['322', 'Yat,', 'Tato', 'mouse', '   ', 'vaty', 'rat,', 'mouse', 'Tat,', 'Tate', '~', '7', 'mouse', 'rat,', 'MSGKPVLHYFNARGRMEC', 'IRWLLAAAGVEFE!', 'TALAKDRTKNRYLPAFEKVLKSHGQDYLVGNRLTRVD', 'IHLLELLLYVEEF', 'DASLLTSFPL', 'DANIEL', 'ET', 'AL.', '60', '120', '180', '222', '223', 'FIG.', '5.', 'Comparison', 'of', 'amino', 'acid', 'sequences', 'of', 'Ya', 'subunits', 'from', 'mouse', 'and', 'rat.', 'The', 'mouse', 'sequence', 'is', 'derived', 'from', 'Ya', 'gene', 'in', 'clone', '\\mYa];', 'the', 'rat,', 'sequence', 'is', 'derived', 'from', 'rat', 'liver', 'Ya', 'cCONA', 'clones', 'pGTB38', '(Pickett', 'ef', 'a/.,', '1984)', 'and', 'prYa!2;', 'the', 'rat,', 'sequence', 'is', 'derived', 'from', 'rat', 'liver', 'Ya', 'cDNA', 'clone', 'pGTR261', '(Lai', 'ef', 'a/.,', '1984).', 'acids', 'by', 'size', 'and', 'polarity', 'of', 'the', 'respective', 'side-chains', '(Swanson,', '1984),', 'at', 'least', 'half', 'of', 'the', 'amino', 'acid', 'substitu-', 'tions', 'in', 'the', 'mouse', 'and', 'rat', 'Ya', 'subunits', 'are', 'conservative.', 'There', 'are', 'two', 'amino', 'acid', 'replacements', 'by', 'Pro', 'in', 'mouse', 'Ya', '(positions', '177', 'and', '206)', 'which', 'may', 'affect', 'the', 'helical', 'struc-', 'ture', 'of', 'the', 'polypeptide.', 'An', 'alignment', 'of', 'the', 'deduced', 'amino', 'acid', 'sequences', 'of', 'mouse', 'and', 'rat', 'Ya', 'subunits', 'indi-', 'cales', 'that', 'most', 'of', 'the', 'amino', 'acid', 'substitutions', 'occur', 'in', 'the', 'same', 'regions', 'of', 'the', 'molecule', 'with', 'a', 'preference', 'for', 'the', 'car-', 'boxyl', 'terminus', '(Fig.', '5).', 'The', 'highly', 'conserved', 'amino', 'acid', 'regions', 'probably', 'delineate', 'the', 'domains', 'involved', 'in', 'sub-', 'strate', 'binding', 'and', 'enzymatic', 'activities', 'of', 'Ya.', 'The', 'per-', 'centage', 'of', 'amino', 'acid', 'homology', 'between', 'mouse', 'and', 'rat', 'Ya', 'is', 'similar', 'to', 'that', 'between', 'the', 'two', 'types', 'of', 'rat', 'Ya', 'subunits.', 'There', 'are', '10', 'and', '12', 'amino', 'acid', 'differences', 'between', 'the', 'mouse', 'and', 'rat', 'subunits', 'as', 'compared', 'with', '8', 'amino', 'acid', 'dif-', 'Terenees', 'among', 'the', 'two', 'rat', 'Ya', 'subunits', '(Fig.', '5).', 'More', 'sequence', 'divergence', 'is', 'observed', 'in', 'the', 'nontrans-', 'lated', 'regions', 'of', 'the', 'Ya', 'mRNAs.', 'In', 'the', '5‘', 'nontranslated', 're-', 'gion', 'there', 'are', '7', 'and', '8', 'base', 'substitutions', 'in', 'mouse', 'Ya', 'gene', 'as', 'compared', 'with', 'the', 'two', 'rat', 'Ya', 'cDNA', 'sequences', '(Figs.', '1', 'and', '3;', 'Lai', 'ef', 'af,', '1984;', 'Pickett', 'et', 'a/.,', '1984;', 'Taylor', 'ef', 'ai.,', '1984).', 'The', '3’', 'nontranslated', 'region', 'of', 'the', 'two', 'rat', 'Ya', 'mRNAs,', 'as', 'revealed', 'by', 'the', 'cDNA', 'clones,', 'contains', 'the', 'most', 'significant', 'sequence', 'divergence,', 'permitting', 'the', 'classi-', 'fication', 'of', 'the', 'two', 'types', 'of', 'Ya', 'mRNAs', 'as', 'derived', 'from', 'different', 'genes', '(Lai', 'ef', 'a/,,', '1984;', 'Mannervik,', '1985).', 'In', 'addi-', 'tion', 'Lo', '16', 'single', 'nucleotide', 'deletions,', 'insertions', 'or', 'substitu-', 'tions,', 'the', 'two', 'rat', 'Ya', 'mRNAs', 'differ', 'in', 'this', 'region', 'by', 'a', 'stretch', 'of', '13', 'nucleotides', 'present', 'in', 'Ya', 'type', 'I', '[found', 'in', 'cDNA', 'clones', 'pGTB38', '(Pickett', 'ef', 'af,', '1984)', 'and', 'prYal2', 'isolated', 'by', 'us]', 'and', 'deleted', 'in', 'Ya', 'Lype', 'IJ', '[found', 'in', 'cDNA', 'clones', 'C70', '(Daniel', 'e¢', 'a/.,', '1983)', 'and', 'pGTR261', '(Lai', 'et', 'al,', '1984)].', 'The', 'mouse', 'Ya', 'gene', 'contains', 'the', '13-nucleotide', 'se-', 'quence', 'and', 'has', 'a', '3’', 'noncoding', 'region', 'homologous', 'to', 'rat', 'Ya', 'type', 'Ll.', 'The', '13', 'nucleotide', 'sequence', 'is', 'GFAATCCAGG-', 'CTC', 'in', 'rat', 'and', 'GATA(', ')CTGGCCTC', 'in', 'mouse', 'Ya', 'gene', 'duc', 'to', 'one', 'deletion', 'and', 'five', 'base', 'substitutions', '(Fig.', '4).', 'The', 'high', 'homology', 'between', 'mouse', 'and', 'rat', 'Ya', 'gene', 'se-', 'quences', 'extends', 'beyond', 'the', 'mRNA', 'coding', 'sequence.', 'Anal-', 'ysis', 'of', 'the', 'rat', 'Ya', 'gene', 'fragment', 'in', 'clone', '\\r¥all', '(Fig.', '4)', 'indicates', 'extensive', 'sequence', 'conservation', '(70-80%)', 'in', 'the', '50-200', 'bases', 'of', 'introns', 'at', 'the', 'exon-intron', 'junctions', 'as', 'well', 'as', 'in', 'the', 'region', 'bevond', 'the', 'cleavage-polyadenylation', 'site', 'of', 'pre-mRNA.', 'Analysis', 'of', 'all', 'known', 'glutathione', 'S-transferase', 'cDNA', 'sequences', 'has', 'shown', 'that', 'these', 'enzymes', 'are', 'encoded', 'by', 'a', 'minimum', 'of', 'four', 'suparate', 'gene', 'families', '(Ya,', 'Yb,', 'Yc,', 'and', 'Yp)', 'that', 'present', 'significant', 'sequence', 'homologies', '(Suguoka', 'et', 'al.,', '1985;', 'Lai', 'er', 'u/.,', '1986;', 'Lai', 'and', 'Tu,', '1986).', 'These', 'ho-', 'molagies', 'support', 'the', 'hypothesis', 'of', 'a', 'common', 'ancestral', 'gene', 'from', 'which', 'the', 'different', 'classes', 'of', 'glutathione', 'S-transferase', 'genes', 'have', 'evolved', 'by', 'duplication', 'and', 'diver-', 'gence', '(Mannervik,', '1985;', 'Lai', 'er', 'a/.,', '1986).', 'A', 'comparison', 'of', 'nucleotide', 'and', 'amino', 'acid', 'sequences', 'among', 'the', 'glutathi-', 'one', 'S-transferases', '<uggests', 'that', 'the', 'Ya', 'and', 'Ye', 'gene', 'fami-', 'lies', 'have', 'evolved', 'from', 'the', 'ancestral', 'glutathione', 'S-trans-', 'ferase', 'gene', 'via', 'a', 'co:nmon', 'intermediate', 'gene', 'different', 'from', 'that', 'which', 'gave', 'rise', 'to', 'the', 'Yb,', 'and', 'Yb,', 'gene', 'familics', '(Mannervik,', '1975);', 'the', 'Yp', 'subunit', 'gene(s)', 'has', 'probably', 'evolved', 'at', 'an', 'earlier', 'stage', 'before', 'che', 'separation', 'of', 'Ya', 'and', 'Ye', 'genes', '(Suguoka', 'ef', 'af,', '1985).', 'The', 'high', 'homology', 'presently', 'observed', 'between', 'specific', 'Ya', 'gene', 'sequences', 'in', 'mouse', 'and', 'rat', 'supports', 'the', 'conclusion,', 'based', 'on', 'the', 'com-', 'parison', 'of', 'Yb', 'cDNA', 'sequences,', 'that', 'the', 'interspecies', 'varia-', 'tion', 'of', 'homologous', 'glutathione', 'S-transferase', 'subunits', 'is', 'smaller', 'than', 'the', 'di:ferences', 'between', 'the', 'families', 'of', 'trans-', 'ferases', 'within', 'a', 'species', '(Mannervik,', '1985),', 'This', 'suggests', 'that', 'the', 'separation', 'between', 'Ya,', 'Yc,', 'and', 'Yb', 'gene', 'familics', 'and', 'the', 'further', 'Ya', 'gene', 'duplication', 'and', 'divergence', 'took', 'place', 'before', 'the', 'mouse', 'and', 'rat', 'speciation', 'occurred', 'aboul', '17', 'million', 'years', 'ago', '(Miyata', 'ef', 'a/.,', '1982).', 'The', 'glutathione', '.3-transferases', 'represent', 'a', 'family', 'of', 'isa-', 'zymes', 'whose', 'mRNA', 'levels,', 'particularly', 'Ya', 'and', '¥b.,', 'are', 'regulated', 'by', 'two', 'different', 'classes', 'of', 'xenobiotics,', '3-methyl-', 'cholanthrene', 'and', 'phenobarbital.', 'Another', 'multigene', 'family', 'of', 'drug-metabolizing', 'enzymes,', 'the', 'cytochrome', 'P-450s,', 'is', 'also', 'regulated', 'by', 'the', 'same', 'xenobiotic', 'compounds.', 'How-', ' ']