Phospholipase A1
# Phospholipase A1

Phospholipase $A_1$ $(PLA_1)$ sind Enzyme aus der Gruppe der Phospholipasen. Die Phospholipase spaltet Phospholipide am C1-Atom des Glycerols.

## Eigenschaften

Phospholipase $A_1$ hydrolysiert Phosphatidylserin zu einer Fettsäure und einem 2-Acylglycerolphosphoserin (2-Acyl-1-lysophosphatidylserin, Lyso-PS) oder Phosphatidsäure zu Lysophosphatidsäure (Lyso-PA), in geringem Umfang auch Phosphatidylcholin, Phosphatidylethanolamin, Phosphatidylinositol oder Triacylglyceride. Die Spaltprodukte binden an jeweils eigene Rezeptoren, LPSR1–3 bzw. LPAR1–6.

Bei apoptotischen Zellen wird Phosphatidylserin an der Außenseite der Zellmembran gespalten, woraufhin Mastzellen durch 2-Acyl-1-lysophosphatidylserin zur Ausschüttung von Histamin aktiviert werden. Weiterhin ist eine Phospholipase Bestandteil des Wespengifts, wo es als Toxin und Allergen wirkt. Isoformen der Phospholipase $A_1$ sind $mPA-PLA_1$ (membrangebunden, Phosphatidsäure-bevorzugend) und $PS-PLA_1$ (Phosphatidylserin-bevorzugend). Daneben gibt es andere Lipasen, die sowohl Triacylglyceride als auch mit einer $PLA_1-Aktivität$ Phosphoglyceride hydrolysieren: Pankreaslipase (PL), Lipoproteinlipase (LPL), Hepatische Lipase (HL) und Endotheliale Lipase (EL). Eine alternativ gespleißte Isoform der Phospholipase $A_1$ hydrolysiert 1-Acyl-1-lysophosphatidylserin, nicht aber Phosphatidylserin. Manche Formen der Phospholipase $A_2$ besitzen zusätzlich eine $PLA_1-Enzymaktivität.$

Der optimale pH-Wert für die Hydrolyse von Phosphatidylserin liegt bei einem pH-Wert von 7,5 und für die Hydrolyse saurer Phospholipide (wie Phosphatidsäure) bei 4.

## Struktur

Strukturell ist die $PLA_1$ ein Monomer, welches das Sequenzmotiv Gly-X-Ser-X-Gly enthält, wobei X für eine beliebige Aminosäure steht. Das Serin gilt als die aktive Stelle im Enzym. $PLA_1$ enthält auch eine katalytische Triade aus Ser-Asp-His mit einer Vielzahl von Cysteinresten, die für die Bildung von Disulfidbrücken benötigt werden. Die Cysteinreste sind für strukturelle Schlüsselmotive wie die Deckel-Proteindomäne und die B9-Domäne verantwortlich, bei denen es sich um lipidbindende Oberflächenschleifen handelt. Diese beiden Schleifen können bei jedem $PLA_1-Enzym$ unterschiedlich sein. Ein PLA1-Enzym mit einer langen Deckel-Domäne (22–23 Aminosäuren) und einer langen B9-Domäne (18–19 Aminosäuren) stellt beispielsweise eine extrazelluläre $PLA_1$ dar, das auch eine Triacylglycerin-Hydrolase-Aktivität aufweist, während ein PLA1-Enzym, das als selektiver gilt, eine kurze Deckel- und B9-Domäne mit 7–12 bzw. 12–13 Aminosäuren aufweist.

Bei den extrazellulären PLA1/Lipase-Familienmitgliedern sind die β5- und β9-Schleifen sowie die Deckel-Domäne in Gelb, Cyan und Grün dargestellt. Die drei Reste, die eine katalytische Triade bilden (Ser, Asp und His), sind üblicherweise als Stäbchen (rot) dargestellt. Bei den Mitgliedern der cPLA2-Familie (cPLA2α, cPLA2β und cPLA2ζ) sind die konservierten Lipasemotive (GXSGX und DXG) meist in rot und die beiden Reste, die eine katalytische Dyade bilden (Ser und Asp), als Stäbchen dargestellt. Für PLAAT3/PLA2G16 sind die drei Reste, die eine katalytische Triade bilden (zwei Histidine und Cystein), als Stäbchen (rot) dargestellt. Die Strukturen wurden von der RCSB Protein Data Bank übernommen mit den Referenz-PDB-IDs: PL (PDB 1LPB), LPL (PDB 6OB0), PLRP1 (PDB 2PPL), cPLA2α (PDB 1CJY), PLA2G16 (PDB 4DOT). Die vorhergesagten Strukturen der Lipasen, wurden aus der AlphaFold Protein Structure Database entnommen. Alle Strukturen wurden mit der Software PyMOL visualisiert.

## Beispiele

Enzyme mit $PLA_1-Aktivität$ in Säugetieren :

| Name | Andere Namen | Humanes Gen | Substrate | Reaktion | PDB ID (H: Human, R: Ratte) |
| - | - | - | - | - | - |
| extrazelluläre $PLA_1$ ||||||
| PS-PLA1 | PLA1A | PLA1A | PS | Erzeugt LysoPS | - |
| PA-PLA1α | LIPH, mPA-PLA1α | LIPH | PA | Erzeugt LysoPA | - |
| Lipoprotein-Lipase | LPL, LIPD | LIPD | TAG, PL | TAG-Lipase und PLA1-Aktivität | H: PDB 6E7K, PDB 6OAU, PDB 6OAZ, PDB 6OB0, PDB 6WN4 |
| Hepatische Lipase | HL, LIPC | LIPC | TAG, PL | TAG-Lipase und PLA1-Aktivität | - |
| Endotheliale Lipase | EDL, EL, LIPG | LIPG | PL | Stärkste PLA1-Aktivität | - |
| Pankreaslipase | PL, PNLIP | PNLIP | TAG, PL | TAG lipase and PLA1 activity | H: PDB 1GPL, PDB 1LPA, PDB 1LPB, PDB 1N8S |
| Pankreatiscbes lipase-verwandtes Protein 1 | PLRP1 | PLRP1 | TAG, PL | TAG-Lipase und PLA1-Aktivität | H: PDB 2PPL |
| Pankreatiscbes lipase-verwandtes Protein 2 | PLRP2 | PLRP2 | TAG, PL | TAG-Lipase und PLA1-Aktivität | H: PDB 2OXE, PDB 2PVS; R: PDB 1BU8 |
| intrazelluläre $PLA_1$ ||||||
| PA-PLA1 | DDHD1, iPLA1α | DDHD1 | PL | PLA1-Aktivität | - |
| KIAA0725p | DDHD2, iPLA1γ | DDHD2 | PL | PE, DAG, CL | - |
| p125 | iPLA1β | P125 | unbekannt | keine enzymatische Aktivität | - |
| PNPLA6 | iPLA2δ, NTE | PNPLA6 | PC, LPC | PLB, LysoPLA-Aktivität (hydrolysiert an C1 und C2) | - |
| PNPLA7 | iPLA2θ, NRE | PNPLA7 | PC, LPC | PLB, LysoPLA-Aktivität (hydrolysiert an C1 und C2) | - |
| PNPLA8 | iPLA2γ, Gruppe VIB PLA2 | PNPLA8 | PC | PLB, LysoPLA-Aktivität (hydrolysiert an C1 und C2) | - |
| cPLA2α | PLA2G4A, Gruppe IVA PLA2 | PLA2G4A | PL | PLB, LysoPLA-Aktivität (hydrolysiert an C1 und C2) | H: PDB 1BCI, PDB 1CJY, PDB 1RLW |
| cPLA2β | PLA2G4B, Gruppe IVB PLA2 | PLA2G4B | PL | PLB, LysoPLA-Aktivität (hydrolysiert an C1 und C2) | - |
| cPLA2ζ | PLA2G4F, Gruppe IVF PLA2 | PLA2G4F | PL | PLB, LysoPLA-Aktivität (hydrolysiert an C1 und C2) | - |
| PLA2G16 | Gruppe XVI PLA2, PLAAT3, HRASLS3, H-Rev107 | PLA2G16 | PL | PLB, LysoPLA-Aktivität (hydrolysiert an C1 und C2) | H: PDB 2KYT, PDB 4DOT, PDB 4FA0, PDB 4Q95, PDB 7C3Z, PDB 7C41 |

## Geschichte

Sowohl die $PLA_1-$ als auch die $PLA_2-Aktivität$ wurden in verschiedenen Geweben und im Blutplasma nachgewiesen. In den 1990er Jahren wurden zwei $PLA_1-Moleküle$ biochemisch gereinigt und identifiziert. Bei diesen beiden $PLA_1$ handelt es sich um das phosphatidsäurepräferentielle $PLA_1$ $(PA-PLA_1)$ und das phosphatidylserinspezifische $PLA_1$ $(PS-PLA_1).$ 1994 reinigten Higgs und Glomset eine neue $PLA_1$ aus einer zytosolischen Fraktion von Rinderhoden, die bevorzugt PA hydrolysierte. Kurz darauf klonierte dieselbe Gruppe eine cDNA des $PLA_1,$ und es stellte sich heraus, dass $PA-PLA_1$ ein intrazelluläres Protein mit 875 Aminosäuren und einer berechneten Molekularmasse von etwa 100 kDa ist. Gleichzeitig reinigte die Gruppe von Exton eine sehr ähnliche $PLA_1$ aus dem Rinderhirn. Es war nicht klar, ob die beiden intrazellulären $PLA_1$ identisch waren, da die beiden Gruppen unterschiedliche $PLA_1-Testbedingungen$ und Substrate verwendeten. Später reinigte die Gruppe von Kudo ähnliche $PLA_1$ aus dem Gehirn und den Hoden von Mäusen, Ratten und Kühen und zeigte, dass sie mit der oben erwähnten $PA-PLA_1$ identisch sind. Sie wiesen nach, dass $PA-PLA_1$ in Gegenwart von Triton X-100 überwiegend Phosphatidsäure (PA) und in Abwesenheit von Triton X-100 Phosphatidylethanolamin (PE) hydrolysiert. Das Ergebnis zeigt deutlich, dass die Substratspezifität von $PA-PLA_1$ in vitro durch die Testbedingungen beeinflusst wird, was die Identifizierung der natürlichen Substrate von $PA-PLA_1$ erschwert. Dies bedeutet auch, dass der Name $PA-PLA_1$ für das Enzym nicht geeignet ist.

Horigome et al. wiesen zwei PLA-Aktivitäten im Überstand von aktivierten Rattenblutplättchen nach. Eine davon wurde als sekretorische PLA2 identifiziert, die jetzt als sekretorische Phospholipase A2 der Gruppe IIA (sPLA2IIA) bekannt ist. Sato et al. gelang es, eine andere PLA zu reinigen und zu klonieren, die eine hohe Präferenz für serinhaltige Phospholipide zeigte. Diese PLA ist nun als PS-spezifische $PLA_1$ $(PS-PLA_1)$ bekannt. $PS-PLA_1$ hydrolysierte in vitro spezifisch PS. Darüber hinaus wirkte es auf die intakte Zellmembran ein, hydrolysierte PS und produzierte 2-Acyl-LysoPS. Daher wird angenommen, dass $PS-PLA_1$ ein LysoPS-produzierendes Enzym ist.

Nach der Entdeckung der beiden $PLA_1-Moleküle$ fanden mehrere Forscher ähnliche $PLA_1$ (Homologe) in den Nukleotiddatenbanken, exprimierten sie als rekombinante Proteine und charakterisierten sie biochemisch. Diese Analysen identifizierten die Homologe als neuartige $PLA_1s.$ Dazu gehören das extrazelluläre Enzym membranassoziierte PA-selektive $PLA_1α$ $(mPA-PLA_1α,$ ein $PS-PLA_1-Homolog)$ und die intrazellulären Enzyme $iPLA_1$ γ/DDHD2/KIAA0725 (ein $PA-PLA_1-Homolog)$ und $iPLA_1β/SEC23IP/p125$ $(PLA_1-Aktivitäten$ wurden nicht nachgewiesen). Darüber hinaus wurde eine ähnliche biochemische Charakterisierung für $PLA_2-Homologe$ durchgeführt. Die biochemische Charakterisierung der PLA2-Homologe zeigte, dass einige von ihnen neben ihrer $PLA_2-Aktivität$ auch eine $PLA_1-Aktivität$ aufwiesen. In diesem Zusammenhang ist auch darauf hinzuweisen, dass bestimmte Lipasen, die TAG hydrolysieren, $PLA_1-Aktivität$ besitzen, wie oben erwähnt. Lipasen hydrolysieren Fettsäuren an den Positionen sn-1 und sn-3 von Triacylglycerin (TAG) und Diacylglycerin (DAG). Sie hydrolysieren auch Fettsäuren in der sn-1- oder sn-3-Position von Monoacylglycerin (MAG).

