وللحصول على الآداء الأمثل لكل الطرق المعتمدة على التصلب أو التخمير تقريبا، يفترض أن تكون درجات حرارة الذوبان للمناطق المتداخلة مماثلة لكل الأوليغنوكليوتيدات.
For optimal performance of almost all annealing based methods, the melting temperatures of the overlapping regions are supposed to be similar for all oligonucleotides.