['   ', 'SN', 'TL', 'I', 'eae', 'ae', 'anal', 'seth', 'VL', 'A', '“OA', 'ha', 'EA', 'Dee', 'ee', 'A', 'RE?', 'ITS', 'ae', 'ae:', '|', '|', ' ', 'y', 'pad', 'mann', 'ah', 'ate', 'aber', 'anaes', 'clas', 'tc', 'tS', 'Se', 'Soa', 'ni', 'cil', 'tac', 'ne', 'anaemia', 'arf', 'bet', 'nats', 'asi', 'Di', 'at', 'mrt', 'AA', 'I', 'titan', 'tit,', 'Same', 'alt', 'Ree', 'Ata', 'hn', 'arcain', 'Nat', 'an', 'mtn', 'ame', '343', 'were', 'combined,', 'evaporated', 'to', 'dryness', 'and', 'chromatographed', 'on', 'a', 'reverse', 'phase', 'HPLC-system,', 'consisting', 'of', 'a', 'pair', 'of', 'u-Bondapak', 'C-18', 'columns', '(2', 'X', '30', 'cm),', 'and', 'a', 'solvent', 'pair', 'of', '(A)', 'acetate', 'buffer', 'at', 'pH', '6', 'and', '(B)', 'methanol/water', '(50:50).', 'The', 'A', 'to', 'B', 'solvent', 'programming', 'was', 'completed', 'within', '66', 'min', 'at', 'a', 'flow', 'rate', 'of', '1.5', 'ml/min.', 'The', 'radioactive', 'band', 'with', 'the', 'retention', 'volume', 'of', 'NNK', '(~73.5', 'min)', 'was', 'rechromatographed', 'on', 'a', 'normal', 'phase', 'HPLC', 'system.', 'This', 'consisted', 'of', 'a', 'pair', 'of', 'Li-Chrosorb', 'Si', '60', 'columns', '(2', 'X', '25', 'cm).', 'with', 'a', 'solvent', 'mixture', 'of', 'chloroform/cyclohexane/methanol', '(68.6', ':30.0:1.4)', 'at', 'a', 'flow', 'rate', 'of', '1', 'ml/min.', 'The', 'peak', 'with', 'the', 'retention', 'volume', 'of', 'NNK', 'was', 'collected', 'and', 'the', "'*C-", 'and', '°H-6-activities', 'were', 'deter-', 'mined', '3', 'times', 'using', 'a', 'dual', 'channel', 'counting', 'program', 'in', 'the', 'liquid', 'scintilla-', 'tion', 'counter.', 'Three', 'small', 'aliquots', 'were', 'analyzed', 'by', 'GC-TEA.', 'In', 'order', 'to', 'facilitate', 'reproducible', 'GC', 'separations,', 'a', '3.3', 'm', 'X', '2', 'mm', 'i.d.', 'glass', 'column', 'was', 'pretreated', 'with', 'diluted', 'dimethyl-dichlorosilane', 'in', 'toluene.', 'The', 'column', 'was', 'packed', 'with', '10%', 'UCW-982', 'on', 'Gas', 'Chrom', 'Q', '(80/100),', 'The', 'GC', 'was', 'operated', 'at', '185°C', 'with', 'an', 'argon', 'flow', 'of', '35', 'ml/min.', 'Under', 'these', 'conditions', 'the', 'retention', 'times', 'were', 'for', 'NNN', '10', 'min,', 'NAT', '12', 'min,', 'NAB', '13', 'min', 'and', 'NNK', '18', 'min.', 'Pyrosynthesis', 'of', 'NNK', 'from', 'nicotine:', 'In', 'order', 'to', 'assess', 'the', 'formation', 'of', 'NNK', 'from', 'nicotine', 'during', 'smoking', 'we', 'spiked', '50', 'cigarettes', 'with', '[methyl-', '14C]', 'nicotine', '(total', 'activity', '5', 'X', '10’', 'dpm)', 'according', 'to', 'an', 'earlier', 'published', 'method', '[14].', 'Smoking', 'of', 'these', 'cigarettes,', 'trapping', 'of', 'the', 'mainstream', 'smoke', 'and', "{'*C]NNK", 'analysis', 'were', 'completed', 'as', 'described', 'above.', 'RESULTS', 'AND', 'DISCUSSION:', 'NNK', 'is', 'a', 'tobacco-specific', 'compound', 'and', 'one', 'of', 'the', 'most', 'powerful', 'carcinogens', 'in', 'cigarette', 'smoke', '[4,10,13]', '.', 'In', 'order', 'to', 'determine', 'the', 'origin', 'of', 'NNK', 'in', 'cigarette', 'smoke', 'we', 'explored', '2', 'approaches.', 'In', 'one', 'approach', 'we', 'spiked', 'the', 'cigarettes', 'with', "[1-'*C]", 'NNK', 'and', 'determined', 'the', 'recovery', 'of', 'unchanged', "'*C-labelled", 'NNK', 'in', 'the', 'smoke,', 'whereas', 'for', 'the', 'other', 'approach,', 'the', 'cigarette', 'tobacco', 'column', 'was', 'spiked', 'with', "[methyl-'*C]", 'nicotine', 'and', 'the', 'labelled', 'NNK', 'in', 'the', 'smoke', 'was', 'determined.', 'TEA', 'RESPONSE', '   ', '0', '5', '10.', '15', '20', 'MINUTES', 'Fig.', '3.', 'GC-TEA', 'trace', 'of', 'TSNA', 'in', 'cigarette', 'smoke.', 'frviaiss', 'WO', 'RE', 'ee', 'Peneret', '2', '68TSETLOOT']