human
Manipulation génétique Comment les scientifiques modifient-ils l'ADN d'un organisme ? Est-il extrait de l'organisme, modifié en laboratoire puis réintroduit ? Ou est-ce fait à l'intérieur de l'organisme ? Quelles sont les limites actuelles de la technologie de manipulation génétique ? Explique comme si j'avais cinq ans.
gpt
Généralement, les gens copient le petit morceau d'ADN qu'ils veulent modifier à partir de l'ADN/ARN endogène, le modifient en laboratoire, puis le remettent en place. Les entreprises vous vendront des clones de n'importe quel [gène] (URL_6) de votre choix. Ou construisez des versions mutantes du gène selon vos spécifications. Pour la plupart des systèmes, vous pouvez ajouter et sélectionner des * * plasmides * * qui sont de petits morceaux circulaires d'ADN contenant le ou les gènes à exprimer et un marqueur sélectionnable. Ceux-ci peuvent être utilisés dans les cultures de bactéries, levures, humains/singes/souris/mouches. Ils existent généralement en plusieurs exemplaires et doivent être * * sélectionnés * * pour . Cela se fait généralement en plaçant un gène de résistance aux antibiotiques sur le plasmide et en faisant croître des cellules en présence de l'antibiotique. Pour modifier le génome de manière plus permanente, il faut * * intégrer * * l'ADN, le faire insérer sur un chromosome. Pour les organismes plus simples comme la levure , cela se fait par * * [ recombinaison homologue ] ( URL_4 ) * * . Dans la levure, vous pouvez transformer l'ADN dans la levure, il pénètre dans le noyau, subit une recombinaison homologue et vous sélectionnez (encore une fois cela peut être fait en ayant un gène antibiotique sur votre morceau d'ADN) pour la levure transformée. Pour la culture cellulaire humaine/singe/souris/mouche, la recombinaison homologue n'est pas aussi efficace. Bien que ce soit traditionnellement la façon dont vous manipulez les cellules lorsque vous créez des [ * * souris knock - out * * ] ( URL_0 ) . Afin de créer * * des lignées cellulaires stables * * , vous pouvez aléatoirement [ * * intégrer des plasmides * * ] ( URL_1 ) , ou profiter du fait que certains * * [ virus ] ( URL_5 ) * * intègrent naturellement l'ADN dans le génome . Le problème avec ces deux approches est que vous ne pouvez pas cibler précisément les gènes pour la suppression ou l'ajout de balises telles que la GFP (protéine fluorescente verte). Cela a conduit à plusieurs approches : * * [ doigts de zinc ] ( URL_3 ) * * et * * [ TALENs ] ( URL_2 ) * * . Ceux-ci utilisent des domaines spécifiques de liaison à l'ADN liés à des nucléases (enzymes qui coupent l'ADN) pour cibler précisément un gène d'intérêt. Vous pouvez le modifier en fournissant un plasmide modèle avec GFP (ou tout autre marqueur) que les cellules utilisent pour réparer la cassure de l'ADN double brin. [Un article publié la semaine dernière] (URL_7) indique que l'utilisation d'ARN courts pour diriger les nucléases Cas9 est un système supérieur.