Как и в других играх серии, в Mario Kart DS представлены персонажи из серии Mario, и они сталкиваются друг с другом во время гонки на картах по трассам, основанным на локациях из серии Mario.
Игры про Марио соревнуются друг с другом на картингах по трассам, тематически оформленным в локациях серии Mario.