['Since', 'thymocyte', 'development', 'in', 'rag-1™"', 'and', 'rag-2™"', 'mice', 'is', 'blocked', 'at', 'the', 'Thy-1*CD44-CD25~', 'stage', '(38,48),', 'the', 'arrest', 'in', 'tge26', 'T', 'call', 'development', 'precedes', 'that', 'in', 'rag™"', 'mice', '(49).', 'The', 'T', 'cell', 'deficiency', 'is', 'caused', 'by', 'both', 'human', 'and', 'murine', 'COD3e', 'transgenes', 'Previously', 'we', 'demonstrated', 'that,', 'in', 'addition', 'to', 'the', 'fulltength', 'human', 'CDe', 'gene.', 'a', 'truncated', 'human', 'CD3e', 'gene', '(pL12A1)', 'coding', 'for', 'the', 'transmembrane', 'and', 'cytoplasmic', 'domains', 'of', 'CD3e', 'could', 'also', 'cause', 'the', 'arrest', 'in', 'T', 'cell', 'development.', 'Yet', 'a', 'further', 'deletion', 'of', 'the', 'transmembrane', 'and', 'half', 'of', 'the', 'cytoplasmic', 'domain', '(pL12A2)', 'could', 'not', 'induce', 'T', 'cell', 'defi-', 'ciency', '(36;', 'Figs', '2', 'and', '6B).', 'Thus', 'the', '55', 'amino', 'acid', 'cyto-', 'plasmic', 'domain', '(with', 'its', 'membrane', 'anchor)', 'of', 'the', 'human', 'CD3e', 'protein', 'is', 'a', 'prerequisite', 'for', 'establishing', 'the', 'T', 'cell', 'deficiency.', 'Since', 'the', 'human', 'and', 'murine', 'cytoplasmic', 'domains', 'are', 'highly', 'conserved', '(Fig.', '1C),', 'we', 'examined', 'whether', 'an', 'arrest', 'in', 'T', 'cell', 'development', 'could', 'be', 'caused', 'by', 'the', 'murine', 'CD3e', 'protein.', 'To', 'this', 'end', 'a', 'construct', 'pL16', '(Fig.', '1),', 'in', 'which', 'expression', 'of', 'the', 'murine', 'protein', 'was', 'governed', 'by', 'the', 'human', 'enhancer,', 'was', 'used', 'to', 'generate', 'transgenic', 'anirnals.', 'Of', 'the', 'four', 'homozygous', 'lines', 'established', 'with', 'pL16,', 'only', 'mice', 'with', ' ', ' ', '  ', '  ', '   ', ' ', ' ', ' ', '   ', ' ', '%', "Thymocy'!", 'vs', 'wild', 'type', 'pL', '12', 'pLi2Al', 'pL12a2', 'Se', 'Ta', '[fen', '[ae', '=', 'Fan', '||', 'os', '[se', '[pel', 'a', 'Block', 'cf', 'eariy', 'T', 'coll', 'development', 'by', 'CD3e', '439', ' ', 'high', 'copy', 'numbers', 'were', 'T', 'cell', 'deficient,', 'and', 'thymocyte', 'numbers', 'were', 'inversely', 'related', 'to', 'the', 'number', 'of', 'transgene', 'copies', '(Figs', '2', 'ana', '68}.', 'Taus', 'the', 'transgenic', 'murine', 'CD3e', 'protein', 'was', 'able', 'to', 'estab.ish', 'the', 'T', 'cell', 'deficiency', 'in', 'a', 'copy-', 'number-dependent', 'manne:', 'Collectively', 'the', 'cependence', 'of', 'the', 'T', 'cell', 'deficiency', 'on', 'the', 'number', 'of', 'copies', 'of', 'either', 'suman', 'or', 'murine', 'CD3e', 'gene', 'and', 'he', 'necessity', 'for', 'the', 'presence', 'of', 'the', 'exons', 'coding', 'for', 'the', 'r', 'suggest', 'that', 'over-expression', 'of', 'arrest', 'in', 'T', 'cell', 'development.', ' ', ' ', '  ', 'Over-expression', 'of', 'the', 'CD3e', 'protein', 'causes', 'the', 'abrogation', 'of', 'early', 'T', 'cell', 'developrnent', 'To', 'establish', 'that', 'T', 'ccll', 'deficiency', 'was', 'caused', 'by', 'high', 'levels', 'of', 'expression', 'of', 'the', 'CD3e', 'transgenes,', 'the', 'following', 'experiments', 'were', 'conducted:', 'first,', 'transgenic', 'mice', 'generated', 'with', 'either', 'the', 'hurnan', 'or', 'murine', 'CD3e', 'enhancer', 'were', 'com-', 'pared,', 'because', 'jn', 'vitro', 'transfection', 'experiments', 'had', 'shown', 'hat', 'the', 'human', 'COS', 'enharcer', 'was', 'significantly', 'stronger', 'han', 'its', 'murine', 'counterpart.', 'while', 'the', 'respective', 'promoter', 'activities', 'were', 'comparable', '(50,', 'and', 'A.', 'Ruhimann', 'and', 'C.', 'Terhorst,', 'in', 'preparation):', 'to', 'this', 'end,', 'a', 'new', 'construct,', 'pL19,', 'was', 'compared', 'with', 'pL', '16.', 'As', 'discussed', 'above,', 'in', 'pL16', ' ', ' ', ' ', '  ', ' ', '   ', '  ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', 'Fig.', '2.', 'Total', 'number', 'of', 'thymocytes', 'per', 'thymus', 'in', 'homozygous', 'transgenic', 'mice.', 'The', 'numbers', 'littermates', 'in', 'a', 'logarithmic', 'scale.', 'Data', 'were', 'obtained', 'frarn', 'mice', 'ranging', 'from', 'newborn', 'te', '6', 'mor', 'total', 'thymocytes', 'from', 'transgenic', 'mice', 'versus', 'wild', 'type', 'littermates', 'remains', 'about', 'the', 'same.', 'irresp!', 'are', 'shown', 'in', 'comparison', 'with', 'wild', 'lype', 'age,', 'and', 'the', 'relative', 'percentage', 'of', '*', 'their', 'ages.', 'At', 'least', 'one', 'wild', 'type', ' ', ' ', 'littermate', 'was', 'analyzed', 'in', 'parallel', 'with', 'transgenic', 'mice.', 'The', 'average', 'number', 'of', 'total', 'thymocytes', 'fram', 'the', 'wild', 'type', 'littermates', 'was', 'used', 'as', '400%,', 'and', 'the', 'number', 'of', 'total', 'thymacytes', 'from', 'each', 'transgenic', 'mouse', 'was', 'converted', 'into', 'a', 'percenzags.', 'For', 'newborn', 'mice,', 'the', 'number', 'of', 'total', 'thymocytes', 'from', 'each', 'mouse', 'was', 'collected,', 'and', 'ihe', 'conversion', 'was', 'done', 'after', 'determination', 'of', 'the', 'pnenotype', 'by', 'Southern', 'blots,', 'Each', 'det', 'represents', 'a', 'relative', 'cell', 'number', 'trom', 'one', 'homozygous', 'mouse', ' ', ' ']