Glükoneogenees muudab püruvaadi glükoosi-6-fosfaadiks läbi mitmete vahepealsete protsesside, millest paljud jagunevad glükolüüsiga. Kuid see tee ei ole lihtsalt glükolüüsi tagurpidi, sest mitmed sammud katalizeerivad mitte-glükolüüsilised ensüümid. See on oluline, sest see võimaldab glükoosi moodustumist ja lagunemist reguleerida korraga ja ei saa takistada mõlema tee toimimist polüsahhariidide tsüklis. Kuigi glükoosi tekitamine ühenditest nagu püruvaat, laktaat, glütserool, glütseraat-3-fosfaat ja aminohappeid nimetatakse glükoneogeneesiks.
selgroogsed peavad tooma rasvhapete ketonkehi, et asendada glükoosi sellistes kudedes nagu aju, mis ei suuda rasvhappeid metaboliseerida