['center', 'layer', 'of', 'the', 'tubule.', 'A', 'stage', 'XI', 'tubule', 'is', 'shown', 'in', 'Fig.', '3G,H.', 'Spermatocytes', 'in', 'leptotene', 'and', 'zygotene', 'of', 'meiosis', 'T', 'are', 'also', 'present', 'in', 'stage', 'X-XT', 'tubules;', 'however,', 'no', 'signal', 'above', 'background', 'was', 'detected.', 'In', 'situ', 'hybrid-', 'ization', 'analysis', 'of', 'testes', 'from', 'day', '7', 'p.', 'n.', 'mice,', 'where', 'the', 'spermatogonia', 'are', 'clearly', 'seen,', 'did', 'not', 'reveal', 'any', 'cycB2', 'signal', 'above', 'background', 'in', 'these', 'mitotically', 'dividing', 'germ', 'cells', '(data', 'not', 'shown).', 'Secondary', 'spermatocytes', 'are', 'found', 'in', 'only', 'a', 'very', 'small', 'portion', 'of', 'the', 'tubules', 'present', 'in', 'the', 'adult', 'testis', 'due', 'to', 'the', 'brevity', 'of', 'this', 'particular', 'stage.', 'Nonetheless', 'cycB2', 'wanscripts', 'were', 'also', 'detected', 'in', 'these', 'cell', 'types', '(data', 'not', 'shown).', 'No', 'signal', 'above', 'background', 'was', 'detected', 'over', 'the', 'elongating', 'spermatids', 'found', 'in', 'the', 'adluminal', 'region', 'of', 'the', 'tubules', '(Fig.', '3C-H).', 'This', 'pattern', 'of', 'cycB2', 'expression', 'is', 'in', 'striking', 'contrast', 'with', 'that', 'of', 'cycBl', 'expression,', 'wherein', 'cycB/', 'transcripts', 'were', 'detected', 'at', 'low', 'levels', 'in', 'late', 'pachytene', 'spermatocytes', 'and', 'at', 'high-', 'est', 'levels', 'in', 'the', 'round', 'spermatids', '(Chapman', 'and', 'Wolge-', 'muth,', '1992),', 'These', 'distinct', 'patterns', 'of', 'expression', 'in', 'male', 'germ', 'cells', 'are', 'summarized', 'in', 'the', 'diagram', 'in', 'Fig.', '4.', ' ', 'Localization', 'of', 'cycB2', 'signal', 'to', 'both', 'germinal', 'and', 'somatic', 'celis', 'in', 'the', 'ovary', 'Northern', 'blot', 'hybridization', 'analysis', 'revealed', 'that', 'cycB2', 'transcripts', 'were', 'also', 'present', 'in', 'the', 'ovary.', 'To', 'determine', 'if', 'cycB2', 'was', 'expressed', 'in', 'the', 'germ', 'cells,', 'as', 'in', 'the', 'testis,', 'or', 'in', 'the', 'somatic', 'cells,', 'sections', 'of', 'ovaries', 'were', 'examined', 'by', 'in', 'situ', 'hybridization', '(Fig.', '5).', 'Developing', 'ovarian', 'follicles', 'were', 'staged', 'by', 'the', 'size', 'of', 'the', 'oacyte', 'and', 'by', 'the', 'number', 'of', 'layers', 'of', 'granulosa', 'cells', 'surrounding', 'the', 'oocyte', 'accord-', 'ing', 'to', 'Pedersen', 'and', 'Peters', '(1968).', 'Oocytes', 'that', 'have', 'not', 'entered', 'the', 'growth', 'phase,', 'called', 'resting', 'oocytes,', 'are', 'found', 'in', 'follicles', 'staged', '1', 'through', '3a,', 'while', 'growing', 'oocytes', 'are', 'found', 'in', 'follicles', 'staged', '3b', 'through', '6.', 'Fully', 'grown', 'oocytes', 'are', 'found', 'in', 'follicles', 'of', 'stages', '7', 'and', '8,', 'in', 'which', 'meiosis', 'resumes.', 'No', 'cycB2', 'signal', 'was', 'detected', 'in', 'the', 'resting', 'oocytes', '(Fig.', 'SA,B).', 'cycB2', 'signal', 'was', 'first', 'detected', 'at', 'low', 'levels', 'in', 'growing', 'oocytes', 'of', 'follicles', 'staged', '3b.', 'cyeB2', 'tran-', 'scripts', 'were', 'detected', 'in', 'oocytes', 'as', 'they', 'continued', 'to', 'grow,', 'through', 'to', 'the', 'antral', 'stages', '(Fig.', '5A-D).', 'No', 'obvious', 'dif-', 'ference', 'was', 'noted', 'in', 'the', 'level', 'of', 'cyeB2', 'transcripts', 'in', 'oocytes', 'in', 'later', 'stage', 'follicles.', 'The', 'pattern', 'of', 'accumulation', 'of', 'cycB2', 'transcripts', 'in', 'the', 'growing', 'oocytes', 'was', 'thus', 'quite', 'similar', 'to', 'that', 'observed', 'for', 'cyeB7', 'transcripts', '(Chapman', 'and', 'Wolgemuth,', '1992).', 'cycB2', 'expression', 'was', 'also', 'readily', 'detected', 'in', 'somatic', 'cells', 'of', 'developing', 'follicles,', 'the', 'granulosa', 'cells.', 'This', 'is', 'in', 'contrast', 'to', 'cycB/,', 'which', 'is', 'expressed', 'most', 'abundantly', 'in', 'the', 'germ', 'cells', 'of', 'the', 'ovary', 'and', 'at', 'very', 'low', 'levels', 'in', 'the', 'granulosa', 'cells', 'of', 'larger', 'follicles', '(Chapman', 'and', 'Wolge-', 'muth,', '1992),', 'cycB2', 'transcripts', 'were', 'detected', 'over', 'the', 'gran-', 'ulosa', 'cells,', 'in', 'particular', 'granulosa', 'cells', 'of', 'follicles', 'in', 'stage', '5', 'and', 'larger', '(Fig.', 'SA-D).', 'Within', 'the', 'granulosa', 'cells', 'of', 'stage', '7', 'and', '8', 'follicles', '(antral', 'follicles},', 'cycB2', 'transcripts', 'were', 'not', 'evenly', 'distributed,', 'Rather,', 'cycB2', 'transcripts', 'were', 'most', 'abundant', 'over', 'those', 'granulosa', 'cells', 'closest', 'to', 'ihe', 'oocyte,', 'the', 'cumulus', 'granulosa', 'cells', '(Fig.', '5C,D).', 'Within', 'the', 'adult', 'ovary,', 'there', 'are', 'also', 'follicles', 'that', 'stop', 'growing', 'and', 'begin', 'lo', 'degenerate.', 'These', 'are', 'known', 'as', 'atretic', 'follicles', '(Peters,', '1969).', 'When', 'compared', 'to', 'a', 'healthy', 'follicle,', 'the', 'level', 'of', ' ', 'Cyclin', 'B2', 'in', 'mouse', 'germ', 'cells', '235', 'level', 'of', 'expression', ' ', ' ', ' ', 'lowes!', 'highest', ' ', 'eycB1', ' ', ' ', 'eyeB2', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', 'bo', '2', 'Feary', 'Pmid.', ' Piate', '=D', '|', 'R', 'é', 'Spermatogonia', 'Spermatocytes', 'Spermatids', '(Mitotic)', '{Meiotic)', '(Post-Meiotic}', ' ', 'Fig.', '4.', 'Summary', 'of', 'cycB/', 'and', 'eve?', 'expression', 'during', 'sperniatogenesis.', 'The', 'relative', 'tevels', 'of', 'cveB/', 'and', 'cveB2', 'expression', 'are', 'indicated', 'by', 'ihe', 'stippled', 'box,', 'The', 'spermatogenic', 'cell', 'types', 'are', 'indicated', 'as', 'follows:', 'leptotene', '(L),', 'zygotene', '(Z):', 'pachytene', '(P),', 'diploiene', '(1D).', 'round', 'spermatids', '(R)', 'and', 'elongated', 'spermatids', '(E).', 'The', 'pachytene', 'stuge', 'is', 'divided', 'into', 'early,', 'middle', '(mid.)', 'and', 'late', 'stages.', ' ', ' ', 'cycB2', 'signal', 'over', 'the', 'granulosa', 'cells', 'in', 'atretic', 'follicles', 'appeared', 'to', 'be', 'diminished', 'while', 'a', 'low', 'level', 'of', 'cyeB2', 'signal', 'was', 'still', 'detectable', 'in', 'the', 'oocytes', '(data', 'not', 'shown).', 'cycB?', 'and', 'cycB2', 'transcripts', 'are', 'present', 'following', 'ovulation', 'and', 'in', 'the', 'early', 'embryo', 'The', 'above', 'results', 'on', 'cycB2', 'and', 'our', 'previous', 'observations', 'on', 'cycB/', 'expression', '(Chapman', 'and', 'Wolgemuth,', '1992)', 'demonstrate', 'that', 'these', 'murine', 'B', 'type', 'cyclins', 'are', 'expressed', 'in', 'a', 'developmentally', 'regulated', 'manner', 'in', 'the', 'adult', 'ovary,', 'but', 'in', 'quite', 'distinct', 'patterns.', '¢ycB/', 'is', 'expressed', 'most', 'abun-', 'dantly', 'in', 'the', 'germ', 'cells.', 'particularly', 'in', 'growing', 'oocytes,', 'while', 'cycB2', 'is', 'expressed', 'at', 'apparently', 'comparable', 'levels', 'in', 'both', 'the', 'growing', 'oocyte', 'and', 'in', 'a', 'subset', 'of', 'the', 'somatic', 'cells', 'of', 'the', 'developing', 'follicle.', 'To', 'determine', 'whether', 'the', 'relative', 'levels', 'of', 'cycB/', 'and', 'cveB2', 'mRNAs', 'change', 'as', 'oocytes', 'undergo', 'meiotic', 'maniration', 'and', 'fertilization,', 'in', 'situ', 'hybridization', 'was', 'used', 'tc', 'examine', 'cveB/', 'and', 'cycB2', 'expression', 'in', 'histological', 'sections', 'of', 'ovarian', 'oocytes,', 'ovu-', 'lated', 'eggs', 'and', 'fertilized', 'eggs', '(Pig.', '6).', 'As', 'previously', 'observed,', 'cycB/', 'and', 'cyeB2', 'transcripts', 'were', 'detected', 'in', 'oocytes', '(Fig.', '6A,D).', 'While', 'both', 'evcB/', 'and', 'cycB2', 'tran-', 'scripts', 'were', 'detected', 'in', 'ov', 'ulated', '(Fig.', '6B,E)', 'and', 'fertilized', 'eggs', '(Fig.', '6C,F),', 'the', 'relative', 'levels', 'of', 'both', 'appeared', 'to', 'decrease', 'in', 'the', 'fertilized', 'cous,', 'To', 'determine', 'whether', 'both', 'cyceB/', 'and', 'cycB2', 'are', 'expressed', 'during', 'early', 'embryonic', 'development,', 'blastocyst-', 'staged', 'embryos', 'were', 'examined', 'by', 'in', 'situ', 'hybridization', 'analysis.', 'cycBJ', 'and', 'cycB2', 'wanscripts', 'were', 'detected', 'in', 'cells', 'constituting', 'both', 'the', 'inner', 'cell', 'mass', 'and', 'the', 'trophectoderm', 'of', 'the', 'blastocyst', '(Fig.', '7).', 'Thus', 'while', 'eveB/', 'and', 'cyeB2', 'are', 'expressed', 'differentially', 'in', 'specilic', 'somatic', 'and', 'germinal', 'lineages', 'during', 'male', 'and', 'female', 'germ', 'cell', 'development,', 'they', 'are', 'co-expressed', 'in', 'both', 'the', 'embryonic', 'and', 'extraem-', 'bryonic', 'cell', 'lincages', 'at', 'apparently', 'comparable', 'levels', 'during', 'the', 'early', 'stages', 'of', 'embry', 'ovcnesis.', ' ', ' ', '~', '50553134']