[' ', ' ', 'artery', '(Burnstock', '&', 'Warland,', '1987),', 'canine', 'endo-', 'thelium', '(Houston', 'ef', 'al,', '1987)', 'and', 'rat', 'caecum', '(Manzini', 'et', 'al,', '1986).', 'The', 'present', 'work', 'supports', 'the', 'specificity', 'of', 'reactive', 'blue', '2', 'at', 'P;,-purinoceptors,', 'since', 'reactive', 'blue', '2', 'potently', 'inhibited', 'surfaczant', 'Phospholipid', 'secretion', 'induced', 'by', 'ATP,', 'while', 'reac-', 'tive', 'blue', '2', 'did', 'not', 'have', 'an', 'effect', 'on', 'surfactant', 'phos:', 'pholipid', 'secretion', 'induced', 'by', 'the', 'phorbol', 'ester', 'TPA', 'or', 'the', 'A-agonist', 'terbutaline', 'which', 'act', 'via', 'protein', 'kinase', 'C', '(Sano', 'er', 'al.', '1985)', 'and', 'cyclic', 'AMP-', 'dependent', 'protein', 'kinase', '(Rice', 'e:', 'al.', '1985),', 'respec-', 'tively.', 'The', 'IC.)', 'which', 'we', 'observed', 'for', 'reactive', 'blue', '2', 'inhibition', 'of', 'ATP-induced', 'surfactant', 'secretion', 'was', '1.5', 'x', '10°*m.', 'This', 'compares', 'favourably', 'with', 'van', 'TCy9', 'of', '4', 'x', '10°4M', 'previously', 'obtained', 'for', 'inhibi-', 'tion', 'of', 'junction', 'potentials', 'of', 'the', 'rat', 'caecum', 'by', 'reac-', 'tive', 'blue', '2', '(Manzini', 'er', 'al.,', '1986).', 'While', 'inhibition', 'of', 'ATP-induced', 'surfactant', 'phos.', 'Pholipid', 'secretion', 'by', 'reactive', 'blue', '2', 'could', 'be', 'the', 'result', 'of', 'cytotoxicity,', 'this', 'does', 'not', 'appear', 'probable', 'for', 'two', 'reasons.', 'Reactive', 'blue', '2', 'at', 'similar', 'concentra-', 'tions', 'had', 'no', 'effect', 'on', 'surfactant', 'phospholipid', 'secre-', 'tion', 'induced', 'by', 'other', 'secretagogues', '(terbutaline', 'and', 'TPA)', 'and', 'release', 'of', 'a', 'cytosolic', 'marker', '{lactate', 'References', 'BURNSTOCK.G', '&', 'KENNEDY.', 'C', '(1985).', 'Is', 'there', 'a', 'basis', 'for', 'distinguishing', 'two', 'types', 'of', 'P,-purinoceptor?', 'Gen.', 'Pharmacol.,', '16,', '433-440.', 'j', 'BURNSTOCK.', 'S', '&', 'WARLAND.', '331', '(1987).', 'P,-purinoceptors', 'of', 'two', 'subtypes', 'in', 'the', 'rabbi', 'messen-', 'teric', 'artery.', 'reactive', 'blue', '2', 'selectvely', 'inhibits', 'responses', 'Mediated', 'via', 'the', 'P,,-', 'but', 'not', 'the', 'P,,-punnoceptor.', 'Br.', 'J.', 'Pharmacol.', '90,', '383-391.', '\\', 'CHOO.', 'LK', '{1981}.', 'The', 'effect', 'of', 'reactive', 'blue.', 'and', 'antago-', 'musts', 'of', 'ATP,', 'on', 'the', 'isolated', 'urinary', 'bladders', 'of', 'guinea-pig', 'and', 'rat.', 'J.', 'Pharm.', 'Pharmacol.', '33,', '248-250.', 'DOBBS.', 'LG', '&', 'MASON,', 'RJ.', '(1978).', 'Stirnvlation', 'of', 'secrenon', 'of', 'disaturated', 'phosphatidylcholine', 'from', 'isolated', 'alvcol-', 'sr', 'Type', 'JV', 'cells', 'by', '12-O-tetradecanoyt-13-phorbol', 'acetate.', 'Am', 'Rev.', 'Respir.', 'Dis,', '108,', '705-713,', 'DOBBS.', 'LG', '&', 'MASON.', 'RG', '(1979).', 'Pulmonary', 'alveolar', 'Type', 'H', 'cells', 'isolated', 'from', 'rat.', 'J.', 'Clin.', 'Invest,', '63,', '378-', '387.', 'DOBBS.', 'LG.', 'GONZALES,', 'R', '&', 'WILLIAMS,', 'M.C.', '(1986).', 'An', 'improved', 'method', 'for', 'isolating', 'Type', '1', 'cells', 'in', 'high', 'yield', 'and', 'purty.', '4m.', 'Rev.', 'Respir.', 'Dis.', '134,', '141-145.', 'FOLCH,', ').', 'LEES.', 'M', '&', 'SLOANE-STANLEY,', 'GH.', '937).', 'Simple', 'methods', 'for', 'the', 'isolation', 'and', 'purification', 'of', 'total', 'lipids', 'from', 'animal', 'tissues.', 'J.', 'Biol.', 'Chem,,', '226,', '497-', '309', 'FRIEDMAN.', 'M.', '(1937)', 'The', 'use', 'ef', 'ranks', 'to', 'avoid', 'the', 'assumption', 'of', 'nenmality', 'implicit', 'in', 'the', 'analysis', 'of', 'variance.', 'J.', 'Am.', 'Statist.', 'Ass.,', '32,', '625-701.', 'GILFILLAN.', 'AM.', '&', 'ROONEY,', 'SA.', '(1987)', 'Punnoceptor', 'agonists', 'stimulate', 'phosphatidylcholine', 'secretion', 'in', 'primary', 'cultures', 'of', 'adult', 'rat', 'Type', '21', 'pneumocytes.', 'Biochim.', 'Biophys.', 'Acta,', '917,', '18-23,', 'P,,-PURINOCEPTOR', 'INHIBITION', '162', 'dehydrogenase)', 'was', 'no', 'different', 'in', 'control', 'cells', 'com-', 'pared', 'to', 'cells', 'exposed', 'to', 'various', 'concentrations', 'of', 'reactive', 'blue', '2.', 'The', 'concentrations', 'of', 'reactive', 'blue', '2', 'utilized', 'for', 'the', 'present', 'study', 'are', 'also', 'less', 'than', 'con-', 'centrations', 'used', 'in', 'previous', 'studies', 'when', 'cyto-', 'toxicity', 'was', 'also', 'not', 'noted', '(Manzini', 'ef', 'al,', '|', '86;', 'Reilly', 'et', 'al.,', '1987;', 'Burnstock', '&', 'Wasland,', '1987),', 'In', 'conclusion,', 'we', 'demonstrated', 'that', 'reactive', 'blue', '2', 'is', 'a', 'specific', 'inhibitor', 'of', 'ATP-induced', 'surfactant', 'Phospholipid', 'secretion.', 'Previous', 'work', 'supports', 'the', 'hypothesis', 'that', 'ATP-induced', 'surfactant', 'secretion', 'is', 'mediated', 'via', 'a', 'P,,-purinoceptor', '(Rice', '&', 'Singleion.', '1987},', 'consistent', 'with', 'the', 'present', 'data.', 'The', 'Present', 'work', 'also', 'supports', 'the', 'previous', 'observations', 'of', 'Burnstock', 'and', 'colleagues', '(Manzini', 'e', 'al.,', '1986;', 'Reilly', 'et', 'al,', '(987:', 'Burnstock', '&', 'Warland,', '1987:', 'Houston', 'ez', 'ai.', '1987)', 'suggesting', 'reactive', 'blue', '2', 'is', 'a', 'specific', 'inhibitor', 'of', 'P,,-purinoceptors.', 'Further', 'work', 'to', 'design', 'a', 'more', 'potent', 'antagonist', 'of', 'P.,-', 'purino-', 'ceptors', 'based', 'on', 'the', 'structure', 'of', 'reactive', 'blue', '2', 'may', 'prove', 'useful.', 'This', 'work', 'was', 'supported', 'in', 'part', 'by', 'the', 'Counci!', 'for', 'Tobacco', 'Research,', 'US.A..', 'Inc.', 'and', 'NIH', 'HL38764.', 'HOLLINGSWORTH.', 'M', '&', 'GILFILLAN,', 'AM', '(1984).', 'The', 'Pharmacology', 'of', 'lung', 'surfactant', 'secrenon.', 'Pharmacol.', 'Rer.,', '3%,', '69-90.', 'HOUSTON,', 'DA.', 'BURNSTOCK,', 'G', '&', 'VANHOUTTE.', 'PM', '(1987),', 'Different', 'P,-purinerge', 'receptor', 'subtypes', 'of', 'endothelium', 'and', 'smooth', 'muscle', 'in', 'canine', 'blood', 'vessels.', 'J.', 'Pharmacol', 'Exp.', 'Ther.,', '241,', '301-506.', 'j', 'KERR.', 'D.1.B', '&', 'KRANTIS,', 'A', '(1979).', 'A', 'new', 'class', 'of', 'ATP', 'anlagomsts.', 'Proc.', 'Aust.', 'Physiol.', 'Pharmacol', 'Sor.', '10,', '156P.', 'KRUSKAL.', 'W.H', '&', 'WALLIS,', 'WA.', '(1952).', 'Use', 'of', 'ranks', 'and', 'One', 'criterion', 'analysis', 'of', 'variance.', 'J.', '4m.', 'Starist.', 'Ass...', '47,', '383-621.', 'MANZINI.', '§..', 'HOYLE,', 'CHV.', '&', 'BURNSTOCK.', 'G.', '(1986).', 'An', 'electrophysiological', 'analysis', 'of', 'the', 'effect', 'of', 'reactive', 'blue', '2,', 'a', 'putative', 'P,-purinocepior', 'antagonist,', 'on', 'inhib-', 'itory', 'junction', 'potentials', 'of', 'the', 'rat', 'caecum.', 'Eur.', 'J.', 'Phar-', 'mnacol.,', '127,', '197-204.', 'REILLY.', 'W.M.', 'SAVILLE.', 'V.L', '&', 'BURNSTOCK.', 'G.', '(1987).', 'An', 'msscssment', 'of', 'the', 'antagonistic', 'activity', 'of', 'reactive', 'blue', '2', 'at', 'P|-', 'and', 'P,-purinoceptors:', 'supporting', 'evidence', 'for', 'Purinergic', 'innervation', 'of', 'the', 'rabbit', 'portal', 'vein.', 'Eur.', 'J.', 'Pharmacol,', '248,', '47-53.', 'RICE,', 'WR', '&', 'SINGLETON,', 'FM.', '(1986).', 'P,-purinoceptors', 'Tegulate', 'surfactan!', 'secretion', 'from', 'rat', 'isolated', 'alveolar', 'Type', 'li', 'cells.', 'Br.', 'J.', 'Pharmacol.', '89,', '485-491.', 'RICE.', 'WR.', '&', 'SINGLETON,', 'FM.', '(1987).', 'P,,-purinoceptcr', 'Fegulation', 'of', 'surfactant', 'secretion', 'from', 'rai', 'isolated', 'alveolar', 'Type', 'Il', 'cells', 'is', 'associated', 'with', 'mobilization', 'of', 'intracellular', 'calcium.', 'Br.', 'J.', 'Pharmacol.,', '91,', '833-838.', 'RICE.', 'WR.', 'HULL,', 'W.M,', 'DION,', 'CA.', 'HOLLINGER,', 'BA.', '&', 'WHITSETT.', 'J.A', '(1985).', 'Activation', 'of', 'cAMP', 'dependent', 'PUBLICATIONS', ':', '10350233', '030918']