Äskulinspaltung
# Äskulinspaltung

Die Äskulinspaltung, auch bekannt als Äskulinhydrolyse (oder Esculinhydrolyse), wird in der mikrobiologischen Diagnostik eingesetzt, um Bakterienarten, insbesondere aus der Gruppe der Nonfermenter, voneinander zu unterscheiden.

## Prinzip

Einige Bakterienarten, größtenteils aus der Gruppen der Nonfermenter, sind im Stande, mit der von ihnen gebildeten β-Glucosidase Äskulin hydrolytisch in Glucose und Aesculetin zu spalten. Das Äskuletin bildet mit dem Eisen(III)-Ionen der später hinzugegebenen Testlösung eine schwarze Komplexverbindung, welche eine positive Reaktion anzeigt.

## Testdurchführung

Es werden etwa 1 bis 3 Kolonien des zu untersuchenden Bakteriums von einem festen Nährmedium (Agarplatte/Primärkultur) mit Hilfe einer sterilen Impföse in die Äskulin-Bouillon inokuliert. Anschließend bebrütet man die Suspensionskultur für etwa 16 bis 24 Stunden bei 36 ±1 °C. Nach der Inkubation werden etwa 5 Tropfen einer Eisen(III)-chlorid-Lösung zu der Bouillon gegeben.

Der Arbeitsschritt der Zugabe entfällt, hält man ein Aeskulin Agar Medium, das Eisen(III)-chlorid enthält, als Schrägagar in Teströhrchen als fertigen Test auf Vorrat. Bei diesen kann direkt nach dem Anzüchten das Testergebnis abgelesen werden; bei einer positiven Reaktion färbt sich der Schrägagar im Röhrchen schwarz.

## Auswertung des Tests

Positiv: Schwarzfärbung der Bouillon Negativ: Ausbleiben der Schwarzfärbung

| Äskulin-positive Bakterienarten | Äskulin-negative Bakterienarten |
| - | - |
| Stenotrophomonas maltophilia | Pseudomonas aeruginosa |
| Enterococcus faecalis | Streptococcus agalactiae |
| Pseudomonas luteola | Enterobacter cloacae |
| Sphingomonas paucimobilis | |
| Streptococcus uberis |

## Arbeitsmittel, Reagenzien, Nährböden

* Äskulin-Bouillon
* 10%ige Eisen(III)-chlorid-Lösung
