Как и в других играх серии, в Mario Kart DS представлены персонажи из серии Mario, и они сталкиваются друг с другом во время гонки на картах по трассам, основанным на локациях из серии Mario.
Как и в других играх серии Mario Kart, в Mario Kart DS персонажи из игр Mario участвуют в гонках друг с другом на картингах на трассах, тематически связанных с локациями серии Mario.