[' ', 'taining', 'ingested', 'lung', 'surfactant.', 'Nuclear', 'staining', 'was', 'minimal.', 'Bar,', '0.2', 'pm.', 'the', 'greater', 'size', 'and', 'the', 'extended', 'nature', 'of', 'actin-binding', 'pro-', 'tein', 'molecules.', 'Membrane-associated', 'Geilsolin', 'Is', 'Aiso', 'Bound', 'to', 'Short', 'Actin', 'Filaments', 'Mechanical', 'cleavage', 'opens', 'cells', 'by', 'ripping', 'off', 'pieces', 'of', 'api-', 'cal', 'membrane', 'and', 'permits', 'viewing', 'of', 'the', 'cytoplasmic', 'side', 'of', 'the', 'plasma', 'membrane', 'and', 'specific', 'labeling', 'of', 'intracellular', 'structures.', 'A', 'network', 'of', 'filaments', 'very', 'similar', 'in', 'structure', 'to', 'the', 'cortical', 'networks', 'revealed', 'by', 'detergent', 'permeabiliza-', ' ', ' ', 'Figure', '4.', 'Comparison', 'of', 'the', 'labeling', 'pattern', 'of', 'actin-binding', 'pro-', 'tein', 'in', 'macrophages', 'with', 'that', 'of', 'golsolin', 'in', 'Fig.', '1.', 'Macrophage', 'sec-', 'tions', 'were', 'sisined', 'with', '8-nm', 'immunogold', 'as', 'in', 'Fig.', '|', 'except', 'that', 'anti-actin-binding', 'protein', 'IgG', 'was', 'substituted', 'for', 'antigelsolin', 'IgG.', 'Actin-binding', 'protein', 'label', 'was', 'clustered', 'and', 'concentrated', 'within', 'the', 'cortical', 'cytoplasm.', 'Some', 'gold', 'label', 'was', 'found', 'oncellular', 'mem-', 'branes', 'but', 'it', 'was', 'not', 'concentrated', 'relative', 'to', 'its', 'cytoplasmic', 'con-', 'centration', '(Fig.', '2).', 'tion', '(Hartwig', 'and', 'Shevlin,', '(986)', 'is', 'visible', 'at', 'the', 'edges', 'of', 'unroofed', 'macrophages', 'ripped', 'open', 'in', 'the', 'process', 'of', 'spread-', 'ing', 'on', 'the', 'surface', 'of', 'a', 'glass', 'coversiip.', 'The', 'filaments', 'have', '10-nm', 'diam', 'and', 'the', 'beaded', 'substructure', 'of', 'actin', 'and', 'acquire', 'a', 'characteristic', 'fluted', 'appearance', '(Heuser', 'and', 'Kirschner.', '1980.', 'Hartwig', 'and', 'Shevlin,', '1986)', 'when', 'reacted', 'with', 'myosin', 'St', '(Fig.', '5', '6).', 'The', 'actin', 'network', 'extends', 'from', 'the', 'upper', 'edge', 'of', 'the', 'cell,', 'where', 'the', 'upper', 'membrane', 'was', 'mechanically', 're-', 'moved,', 'to', 'the', 'cytoplasmic', 'side', 'of', 'the', 'substuate-adherent', 'membrane', '(Fig.', '5', 'a).', 'The', 'more', 'central', 'regions', 'of', 'these', 'un-', 'Figure', 'S.', 'Electron', 'micrographs', 'showing', 'the', 'organization', 'of', 'actin', 'filaments', 'on', 'the', 'cytoplasmic', 'side', 'of', 'unroofed', 'macraphages.', 'M:', 'were', 'unroofed', 'by', 'adhering', 'and', 'removing', 'polylysine-coated', 'coverslips', 'to', 'their', 'exposed', 'surface', 'as', 'described', 'in', 'Materials', 'and', 'Methods.', '(a)', 'Representative', 'electron', 'micrograph', 'showing', 'the', 'organization', 'of', 'filaments', 'on', 'the', 'cytoplasniic', 'side', 'of', 'the', 'adherent', 'membrane.', 'Different', 'regions', 'of', 'filament', 'density', 'are', 'apparent:', 'the', 'cell', 'margins', 'are', 'densely', 'covered', 'with', 'filaments', 'whereas', 'more', 'central', 'regions', 'have', 'only', 'a', 'sparse', 'coating', 'of', 'filaments.', 'Points', 'of', 'filament', 'contact', 'with', 'plasma', 'membrane', 'can', 'bs', 'observed', 'both', 'in', 'the', 'region', 'where', 'the', 'membrane', 'is', 'adherent', 'to', 'the', 'coverslip', 'and', 'near', 'the', 'cell', 'margins', 'where', 'the', 'membrane', 'has', 'torn.', '(6)', 'identification', 'of', 'membrane-associated', 'filaments', 'as', 'actin', 'using', 'myosin', 'subfragment', '|.', 'Actin', 'Hlaments', 'appear', 'as', 'fluted', 'cables', 'after', 'treaiment', 'with', 'myosin', 'S!', 'and', 'are', 'replete', 'across', 'the', 'cytoplasmic', 'side', 'of', 'the', 'membrane.', 'Many', 'filaments', 'can', 'be', 'observed', 'to', 'imtersect', 'the', 'membrane.', 'Bars,', '(a)', '|', 'gan.', '(5)', 'O2', 'gm.', '‘The', 'Sourna?', 'of', 'Cell', 'Biology.', 'Volume', '108,', '1989', 'PUBLICATIONS', '037042']