title: Buffer TBE
text: # Buffer TBE
  
  Il buffer TBE è una soluzione tampone usata nella preparazione di gel elettroforetici di agarosio per la separazione di frammenti di DNA risultanti dall'amplificazione di PCR, da protocolli di purificazione e da esperimenti di clonaggio.
  
  È composto da una soluzione di Tris-borato-EDTA, e l'EDTA sequestra i cationi bivalenti. Il buffer TBE è particolarmente utile nella separazione di piccoli frammenti di DNA (peso molecolare < 1000), ad esempio piccoli prodotti risultanti dalla digestione con enzimi di restrizione.
  
  Il TBE ha una migliore capacità tamponante e fornisce una più accurata risoluzione del buffer TAE. Il TBE è generalmente più costoso del TAE e inibisce la DNA ligasi che può causare problemi nel caso si volesse procedere con la purificazione o la ligazione del DNA.
  
  ## Preparazione
  
  Per preparare 1 litro di TBE ICI 10X (impiegato nei gel di agarosio) si usano:
  
  * 162 g Tris base (tris(idrossimetil)amminometano)
  * 46,3 g acido borico
  * 9,5 g EDTA sale disodico
  * $H_2O$ a volume finale di 1000 ml
  
  Il pH dello stock deve essere 8,8.
  
  Per preparare 1 litro di TBE 10X (impiegato nei gel di acrilamide) si usano:
  
  * 107,81 g Tris base (tris(idrossimetil)amminometano)
  * 55,04 g acido borico
  * 3,72 g EDTA sale disodico
  * $H_2O$ a volume finale di 1000 ml
  
  Il pH dello stock deve essere 8,3.
  
  Il sale disodico dell'EDTA non si solubilizza fino a che la soluzione non abbia raggiunto un pH di circa 8,0 tramite l'aggiunta di NaOH.
  
  