הפקת גלוקוז מרכיבים כמו פירואט, לקטט, גליצ'רול, גליצ'רול 3-פוספט וחומצות אמינו נקראת גלוקונוגנזה. גלוקונוגנזה הופכת פירואט לגלוקוז-6-פוספט באמצעות סדרה של ביניים, רבים מהם משותפים עם גליקוליזה. עם זאת, מסלול זה אינו גלוקוליזה פשוטה, שכן מספר שלבים מופעלים על ידי אנזימים גלוקוליזים שאינם גלוקוליזים. מסלול זה חשוב מכיוון שהוא מאפשר את היווצרות הגלוקוז וההתמוטטות של גלוקוז להיות מוסדרים באופן ישיר, ולא יכול למנוע את שני המסלולים מלהתנהל במעגל גלוקוז. למרות שזו דרך מובילה של פליטת שומן, גליצ'רול, גליצ'רול, גליצ'רול 3-פוספט וחומצות אמינו, גליקוז יכול להיות מופץ באופן ישיר על ידי אנזימים אחרים, כגון גליקוז או פליטת גלוקוז
בעלי חוליות צריכים לייצר גופים קטוניים מחומצות שומן כדי להחליף גלוקוז ברקמות כמו המוח שאינו יכול לעכל חומצות שומן