = 360 g.mol-1 O O O P O VI O P O O O
  
  Dans un ballon muni d’une garde à chlorure et à 0°C sont additionnés 200 μL de triméthylphosphite (1 éq.) sur l’aldéhyde (78) α-iodé obtenu précédemment. Le mélange réactionnel est laissé remonter à température ambiante pour une nuit. La réaction est évaporée sous vide poussé et l’on recueille 340 mg du phosphate d’énol (VI) attendu avec un bon degré de pureté et un rendement quantitatif. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : 1,35 (6H, t, CH3), 1,42-1,78 (4H, m, CH2-CH2), 2,01 (0,56H, dt~q, CH2-CH (E)), 2,19 (0,44H, dt~q, CH2-CH (Z)), 3,82 (3,36H, d, Me-O-P (E)), 3,83 (2,64H, d, Me-O-P (Z)), 4,05 (2H, q, CH2-CH2-O-P), 4,12 (4H, qd, CH3-CH2), 4,87 (0,44H, ddt, CH-O-P (Z)), 5,45 (0,56H, ddt, CH-O-P (E)), 6,41 (1H, m, CH2-CH (E+Z)) RMN 13C (101 MHz, CDCl3) : 16,1 (d, CH3-CH2), 23,2 (s, CH2-CH (Z)), 24,9 (s, CH2), 25,3 (s, CH2-CH (E)), 26,4 (s, CH2), 54,7 (d, Me-O-P), 63,7 (d, CH3-CH2-O-P), 62,7 (d, CH2-CH2-O-P), 115,3 (d, CH-O (Z)), 116,7 (d, CH-O (E)), 135,1 (d, CH2-CH (Z)), 136,1 (d, CH2-CH (E)) RMN 31P (400 MHz, CDCl3) : -0,70 (s, phosphate), -1,93 (s, phosphate d’énol (E)), -2,38 (s, phosphate d’énol (Z)).
  
  II - Synthèse des hexane-1,6-diphosphates VII et VII’ II.1. Synthèse de l’hexane-1,6-diphosphate
  
  VII C14H32O8P2 MM = 390 g.mol-1 Rf = 0,7 - Acétone / EtOH (9 : 1) O O O P O VII
  
  O
  
  P O
  
  O O
  
  Dans un ballon muni d’une garde à chlorure, 1 g d’hexanediol (8,47 mmol) et 100 mg de DMAP (0,1 éq.) sont mis suspension dans 25 mL de pyridine. 4,4 mL de chlorophosphate de diéthyle (4 éq.) sont additionnés goutte à goutte et la réaction est abandonnée à température ambiante pendant 24 heures. La pyridine est évaporée sous vide poussé et le résidu obtenu est purifié sur PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie -224- Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS colonne de gel de silice éluée par un mélange Acétone / EtOH (9 : 1). 3,00 g du produit VII pur sont obtenus avec un rendement de 91%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : 1,38 (12H, t, CH3), 1,32-1,93 (8H, m, CH2-CH2), 4,04 (4H, q, CH2-CH2-O), 4,11 (8H, qd, CH3-CH2) RMN 31P (400 MHz, CDCl3) : -0,68 (s). II.2. Synthèse de l’hexane-1,6- diphosphate
  
  VII’ C14H32O8P2 MM = 278 g.mol-1 HO HO P O O P OH O OH O VII' Dans un ballon sous azote à 0°C, 1 g d’hexanediol (8,47 mmol) est additionné sur 1,6 mL de POCl3 (2 éq.). Après 4 heures à 0°C, la réaction est abandonnée une nuit à température ambiante. Le brut obtenu est dilué dans 4,2 mL d’acétonitrile placé à 0°C et 6 g d’AgNO3 (4 éq.) en suspension dans un mélange eau / Acétonitrile (1 : 1) sont ajoutés. Après 6 heures d’agitation, la réaction est placée une nuit au congélateur afin de précipiter les sels de NaCl formée. Après filtration de ces sels, le filtrat est concentré puis repris dans 5 mL d’éthanol afin de terminer la précipitation. Après filtration et évaporation, on recueille 1,86 g du produit (VII’) attendu avec un bon degré de pureté et un rendement de 76%. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) : 1,32-1,93 (8H, m, CH2-CH2), 3,93-4,08 (4H, m, CH2-O) RMN 31P (400 MHz, CDCl3) : 0,48 (bs).
  
  III - Synthèse de l’hydroxyphosphonate VIII III.1. Synthèse de l’ester glycidique α-chloré d’isopropyle (83) C14H21O7Cl MM = 365 g.mol-1 Rf = 0,20 - AcOEt / Hexane (1 : 2) Rapp. diast. = 65/35 8 O Cl O 1 2 9 O O 3 4
  
  Dans un tétracol de 250 mL sous aller-retour d’azote, muni d’une ampoule à 5 O introduction et d’un thermomètre, 1,6 mL d’iPrOH anhydre
  
  sont introduits. 6 O 83 7 O 254 mg de K (3 éq.) sont alors ajoutés. Après dissolution du K, 4,4 mL d’éther sont introduits. Le milieu est alors refroidi à 0°C. Un mélange contenant 500 mg de (69) (2,2 mmol - préparation en Première Partie IV.5.2.) et 1,12 g de CHCl2COOiPr (3 éq.) dans 6,0 mL d’éther est introduit goutte à goutte (~ 1goutte / 2 sec). Après 60 minutes d’agitation à 0°C, le milieu est neutralisé avec une solution d’HCl dans l’éther, puis centrifugé. Le surnageant est évaporé sous pression réduite. Le gel obtenu est alors purifié par chromatoflash avec un éluant AcOEt / Hexane (1 : 9) (permet de retirer CHCl2COOiPr), puis AcOEt / Hexane (1 : 1). On recueille 715 mg de deux diastéréoisomères (83) avec un rendement de 89 % dans un rapport 65 / 35.
  
  -225- PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS (83) Majoritaire : RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) δ : 1,28-1,52 (18H, m, H isopropylidène et H9), 3,50 (0,65H, d, H3M, 3 J(H3M-H4M) = 8,0 Hz), 3,80-4,30 (5H, m, H4, H5, H6, H7,), 5,10 (0,65H, h, H8M, 3J(H8-H9) = 7,0 Hz) ; RMN 13C (CDCl3, 63 MHz) δ : 21,5 (C9), 25,1, 26,7, 27,1, 27,2 (isopropylidène), 61,9 (C3), 67,2 (C7), 71,9 (C8), 75,6 (C2), 75,8 (C5), 77,7 (C6), 79,4 (C4), 109,7,
  
  1 (C10, C11), 163,9 (C1). (83) minoritaire : RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) δ : 1,28-1,52 (18H, m, H isopropylidène et H9), 3,49 (0,35H, d, H3m, 3 J(H3m-H4m) = 8,0 Hz), 3,80-4,30 (5H, m, H4, H5, H6, H7,), 5,10 (0,35H, h, H8m, 3J(H8-H9) = 7,0 Hz) ; RMN 13C (CDCl3, 63 MHz) δ : 21,5 (C9), 25,3, 26,6, 26,9, 27,1 (isopropylidène), 61,3 (C3), 66,2 (C7), 72,1 (C8), 75,5 (C2), 75,8 (C5), 77,7 (C6), 80,3 (C4), 109,9, 111,2 (C10, C11), 163,9 (C1). IR (pastille de NaCl) : νC=O = 1747 cm-1 ; MS (FAB +) : m/z 365 (M+, 100%), m/z 387 ([M + Na]+, 100%).
  
  III.2. Synthèse de l’α α-cétoester d’isopropyle (82) III.2.1. Préparation du diiodure de magnésium
  
  Dans un tétracol de 250 mL sous aller-retour d’azote muni d’un réfrigérant, sont successivement introduits : 493 mg de magnésium en poudre (2 éq., 20,3 mmol), 64,5 mL d’éther, 5,15 g de diiode (2 éq.). Le mélange est porté à reflux pendant 3 heures à l’abri de la lumière (la solution initialement brune est devenue incolore), à la suite de quoi il est ramené à la température ambiante. III.2.2. Addition du diiodure de magnésium sur l’ester glucidique α-chloré (82)
  
  C16H26O7 MM = 330 g.mol-1 Rf = 0,36
  
  -
  
  AcOEt / Hexane (1 : 4) 9 8 O O O 1 2 3 CH2 Dans un second tétracol de 500 mL sous aller-retour d’azote muni d’une 4 O ampoule à introduction, 3,70 g de (83) (10,15 mmol) sont dissous dans un 5 O mélange de 104 mL de toluène et 25 mL d’éther, puis refroidi à -60°C. La 6 O solution de diiodure de magnésium, préalablement diluée avec 10 mL d’éther, est 82 7 O transférée dans l’ampoule à introduction à l’aide d’une seringue en verre munie d’une aiguille de gros diamètre. Le ballon est rincé avec à nouveau 10 mL d’éther, que l’on transfère dans l’ampoule à introduction. La solution est introduite goutte à goutte après quoi le milieu est remonté en température jusqu’à -30°C. Au bout de 110 minutes, le suivi par ccm montre que la réaction est terminée. Le milieu est alors hydrolysé avec une solution aqueuse fraîchement préparée de 59 g de pyrosulfite de sodium (Na2S2O5, 30,5 éq.) dans 138 mL d’eau et laissé sous agitation durant 45 minutes. Une fois les phases séparées, la phase aqueuse est réextraite 3 fois avec 115 mL d’éther. Les phases organiques rassemblées sont séchées sur Na2SO4 puis filtrées sur fritté et les solvants du filtrat sont évaporés sous pression réduite. Le gel obtenu est purifié par chromatoflash sur silice à l’aide d’un éluant AcOEt / Hexane (1 : 4). On recu 2,89 g de (82) avec un rendement de 86 %. PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie -226- Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) δ : 1,32-1,39 (18H, m, H isopropylidène et H9), 3,16 (1H, dd, H3’,3J(H3’-H3) = 17,0 Hz, 3J(H3-H4) = 8,0 Hz), 3,25 (1H, dd, H3, 3J(H3-H3’) = 17,0 Hz, 3 J(H3-H4) = 4,0 Hz), 3,60 (1H, t like, H5, 3J(H5-H4) = 3J(H5-H6) = 8,0 Hz), 3,94 (1H, dd, H7, 3 J(H7-H7’) = 8,0 Hz, 3J(H7-H6) = 4,0 Hz), 4,05 (1H, m, H6), 3,94 (1H, dd, H7’, 3J(H7’-H7) = 8,0 Hz, 3 J(H7’-H6) = 6,0 Hz), 4,42 (1
  
  H
  
  ,
  
  ddd≈sext
  
  .,
  
  H
  
  4, 3J(H4-H3’) = 3J(H4-H5) =
  
  8,0
  
  Hz, 3J(H4-H3) 
  
  = 4,0
  
  
  
  Hz), 5,15 (1H
  
  ,
  
  h
  
  ,
  
  H8, 3J
  
  (
  
  H
  
  8-
  
  H9) = 6,0 Hz) ; RM
  
  N
  
  13C (CDCl3, 63 MHz) δ : 21,5 (C9), 25,2, 26,6, 26,8, 27,0 (isopropylidène), 42,8 (C3), 67,8 (C7), 70,7 (C8), 75,6, 76,8 (C5, C6), 80,7 (C4), 109,7, 109,8 (C9, C10), 160,3 (C1), 191,6 (C2) ; IR (pastille de NaCl) : νC=O = 1721 cm-1 ; MS (FAB +) : m/z 331 (M+, 56%), m/z 315 ([M - Me]+, 100%) ; MS FAB -) : m/z 353 ([M + Na]+, 100%). III.3. Synthèse de l’α α-hydroxy-β β-phosphonoester (81) III.3.1. Préparation du carbanion α-lithiométhylphosphonate de diéthyle (85)
  
  Dans un tétracol de 50 mL sous aller-retour d’azote, équipé d’une agitation mécanique, d’une ampoule à introduction, et d’un thermomètre basse température, 8,0 mL de THF anhydre sont introduits. Celui-ci est refroidi à l’aide d’un Dewar d’azote liquide, jusqu’à -65°C. 1,5 mL d’une solution de n-butyl lithium (1,05 éq., 1,6M dans l’hexane) sont ajoutés. 347 mg de méthylphosphonate de diéthyle (2,3 mmol) dilués dans 2,0 mL de THF sont additionnés goutte à goutte par l’ampoule à introduction (rincée ensuite par 6,0 mL de THF). La solution est agitée pendant 30 minutes à -65°C à l’issue desquelles le carbanion est prêt et refroidi à -78°C. III.3.2. Introduction du carbanion (85) sur l’α-cétoester d’isopropyle (82) C21H39O10
  
  P 13 14 8 9 M = 483 g.mol-1 H3CH2CO 12 OH CHMe CO 2 2 H CH CO P 3 2 Rf = 0,10 - AcOEt / Hexane (1 : 1) 2 1 O 3CH2 O 11 4 5O 6 O 81 7 O 10
  
  Dans un tétracol de 100 mL sous aller-retour d’azote, équipé d’une agitation mécanique, d’une ampoule à introduction (calorifugée avec de la laine de verre) et d’un thermomètre basse température, 760 mg de (82) (2,3 mmol) sont dissous dans 10 mL de THF puis refroidis à -78°C. A l’aide d’un tuyau de transfert en Teflon, le carbanion (85) précédemment préparé est transféré vers l’ampoule à introduction (par surpression d’azote au niveau du premier tétracol) et ajouté avec un goutte à goutte rapide. Le premier tétracol est rincé 3 fois avec 2,0 mL de THF. Au bout de 60 minutes d’agitation, le milieu est lentement (en 15 minutes) remonté en température jusqu’à -20°C où il est neutralisé à l’aide d’une solution d’HCl dans l’éther. La solution est alors hydrolysée par 10 mL d’eau. Après une première séparation des phases, la phase aqueuse est réextraite trois fois avec 10 mL d’éther. Les phases organiques rassemblées sont séchées sur Na2SO4 et évaporées sous pression réduite. Le gel brut est ensuite purifié par chromatographie sur silice, à l’aide d’un éluant AcOEt / Hexane (1 : 1). On recueille 754 mg du produit (81) attendu avec un rendement de 68 % et un rapport diastéréoisomérique de -227- PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS laine de verre siphonage sous pression d' azote -78°C (EtO)2P(O)CH2Li (85) /THF -78°C α-cétoester (82) /THF azote liquide Ballon 2 Ballon 1 RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) δ : 1,26-1,41 (24H, m, H isopropylidène, H9, H9’, H14, H14’), 1,90-2,60 (4H, m, H3, H3
  
  ’
  
  , H12, H12’),
  
  3,5
  
  2 (1H, m, H5), 4,10-4,30 (8H, m, H4, H6, H7, H13, H13
  
  ’
  
  ), 5,09 (1H, m, H8) ; IR (
  
  pastille
  
  de NaCl) :
  
  ν
  
  C=
  
  O
  
  
  
  =
  
  1726
  
  cm-1
  
  ; MS (
  
  FAB
  
  +
  
  ) : m
  
  /z 483
  
  (M
  
  +, 100%
  
  ). 
  
  (81) Majoritaire : RMN 31P (CDCl3, 101 MHz) δ : 24,08 (s) ; RMN 13C (CDCl3, 63 MHz) δ : 16,1 (d, C14, C14’, 3 J(C14-P) = 16,0 Hz), 21,4, 21,5 (C9, C9’), 26,3, 26,5, 26,6, 26,7 (isopropylidène), 36,5 (d, C12, 1 J(C12-P) = 140,0 Hz), 44,1 (d, C3, 3J(C3-P) = 15,0 Hz
  
  ),
  
  61,4 (m
  
  ,
  
  C
  
  13, C13’), 67,4 (C7), 69,8 (C8), 72,6 (d, C2, 2J(C2-P) = 6,0 Hz), 75,2, 76,6 (C5, C6), 80,8 (C4), 109,4, 109,0 (C10, C11), 173,4 (d, C1, 3 J(C1-P) = 5,0 Hz). (81) minoritaire : RMN 31P (CDCl3, 101
  
  ) δ : 24,57 (s) ; RMN 13C (CDCl3, 63 MHz) δ : 16,1 (d, C14, C14’, 3 J(C14-P) = 16,0 Hz), 21,4, 21,5 (C9, C9’), 26,3, 26,5, 26,6, 26,7 (isopropylidène), 35,1 (d, C12, 1 J(C12-P) = 140,0 Hz), 43,1 (d, C3, 3J(C3-P) = 15,0 Hz), 61,4 (m, C13, C13’), 67,5 (C7), 69,3 (C8), 74,1 (d, C2, 2J(C2-P) = 6,0 Hz), 75,2, 76,6 (C5, C6), 81,1 (C4), 109,6, 109,4 (C10, C11), 173,5 (d, C1, 3 J(C1-P) = 5,0 Hz). III.4. Déblocage de l’hydroxyphosphonate (81) C12H25O10P MM 
  
  =
  
  360
  
  g.mol
  
  -1
  
  10 9 1
  
  H
  
  3CH
  
  2CO CO2H H3CH2CO P
  
  8 OH 2 O CH
  
  2 Dans un monocol de 50 mL muni d’un Y, sous aller-retour d’azote, 3 HO 4 275 mg de (81) (0,57 mmol) dissous dans 5,0 mL de MeOH sont 5 OH introduits sur une solution de 11 mL de MeOH et 36 μL de Me3SiBr 6 OH He 7 (0,5 éq., 153,1 g.mol-1, 1,183 g.mL-1) ayant préalablement été agitée OH pendant 1 heures. Le milieu est laissé sous agitation à température ambiante pendant 15 heures. Les solvants sont évaporés sous pression réduite, puis le milieu est successivement co-évaporé avec : 10 mL de CH2Cl2, 10 mL d’acétone, et 10 mL d’éther. On recueille 200 mg de He avec un rendement quasi-quantitatif.   ième Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) δ : 1,20-1,40 (6H, m, H10, H10’), 2,30-3,00 (4H, m, H3, H8), 3,90-4,20 (8H, m, H5, H6, H7, H9, H9’), 4,80-4,90 (1H, m, H4) ; RMN 31P (CDCl3, 101 MHz) δ : 28,61 (s, 42%), 29,63 (s, 58%). He Majoritaire : RMN 13C (CDCl3, 63 MHz) δ : 16,5 (C10, C10’), 32,9 (d, C8, 1J(C8-P) = 141,0 Hz), 37,6 (C3), 62,2 (d, C9, C9’, 2J(C9-P) = 6,0 Hz), 64,3 (C7), 71,7, 72,2 (C5 C6), 73,5 (d, C2, 2J(C2-P) = 3,0 Hz), 77,5 (C4), 177,0 (d, C1, 3J(C1-P) = 15,0 Hz). He minoritaire : RMN 13C (CDCl3, 63 MHz) δ : 16,5 (C10, C10’), 33,0 (d, C8, 1J(C8-P) = 140,0 Hz), 37,5 (C3), 62,2 (d, C9, C9’, 2J(C9-P) = 6,0 Hz), 64,3 (C7), 71,1, 73,0 (C5, C6), 72,4 (d, C2, 2J(C2-P) = 3,0 Hz), 76,1 (C4), 176,2 (d, C1, 3J(C1-P) = 16,0 Hz). III.5. Monophosphorylation de He C16H34O13P2
  
  MM = 496 g.mol-1 O 1 CO2H EtO P 8 OH EtO 2 CH 2 3 HO 4 OH 5 6 OH 11 12 OEt VIII 7 O P OEt 10 9
  
  Dans un ballon muni d’une garde à chlorure, 150 mg de He (0,42 mmol) sont placés en réaction avec 101 mg de DMAP (2 éq.) et 120 μL de chlorophosphate de diéthyle (2 éq.) dans 4 mL de pyridine. Après 48 heures à température ambiante, le milieu est évaporé sous O vide poussé. La pâte obtenue est lavée trois fois par 10 mL d’éther afin de retirer l’excès de chlorophosphate et la pyridine résuduelle. Le brut obtenu est sommairement purifié sur colonne (dans une pipette pasteur) de gel de silice, éluée par un mélange CH2Cl2 / EtOH (8 : 2), qui permet d’obtenir le produit VIII désiré avec un bon degré de pureté et un rendement de 36%. RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) δ : 1,20-1,40 (12H, m, H10, H10’, H12, H12’), 2,30-3,00 (4H, m, H3, H8), 3,90-4,20 (12H, m, H5, H6, H7, H9, H9’, H11, H11’), 4,80-4,90 (1H, m, H4) ; RMN 31P (CDCl3, 101 MHz) δ : -0,97 (s, phosphate minoritaire - 42%), -0,33 (s, phosphate Majoritaire - 58%), 26,32 (s, phosphonate minoritaire - 42%), 27,18 (s, phosphonate Majoritaire 58%). IV - Synthèse du phosphoénolpyruvate IX IV.1. Synthèse de l’α α-cétoester-β β-iodé (86) C16H25IO7 MM = 456 g.mol-1
  
  Dans un tétracol de 100 mL sous azote, équipé d’un réfrigérant, 54 mg de magnésium en poudre (1,3 éq., 2,2 mmol), 15,0 mL d’éther et 567 mg de diiode (1,3 éq.) sont introduits. Le mélange est porté à reflux sous agitation pendant 3 heures à l’abri de la lumière (la solution initialement brune est devenue incolore). 621 mg d’ester glycidique α-chloré (83) (1,7 mmol) dissous dans 8 O 9 1 O O 2 HC I 3 O 4 5 O 6 O 86
  
  7 O
  
  -
  
  229
  
  -
  
  PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie Synthèse d’inhibiteurs
  
  de
  
  la
  
  
  
  DAH7
  
  PS 8,9 mL d’éther, sont alors ajouté goutte à goutte. La solution est mise à reflux pendant 2 heures. Le milieu est hydrolysé avec 10 mL d’eau, à la suite de quoi les deux phases sont séparées. La phase aqueuse est réextraite trois fois avec 10 mL d’éther. Les phases organiques rassemblées sont séchées sur MgSO4, filtrées et évaporées sous pression réduite. (86) est alors rapidement engagé en réaction de Perkow. IV.2. Synthèse du
  
  phospho
  
  én
  
  olpyruvate (87) par la réaction de Perkow C18H31O10P4 MM = 438 g.mol-1 8 O O P O O 2 O 1 9 O 3 235 mg de triméthylphosphite (1,1 éq., 124,0 g.mol-1, 1,052 g.mL-1) O 4 dissous dans 4,1 mL d’éther sont ajoutés sur (86). Après 15 minutes 5 O d’agitation à température ambiante, les solvants sont évaporés sous 6 O 87 pression réduite. Le résidu est alors purifié par chromatoflash, avec un 7 O éluant AcOEt / Hexane (1 : 3), puis AcOEt / Hexane (1 : 1). On recueille les deux stéréoisomères attendus avec un rendement de 44% depuis le composé (83) dans les proportions Z / E suivantes : 85% / 15%. RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) : 1,30, 1,31, 1,32, 1,41, 1,43 (18H, 5s, isopropylidène ; isopropyl), 3,71 (5,1H, d, H8 (Z), 3J(H8-P) = 11,5 Hz), 3,88 (0,9H, d, H8 (E), 3J(H8-P) = 11,5 Hz), 3,78-4,16 (4H, m, H5, H6, H7), 4,75 (1H, dd~t, H4), 5,06 (1H, dq, H9), 6,26 (0,85H, dd, H3 (Z), 4J(H3Z-P) = 2,5 Hz ; 3J(H3Z-H4) = 9,0 Hz ), 6,37 (0,15H, dd, H3 (E), 4J(H3E-P) = 1,6 Hz ; 3J(H3E-H4) = 9,0 Hz ) ; RMN 31P (CDCl3, 101 MHz) : -4,39 (s, phosphate (E)), -4,02 (s, phosphate (Z)) ; RMN 13C (63 MHz, CDCl3) : 18,4 (isopropyl (E)), 22,0 (isopropyl (Z)), 24,8 ; 26,1 ; 26,6 ; 26,7 (isopropylidène), 54,9 ; 55,0 (C8 ; C8’), 64,9 (C7), 66,7 ; 70,4 ; 73,3 ; 74,6 (C4, C5, C6, C9), 128,0 (C3 (E)), 128,1 (C3 (Z)), 140,9 (C1), 164,3 (C2) ; IR (pastille de NaCl) : νC=C = 1668 cm-1, νC=O = 1743 cm-1. IV.3. Déblocage du phosphoénolpyruvate (87) C10H19O10P MM = 330 g.mol-1 O HO P O HO O O HO IV.3.1. Utilisation du tandem silylation-hydrolyse OH
  
  Dans un monocol de 25 mL muni d’un Y et d’un réfrigérant, sous allerOH Pe retour d’azote, 174 mg de (87) (0,39 mmol) dissous dans 7,8 mL de OH (CHCl)2 y sont introduits. 130 mg de Me3SiBr (2,2 éq., 153,1 g.mol-1, 1,183 g.mL-1) sont alors introduits à la seringue. Après 4 heures d’agitation à température ambiante, les solvants sont évaporés sous pression réduite et 4 mL d’eau sont introduits. Après 4 heures d’agitation à température ambiante, le milieu est alors congelé puis lyophilisé. Afin de compléter cette déprotection, nous effectuons un passage sur résine Amberlyst 15 (dry).
  
  IV.3.2. Passage sur résine Amberlyst 15 (dry), accès à Pe
  
  Le produit précédent est alors redissous dans 4 mL de MeOH, et 340 mg de résine Amberlyst 15 (dry) sont ajoutés. Après 22 heures d’agitation à température ambiante, le milieu est filtré sur fritté de porosité 4. Le pH du filtrat est porté à 5 à l’aide d’une solution de KOH 1M dans le méthanol (on obtient en théorie le monosel de potassium). Les solvants sont alors évaporés sous PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie -230- Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS pression réduite. On recueille 138 mg du produit Pe avec un bon degré de pureté et un rendement quantitatif. RMN 1H (CDCl3, 250 MHz) : 1,30 (5,28H, s, isopropyl (E)), 1,32 (0,72H, s, isopropyl (Z)), 3,643,84 (4H, m, H5, H6, H7), 4,98 (1H, dd, H4), 5,10 (1H, dq, H8), 6,21 (0,12H, dd, H3 (Z)), 6,49 (0,88H, dd, H3 (E)) ; RMN 31P (CDCl3, 101 MHz) : -3,21 (s, phosphate (E)), -3,23 (s, phosphate (Z)) ; RMN 13C (63 MHz, CDCl3) : 18,4 (isopropyl (E)), 22,0 (isopropyl (Z)), 64,9 (C7), 66,7 ; 70,4 ; 73,3 ; 74,6 (C4, C5, C6, C8), 128,0 (C3 (E)), 128,1 (C3 (Z)), 140,9 (C1), 164,3 (C2) ; IR (pastille de NaCl) : νC=C = 1668 cm-1, νC=O = 1743 cm-1.
  
  -231- PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS PARTIE EXPERIMENTALE - Deuxième partie Synthèse d’inhibiteurs de la DAH7PS -232- -233- PARTIE EXPERIMENTALE - Troisième partie Etude Biologique des inhibiteurs TROISIEME PARTIE Etude biologique des inhibiteurs I’, IV, V, VI, VII, VII’ et VIII PARTIE EXPERIMENTALE - Troisième partie Etude Biologique des inhibiteurs -234- -235- PARTIE EXPERIMENTALE - Troisième partie Etude Biologique des inhibiteurs I - Souches bactériennes
  
  Les produits synthétisés ont été testées au laboratoire de Microbiologie Moléculaire de Madame le Professeur Finance par le Docteur Raphaël Duval (GEVSM- UMR7565, UHP Nancy I) sur 4 germes de référence dans le d des maladies nosocomiales : Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus et Enterococcus fæcalis. Nom Souche Type KDO8PS DAH7PS Escherichia coli ATCC 25922 Gram - Oui Oui Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Gram - Oui Oui Enterococcus fæcalis ATTC 29212 Gram + Non Oui Gram + Non Oui Staphylococcus aureus ATCC 25923 ATCC 25913
  
  L’ensemble de ces bactéries ayant une structure pariétale différente (Gram+ et Gram-), les résultats attendus doivent permettre de préciser la cible des différents composés testés. Une inhibition de la croissance d’une bactérie Gram-négative peut être le reflet de l’inhibition de la KDO8PS, alors qu’un contrôle de la multiplication des micro-organismes Gram-positifs doit traduire une inhibition de la DAH7PS. Il est à noter que nous avons testé deux souches différentes de Staphylocoque doré. Ceci est dû au fait que les chercheurs européens et américains n’utilisent pas la même souche de référence. Dans notre cas, afin de pouvoir comparer nos résultats avec l’ensemble de ceux parus dans la littérature, nous avons procédé aux tests sur les deux souches de Staphylococcus aureus les plus couramment utilisées.
  
  PARTIE EXPERIMENTALE - Troisième partie -236- Etude Biologique des inhibiteurs II - Réalisation de l’antibiogramme
  
  La Concentration Minimale Inhibitrice (CMI) d’un composé est mesurée par la méthode de dilution en milieu liquide. Celle-ci permet de quantifier de façon très précise la croissance bactérienne. Les bactéries, Staphylococcus aureus ATCC 25923 et ATCC 25913, Enterococcus feacalis ATTC 29212, Escherichia coli ATCC 25922 et Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, sont mises en culture dans un bouillon de Mueller-Hinton (Difco, 275730) puis déposées sur des microplaques de 96 puits. Pour chaque CMI, trois témoins ont réalisés : témoin milieu ; témoin milieu + drogue ; témoin bactérie (sans drogue). Chaque drogue est dilué de façon à obtenir une gamme de concentration allant de 30 mg.mL-1 à 1 μg.mL-1. Les microplaques sont ensemencées avec un inoculum de 105 à 106 bactéries suivant les recommandations du Comité de l’Antibiogramme de la Société Française de Microbiologie et du National Commitee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS devenu début 2006 le Clinical Laboratory Standard Institute - CLSI). Après 18h et 24h d’incubation à 37°C, la croissance bactérienne peut être appréciée quantitativement en déterminant la turbidité de chaque échantillon par lecture de l’absorbance à 540 nm à l’aide d’un appareil Titertek Multiscan MCC/340 MK II.
  
  -237
  
  - PARTIE EXPERIMENTALE - Troisième partie Etude Biologique des inhibiteurs PARTIE EXPERIMENTALE - Troisième partie Etude Biologique des inhibiteurs -238- -239- PARTIE EXPERIMENTALE - Quatrième partie Réaction d’ « homologation » Application à la synthèse d’exo-glycals
  
  QUATRIEME PARTIE REACTION D’ « HOMOLOGATION » DE LA FONCTION ALDEHYDIQUE DE DIALDOSES ET D’ALDOSES Application à la synthèse d’exo-glycals -240- PARTIE EXPERIMENTALE - Quatrième partie Réaction d’ « homologation » Application à la synthèse d’exo-glycals I - Préparation des substrats glucidiques I.1. Substrats commerciaux Bn
  
  O
  
  O O O O O OBn
  
  OH O OH
  
  Bn
  
  O OBn 89
  
  90
  
  Les substrats (89) et (90) sont disponibles chez les fournisseurs habituels
  
  . I.2. Sub
  
  stra
  
  ts précédemment préparé
  
  s
  
  TBDMSO O O 3a O OH O O
  
  OH
  
  O 43 O H
  
  H
  
  O O O O O
  
  57 O
  
  69 O O O O
  
  Les substrats (3a), (43), (57) et (69) ont été préparés précédement. Pour le mode opératoire, se reporter à la première partie I.2.1. pour (3a) ; II.1.1. pour (43) ; III.2.1. pour (57) et III.5.2. pour (69). I.3. Préparation du dialdolyxose (88) I.3.1. Formation du 2,3;5,6-di-O-isopropylidène-α-D-mannofuranose (89) C12H20O6 M = 260,3 g.mol-1 O O O O O OH
  
  Dans un tétracol de 1 L, muni d’un réfrigérant et d’un tube de garde à CaCl2, 500 mL d’acétone sont introduits ainsi que 12,6 mL d’H2SO4 (36N). Après homogénéisation, 18,0 g de D-mannose (0,10 mol) sont ajoutés. A l’issu de 4 heures d’agitation à température ambiante, le milieu est neutralisé avec du Na2CO3 anhydre. Une fois filtrée, la solution est portée à reflux en présence de 15 g de Na2CO3 pendant 1 heure. Le filtrat récupéré, les solvants sont évaporés sous pression réduite. Le résidu est alors dissous dans un minimum d’éther, par ajout d’hexane celui-ci précipite. On réitère la recristallisation après évaporation des solvants de la solution mère. On recueille une huile translucide avec un rendement quasi-quantitatif. RMN 1H (250 MHz, CDCl3) : 1,33 (3H, s, isopropylidène), 1,38 (3H, s, isopropylidène), 1,46 (3H, s, isopropylidène), 1,47 (3H, s, isopropylidène), 3,11 (1H, m, O-H), 4,07 (2H, m, H6), 4,18 (1H, dd, H4, 3J(H4-H3) = 3,6 Hz ; 3J(H4-H5) = 7,1 Hz), 4,39 (1H, m, H5), 4,62 (1H, d, H2, 3J(H2-H3) = 6,0 Hz), 4,81 (1H, dd, H3, 3J(H3-H2) = 6,0 Hz ; 3J(H3 H4) = 3,6 Hz), 5,38 (1H, s, H1) ; RMN 13C (63 MHz, CDCl3) : 24,4 ; 25,1 ; 25,8 ; 26,8 (4s, isopropylidène), 66,5 (C6), 73,2 ; 79,3 ; 80,2 ; 85,4 (C2 ; C3 ; C4 ; C5), 101,2 (C1), 109,1 ; 112,6 (C7 ; C8). -241- PARTIE EXPERIMENTALE - Quatrième partie Réaction d’ « homologation » Application à la synthèse d’exo-glycals I.3.2. Synthèse du 1-O-méthyl-2,3;5,6-di-O-isopropylidène-α-D-mannofuranose (91) C13H22O6 M = 274 g.mol-1 O O O O OO Me
  
  A une solution de 26,94 g de 2,3;5,6-di-O-isopropylidène-α-Dmannofuranose (1 éq.) dans 130 mL de DMF est additionné goutte à goutte et à 4°C, 25,2 mL d’iodométhane (3,3 éq.). Puis, une solution de 2,98 g de NaH (1,2 éq.) dans 150 mL de DMF est ajouté à 4°C. Le mélange est agité pendant une nuit (apparition d’un précipité blanc). La mixture est alors hydrolysée par de la glace, concentrée sous pression réduite, reprise à l’éther. La phase organique est séparée, lavée par une solution saturée de NaHCO3, séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée sous pression réduite. RMN 1H (250 MHz, CDCl3) : 1,33 (3H, s, isopropylidène), 1,40 (3H, s, isopropylidène), 1,44 (3H, s, isopropylidène), 1,48 (3H, s, isopropylidène), 3,32 (3H, s, OMe), 3,96-4,02 (2H, m, H6), 4,11 (1H, ~dd, H4), 4,38-4,46 (1H, m, H5), 4,67 (1H, d, H2, 3J(H2-H3) = 6,0 Hz), 4,80 (1H, dd, H3, 3 J(H3-H2) = 6,0 Hz ; 3J(H3-H4) = 3,6 Hz), 5,09 (1H, s, H1) ; RMN 13C (63 MHz, 
  
  l3) : 24,5 ; 25,2 ; 25,9 ; 28,9 (4s, isopropylidène), 54,0 (C7), 66,9 (C6), 73,1 ; 79,5 ; 80,4 ; 85,1 (C2 ; C3 ; C4 ; C5), 105,6 (C1), 109,2 ; 112,6 (C7 ; C8).