['Average', 'af', 'femut', 'Average', 'a', '/', 'famur', '(Thousands)', 'Pre-Pro-B', 'cells', ' ', '250', '2007', ' ', ' ', 'a', 'S', ' ', ' ', '1007', ' ', '50', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', '1', '4', '12', '26', 'Aga', 'imonths)', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', 'Pro-B', 'cells', '2.00', '1.50', '=', 'i', '~T', '2', '1.007', 'i', '0.50', '9.00', '1', '4', '12', '24', 'Age', '(months)', 'Cc', 'Pre-B', 'cells', '4', '_—', '3', 'Fa', '2g', '—~s', 'RK', '5', 'ae', '2', '7', 'a2', '5', '§', 'z', 'a', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', ' ', '1', '4', '12', 'Age', '(manths}', 'Fig.', '3.', 'Age-related', 'changes', 'in', 'the', 'numbers', 'of', 'specific', 'early', 'B', 'lymphocyte', 'precursor', 'cells', 'in', 'marrow.', '(A)', 'Prepro-B', 'cells.', '(B)', 'Pro-B', 'cells.', '(C)', 'Pre-B', 'cells.', 'The', 'average', 'number', 'per', 'femur', '*', 'SD', 'was', 'determined', 'by', 'analysing', 'individual', 'animals', 'aged', '1,', '4,', '12', 'and', '24', 'months', 'in', 'four', 'separate', 'experiments.', 'The', 'total', 'number', 'of', 'animals', 'analysed', 'in', 'each', 'age', 'group', 'is', 'given', 'in', 'Table', '1.', 'Statistical', 'significance', 'was', 'determined', 'by', 'analysis', 'of', 'variance', 'followed', 'by', 'an', 'unpaired', "Student's", 'test.', '*P', '<', '0.02', 'from', '1-', 'and', '12-manth-old', 'animals;', '“*P', '<', '0.002', 'from', '1-month-old', 'animals;', '*"*F', '<', '0.0001', 'fram', '1-month-old', 'and', 'P', '<', '0.05', 'from', '4-', 'and', '12-month-ald', 'animals.', '50553059', 'tti—~«*', 'Changes', 'in', 'B', 'lymphopoiesis', 'with', 'age', '105', 'the', 'numbers', 'of', 'all', 'B', 'lymphocyte', 'precursor', 'papulations', 'within', 'the', 'marrow', 'of', 'mice', '1,', '4,', '12', 'and', '24', 'months', 'of', 'age', 'were', 'determined.', 'These', 'ages', 'were', 'chosen', 'in', 'order', 'to', 'unify', 'the', 'previous', 'reports', 'examining', 'the', 'effects', 'of', 'ageing', 'on', 'B', 'lympho-', 'opoiesis', '(9-13}.', 'Comparisons', 'were', 'made', 'using', 'the', 'absolute', 'numbers', 'of', 'cells', 'at', 'each', 'stage', 'of', 'B', 'lymphoid', 'development', 'per', 'femur', 'as', 'opposed', 'to', 'using', 'the', 'relative', 'frequencies', 'because', 'the', 'marrow', 'cellularity', 'changes', 'with', 'age', '(Table', '1;', '24,27).', 'To', 'determine', 'the', 'variations', 'within', 'each', 'age', 'group,', 'calculations', 'of', 'the', 'number', 'of', 'cells', 'in', 'each', 'stage', 'of', 'develop-', 'ment', '(Figs', '1', 'and', '2)', 'were', 'performed', 'on', 'individual', 'animals.', 'We', 'found', 'that', 'the', 'earliest', 'identified', 'precursor,', 'the', 'prepro-', 'B', 'cell,', 'did', 'not', 'decline', 'over', 'the', 'lifespan', 'of', '24', 'months', '(Fig.', '3A).', 'Consistently,', 'there', 'was', 'a', 'modest', 'decrease', 'in', 'the', 'numbers', 'of', 'pro-B', 'cells', 'per', 'femur', 'between', '1', 'and', '4', 'months', 'of', 'age.', 'The', 'numbers', 'of', 'pro-B', 'ceils', 'per', 'femur', 'was', 'slightly', 'increased', 'by', '12', 'months', 'to', 'a', 'level', 'similar', 'to', 'that', 'found', 'in', '1-month-old', 'mice.', 'The', 'numbers', 'of', 'pro-B', 'cells', 'per', 'femur', 'did', 'not', 'significantly', 'differ', 'between', 'the', '12-', 'and', '24-month-old', 'animals', '(Fig.', '38).', 'The', 'numbers', 'of', 'pre-B', 'cells', 'per', 'femur', 'were', 'the', 'most', 'affected', 'over', 'the', 'life', 'of', 'the', 'animals', '(Fig.', '3C).', 'Pre-B', 'cell', 'numbers', 'declined', 'in', 'two', 'apparent', 'phases:', 'between', '1', 'and', '4', 'months', 'and', 'between', '12', 'and', '24', 'months', 'of', 'age.', 'Although', 'the', 'correlation', 'between', 'the', 'cell-surface', 'pheno-', 'type', 'and', 'the', 'stage', 'of', 'B', 'lymphoid', 'development', 'is', 'well', 'accepted,', 'it', 'is', 'possible', 'that', 'the', 'changes', 'we', 'observed', 'were', 'due', 'to', 'altered', 'expression', 'of', 'cell', 'surface', 'proteins', 'and', 'not', 'due', 'to', 'alterations', 'in', '{he', 'developmental', 'process.', 'No', 'changes', 'in', 'the', 'FACS', 'profiles', 'were', 'observed', '(Fig.', '2).', 'To', 'further', 'confirm', 'the', 'changes', 'in', 'the', 'pre-B', 'cell', 'numbers,', 'we', 'used', 'immunofluorescent', 'staining', 'for', '1»', 'heavy', 'chains', 'on', 'the', 'cell', 'in', 'the', 'cytoplasm', '(cy)', 'and', 'on', 'the', 'surface', '(su)', 'of', 'bone', 'marrow', 'cells', 'to', 'calculate', 'the', 'numbers', 'of', 'cu*su”', 'pre-B', 'cells', 'per', 'femur', 'for', 'four', 'mice', 'in', 'each', 'group', 'from', '1', 'to', '24', 'months', 'of', 'age.', 'The', 'results', 'of', 'this', 'experiment', 'confirmed', 'a', 'decline', 'in', 'the', 'numbers', 'of', 'pre-B', 'cells', 'at', '4', 'months', 'and', 'a', 'severe', 'loss', 'by', '24', 'months', 'of', 'age', '(Fig.', '4).', ' ', 'The', 'decline', 'in', 'the', 'number', 'of', 'pre-B', 'cells', 'with', 'age', 'does', 'not', 'proportionally', 'atlect', 'the', 'numbers', 'of', 'newly', 'formed', '8', 'cells', 'in', 'the', 'periphery', 'One', 'would', 'predict', 'that', 'in', 'aged', 'animats', 'the', 'numbers', 'of', 'newly-', 'formed', 'B', 'cells', 'would', 'decrease', 'in', 'proportion', 'to', 'the', 'numbers', 'of', 'the', 'pre-B', 'cells.', 'Indeed,', 'a', 'progressive', 'loss', 'in', 'the', 'numbers', 'of', 'IgMtIgD~', 'newly', 'formed', 'B', 'cells', 'of', 'the', 'marrow', 'occurred', 'with', 'age', '(Fig.', '5A).', 'However,', 'this', 'decrease', 'in', 'the', 'immature', 'B', 'cell', 'population', 'was', 'much', 'less', 'than', 'what', 'would', 'be', 'predicted', 'based', 'on', 'the', 'severe', 'changes', 'in', 'the', 'pre-B', 'cell', 'numbers.', 'For', 'example,', 'a', '40%', 'loss', 'in', 'pre-B', 'cell', 'numbers', 'occurred', 'between', '12', 'and', '24', 'months', 'of', 'age,', 'but', 'the', 'drop', 'in', 'the', 'numbers', 'of', 'newly', 'formed', '&', 'ceils', 'between', '12', 'and', '24', 'months', 'was', 'only', '~15%.', 'Allman', 'et', 'af', '(29,30)', 'have', 'recently', 'determined', 'that', 'B220*HSA', 'B', 'cells', 'in', 'the', 'spleen', 'are', 'the', 'newly', 'produced', 'B', 'cell', 'migrants', 'from', 'the', 'marrow.', 'The', 'number', 'of', 'newly', 'migrated,', 'immature', 'B', 'cells', 'in', 'the', 'spleen', 'was', 'the', 'greatest', 'at', '1', 'month,', 'and', 'then', 'remained', 'relatively', 'constant', 'throughout', 'aduithood', '(Fig.', '5B).', 'These', 'results', 'indicate', 'that', 'age-related', 'changes', 'in', 'the', 'numbers', 'of', 'pre-B', 'cells', 'in', 'the', 'marrow', 'do', 'not', 'directly']