1. Objet et champ d'application
      Cette méthode sert à déterminer la teneur de NI tétrahydrocannabinol (NI THC) des variétés de chanvre (Cannabis sativa L.).

 2. Principe
      Détermination quantitative par chromatographie en phase gazeuse (C.P.G.) du NI THC après extraction par un solvant convenable.

 3. Appareillages
      Chromatographe en phase gazeuse muni d'un détecteur à ionisation de flamme ;
   Colonne de verre de 2,50 mètres de long et de 3,2 millimètres (un huitième de pouce) de diamètre remplie d'une phase stationnaire du type phényl-méthyl-silicone (par exemple, OV 17 à 3 p. 100) imprégné sur un support approprié.

 4. Prélèvement et réduction de l'échantillon

 Prélèvements
      On prélèvera dans une population d'une variété de chanvre donnée au moins 500 plantes, de préférence en différents points et en excluant les bordures. Ces prélèvements sont effectués en pleine journée à la fin de la floraison.
   L'ensemble mélangé de ces prélèvements sera représentatif du lot.
   Le matériel obtenu est séché à l'air ambiant.

 Réduction
      L'échantillon prélevé comme indiqué ci-dessus sera réduit le cas échéant à 500 pieds, cet échantillon réduit devant être représentatif de l'échantillon originalement prélevé.
   L'échantillon réduit sera divisé en deux.
   Un exemplaire est transmis au laboratoire chargé de déterminer la teneur en NI THC. L'autre exemplaire sert éventuellement à effectuer une contre-analyse.

 5. Réactifs
      Ether de pétrole (40-65 °C) ou solvant de polarité voisine ;
   NI tétrahydrocannabinol (NI THC) chromatographiquement pur ;
   Solution éthanolique 0,1 p. 100 (P/V) d'androstène 3-17 dione, chromatographiquement pure.

 6. Préparation de l'échantillon laboratoire
      Du matériel végétal contenu dans l'exemplaire de l'échantillon reçu est retenu, en vue de la détermination du taux de NI THC, le tiers supérieur des plantes, ce tiers étant débarrassé des tiges et des graines. La dessiccation du matériel végétal ainsi retenu est achevée à l'étuve sans dépasser 40 °C jusqu'à poids constant.

 7. Extraction
      Le matériel retenu conformément au point 6 ci-dessus est réduit en poudre demi-fine (tamis de 1 000 mailles par centimètre carré).
   2 grammes de poudre bien mélangée sont extraits par 30 à 40 millilitres d'éther de pétrole (40-65 °C). Après vingt-quatre heures de contact et une heure d'agitation mécanique, on filtre. Le marc subit deux extractions dans les mêmes conditions. Les solutions éthéro-pétroliques sont évaporées à sec. On reprend le résidu par 10 millilitres d'éther de pétrole. L'extrait ainsi préparé est utilisé pour l'analyse quantitative par chromatographie en phase gazeuse.

 8. Analyse quantitative par chromatographie en phase gazeuse
      a) Préparation des solutions à doser :
   Le résidu d'extraction repris par 10 ml d'éther de pétrole fera l'objet d'une analyse quantitative du NI THC qu'il contient. Pour cela, on mettra en oeuvre la technique de l'étalon interne et on calculera la surface des pics.
   1,0 ml de solution éthéro-pétrolique est évaporé à sec. Le résidu est repris par 2,0 ml d'une solution éthanolique à 0,1 p. 100 d'androstène 3-17 dione (étalon interne avec temps de rétention nettement supérieur à ceux des divers cannabinoïdes et, en particulier, environ le double de celui du NI THC).
   Gammes d'étalonnage :
   0,10-0,25 - 0,50-1,0 et 1,5 mg de NI THC dans 1 ml de solution éthanolique à 0,1 p. 100 d'androstène 3-17 dione.
   b) Conditions de l'appareillage :
   Température du four : 240 °C.
   Température de l'injecteur : 280 °C.
   Température du détecteur : 270 °C.
   Débit d'azote : 25 ml/mn.
   Débit d'hydrogène : 25 ml/mn.
   Débit d'air : 300 ml/mn.
   Volume injecté : 1 ml de la solution éthanolique finale.
   Le temps de rétention relatif du NI THC est calculé par rapport à l'androstène.

 9. Expression des résultats
      Le résultat est exprimé en grammes de NI THC pour 100 grammes de l'échantillon laboratoire séché jusqu'à poids constant. Le résultat est affecté d'une tolérance de 0,03 gramme par 100 grammes.